СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ, ДЛИТЕЛЬНОГО ХРАНЕНИЯ И КРИОКОНСЕРВАЦИИ СПЕРМЫ ИНДЮКОВ "ВНИИГРЖ-5" Российский патент 2015 года по МПК A61D19/02 

Изобретение относится к птицеводству и может применяться в биотехнологиях искусственного осеменения индеек.

С развитием методов искусственного осеменения сельскохозяйственной птицы актуальными стали разработки сред для разбавления, длительного хранения и криоконсервации спермы самцов с целью повышения оплодотворенности яиц. При этом составы сред различны для разных видов птицы.

Одной из задач является длительное хранение и криоконсервация спермы индюков. Для ее решения среди прочих была предложена среда, содержащая растворенные в дистилированной воде: инозитол, лактозу, фосфорнокислый калий двузамещенный и однозамещенный, тиосульфат натрия и цинковый комплекс этилендиаминтетраацетата двунатриевого двуводного [1]. Главным недостатком этой среды являются относительно невысокие показатели оплодотворенности яиц (63,3%) и вывода молодняка (49,9%), получаемые после осеменения спермой, прошедшей криоконсерацию.

В качестве прототипа была выбрана среда «ВИРГЖ-4», имеющая наиболее близкий к заявляемому объекту изобретения состав компонентов [2], используемая для криоконсервации спермы петухов и индюков.

Задачей предлагаемого изобретения было существенное повышение биологической полноценности спермиев индюков при длительном хранении при плюсовых температурах и криоконсервации и, как следствие, - повышение оплодотворенности яиц.

По итогам многочисленных экспериментов установлено, что для решения этой задачи целесообразно в качестве источников ионов магния вместо взятого в прототипе ацетата использовать сульфат и привести соотношение растворенных в 100 мл дистиллированной воды компонентов до следующих диапазонов: глутамат натрия - 1,60-2,00 г; глутаминовая кислота - 0,04-0,05 г; инозитол - 0,24-0,26 г; калий фосфорнокислый двузамещенный - 0,32-0,36 г; глюкоза - 1,00-1,14 г; магния сульфат 0,22-0,23.

При использовании этой среды для криоконсервации спермы индюков в качестве криопротектора добавляют к объему разбавленной спермы N,N-диметилацетамид в концентрации 8%.

Для проверки диапазонов содержания компонентов в сравнении с прототипом были испытаны 4 варианта новой среды, получившей название «ВНИИРГЖ-5», составы которых показаны в таблице 1.

Степень разбавления: 1 часть спермы и 3 части среды. Частота осеменения индеек при хранении спермы при плюсовых температурах - 1 раз в 14 дней; при использовании замороженно-оттаянной спермы - 1 раз в 7 дней.

В таблице 2 приведены результаты сравнительных испытаний различных вариантов среды после замораживания, хранения в течение года при температуре жидкого азота и последующего оттаивания, из которой видно, что объект изобретения имеет значительное преимущество перед прототипом, особенно заметное в вариантах II и III.

В таблице 3 показаны результаты сравнительных испытаний прототипа и состава предлагаемой среды по варианту III (оба без N,N-диметилацетамида) при разных сроках хранения при температуре: +1…+3°С. Здесь также наблюдается преимущество объекта изобретения.

Среду «ВНИИГРЖ-5» готовят следующим образом: в первую емкость наливают 50 мл дистиллированной воды, в которой растворяют: глутамат натрия и фосфорнокислый калий двузамещенный. Во второй емкости в 50 мл дистиллированной воды растворяют глюкозу, инозитол, магния сульфат и глутаминовую кислоту. После полного растворения компонентов оба раствора соединяют в одной емкости.

Технический результат предлагаемого изобретения состоит в существенном повышении биологической полноценности спермиев индюков при длительном хранении и криоконсервации.

Таблица 1 Компоненты среды Ед. измерения Среда «ВНИИГРЖ-5» Прототип «ВИРГЖ-4»     Вариант I Вариант II Вариант III Вариант IV   Глутамат натрия г 1,26 1,60 2,00 2,40 2,40 Глутаминовая кислота г 0,03 0,04 0,05 0,06 0,14 Инозитол г 0,23 0,24 0,26 0,30 0,20 Калий фосфорнокислый двузамещенный г 0,29 0,32 0,36 0,40 0,35 Глюкоза г 0,87 1,00 1,14 1,35 0,80 Магния сульфат г 0,20 0,22 0,23 0,25 - Магния ацетат г - - - - 0,10 Глицин г - - - - 0,10 N,N-диметилацетамида % 8,00 8,00 8,00 8,00 8,00 Вода дистиллированная мл 100 100 100 100 100

Таблица 2 Среда Варианты Проинкубировано яиц, шт. Оплодотворенность яиц, % Вывод молодняка, % Объект изобретения «ВНИИГРЖ-5» I 200 67,2 60,0 II 213 81,2 72,5 III 198 86,9 79,6 IV 385 70,2 61,3 Прототип «ВИРГЖ-4» 328 79,1 72,9

Таблица 3 Среда Время хранения спермы, час Проинкубировано яиц, шт Оплодотворенность яиц, % Вывод молодняка, % Объект изобретения «ВНИИГРЖ-5», вариант III 1 1378 97,0 83,8 24 831 95,2 82,8 48 284 89,1 71,1 Прототип «ВИРГЖ-4» 24 1324 85,6 73,0

Источники информации

1. Осташко Ф.И., Бесулин В.И., Каркач П.М. Среда для разбавления и замораживания спермы индюков: Авт. св. СССР №1477397, А61Д 7/02, 1987.

2. Целютин К.В., Тур Б.К. Искусственное осеменение и криоконсервация спермы сельскохозяйственной птицы (петухи, индюки, гусаки и селезни). - СПб - Пушкин. - 2013. - С. 29.

Изобретение относится к птицеводству, в частности к среде для разбавления и длительного хранения спермы индюков. Среда характеризуется тем, что она содержит растворенные в дистиллированной воде глутамат натрия, глутаминовую кислоту, инозитол, калий фосфорнокислый двузамещенный, глюкозу и магния сульфат. Все компоненты взяты в определенном соотношении. При этом при криоконсервации спермы среда дополнительно содержит N,N-диметилацетамид в концентрации 8%. Использование изобретения позволит повысить биологическую полноценность спермиев индюков при длительном хранении и криоконсервации. 1 з.п. ф-лы, 3 табл.

1. Среда для разбавления и длительного хранения спермы индюков, характеризующаяся тем, что она содержит растворенные в дистиллированной воде глутамат натрия, глутаминовую кислоту, инозитол, калий фосфорнокислый двузамещенный, глюкозу и магния сульфат при следующем соотношении компонентов:
Глутамат натрия - 1.60-2.00 г
Глутаминовая кислота - 0.04-0.05 г
Инозитол - 0.24-0.26 г
Калий фосфорнокислый двузамещенный - 0.32-0.36 г
Глюкоза - 1.00-1.14 г
Магния сульфат - 0.22-0.23 г
Вода дистиллированная - 100 мл

2. Среда для разбавления и длительного хранения спермы индюков по п. 1, отличающаяся тем, что при криоконсервации спермы она дополнительно содержит N,N-диметилацетамид в концентрации 8%.