СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГАММА-ГЛИЦИНА ИЗ РАСТВОРОВ Российский патент 2013 года по МПК A23L1/30 A23L1/305 C07C227/08 C07C229/08 

Область техники

Изобретение относится к фармацевтической и пищевой отраслям промышленности, в частности к производству композиций биологически активных веществ, которые могут быть использованы как биологически активные добавки. Более конкретно, получение более активной кристаллической гамма-модификации глицина при кристаллизации в присутствии дикарбоновых кислот.

Уровень техники

Аминокислота глицин в настоящее время находит широкое применение в медицине. Препараты глицина способны уменьшать психоэмоциональное напряжение и агрессивность, повышать социальную адаптацию, нормализовать сон и повышать умственную работоспособность, уменьшать выраженность общемозговых расстройств при ишемическом инсульте и снижать токсическое действие алкоголя (Gannon М.С., Nuttall J.A., Nuttall F.Q. // Am. J. Clin. Nutr. 2002. 76. P.1302-1307) [1]. В США препараты глицина одобрены для лечения негативной симптоматики у больных шизофренией (Javitt D.C., Zylberman I., Zukin S.R. et al. //Am. J. Psychiatry. 1994. 151. №8. P.1234-1236) [2]. Обычно рекомендуют сублингвальный прием таблетки глицина, при этом отмечено, что употребление раствора глицина менее эффективно, чем сухого препарата (Гусев Е.И., Комисарова И.А., Алферова В.В. и др. // Terra Medica. 2001. №4. С.37-38) [3]. Отсюда можно предположить, что биологическая активность глицина связана не только с его химической формулой, но и с характеристиками твердого вещества

При нормальных условиях могут быть получены α-, β- и γ-формы, значительно различающиеся между собой не только физическими, но и биологической активностью (Markel A.L., Achkasov A.F., Alekhina Т.А., Prokudina O.I., Ryazanova M.A., Ukolova T.N., Efimov V.M., Boldyrev, V.V. Pharmacology Biochemistry and Behavior, 2011, 98 (2), pp.234-240) [4].

Кристаллическая структура α-формы глицина представляет собой димеры, образующие двойные центросимметричные слои, связанные между собой посредством Ван-дер-Ваальсовых взаимодействий (Jonsson P.G., Kvick A. // Acta Cryst, 1972, 28, P.1827-1833) [5]. Структура гамма-модификации глицина имеет особенности, отличающие ее от структур двух других модификаций глицина (α глицина и β глицина) (пространственная группа симметрии Р31 или Р32, структура полярна и нецентросимметрична, построена из тройных спиралей, связанных водородными связями молекул глицина (Y.Iitaka // Acta Cryst, 1958, 11, P.225-226) [6]. Растворимость обеих форм глицина практически одинакова (Xia Yang, Xiujuan Wang, and Chi Bun Ching // J. Chem. Eng. Data 2008, 53, P.1133-1137) [7], поэтому объяснение различия в биологической активности форм глицина, по-видимому, стоит искать в области механизма растворения. В этой связи интересно отметить, что, по данным атомно-силовой микроскопии и малоуглового рентгеновского рассеяния (Chattopadhyay S., Erdemir D., Evans J.M.B. et al. // Cryst. Growth Design. 2005. V.5. №2. P.523-527) [8], при растворении полиморфных модификаций глицина в воде в раствор переходят не отдельные изолированные молекулы, но фрагменты исходных кристаллических структур - центросимметричные димеры, при растворении α-формы, и полярные цепочки - при растворении γ-формы.

На кристаллизацию полиморфных модификаций глицина из раствора сильно влияет pH. Для варьирования pH в литературе до сих пор использовали добавки уксусной кислоты или аммиака. В присутствии неорганических кислот и оснований образуются соли глицина и их кристаллогидраты. В растворах, по-видимому, может происходить перегруппировка ассоциатов молекул глицина.

Известен способ получения гамма-модификации глицина (заявка на изобретение US 2005256300 от 2005.11.17 (WO 2006124152 2006-11-23)) [9]. Способ использования постоянного электрического поля в индукционной кристаллизации и контроле формирования кристаллов. Применение мощного постоянного электрического поля для пересыщенных растворов глицина с целью образования зародышей гамма-полиморфа глицина, благодаря создаваемой ориентации сильно полярных молекул глицина в ранее существовавших кластерах, тем самым, помогая им организоваться в кристаллическую структуру. Процесс проводили в специальной высоковольтной камере. Диапазон напряжений 400-800 тыс. В/м. Пересыщение до 1,85-2 исходных водных растворов глицина получали при нагревании до 62-64°C и выдерживании при данной температуре в течение ночи. После чего растворы глицина медленно охлаждали до комнатной температуры. При напряженности 600 тыс. В/м происходила кристаллизация гамма-глицина в течение 30-90 мин. Начало зарождения кристаллов можно было наблюдать визуально по образованию игольчатых кристаллов.

Данный способ имеет недостаток в виде необходимости использования высоковольтной камеры, а также в необходимости поддержания высокопересыщенного состояния растворов в течение длительного времени.

В последней версии Кембриджского банка структурных данных (февраль 2011) содержится 108 записей, соответствующих неорганическим солям глицина и их гидратам.

Публикация международной заявки WO 0102075 - 2001-01-11 [10] касается метода использования лазерного излучения для получения полиморфных модификаций, в частности, гамма-глицина из пересыщенных водных растворов глицина (3.7-3.9 моль/л) при температуре 50°C. Воздействуют мощным пучком лазера с длиной волны 1.06 мкм в импульсном режиме с частотой 10 импульсов в секунду. Через несколько часов возникают несколько кристаллов, которые через 1-2 дня достигают размеров 10 мм.

Данный способ имеет недостаток в виде необходимости использования лазера, а также в длительности процесса.

Патентная заявка Японии JP 9067322 - 1997-03-11 [11]. Получение гамма-глицина достигается быстрым охлаждением насыщенного раствора глицина (0.1-2.0 г глицина на 100 г воды). Насыщенный при 60-95°C водный раствор глицина подают в резервуар для кристаллизации, где поддерживается постоянная температура 20-45°C, достаточная для быстрого охлаждения раствора. После извлекают смесь кристаллического гамма-глицина и раствора, производят разделение твердой и жидкой составляющих.

Патентная заявка Японии JP 9003015 - 1997-01-07 [12] на способ получения гамма-глицина путем перекристаллизации альфа-глицина. Перекристаллизацию проводят при нагревании в щелочных водных растворах (pH 10-14) в присутствии гидроксидов, карбонатов или окислов щелочных и щелочно-земельных металлов.

Недостатком данного способа является вероятность образования в указанном интервале кислотности среды (pH 10-14) относительно устойчивых солей глицина со щелочными и щелочноземельными металлами, удаление которых из твердого осадка затруднено.

Раскрытие изобретения

Задача изобретения состоит в создании более простого способа получении гамма-глицина из растворов.

Общая реализация метода (скрининг)

В 3-4 мл дистиллированной воды при 30-50°C растворяли навеску смеси порошков α-глицина и дикарбоновой кислоты общей массой 0,6 г. Были исследованы растворы с мольной долей кислоты 1, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 и 90%.

В качестве дикарбоновых кислот использовали яблочную и янтарную кислоты. Кристаллизацию производили медленным испарением при комнатной температуре. pH растворов измеряли до и после выпадения кристаллов (портативный pH-метр Mettler Toledo Seven Go).

Для повышения эффективности процесса растворяли при нагревании до 50°C такое количество глицина, чтобы при 30°C раствор становился пересыщенным.

Полученный осадок отделяли при фильтровании или декантрировании раствора. После удаления осадка при отсутствии значительного испарения раствора можно провести повторное нагревание маточного раствора, добавив свежую порцию глицина.

Кристаллические продукты исследовали методами рентгенофазового анализа (дифрактометр Bruker D8 Discover с излучением СuКα, графитовым монохроматором и двухкоординатным газоионизационным детектором) и ИК-спектроскопии (ИК-Фурье спектрометр DigiLab Excalibur 3100 (Varian)). Спектры НПВО были записаны в диапазоне 4000-550 см^-1 с разрешением 2 см^-1 с использованием приставки MIRacle ATR фирмы Pike. ИК-спектры обрабатывались в программе Digital Resolutions Pro 4.0. Индицирование рентгенограмм проводили при помощи программ PowderCell 2.3 и Eva Version 6.0 (пакет программ DIFFRAC^plus) с использованием структурных данных из Кембриджского банка данных (CSD), а также полученных нами в ходе монокристальных рентгеновских экспериментов.

В результате перекристаллизации глицина в присутствии яблочной и янтарной дикарбоновых кислот происходило образование γ-формы.

Проведенный ВЭЖХ-анализ (Милихром А-02 (Эконова, Россия)) показал, что в осадке может присутствовать примесь дикарбоновой кислоты, в присутствии которой проводилась перекристаллизация. Загрязнение устраняется путем промывки осадка этиловым спиртом.

Результаты перекристаллизации α-формы глицина в присутствии яблочной кислоты приведены в таблице 1. Абсолютная погрешность в определении pH составила 0,1.

Таблица 1 Процент кислоты (мольный) pH свежеприготовленного раствора pH раствора после выпадения кристаллов Результат кристаллизации 1 4.6 4.3 γ+α 5 4.0 3.9 γ+α 10 3.7 3.6 γ 20 3.4 3.4 γ 30 3.2 2.7 γ 40 3.0 2.6 γ 50 2.9   не кристаллизуется 60 2.7   не кристаллизуется 70 2.5   не кристаллизуется 80 2.4 не удается измерить яблочная кислота 90 2.1 не удается измерить яблочная кислота

Аналогичные результаты, получены с янтарной кислотой. Пример расчета навесок для получения гамма-глицина кристаллизацией из растворов в присутствии яблочной и янтарной дикарбоновых кислот приведен в таблице 2

Таблица 2 Кристаллизация глицина с яблочной кислотой Мольный %, кислоты Масса глицина (г) Масса кислоты (г) 1 0.609 0.011 5 0.553 0.052 10 0.501 0.099 20 0.415 0.185 30 0.340 0.260 40 0.274 0.326 50 0.215 0.385 Кристаллизация глицина с янтарной кислотой мольный %, кислоты Масса глицина (г) Масса кислоты (г) 1 0.566 0.009 5 0.556 0.046 10 0.509 0.089 20 0.430 0.169 30 0.359 0.242 40 0.293 0.307 50 0.233 0.367

Как показали приведенные результаты экспериментов, кристаллы гамма-глицина образуются при добавлении в водный раствор глицина 10-40 мол.% - яблочной или янтарной дикарбоновых кислот.

Источники информации

1. Gannon М.С., Nuttall J.A., Nuttall F.Q. // Am. J. Clin. Nutr. 2002. 76. P.1302-1307.

2. Javitt D.C., Zylberman I., Zukin S.R. et al. // Am. J. Psychiatry. 1994. 151. №8. P.1234-1236].

3. Гусев Е.И., Комисарова И.А., Алферова B.B. и др. // Terra Medica. 2001. №4. С.37-38.

4. Markel A.L., Achkasov A.F., Alekhina T.A., Prokudina O.I., Ryazanova M.A., Ukolova T.N., Efimov V.M., Boldyrev, V.V. Pharmacology Biochemistry and Behavior, 2011, 98 (2), pp.234-240.

5. Jonsson P.G., KvickA. //Acta Cryst, 1972, 28, P.1827-1833.

6. Y.Iitaka // Acta Cryst, 1958,11, P.225-226).

7. Xia Yang, Xiujuan Wang, and Chi Bun Ching // J. Chem. Eng. Data 2008, 53, P.1133-1137.

8. Chattopadhyay S., Erdemir D., Evans J.M.B. et al. // Cryst. Growth Design. 2005. V.5. №2. P.523-527.

9. US 2005256300 от 2005.11.17 (WO 2006124152 2006-11-23.

10. WO 0102075 - 2001-01-11.

11. JP 9067322 - 1997-03-11.

12. JP 9003015 - 1997-01-07.

Изобретение относится к фармацевтической и пищевой отраслям промышленности, в частности к производству композиций биологически активных веществ, которые могут быть использованы как биологически активные добавки (БАД). Предложен способ получения гамма-глицина из водного раствора. Способ заключается в перекристаллизации глицина в водном растворе при добавлении в раствор 10-40 мол.% яблочной или янтарной дикарбоновой кислоты. Изобретение позволяет упростить получение гамма-глицина и расширить ассортимент БАД к пище. 2 табл.

Способ получения гамма-глицина из раствора, заключающийся в перекристаллизации глицина в водном растворе при добавлении в раствор 10-40 мол.% яблочной или янтарной дикарбоновых кислот.