СПОСОБ МОНИТОРИНГА ФИБРОЗА ПЕЧЕНИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С (ХГС) Российский патент 2007 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, разделу инфекционные болезни - хронические гепатиты.

На современном этапе пункционная биопсия печени (ПБП) считается «золотым стандартом» для диагностики фиброза печени у больного ХГС.ПБП с последующим морфологическим исследованием пунктата проводится для определения степени активности гепатита, стадии процесса (степени выраженности фиброза), исключения альтернативных диагнозов или выявления дополнительных патологий, а также с целью оценки эффективности противовирусной терапии [1]. Гистологическое исследование печени служит единственной возможностью точного подтверждения уже сформировавшегося, хотя и компенсированного цирроза печени, позволяет определить исходное состояние печени до лечения и прогноз ХГС и ответа на противовирусную терапию [2, 3]. К сожалению, ПБП, оставаясь «золотым стандартом» определения стадии фиброза, все-таки является методикой с определенным процентом осложнений вплоть до летальных (по данным ряда исследований количество летальных случаев варьируется от 0 до 3,3 на 1000) [4] и, по мнению некоторых авторов, обладает сомнительной информативностью для установления показаний к противовирусной терапии [3]. По их мнению, ценность биопсии ограничивается вариабельностью получаемого образца ткани печени, так как, несмотря на то, что гепатит - диффузное заболевание печени, доля фиброзной ткани в исследуемом образце может не соответствовать доли фиброзной ткани в печени в целом. Кроме этого, ПБП имеет ряд абсолютных и относительных противопоказаний. Необходимо отметить, что нередко для оценки прогноза заболевания и эффективности лечения существует необходимость повторных биопсий в течение жизни одного больного [2].

Таким образом, возможности ПБП ограничены, с одной стороны, погрешностями в получении материала и в трактовке результатов, с другой стороны - вероятностью серьезных осложнений вплоть до летальных. Кроме того, у ряда пациентов ПБП невозможно выполнить, так как имеются противопоказания (гемофилия, гемангиома, тромбоцитопения, психическая неустойчивость с фобиями и др.). Все вышеизложенное обосновывает необходимость разработки и внедрения более доступных к широкому применению и простых в использовании методов определения маркеров фиброза, в которых бы использовалась периферическая кровь.

Наиболее близкими к заявляемому изобретению для определения степени выраженности фиброза являются методы выявления в крови молекулярных соединений, участвующих в патофизиологии процесса образования внеклеточного матрикса или являющихся активаторами фиброгенеза (коллаген IV типа (CL-IV), аминотерминальный пропептид коллагена III (Р III Р), гиалуроновая кислота (ГК), металлопротеиназы (ММР) и ингибиторы металлопротеиназ (TIMP)) [6]. Данные литературы позволяют сделать заключение о том, что большинство исследователей считают серологические маркеры фиброза полезным методом мониторирования фиброза печени, методом, с помощью которого можно разграничивать стадии фиброза в печени и оценивать эффект противовирусной терапии. Однако ряд исследователей не подтверждает эти заключения [5, 7]. Кроме того, имеются расхождения в оценке диагностической значимости каждого отдельного маркера и высказываются разные мнения по вопросу о том, что собственно отражает тот или иной маркер : степень воспаления, активность фиброгенеза или уже сформировавшуюся стадию фиброза. Это расхождение отчасти можно объяснить использованием авторами разных шкал оценки фиброза и различиями в интерпретации стадии фиброза морфолагами (межисследовательские различия), возможностью «ошибки образца» печени, полученного при ПБП (достигающей 30% в такого рода исследованиях), а также особенностями применяемых тест-систем (разные производители, различные фрагменты молекул, положенные в основу тест-систем). Из-за сложности выполнения определение этих маркеров фиброза не получили широкого распространения. Все изложенное выше демонстрирует необходимость дальнейшего поиска методов диагностики фиброза печени.

В настоящее время признано, что иммунологические механизмы являются ведущими в формировании хронического гепатита. Предполагается, что повреждение печени при ХВГ обусловлено как прямыми цитопатическими эффектами вируса, так и иммуноопосредованными механизмами с возможным преобладанием тех или других на различных этапах заболевания. В стадии хронического воспаления провоспалительные цитокины стимулируют пролиферацию фибробластов и синтез коллагена как непосредственно, так и через индукцию каскада других цитокинов, которые в совокупности усиливают процессы неоангиогенеза. При длительной и неконтролируемой активации макрофагов в органном очаге хронического иммунного воспаления сочетанный эффект медленнодействующих цитокинов и ростовых факторов приводит к замещению функционально полноценных тканей фиброзной тканью. Выступая в качестве первой линии защиты организма от вирусного патогена, мононуклеарные фагоциты сами становятся мишенями атаки вируса, что приводит к нарушению их функций. Следовательно, возбудитель фактически может ускользать от эффекторных механизмов иммунитета, сохраняя вирулентность, что объясняет прогрессирующее хроническое поражение клеток печеночной паренхимы с исходом либо в цирроз либо в рак печени.

Таким образом, цитокины, как продуцируемые локально в печени, так и циркулирующие в системном кровотоке, играют важную роль в контролировании вирусной репликации и вносят существенный вклад в гепатоцеллюлярное повреждение.

Задача изобретения - разработка эффективного способа диагностики фиброза печени при ХГС с использованием показателей цитокинов сыворотки крови.

Заявляемый способ диагностики фиброза печени с использованием сывороточных цитокинов имеет следующие общие признаки с его аналогом (прототипом) определения в крови серологических маркеров фиброза:

1. Методика забора исследуемого материала (кровь из локтевой вены не более 5 мл однократно).

2. Позволяет определить присутствие некровоспалительных повреждений ткани печени.

Отличительными от прототипа признаками заявляемого способа являются:

1. Определение содержания цитокинов крови - ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-12р70 и ФНО-α.

2. Прямая взаимосвязь сывороточных цитокинов с локальными показателям изучаемых параметров непосредственно в органе-мишене.

3. Отражает сформировавшуюся стадию фиброза.

При проведении анализа имеющейся научной и патентной информации не обнаружено сведений, относящихся к использованию определения содержания сывороточных цитокинов с учетом их корреляции с показателями локального уровня, для диагностики фиброза печени при ХГС.

Объектом исследования были 40 пациентов с ХГС. Анализировали содержание 8 цитокинов - ИЛ-1 а, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-12р40, ИЛ-12р70, ФНО-α, ИФН-γ в сыворотке крови и супернатанте биоптата печени пациентов ХГС и здоровых доноров (5 человек). Для этого периферическую кровь (5 мл) забирали шприцем из локтевой вены, центрифугировали при 3000 об/мин на холоде в течение 10 мин. Сыворотку разливали по 0,5 мл в эпиндорфы, замораживали и хранили до использования при -76°С. Всем пациентам выполнялась чрескожная пункционная биопсия печени иглой Менгини с получением столбика биоптата не менее 20 мм, от которого 2-3 мм субстрата гомогенезировали с добавлением физиологического раствора (5 мл), ресуспендировали и центрифугировали при 5000 об/мин на холоде в течение 10 мин. Полученный супернатант распределяли по 0,5 мл в эпиндорфы, замораживали и хранили до использования при -76°С. Применяли метод твердофазного ИФА с использованием диагностических наборов (R&D Diagnostics Inc., USA) с чувствительностью 1 пг/мл. Расчеты количества цитокинов проводили путем построения калибровочной кривой с помощью компьютерной программы и выражали в пг/мл. В качестве контроля при исследовании уровней цитокинов в гомогенизатах печеночных биоптатов использовались образцы печеночной ткани 5 доноров, не имеющих хронических заболеваний и маркеров инфицирования вирусами парентеральных гепатитов. Учитывая небольшие пределы разбросов показателей, мы сочли возможным ограничиться этим количеством исследований. Необходимо принять во внимание также сложность и специфику забора материала. Оценку результатов проводили с использованием статистических приемов для малых выборок. Для морфологического исследования биоптаты обрабатывали по общепринятым методикам и заключали в парафин. В гистологических срезах, окрашенных гематоксилином и эозином и по Ван-Гизону, определяли активность некровоспалительных изменений на основе полуколичественной оценки по R.G. Knodell et al. (1981) в модификации В.В. Серова (1996) и индекс фиброза по V.J.Desmet et al. (1994) по алгоритму METAVIR. Для оценки информативности системного и локального статуса цитокинов провели корреляционный анализ взаимосвязей между морфологическими характеристиками ХГС и их концентрацией в сыворотке крови и супернатантах биоптатов печени. Статистическая обработка полученных материалов произведена с применением прикладных программ BIOSTAT. С целью определения достоверности различий использован t-критерий Стьюдента для факторов, имеющих нормальное распределение. Корреляционный анализ проводили с использованием непараметрической корреляции Спирмена.

При изучении содержания цитокинов в сыворотке крови при ХГС наблюдалось достоверное увеличение концентраций цитокинов Тh2-типа (ИЛ-4, ИЛ-10) и провоспалительных цитокинов ФНО-α, ИЛ-1α, ИЛ-12р40, ИЛ-12р70 на фоне достоверного снижения уровней Тh1 цитокинов (ИЛ-2 и ИФН-γ). При этом имеется статистически значимое отличие показателей содержания уровней цитокинов в группах пациентов с разными стадиями фиброза (табл.1). Из таблицы видно, что количество провоспалительных цитокинов (ИЛ-1α, ФНО-α) в сыворотке крови более чем в 2,5 раза превышают их уровни у здоровых людей. При этом содержание ИЛ-1α и ФНО-α у больных с F2 и F3 достоверно выше их уровня в группе больных без признаков фиброза (F0). При этом не определено достоверных различий между концентрацией исследуемых цитокинов в группах с F0 и начальными его проявлениями (F1) (р>0,05). Уровни сывороточных цитокинов ИЛ-2 и ИНФ-γ, продуцируемых Т-клетками 1 типа, значительно снижены, в особенности ИФН-γ. При сравнении содержания исследуемых цитокинов у больных с разными стадиями фиброза отмечено, что статистически значимые различия определялись в группе больных с F3 (р<0,01). В то время как в группе с F0 показания уровней сывороточных ИЛ-2 и ИФН-γ по сравнению со здоровыми не отличались (0,17±0,09 пг/мл и 10,0±4,8 пг/мл против 0,2±0,03 пг/мл 14,3±1,7 пг/мл соответственно, р<0,05). Что касается сывороточного содержания цитокинового профиля Т-клеток 2 типа, то для ИЛ-4 и ИЛ-10 обнаружены значительные повышения их уровней по мере прогрессирования фиброза. Концентрация ИЛ-4 в группе без фиброза статистически значимо не отличалась от показателя уровня исследуемого цитокина в сыворотке крови у здоровых (4,5±1,0 пг/мл против 3,2±1,2 мг/мл, р>0,05). Содержание сывороточного ИЛ-10 в группах больных с F0 и F1 также достоверно не изменялось (28,5±7,8 пг/мл и 34,4±8,1 пг/мл соответственно, р>0,05). Исследование локального содержания ИЛ-1α, ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-12р40, ИЛ-12р70, ФНО-α свидетельствует о достоверном увеличении их уровней, a также о снижении концентраций ИЛ-2, ИФН-γ по сравнению с группой контроля (табл.2). Самый низкий локальный уровень провоспалительных и Тh1-продуцируемых цитокинов наблюдался при F1 для ИФН-γ (р<0,01) и при F2 для ИЛ-2 (р<0,05). Содержание ИЛ-1α в супернатанте печени достоверно не отличалось между показателями в группах с F2 и F3 (75,0±10,8 пг/мл и 100,0±21,5 пг/мл соответственно, р>0,05). Локальный уровень ФНО-α в исследуемых группах имел достоверную тенденцию к увеличению его концентрации при прогрессировании фиброза и в отличие от сывороточного уровня был достоверно отличен в группах с F0 и F1 (10,1±1,5 пг/мл и 59,0±2,8 пг/мл соответственно, р<0,01). Содержание цитокинов профиля Th 2 типа на местном уровне характеризовалось статистически значимым увеличением концентрации ИЛ-4 и ИЛ-10 в исследуемых группах. В отличие от сывороточных значений этих цитокинов наблюдалось значительное их увеличение (на местном уровне) по сравнению с группой здоровых более чем в 20 раз в группе с F3 (для ИЛ-4, р<0,001). Содержание ИЛ-12р40 на системном уровне в исследуемых группах достоверно отличалось от группы здоровых (р<0,05), однако в группах с разной стадией фиброза статистическая значимость различий была неравномерной. В отличие от этого на местном уровне четко определялась статистическая значимость различий в содержании исследуемого цитокина в группах с разными стадиями фиброза (р<0,001). При этом в группе с высокой стадией фиброза (F3) концентрация локального ИЛ-12р40 превосходила нормальные значения в 300 раз, что отличалось от сывороточного показателя (в 5 раз). Таким образом, несмотря на определенные различия, изменение баланса цитокинов Th1 и Th2 на локальном и системном уровнях носит однонаправленный характер. При изучении корреляционных взаимосвязей между исследуемыми цитокинами в различных биологических субстратах (сыворотке крови и супернатантах печени) и выраженностью фиброза печени в баллах выявлена высокая степень корреляции между параметрами ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-12р70 и ФНО-α, что дает возможность использования их в качестве достоверных маркеров выраженности фиброза печени (табл.3). Наиболее значимыми для оценки выраженности фиброза явилось повышение уровней сывороточных ИЛ-4 (>5,6 пг/мл), ИЛ-10 (>35 пг/мл), ФНО-α (>14 пг/мл) и ИЛ-12р70 (>8,5 пг/мл). Следовательно, определенные интервалы параметров иммунитета могут служить критериями неблагоприятного течения болезни. Согласно литературным данным, высокий уровень ФНО-α связывают с индукцией апоптоза гепатоцитов и макрофагов, что стимулирует экспрессию интегрина Мас-1, который в свою очередь манифестирует переход воспалительного процесса в цирроз и ограничивает выработку цитокинов Тh1-типа ответа [5]. Именно этим можно объяснить высокую степень корреляционных связей между концентрацией ФНО-α, продуцируемого преимущественно клетками СММ, и ИЛ-4, ИЛ-10 - продуцируемых Th2 типа, на системном и локальном уровнях и выраженностью фиброза, что возможно ведет к избыточной активации гуморальной составляющей иммунной системы с иммунопатологическими последствиями. Преобладание увеличения концентрации локальных цитокинов может быть связано и с нарушением их инактивации поврежденной печенью. К противовоспалительным механизмам относится локальное и системное действие ИЛ-10, направленное на ингибирование продукции ФНО-α и регуляцию синтеза ИЛ-12. Однако при дисбалансе провоспалительных и противовоспалительных цитокинов иммунологические механизмы приобретают патологический характер, что имеет место при ХГС.

Таким образом, установленные связи между содержанием исследуемых цитокинов на системном и локальном уровне с морфологическими показателями свидетельствуют о том, что из всех изученных в работе иммунологических тестов наибольшей значимостью для определения стадии фиброза являлись показатели содержания как в сыворотке, так и в супернатантах биоптатов печени ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-12р70 и ФНО-α. Следовательно, использование определения концентраций указанных цитокинов в сыворотке крови является альтернативным методом скрининга фиброза печени.

Литература:

1. Никитин И.Г., Строжаков Г.И., Федоров И.Г. Хронический гепатит С у пациентов, перенесших трансплантацию печени: механизмы прогрессирования и подходы к лечению //Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 2003. - №4. - С.4-10.

2. Майер К.П. Гепатит и последствия гепатита. Практическое руководство. - М.: ГЭОТАР, Медицина, 1999. - 432 с.

3. Manns M.P., Hutchison J.G., Gorton S.C., et al. Peginterferon alfa-2b plus ribavirin compared with interferon alfa-2b plus ribavirin for initial treatment of chronic hepatitis C: a randomized trial //Lancet. - 2001. - Vol.358. - P. 898-965.

4. Grant A., Neuberger J. Guidelines on the use liver biopsy in clinical practice //Gut. - 1999. - Vol.45(4). - P.1-11.

5. Regev A., Berho М., Jeffers L.J., et al. Sampling error and intraobserver variation in liver biopsy in patients with chronic HCV infection //J. Gastroenterol. - 2002. - Vol.97(10). - P. 2614-8.

6. Schruppan D. Serum markers of fibrosis // Surrogate Markers to Asses Efficacy of Treatment in Chronic Liver Disease. - Basel, - 1995. - P.25.

7. Leroy V., De Traversay C., Bamoud R., et al. Changes in histological lesions and serum fibrogenesis markers in chronic hepatitis C patients non-responders to interferon alpha //J. Hepatol. - 2001. - Vol.35(1). - P.120-6.

Таблица 1Содержание цитокинов (в пг/мл) в сыворотке крови у больных ХГС с различной стадией фиброзаГруппы обследованныхИЛ-1αИЛ-2ИЛ-4ИЛ-10ИЛ-12р40ИЛ-12р70ФНО-αИФН-γF01,2±0,2*0,17±0,094,5±1,028,5±7,8*69,5±11,285,8±11,1*9,1±2,5*10,0±4,8(n=12)Р₂>0,05Р₂>0,05Р₂<0,05Р₂>0,05Р₂>0,05Р₂<0,05Р₂>0,05P₂>0,05 Р₃<0,05Р₃>0,05Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃>0,01 Р₄<0,001Р₄>0,05Р₄<0,01Р₄<0,01Р₄<0,001Р₄<0,01Р₄<0,01Р₄<0,01F11,5±0,4*0,15±0,0511,5±2,1*34,4±8,1*100,8±17,0*62,5±9,4*13±1,8*8,1±2,5*(n=13)P₁>0,05P₁>0,05P₁<0,05P₁>0,05P₁>0,05P₁<0,05P₁>0,05P₁>0,05 Р₃<0,01Р₃>0,01Р₃<0,05Р₃<0,05Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃>0,01 Р₄<0,01Р₄<0,05Р₄<0,01Р₄<0,01Р₄<0,01Р₄<0,01Р₄<0,01Р₄<0,01F25,0±0,9*0,16±0,03^*17,0±1,1*70,1±15,1*180±30,5*30,5±2,3*20±1,9*5,4±1,8*(n=8)P₁<0,01P₁>0,01P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,01P_i<0,01P₁>0,01 Р₂<0,01Р₂>0,01Р₂<0,05Р₂<0,05Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂>0,01 Р₄<0,05Р₄<0,05Р₄<0,05P₄<0,05Р₄>0,05Р₄<0,05Р₄<0,01Р₄<0,01F37,7±1,3*0,1±0,02*20,1±1,2*107,5±10,9*250±70,0*10,9±1,2*28,5±3,5*1,2±0,4*(n=7)P₁<0,01P₁<0,05P₁<0,01P₁<0,001P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,01 Р₂<0,01Р₂<0,05Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂<0,01 Р₃<0,05Р₃<0,01Р₃<0,05Р₃<0,01Р₃>0,05Р₃<0,05Р₃<0,01Р₃<0,01контроль (n=5)0,53±0,10,2±0,033,2±1,213,9±0,754,8±3,76,3±1,24,3±1,214,3±1,7Достоверность различий изучаемого показателя по сравнению с:* - контрольной группой (Р<0,05)P₁ - группой с F0Р₂ - группой c F1Р₃ - группой с F2P₄ - группой с F3

Таблица 2Содержание цитокинов (в пг/мл) в супернатанте печени у больных ХГС с различной стадией фиброзаГруппы обследованныхИЛ-1αИЛ-2ИЛ-4ИЛ-10ИЛ-12р40ИЛ-12р70ФНО-αИФН-γF020,0±3,530,1±3,175,1±20,0150,1±30,120,5±3,5*30,3±5,1*10,1±1,5*70,5±12,5(n=12)Р₂<0,01Р₂>0,01Р₂<0,001Р₂>0,05Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂<0,05 Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃<0,001Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃<0,05 Р₄<0,01Р₄<0,01Р₄<0,001Р₄<0,01Р₄<0,001Р₄<0,01Р₄<0,001Р₄<0,01F170,0±11,2*20,5±5,1200±95,1*170±18,5*50,1±7,8*20,5±1,2*59±2,8*30,1±9,5*(n=13)P₁<0,01P₁<0,001P₁<0,01P₁>0,05P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,05 Р₃>0,05Р₃<0,001Р₃<0,05Р₃<0,05Р₃<0,01Р₃<0,05Р₃<0,01Р₃>0,05 Р₄<0,01Р₄<0,001Р₄<0,01Р₄<0,01Р₄<0,001Р₄<0,01Р₄<0,001Р₄>0,05F275±10,8*10,5±1,5*400±90,3*240±70,8*200,1±90,1*10,2±2,4*100±15,9*30,8±8,1*(n=8)P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,01P₁<0,05 Р₂>0,05Р₂<0,01Р₂<0,05Р₂<0,05Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂>0,05 Р₄<0,05Р₄>0,05Р₄<0,01Р₄<0,01Р₄<0,001Р₄<0,01Р₄<0,01P₄>0,05F3100±21,5*8,3±1,1*800±100,0*450,5±80,0*2000±180*2,1±0,9*200±20,8*25,3±7.5*(n-7)P₁<0,01P₁<0,001P₁<0,001P₁<0,01P₁<0,001P₁<0,01P₁<0,001P₁<0,01 Р₂<0,01P₂<0,01Р₂<0,01Р₂<0,01Р₂<0,001Р₂<0,01Р₂<0,001Р₂>0,05 Р₃>0,05Р₃>0,05Р₃<0,001Р₃<0,01Р₃<0,001Р₃<0,01Р₃<0,01Р₃>0,05контроль16,4±2,929,0±2,855,0±9,4139,4±13,26,8±0,93,3±0,74,9±1,464,4±2,9(n=5)        Достоверность различий изучаемого показателя по сравнению с:* - контрольной группой (Р<0,05)P₁ - группой с F0Р₂ - группой с F1Р₃ - группой с F2Р₄ - группой с F3

Таблица 3Коэффициенты корреляции (R) и уровни их значимости (р) между выраженностью фиброза (F) и показателями содержания сывороточных и локальных цитокинов при ХГСЦитокиныСывороткаСупернатант печениF1(l-4)F2(5-8)F3(9-12)F1(1-4) F2(5-8)F3(9-12)(n=15)(n=10)(n-5)(n=15)(n=10)(n=5)RРRРRРRРRрRРИЛ-1α0,10,80,090,70,650,010,140,70,330,20,680,001ИЛ-20,260,40,330,20,490,10,280,40,220,40.950,001ИЛ-40,970,0010,870,0010,980,0010,950,010,890,0010,970,001ИЛ-100,960,0010,930,0010,940,0010,910,010,920,0010,940,01ИЛ-12р400,10,80,990,0010,970,0010,180,60,90,70,930,001ИЛ-12р700,940,010,930.0010,980,0010,940,010,990,010,980,001ФНО-α0,870,0010,90,0010,980,010,930,010,90,010,980,001ИФН-γ0,760,0010,670,010,480,10,170,60,30,20,960,001Выделенные цифры означают максимальную степень R и p между изучаемыми показателями

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностическим методам, и может быть использовано для мониторинга фиброза печени у больных хроническим гепатитом С (ХГС). Для осуществления способа в сыворотке крови определяют содержание цитокинов ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-12р70, ФНО-α. При ИЛ-4 выше 5,6 пг/мл, ИЛ-10 выше 35 пг/мл, ФНО-α выше 14 пг/мл и ИЛ-12р70 выше 8,5 пг/мл устанавливают наличие выраженного фиброза печени. Изобретение позволяет провести эффективную диагностику фиброза печени у больных хроническим гепатитом С. 3 табл.

Способ мониторинга фиброза печени у больных хроническим гепатитом С, включающий проведение исследований сыворотки крови, отличающийся тем, что определяют содержание сывороточных цитокинов - ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-12р70 и ФНО-α и при повышении уровней ИЛ-4 выше 5,6 пг/мл, ИЛ-10 выше 35 пг/мл, ФНО-α выше 14 пг/мл и ИЛ-12р70 выше 8,5 пг/мл устанавливают наличие выраженного фиброза печени.