СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АТРОФИИ ВЛАГАЛИЩА У ЖЕНЩИН РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА В СОСТОЯНИИ ПОСТОВАРИОЭКТОМИИ Российский патент 2010 года по МПК G01N33/48 

Описание патента на изобретение RU2404430C1

Изобретение относится к медицине, в частности к онкогинекологии, и касается диагностики атрофии влагалища у женщин репродуктивного возраста в состоянии постовариоэктомического синдрома (ПОЭС) и медикаментозной супрессии яичников.

За последние десятилетия наглядно проявляется тенденция к возникновению рака тела и шейки матки в более раннем возрасте женщины. В связи с чем отмечается рост оперативных вмешательств, объем которых обуславливает удаление тела матки с шейкой и придатками, а также, проведение сочетанных лучевых методов лечения, конечным итогом которых являются постлучевые изменения во влагалище женщины. Хирургическое выключение яичников и их медикаментозная супрессия в репродуктивном возрасте у 75-80% пациенток сопровождается развитием синдрома постовариоэктомии, характеризующегося развитием вегетативных, афферентных, личностных, обменно-эндокринных и урогенитальных нарушений, в основе которых лежит дефицит половых стероидов, в частности эстрадиола (5, 8, 13).

По данным ряда авторов после проведения тотальной овариогистерэктомии афферентные и урогенитальные расстройства у 25% женщин носят затяжное течение, практически не подвергаются обратному развитию и с течением времени приобретают хронический характер (7).

Все клинические проявления постовариоэктомического синдрома (ПОЭС) снижают качество жизни женщины и требуют поиска адекватных профилактических и прогностических мер диагностики, на основе которых возможно создание модели качественного и полноценного лечения (2).

Известны способы выявления тяжести атрофических процессов во влагалище с применением кольпоцитологических методов исследования: определение зрелости влагалищного эпителия, подсчета индекса вагинального здоровья (10). Минусами этих способов являются влияние экзогенных (инфекция урогенитального тракта) и эндогенных (снижение иммунитета) факторов на результат исследования, что приводит к получению неадекватных результатов исследования. Кроме того, описанные методики не учитывают уровень периферических стероидов в крови.

Таким образом, до настоящего времени не предложены оптимальные методы диагностики и прогнозирования атрофии влагалища у женщин в состоянии постовариоэктомии хирургического и медикаментозного генеза по поводу рака тела и/или шейки матки.

Наиболее близким к предлагаемому является способ диагностики атрофии влагалища путем кольпоскопии - первый эндоскопический метод, нашедший широкое применение в гинекологической практике (3). Кольпоскопия заключается в проведении детального визуального осмотра слизистой оболочки влагалища, вульвы и влагалищной части шейки матки. Недостатком известного метода является недостаточная точность и информативность, обусловленная тем, что при его применении не учитываются показатели состояния местной гемодинамики. Кроме того, при расширенной кольпоскопии слизистая оболочка обрабатывается 3% раствором уксусной кислоты, которая вызывает спазм сосудов и как следствие уменьшение кровообращения, что снижает точность способа при учете этих показателей.

Необходимым условием эффективного диагностического поиска влагалищных атрофий постовариоэктомического генеза является комплексное и углубленное изучение влагалища женщины. Все приведенные известные методы обследования и диагностики дают оценку только состоянию эпителиальной выстилки влагалища, не изучая при этом базальный, парабазальный, промежуточный и стромальные слои влагалищной стенки, что также снижает точность и информативность диагностики. Учитывая, что рецепторы к стероидам и сосудистая сеть располагаются в основном в базальном, парабазальном и стромальном слоях влагалищной стенки (11, 12), логично предположить, что изучение глубоких слоев позволит произвести качественную оценку состояния влагалища у женщин репродуктивного возраста в состоянии постовариоэктомии.

Новая техническая задача - повышение точности и информативности способа.

Для решения поставленной задачи в способе диагностики атрофии влагалища у женщин репродуктивного возраста в состоянии постовариоэктомии, заключающемся в исследовании тканей влагалища, проводят иммуногистохимическое исследование биоптатов влагалища с подсчетом количества диаметра сосудов, для чего осуществляют биопсию влагалища в средней его трети с забором биоптата размером 0,5×0,5×0,3 см, далее, биоптат фиксируют в нейтральном 10% формалине в течение 18 часов с последующей проводкой в изопропаноле и заливкой в парафин, после этого проводят окраску депарафинизированных срезов гематоксилином и эозином по классической методике с предварительной демаскировкой антигена в цитратном буфере для CD34, результат реакции идентифицируют по ядерному окрашиванию клеток, количеству и размеру сосудов, визуализируемых при помощи CD34, и при наличии сосудов среднего и крупного диаметра с площадью, равной 3-10 мм2, определяют норму, а при наличии сосудов с площадью 2 мм2 и менее, диагностируют атрофию влагалища.

Иммуногистохимическое исследование по данным литературы (4) используется для диагностики различных заболеваний и, главным образом, в дифференциальной диагностике опухолей. При этом метод также широко используется для определения метастатических поражений органов, оценки гормонального статуса опухоли, иммунофенотипирования опухолей, определения факторов прогноза опухолевого прогресса, идентификации различных микроорганизмов, определения гормонов и их рецепторов и т.д. (7, 10). Однако возможность применения иммуногистохимического исследования с целью диагностики атрофии влагалища не очевидна для специалиста.

Данные отличительные признаки не известны в научно-медицинской и патентной литературе. Таким образом, предложенный способ соответствует критерию изобретения «новизна». Совокупность отличительных признаков не вытекает явным образом для специалиста из уровня техники. Способ апробирован в клинике. Предлагаемый способ соответствует критериям «изобретательский уровень», «промышленная применимость».

Способ осуществляют следующим образом. У пациентки на гинекологическим кресле после предварительной асептической обработки наружных половых органов раствором спирта 70% обнажают влагалище в зеркалах. Влагалище обрабатывают 1% водным раствором хлоргексидина. Следующий этап - при помощи аппликационной анестезии местными анестетиками обезболивают участок 2×2 см. В средней трети влагалища при помощи биопсийных щипцов производят забор биоптата размером 0,5×0,5×0,3 см.

Иммуногистохимическое исследование биоптатов при помощи CD34 проводят на парафиновых срезах по стандартной методике с предварительной демаскировкой антигена в нитратном буфере (для CD34). Проявление реакции оценивают с помощью системы визуализации DakoCytomation En Vision + System-HRP (DAB).

Для морфологического и иммуногистохимического исследования, биоптаты влагалища фиксируют в нейтральном 10% растворе формалина в течение 18-24 часов с последующей проводкой в абсолютизированном изопропаноле с минеральным маслом по следующей схеме (Табл.1):

1 - И: М - смесь изопропанола и минерального масла в соотношении 5:1 и 2:1.

2 - Под понятием минеральное масло подразумевается: вазелиновое масло, парафиновое масло, минеральное моторное масло, самой низшей марки.

Затем проводят заливку в парафин.

Далее выполняется стандартная окраска срезов гематоксилином и эозином по методике (Табл.2):

На следующем этапе проводят классическую окраску депарафинизированных срезов гематоксилином и эозином, иммуногистохимическое определение количества и размеров сосудов стромы моноклональным антителом против CD34, с дальнейшим подсчетом количества сосудов на единицу площади среза по протоколу (Табл.3).

Все используемые реактивы, буферы и среды для разведения производства Dako.

Результат реакции идентифицируют по ядерному окрашиванию клеток. Полученные результаты оценивают: количество и размер визуализируемых при помощи CD34 сосудов, подсчитывают в единицах на поле зрения микроскопа при увеличении микроскопа 10×, окуляр 10× по системе Автандилова Г.Г. И при наличии сосудов среднего и крупного диаметра с площадью, равной 3-10 мм2, определяют норму, а при наличии сосудов с площадью 2 мм2 и менее, диагностируют атрофии влагалища.

Проведенные клинические испытания способа диагностики атрофии влагалища у женщин репродуктивного возраста в состоянии постовариоэктомии и медикаментозной супрессии яичников, отягощенных раком тела и шейки матки, доказывают, что иммуногистохимическое исследование биоптатов влагалища может быть успешно использовано в клинической гинекологии, как способ достоверной диагностики патологического процесса влагалища, позволяющий онкогинекологу вовремя поставить диагноз и начать соответствующую терапию, а пациентке улучшить качество жизни. Иммуногистохимическое исследование более универсально, чем рассматриваемый прототип, так как может применяться при большем количестве случаев. Противопоказаний к использованию этого метода исследования не найдено, в отличие от кольпоскопии. Таким образом, предложенный способ соответствует критерию изобретения «промышленно применимо».

Конкретные примеры, подтверждающие эффективность использования иммуногистохимического исследования при оценке микроциркуляции в рамках диагностики атрофии влагалища.

Клинический пример 1

Больная Л., 1975 года рождения. История болезни №20242. Диагноз; Cr colli uteri T1бN1M0 III ст. Состояние после комбинированного лечения (2007 г.). Клиническая группа 3. Проведено лечение: 30.05.07. Лапаротомия, расширенная экстирпация матки с придатками по Вертгейму. 10.06.07. - проведен курс сочетанной дистанционной и внутриполостной гамма-терапии в сопровождении МХТ+6 курсов ПХТ. Гистологическое исследование №56982-88: В шейке матки низко дифференцированный эпидермоидный Cr без ороговения с инвазией на всю глубину до адвентиции. МТС в лимфоузлах с обеих сторон. Тело матки и придатки без опухолевого поражения. Постовариоэктомический синдром - тяжелая форма.

Дополнительно проведены исследования согласно предлагаемому способу.

12.12.08. произведена биопсия влагалища.

Гормональный профиль: ФСГ - 31,31 ммЕ/мл; ЛГ - 22,43 ммЕ/мл; эстрадиол 10,0 пг/мл

Результат CD34 - крупные сосуды - 0; средние - 0; мелкие - 5.

Проведенное исследование биоптатов влагалищной стенки обнаружило тяжелое нарушение кровообращения влагалища, что обусловливало проявление урогенитальных нарушений в виде сухости влагалища, диспареуний. Диагностический поиск позволил назначить этиоторопную терапию, корригирующую данные нарушения.

Клинический пример 2

Больная Е., 1976 года рождения. История №13530. Диагноз: Cr colli uteri T3бNxM0. Состояние после сочетанной лучевой лучевой терапии. Клиническая группа 3 (2006 год). Постовариоэктомический синдром средней степени тяжести.

20.09.06. (биопсия шейки матки). Гистологическое исследование №15816: Эпидермоидный cr без ороговения

26.09.06. Проведен курс сочетанной внутриполостной и дистанционной терапии

16.12.08. произведена биопсия влагалища

Гормональный профиль: ФСГ 147,69 ммЕ/мл, ЛГ 66 ммЕ/мл, эстрадиол 108 пг/мл Результат CD34 - крупные сосуды - 0; средние - 0; мелкие - 9.

Полученные результаты констатировали нарушение микроциркуляции влагалища тяжелой степени тяжести. Однако сохранялся кровоток сосудами мелкого калибра на удовлетворительном уровне. Данный факт обуславливался сохраненным стероидогенезом в яичниках. Анализ показателей позволил провести корригирующую терапию.

Предпосылками разработки предлагаемого способа явились клинические исследования. Для доказательства эффективности предложенного нами способа диагностики было проведено обследование 4 групп женщин. Общее количество обследованных составило 354 женщины в состоянии постовариоэктомии после проведенных хирургических, комбинированных и комплексных методов лечения онкозаболеваний.

В основную группу I (n=85) вошли пациентки, после проведенного хирургического лечения (простая, расширенная экстирпация матки с придатками по Вертгейму, Бохману).

В основную II группу (n=131) вошли женщины, пролеченные комбинированными методиками (оперативное лечение в сочетании с лучевой (СЧЛ) и полихимиотерапией (ПХТ).

Основная группа III (n=70) включала пациенток, находившихся в медикаментозной менопаузе после сочетанной лучевой терапии.

В группу IV (группа сравнения; n=68) вошли женщины с доброкачественными заболеваниями внутренних гениталий, получившие хирургическое лечение в объеме простой экстирпации матки с придатками.

При изучении прогностической значимости экспрессии CD34 выявлено, что у пациенток во всех исследуемых группах и в группе сравнения сохраняется на удовлетворительном уровне состояние кровообращения сосудами мелкого калибра. При этом отмечен достоверно менее выраженный средний показатель в группах с проведенным комбинированным лечением - группа II (8,01±0,45) и в группе III с сочетанным лучевым лечением женщин с проведенными лучевыми методами лечения в анамнезе, что, очевидно, связано с агрессивным воздействием внутриполостной гамма-терапии, способствующей склерозированию и разрушению эндотелиальной выстилки кровеносных сосудов. Также в I, II и в IV-й группах наличие удовлетворительного кровоснабжения влагалищной стенки артериями мелкого калибра обусловлено развитием множества мелких коллатералей после проведенного хирургического лечения. При этом в группе I только у 5 чел (5.8%) не фиксировались в биоптате сосуды мелкого калибра; в группе II число аналогичных пациентов было 9 (6,8%), в III группе - 3 (4,3%) и в группе сравнения - подобное явление отмечено только у 2 чел. (2,9%).

В Таблице 4 приведены показатели уровня экспрессии CD34 в обследованных группах (M±m). (Примечание: в сравнениях группы IV и групп II и III t=2,01 и 1,96 соответственно р<0,05, ∗∗в сравнениях группы IV и групп II и III t=10,2 и 15,8 соответственно р<0,001, ∗∗∗в сравнениях группы IV и групп II и III t=7,6 и 8,1 соответственно р<0,01).

Изучение уровня экспрессии CD34, маркирующего капиллярную сеть влагалища сосудами среднего калибра, обнаружило уменьшение показателя в группе II: М=2,02±0,24 (σ=2,754). В группе III с сочетанными лучевыми методами лечения в анамнезе их среднее количество составило 0,79±0,205 (σ=1,719).

Установлено, что наиболее выражено кровоснабжение стенок влагалища сосудами крупного калибра у женщин I и IV-й групп (М=6,09 и 4,09 соответственно). У пациенток второй и третьей групп количество крупных сосудов значительно меньше: в сравнении с IV группой при t=10,2 и 15,8 соответственно р<0,001.

При сравнении показателей по группам пациенток второй и третьей групп с группой I также отмечаются различия высокого уровня достоверности (t=16,9 и 18,6 соответственно, т.е. р<0,001).

В группах II и III средние показатели количества сосудов крупного калибра находились в пределах 1,02±0,18 (σ=2,017) и 0,14±0,05 (σ=0,427). В основной группе II только у 31 чел (24%) обнаружены артерии и вены крупного калибра. В основной группе III число таких пациенток было 8 (11,4%). На высокодостоверном уровне (р<0,001) имелись различия в количестве артериоло-венозных сплетений сосудов среднего калибра у женщин I и III групп в сравнении с группой IV (t=7,6 и 8,1 соответственно). Вместе с этим, сравнение показателей CD34 между I и IV группами обнаружили отсутствие достоверно значимых отличий (t=1,2; р>0,05). Ухудшение кровотока в данных подгруппах обуславливалось двумя факторами: нарушением анатомических взаимоотношений сосудистого русла ввиду хирургических пособий и патологическим влиянием лучевых методов.

В Таблице 5 приведены показатели эстрадиола в исследуемых группах. Примечание: в сравнениях группы IV и III t=3,07. т.е. р<0,01.

Полученные результаты дают основание говорить о наличии достоверно значимых различий в продуцировании эстрадиола у пациенток III и IV-й групп. В группах I и II уровень эстрадиола также превышал значения показателей группы IV, однако статистически достоверных различий между ними выявлено не было (t=0,02 и t=0,2, т.е. р>0,05). Превышение концентраций эстрадиола в группах 1, II связано с наличием в данных выборках около половины женщин с ожирением: индекс массы тела выходил за границы 30 у 45,0% и 47,0% женщин соответственно, что обусловливало усиление ароматазной активности стероидгенеза. Кроме того, уровень содержания эстрадиола в группах I и II, превышающий показатели группы IV, был связан с присутствием в выборках пациенток с диагнозом рака тела матки 1-го патогенетического гормонозависимого варианта.

В группе I таких женщин 40,0% (31 чел.) и в группе II - 29,8% (39 чел.). Как известно, 1-й патогенетический вариант рака тела матки основывается на многообразном проявлении гиперэстрогении и сопутствующему ей ожирению, что согласуется с показателями эстрадиола крови у пациенток I и II групп.

Таким образом, применение разработанного способа с использованием диагностики уровня локального кровотока влагалища, характеризующего одно из звеньев атрофии влагалища посредством клона CD34, позволило своевременно разработать пациенткам план коррекции и терапии урогенитальных расстройств.

Полученные результаты наблюдений биоптатов влагалищной стенки у женщин II и III групп, свидетельствующие о катастрофически сниженном количестве артериоло-венозных сплетений из сосудов крупного и среднего калибра согласно экспрессии

CD34, объясняются агрессивным локальным воздействием лучевой терапии на влагалищную стенку. Изменение кровоснабжения влагалища в группах с проведенным хирургическим этапом лечения связано с нарушением анатомического взаиморасположения органов и с компенсаторным ростом «новых» артериоло-венозных анастомозов сосудов мелкого калибра.

Эстрогены воздействуют на имеющиеся в сосудистой стенке специфические клетки сосудов, подавляя секрецию коллагена этими клетками. Эстрогенам также присущи эндотелий-зависимый и эндотелий-независимый сосудорасширяющие эффекты, улучшение функции эндотелия и торможение тока кальция через кальциевые каналы. Не менее важным фактором среди положительных эффектов эстрогенов является их способность улучшать рост эндотелия, а также тормозить апоптоз и пролиферацию гладкомышечных клеток в ответ на повреждение сосудов (7).

В проведенном исследовании результаты показателей эстрадиола группы III свидетельствовали о достоверно значимых различиях в сравнении с группой IV. В группе III наличия показателей эстрадиола, превышающих показатели групп I, II и IV, может свидетельствовать о продолжающемся на невысоком уровне синтезе эстрогенов и андрогенов тека-тканью яичников.

В результате проведенных исследований было впервые показано, что использование иммуногистохимического исследования для оценки микроциркуляции с целью диагностики атрофии влагалища в значительной степени способствует повышению эффективности хирургического вмешательства, позволяет улучшить качество жизни онкологических пациенток, снизить количество осложнений в отдаленном послеоперационном периоде. Применение иммуногистохимического исследования у женщин репродуктивного возраста в состоянии постовариоэктомии характеризуется хорошим диагностическим результатом: отсутствуют ложно-положительные результаты, диагностика возможна на ранних стадиях развития атрофии влагалища. Также доказано отсутствие побочных эффектов при заборе материала для биопсии и проведении в дальнейшем корригирующей терапии.

Таким образом, использование предлагаемого способа в клинической практике позволяет эффективно, высокотехнологично на современном инновационном уровне проводить диагностику сосудистых нарушений во влагалище у женщин в ПОЭС, вовремя оценить степень урогенитальных нарушений и повысить эффективность лечения. Предлагаемые критерии иммуногистохимического исследования биоптатов влагалища могут быть успешно использованы в клинической гинекологии, как способ достоверной диагностики патологического процесса влагалища, позволяющий онкогинекологу вовремя поставить диагноз и начать соответствующую терапию, а пациентке улучшить качество жизни. Иммуногистохимическое исследование более универсально, может применяться при большем количестве случаев. Противопоказаний к использованию этого метода в отличие от кольпоскопии исследования не найдено.

Источники информации

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. Руководство. М. - 1990 - 384 с.

2. Балан В.Е. Урогенитальные расстройства в климактерии (клиника, диагностика, заместительная гормонотерапия) / Дисс… д.м.н. // 1998. 295 с.

3. Бодяжина В.И., Сметник В.Л., Тумилович Л.Г. «Неоперативная гинекология», Москва, Медицина, 1990. - С.25-32.

4. Криволапов Ю.А., Леенман Е.Е. Морфологическая диагностика лимфом. СПб. «КОСТА», 2006, 208 с.

5. Кулаков В.И., Сметник В.П. Руководство по климактерию. М., 2001. С.404-495.

6. Петров С.В., Райхлин Н.Т. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека. Издание 3-е. - Казань. - 2004. - 456 с.

7. Сметник В.П. Медицина климактерия. М., 2006, 848 с.

8. Юренева С.В. Синдром постовариоэктомии // Materia Medica. 1999 №2(22). С.3-10.

9. Эллиниди В.Н., Аникеева Н.В., Максимова Н.А. Практическая иммуногистохимия (Практические рекомендации). - Санкт-Петербург. - 2002. - с.35.

10. Bachman G. Urogenital ageing: an old problem newly recognized // Maturitas. 1995. №22. Suppl. P.1-5.

11. Forsberg J.G. A morphologist approach to the vagine-age-related changesand estrogen sen-sitivity // Maturitas. 1995. №22 / suppl. P.7-15.

12. McLean A.B., Nicol L.A., Hodgins M.B. Immunohystochenical localization of estrogen receptors in the vulva and vagina // J. Reprod. Med. 1990. Vol.35. P.1015-1016.

13. Payer L: The menopause in various cultures. In: A portrait of the menopause. Expert reports on medical and therapeutic strategies for the 1990s. Ed. Burger H & Boulet M. Parthenon Publishing, Park Ridge, NJ, USA, 1991, p.3-22.

Таблица 1 Этап Реагент Ручная проводка Время (часы) Температура 1 Изопропанол 1 комнатная 2 Изопропанол 1 комнатная 3 Изопропанол 1 комнатная 4 Изопропанол 1 комнатная 5 Изопропанол 1 комнатная 6 И: М1-2 (5:1) 1,5 50°С 7 И:М (2:1) 1,5 50°С 8 Минеральное масло 1,5 50°С 9 Парафин 1 60°С 10 Парафин 1 60°С 11 Парафин 1 60°С 12 Парафин 1 60°С

Таблица 2 Этап Реагент Время в минутах 1 Ксилол 5 2 Ксилол 5 3 Спирт 5 4 Спирт 5 5 Вода дистиллированная 56° 5 6 Гематоксилин (Карацци) 4-5 7 Вода дистиллированная 56° Промыть 2 раза 8 Эозин 0,5-1 9 Спирт 5 10 Спирт 5 11 Ксилол с 12 Ксилол 5 13 Заключение в канадский бальзам

Таблица 3 Этап Реагент Время в минутах Примечание 1 Поместить срезы в термостат 40 56°С 2 Ксилол 5 3 Ксилол 5 4 Спирт 5 5 Спирт 5 6 Спирт 5 7 Вода дистиллированная 2-3 3 смены 8 Демаскировка антигенов в цитратном буфере (рН 6,0) 30 при температуре 94-98°С на водяной бане 9 Остывание при комнатной температуре 20 10 Вода дистиллированная 2 смены промывка 11 Вода дистиллированная 5 2 смены 12 Обводка гидрофобным (восковым) карандашом DakoPen 13 Блокировка эндогенной пероксидазы (3% р-р перикиси водорода, Peroxidase Block) 15-20 во влажной камере 14 Вода дистиллированная 2-3 3 смены 15 Инкубация с первыми антителами 30 во влажной камере 16 Промывочный буфер (рабочий р-р TrisHCl 1×10) промыть 17 Промывочный буфер (рабочий р-р TrisHCl) 5 2 смены 18 Инкубация с системой визуализации En Vision+ -30 во влажной камере 19 Промывочный буфер (рабочий р-р TrisHCl 1×10) промыть 20 Промывочный буфер (рабочий р-р TrisHCl) 5 2 смены 21 DAB+ 2-3 22 Вода дистиллированная 2 3 смены 23 Докраска гематоксилином Карацци 25-27 секунд 24 Проточная водопроводная вода 1 -2 2 смены промыть 25 Теплая водопроводная вода 5 56°С 26 Обезвоживание в спиртах: 5 2 смены 27 Карбол-Ксилол: 5 2 смены 28 Ксилол: 5 минут 2 смены 29 Заключение под покровное стекло в канадский бальзам

Таблица 4 Показатели уровня экспрессии Cd34 в обследованных группах (M±m) Группы Частота встречаемости маркера Сосуды крупного калибра Сосуды среднего калибра Сосуды мелкого калибра I (n=85) 6,09±0,33 4,54±0,2 8,34±0,46 II (n=131) 1,02±0,18∗∗ 2,02±0,24∗∗∗ 8,01±0,45 III (n=70) 0,14±0,05∗∗ 0,79±0,205∗∗∗ 7,94±0,509 IV (n=68) 4,09±0,252∗∗ 4,03±0,345∗∗∗ 9,10±0,304

Таблица 5 Группы I II III IV Эстрадиол 32,27±3,31 32,05±2,37 47,24+4,6* 31,28±2,44

Похожие патенты RU2404430C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТЕПЕНИ АТРОФИИ СТЕНКИ ВЛАГАЛИЩА У ЖЕНЩИН ПОСЛЕ ОВАРИОЭКТОМИИ 2009
  • Евтушенко Ирина Дмитриевна
  • Покуль Лилиана Викторовна
  • Туриченко Ольга Витальевна
  • Иванова Татьяна Васильевна
RU2402273C1
СПОСОБ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОЙ РЕАБИЛИТАЦИИ БОЛЬНЫХ С ТУБООВАРИАЛЬНЫМИ ОБРАЗОВАНИЯМИ 2002
  • Евтушенко И.Д.
  • Романова А.П.
  • Иванова Т.В.
RU2231374C1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ НЕБЛАГОПРИЯТНОГО ТЕЧЕНИЯ МЕСТНОРАСПРОСТРАНЕННЫХ ФОРМ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ, АССОЦИИРОВАННОГО С ВИРУСОМ ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА 2012
  • Батурина Ирина Леонидовна
  • Орнер Ирина Юрьевна
  • Абрамовских Ольга Сергеевна
  • Зотова Мария Александровна
  • Телешева Лариса Федоровна
  • Жаров Александр Владимирович
RU2504326C1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО ЭНДОМЕТРИТА 2007
  • Спирина Юлия Валерьевна
  • Евтушенко Ирина Дмитриевна
RU2342173C1
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ФЕТОПЛАЦЕНТАРНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ 2009
  • Тривоженко Ольга Васильевна
  • Евтушенко Ирина Дмитриевна
RU2402271C1
СПОСОБ УШИВАНИЯ ОПЕРАЦИОННОЙ РАНЫ ПРИ ПЛАСТИЧЕСКИХ ОПЕРАЦИЯХ НА НАРУЖНЫХ ПОЛОВЫХ ОРГАНАХ У ЖЕНЩИН 2005
  • Евтушенко Ирина Дмитриевна
  • Иванова Татьяна Васильевна
  • Гейко Оксана Геннадьевна
RU2290110C2
СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ СУБИНВОЛЮЦИИ МАТКИ В ПОСЛЕРОДОВОМ ПЕРИОДЕ 2002
  • Евтушенко И.Д.
  • Иванова Т.В.
  • Саадех И.А.
  • Куфарева Т.И.
RU2223102C1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ПРЕДРАКОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ШЕЙКИ МАТКИ У ЖЕНЩИН С ПАПИЛЛОМА-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ 2006
  • Берлим Александр Александрович
  • Орлов Владимир Иванович
  • Панченко Светлана Николаевна
  • Авруцкая Валерия Викторовна
RU2310197C1
СПОСОБ ВЫБОРА ТАКТИКИ ВЕДЕНИЯ БОЛЬНЫХ С НЕОПЛАЗИЯМИ ШЕЙКИ МАТКИ 2011
  • Качалина Ольга Владимировна
  • Качалина Татьяна Симоновна
  • Шахова Наталья Михайловна
  • Елисеева Дарья Дмитриевна
  • Андосова Лариса Дмитриевна
  • Михайлова Елена Михайловна
  • Гребенкина Елена Викторовна
  • Михалева Ольга Владимировна
RU2472424C1
Способ выбора тактики лечения пролапса гениталий у пациенток с недифференцированной дисплазией соединительной ткани 2017
  • Тарабанова Ольга Викторовна
  • Крутова Виктория Александровна
  • Ордокова Аминат Айдамиркановна
RU2682497C1

Реферат патента 2010 года СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АТРОФИИ ВЛАГАЛИЩА У ЖЕНЩИН РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА В СОСТОЯНИИ ПОСТОВАРИОЭКТОМИИ

Изобретение относится к медицине, конкретно к гинекологии. Предложен способ диагностики атрофического процесса во влагалище у женщин после радикальных операций на органах малого таза. Проводят иммуногистохимическое исследование биоптатов влагалища с подсчетом в них количества и диаметра сосудов, для чего осуществляют биопсию влагалища в средней его трети с забором биоптата размером 0,5×0,5×0,3 см, далее, биоптат фиксируют в нейтральном 10% формалине в течение 18 часов с последующей проводкой в изопропаноле и заливкой в парафин, после этого проводят окраску депарафинизированных срезов гематоксилином и эозином по классической методике с предварительной демаскировкой антигена в цитратном буфере для CD34, результат реакции идентифицируют по ядерному окрашиванию клеток, количеству и размеру сосудов, визуализируемых при помощи CD34, и при наличии сосудов среднего и крупного диаметра с площадью, равной 3-10 мм2, определяют норму, а при наличии сосудов с площадью 2 мм2 и менее, диагностируют атрофию влагалища. 5 табл.

Формула изобретения RU 2 404 430 C1

Способ диагностики атрофии влагалища у женщин репродуктивного возраста в состоянии постовариоэктомии, заключающийся в исследовании тканей влагалища, отличающийся тем, что проводят иммуногистохимическое исследование биоптатов влагалища с подсчетом количества диаметра сосудов, для чего осуществляют биопсию влагалища в средней его трети с забором биоптата размером 0,5×0,5×0,3 см, далее, биоптат фиксируют в нейтральном 10% формалине в течение 18 ч с последующей проводкой в изопропаноле и заливкой в парафин, после этого проводят окраску депарафинизированных срезов гематоксилином и эозином по классической методике с предварительной демаскировкой антигена в цитратном буфере для CD34, результат реакции идентифицируют по ядерному окрашиванию клеток, количеству и размеру сосудов, визуализируемых при помощи CD34, и при наличии сосудов среднего и крупного диаметра с площадью, равной 3-10 мм2,определяют норму, а при наличии сосудов с площадью 2 мм2 и менее диагностируют атрофию влагалища.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2010 года RU2404430C1

Печь-кухня, могущая работать, как самостоятельно, так и в комбинации с разного рода нагревательными приборами 1921
  • Богач В.И.
SU10A1
Стеклодувная трубка 1939
  • Волков Д.А.
SU63195A1
GUILLERMO RIMOLDI AT AL
Effects of Chronic Genistein Treatment in Mammary Gland, Uterus, and Vagina
Environ Health Perspect
Пресс для выдавливания из деревянных дисков заготовок для ниточных катушек 1923
  • Григорьев П.Н.
SU2007A1

RU 2 404 430 C1

Авторы

Евтушенко Ирина Дмитриевна

Покуль Лилиана Викторовна

Чухрай Ольга Юрьевна

Иванова Татьяна Васильевна

Даты

2010-11-20Публикация

2009-07-27Подача