ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ПЧЕЛ ОТ АСКОСФЕРОЗА Российский патент 2005 года по МПК A01K51/00 

Изобретение относится к области пчеловодства. Использование препарата для лечения аскосфероза пчел.

Аскосфероз - заразная болезнь пчелиных и трутневых личинок и куколок, вызываемая грибами Ascosphaera apis (A. apis). Пораженные личинки теряют эластичность, превращаются в известково-белые твердые комочки, прилипающие к стенкам ячеек. Соты, улья, инвентарь обрабатывают 10% раствором перекиси водорода с добавлением 0,5% муравьиной кислоты. Слабые семьи объединяют, подсиливают, гнезда сокращают. Для лечения чаще всего используют нистатин [1].

Нистатин применяют при аскосферозе пчел согласно наставлению [2]. Его основным недостатком является то, что из-за широкого применения развивается устойчивость гриба к нему и эффективность обработок при этом значительно снижается.

Известен водный раствор аскоцина, применяемый для борьбы с аскосферозом пчел, действующим веществом которого является пропиконозол (2-(2,4-дихлорфенил)-4-пропил-2-(1н-1,2,4-триазолил-1-метил)-1,3-диоксолон) [3]. Основным недостатком препарата аскоцин является наличие в его рецептуре органических растворителей и эмульгаторов, которые оказывают отрицательное действие на пчел. Технология получения препарата многостадийна, что сказывается на его цене.

Для борьбы с аскосферозом пчел известен препарат - аскостат. Этот препарат представляет собой масляный концентрат нистатина в сочетании с активнодействующими компонентами (тимол) [4], [5]. Недостатком этого препарата является то, что обработки проводят в ранневесенний и весенний период, а это не гарантирует предотвращение аскосфероза в летний и осенний периоды, недостаточная степень эффективности, малая широта спектра действия.

Задачей предлагаемого изобретения является расширение ассортимента доступных препаратов с высокоэффективным лечебным действием, а также безопасным для пчел и здоровья пчеловода.

На основании анализа научных и практических исследований предложен препарат, который дополнительно содержит атокс и фурацилин.

Атокс (диоксид кремния, аэросил ГОСТ 14922) представляет собой высокодисперсный нелетучий порошок белого цвета, состоящий из 99,9% диоксида кремния (SiO₂). Размеры частиц 5-20 нм, а удельная поверхность 280-360 м²/г. Нерастворим в воде, кислотах и щелочах. Без запаха. Водная суспензия имеет слабокислую реакцию. Обладает высокой адсорбционной способностью, может оказывать влияние на строение биомолекул в течение биохимических реакций в организме. В атоксе отсутствуют посторонние примеси, негативно влияющие на животных и качество получаемой продукции.

Для лечения пчел препарат готовят из следующих компонентов, мас.%:

Нистатин 26-32

Тимол 5-9

Атокс 54-60

Фурацилин 5-9

Препарат содержит (г/л сиропа):

Нистатин 1,0-1,5

Тимол 0,25-0,3

Атокс 1,5-2,0

Фурацилин 0,2-0,25

Применяется с сахарным сиропом (1:1), двух-трехкратно с интервалом 7 суток.

Примеры конкретного выполнения.

Препарат готовят в трех вариантах.

1 вариант, в мас.%:

Нистатин 26

Тимол 8

Атокс 60

Фурацилин 6

всего 100,0

2 вариант, в мас.%:

Нистатин 28

Тимол 7

Атокс 58

Фурацилин 7

всего 100,0

3 вариант, в мас.%:

Нистатин 32

Тимол 5

Атокс 54

Фурацилин 9

всего 100,0

Опытами установлено, что из предложенных вариантов оптимальным является второй.

При испытании препарата в указанных вариантах концентрации эффективность его составляла около 86%. Снижение, также как и увеличение концентрации не приводило к повышению эффективности обработок.

Препарат готовили следующим образом: брали г/л сиропа:

Нистатин 1,0

Тимол 0,25

Атокс 2,00

Фурацилин 0,25

всего 3,5

Для определения оптимальных параметров были проведены опыты с другими значениями компонентов:

Нистатин 0,50

Тимол 0,125

Атокс 1,00

Фурацилин 0,125

всего 1,75

Нистатин 1,50

Тимол 0,5

Атокс 4,00

Фурацилин 0,50

всего 7,0

Указанные соотношения компонентов в препарате дало более низкую эффективность (эти значения за пределами формулы изобретения). Это подтверждается таблицами 1 и 2.

Для определения активности препарата использовали его водный раствор. Исследование проводили в лабораторных условиях по методу дисков.

Раствор и суспензию спор с плотностью 200 тыс. в 1 мл (0,02 мл) наносили пипеткой (0,02 мл) на диски в стерильных чашках Петри. При этом определили оптимальное количество препарата. В качестве контроля использовали инфицированные диски без препарата. Эти чашки Петри инкубировали в термостате при температуре 30°С в течение 10 суток, учитывая рост мицелия возбудителя аскосфероза пчел. Оценку фунгистатической активности препарата проводили по величине диаметра колоний гриба в опыте по сравнению с контролем. Результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1Концентрация Диаметр колонии А. а]pis (мм) М±mпрепарата, г/л3 сутки5 сутки7 сутки10 сутки7,011,0±1,715,3±1,219,7±0,925,7±1,83,56,3±1,58,7±0,910,0±1,212,7±0,91,7520,7±1,227,0±1,537,3±1,946,3±1,2

Контроль22,3±1,549,7±1,869,0±1,588,0±1,3Где, М - среднее значение, a m - среднеквадратическое отклонение.

Как видно из таблицы, испытуемое вещество имеет высокую фунгицидную активность (при концентрации 3,5 г/л). При применении препарата в большей (7,0) и меньшей (1,75) г/л концентрации активность значительно снижается.

Производственные опыты проводили на неблагополучной по аскосферозу пасеке. В первой серии опытов были сформированы две группы пчелосемей - аналогов, по 30 семей в каждой. При этом учитывали силу семей, количество расплода и степень его поражения. Опытной группе препарат скармливали с сахарным сиропом в рекомендуемой дозе, а контрольная получала обычный сахарный сироп. Обработки проводили двукратно с интервалом в семь суток. Об эффективности препарата судили по пораженности расплода до, и после проведения опыта. Для лабораторных исследований из обеих групп отбирали несколько личинок на наличие гриба Ascosphaera apis в расплоде. Полученные данные представлены в таблице 2.

Таблица 2Гр. и/сКол-во пораж. Через 7 сутокЧерез 14 сутокЧерез 21 сутки лич. на 1 соторамку, на начало опытаКол-во пораж. личинокЭффек
тивность, %Кол-во пораж. личинокЭффек
тивность, %Кол-во пораж. личинокЭффек
тивность, %опыт2,21,2460,7680,386конт
роль2,31,9171,7261,726

Из данных таблицы следует, что применение препарата дает высокий лечебный эффект.

Во второй серии опытов, проведенных на пасеке, были сформированы пять групп по 10 семей в каждой. Семьи подвергались обработкам каждым ингредиентом в отдельности. Оказалось, что на 21 сутки опыта нистатин в дозе 1000000 Ед (1 гр) на литр сахарного сиропа снижал количество пораженных личинок на 35,2%, тимол в дозе 0,25 г/л - 19,3%, фурацилин в дозе 0,25 г - 26,2% и атокс в дозе 2,0 г на литр - 5,3%. Минимальная в наших опытах доза (1,74 г/на литр) снижала экстенсивность поражения расплода на 40%, а максимальная (7,0 г/л) - на 46,7%.

Прилагаем второй вариант таблицы 2, который включает результаты обработки с запредельными значениями ингредиентов. Показана эффективность 40,0 и 46,7%, т.е. эффективность оптимальной дозы 86% является максимальной.

Таблица 2Доза препаратаКол-во пораж. Через 7 сутокЧерез 14 сутокЧерез 21 суток личинок на одну соторамку на начало опытаКол-во пораж. личинок%Кол-во пораж. личинок%Кол-во пораж. личинок%Минимальная доза (1,75 г/л)2,21,8715,01,3235,01,3040,0Оптимальная доза (3,5 г/л)2,21,246,00,768,00,386,0Максимальная доза (7,0 г/л)2,21,626,01,340,01,0346,7Чистый контроль2,31,917,01,7261,726,0

Из данных, приведенных в таблице, видно, что самый высокий лечебный эффект получен в группе пчел, подвергшихся обработке препаратом в оптимальной дозе 3,5 г/л сахарного сиропа 1:1 и составлял 86,0%. Уменьшение дозы препарата вдвое до 1,75 г/л (минимальная доза) снижало эффективность обработок на 46%. Повышение дозы препарата до 7,0 г/л (максимальная доза) не вызывало предполагаемого увеличения эффективности и она составила 46,7%, что связано с плохой поедаемостью пчелами лечебного сиропа.

Применяемый препарат является наиболее удобным в применении, экологически чистым и эффективным средством. Препарат обладает комплексным действием, снижает патогенное воздействие гриба на организм пчел. Не токсичен. Может использоваться каждым пчеловодом.

Источники информации

1. Кривцов Н.И., Лебедев В.И., Туников Г.М. Пчеловодство. - М.: Колос, 1999, с.379-380.

2. Наставление по применению нистатина при аскосферозе пчел, утв. ГУВ Госагропрома СССР, 31.07.1989.

3. Авторское свидетельство СССР № 355008, кл. В 27 К 3/40, 1972.

4. Патент №2147177, кл. А 01 К 51/00, 1998.

5. Смирнов А.М., Игнатьева Г.И., Сохликов А.Б. Новые подходы к лечению аскосфероза пчел. Пчеловодство №3 - 1999, с.20-22.

Препарат относится к области пчеловодства. Препарат содержит, мас.%: нистатин - 26-32, тимол - 5-9, атокс - 54-60, фурациллин - 5-9. Технический результат - расширение ассортимента препаратов с высоким лечебным действием. 3 табл.

Препарат для лечения пчел от аскосфероза, состоящий из нистатина и тимола, отличающийся тем, что он дополнительно содержит атокс и фурацилин при следующем содержании компонентов, мас.%:

Нистатин 26-32

Тимол 5-9

Атокс 54-60

Фурацилин 5-9