КАМЕРА ДЛЯ ЭЛЕКТРОСЛИЯНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ Российский патент 2000 года по МПК C12M3/00 

Изобретение относится к аппаратуре для научных исследований и может быть использовано в биологии развития, генетике и клеточной инженерии для получения клеток и эмбрионов с измененными генетическими свойствами с помощью электрослияния.

Наиболее близким к предложенному изобретению является рабочая камера фирмы Kruss, Frame Chamber CFA 401 (проспект Electro Cellfusion CFA 500 октябрь 1998 г.).

Камера содержит основание с электрическими соединениями, сменное предметное стекло, рамки с защелками, на которых винтами установлены проволочные электроды. При повороте рамок на защелки проволочные электроды плотно прижимаются к стеклу, что является наиболее важным параметром при слиянии клеток. Однако в данной конструкции при неоднократном повороте рамок натяжение проволоки из-за деформации ослабевает, что резко снижает эффективность электрослияния и увеличивает потери клеток. Использование прокладок под сменное предметное стекло значительно увеличивает время подготовки камеры и хорошего эффекта не дает.

Задачей изобретения является повышение эффективности электрослияния клеток за счет устранения влияния деформации проволок при сохранении всех положительных характеристик камеры: сменность стекла, возможность быстрой подготовки камеры, удобная промывка, стерилизация и микроскопирование.

Решение этой задачи достигается тем, что в камере для электрослияния биологических объектов, содержащей основание с электрическими соединениями, рамку с прижимными контактами, несущую проволочные электроды и сменное предметное стекло, согласно изобретению проволочные электроды с нижней стороны рамки установлены на воротках, снабженных фиксаторами, при этом воротки для натяжения проволочных электродов с фиксаторами размещены в окнах рамки, а проволочные электроды опираются на эластичные прокладки, прижимающие их к сменному предметному стеклу, которое выступает над плоскостью основания не более чем на два диаметра проволоки.

На чертеже представлена конструкция камеры для электрослияния биологических объектов (далее камера).

Камера состоит из основания 1, прижимных контактов 2, соединенных электрическими проводниками с электроразъемом 3, рамки 4, установленной на основании 1 с помощью шарнирных петель 5 и удерживаемой плотно на основании 1 за счет прижимных контактов 2. В окнах 6 рамки 4 установлены воротки 7, зафиксированные на рамке стопорами 8. В отверстиях воротков 7 закрепляются одним концом проволочные электроды 9, проходящие снизу рамки 4. Вторые концы проволочных электродов 9 закреплены на рамке 4 винтом 10, при этом проволочные электроды 9 опираются на эластичные прокладки 11, установленные в пазах с нижней стороны рамки 4. Проволочные электроды 9 винтами-упорами 12 могут перемещаться относительно друг друга для получения заданного зазора "Д" между ними. В пазу основания 1 устанавливается сменное предметное стекло 13 таким образом, чтобы его поверхность выступала над основанием 1 не более двух диаметров проволочных электродов. Свободный доступ к стеклу 13 и электродам 9 осуществляется через окно 14 в рамке 4.

Работа с камерой осуществляется следующим образом. В очищенную и простерилизованную камеру устанавливают сменное предметное стекло 13 и, поворачивая рамку на шарнирах 5, фиксируют последнюю прижимными контактами 2. При этом проволоки через эластичную прокладку 11 должны плотно прижиматься к предметному стеклу. Затем камеру устанавливают на предметный столик микроскопа, где проверяются достаточность прижатия проволочных электродов 9 к предметному стеклу 13 и соответствие зазора между ними требуемому. В случае неудовлетворительного прижатия проволок 9 отпускается стопор 8 и с помощью отвертки поворачивается вороток 7 до получения необходимого прижатия. Зазор между проволочными электродами 9 устанавливается с помощью винтов-прижимов 12. После этого на предметное стекло 13 микропипеткой вносится раствор. Затем между электродами в каплю раствора вносятся клетки через окно 14 в рамке 4, камера соединяется с генератором (на чертеже не показан) через разъем 3 и осуществляется электрослияние под микроскопическим контролем.

Камера состоит из основания, прижимных контактов, соединенных электрическими проводниками с электроразъемом, и рамки. В окнах рамки установлены воротки с закрепленными на них одним концом электродами. Вторые концы проволочных электродов закреплены на рамке. В пазу основания установлено предметное стекло, к которому плотно прижимаются проволочные электроды. Расстояние между электродами может регулироваться, что повышает эффективность работы камеры. 1 ил.

Камера для электрослияния биологических объектов, содержащая основание с электрическими соединениями, рамку с прижимными контактами, несущую проволочные электроды и сменное предметное стекло, отличающаяся тем, что проволочные электроды с нижней стороны рамки установлены на воротках для натяжения проволочных электродов, снабженных фиксаторами, при этом воротки размещены в окнах рамки, а проволочные электроды опираются на эластичные прокладки, прижимающие их к сменному предметному стеклу, которое выступает над плоскостью основания не более чем на два диаметра проволочных электродов.