СПОСОБ ОТБОРА ЛОШАДЕЙ С НИЗКИМ УРОВНЕМ ОБМЕНА ТОКСИЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ ПО ЖЕЛАТЕЛЬНОМУ ГЕНОТИПУ Российский патент 2019 года по МПК A01K67/00 

Описание патента на изобретение RU2699520C1

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к способам отбора лошадей, и может быть использовано для селекционного процесса в коневодстве. В качестве критерия для отбора лошадей с низким содержанием токсичных микроэлементов для селекционного процесса, выступает изучение полиморфизма микросателлитной ДНК по локусу HMS7, отбор животных производят по желательным аллелям: OQ, LO, JM, NO, NQ.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Патентный поиск показывает отсутствие каких-либо литературных данных по способу отбора лошадей с низким уровнем обмена токсичных элементов по желательному генотипу для селекционного процесса.

Цель изобретения - создание способа отбора лошадей с низким уровнем обмена токсичных элементов по желательному генотипу для селекционного процесса по результатам определения полиморфизма микросателлитов ДНК по 17-ти локусам, рекомендованные Международным обществом по изучению генетики животных: VHL20, HTG4, АНТ4, HMS7, HTG6, АНТ5, HMS6, ASB23, ASB2, HTG10, HTG7, HMS3, HMS2, ASB17, LEX3, HMS1, СА425 и сопоставлением с суммой токсичных микроэлементов (Sr, Al, Cd, Pb, Sn, Hg) в ммоль/кг.

Способ позволяет решить следующие технические задачи: выявлять животных носителей желательных аллелей: OQ, LO, JM, NO, NQ по локусу HMS7, концентрация токсичных микроэлементов в волосе с гривы средние значения которых не превышают 3,09 ммоля/кг.

РАСКРЫТИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Роль химических элементов в функционировании живого организма не вызывает сомнения, доказано их участие в большинстве биохимических процессов и разнообразных функциях. При этом каждый макро- или микроэлемент характеризуется определенным оптимальным диапазоном содержания в организме. Отклонения в концентрации химических элементов способны привести к возникновению реакций различной степени выраженности, физиологическим изменениям в пределах обычной регуляции, значительным нарушениям метаболизма и специфическим заболеваниям (Авцын А. П. Микроэлементозы человека: этиология, классификация, органопатология / А.П. Авцын, А.А. Жаворонков, М.А. Риш, Л.С. Строчкова. - М.: Медицина, 1991. - 496 с.).

Воздействие токсичных микроэлементов вызывает широкий спектр неблагоприятных последствий для здоровья животных приводя к снижению продуктивных и репродуктивных качеств и др. (Ronis M.J. Reproductive toxicity and growth effects in rats exposed to lead at different periods during development./ M.J. Ronis, T.M. Badger, S.J. Shema, P.K. Roberson, F Shaikh. //Toxicol. Appl. Pharmacol. 1996. - P. 136:361-371. doi: 10.1006/taap.1996.0044; Kalashnikov V. The content of essential and toxic elements in the hair of the mane of the trotter horses depending on their speed / V. Kalashnikov, A. Zajcev, M. Atroshchenko, S. Miroshnikov, A. Frolov, O. Zav'yalov, L. Kalinkova, T. Kalashnikova // Environmental Science and Pollution Research. - 2018. 21961-21967. doi: 10.1007/sl 1356-018-2334-2.).

Способ был реализован следующим образом: на первом этапе исследований был изучен элементный состав волос гривы лошадей (n=415): пород: Башкирская (n=50), Кабардинская (n=52), Вятская (n=56), Тувинская (n=47), Якутская (n=50), Мезенская (n=45), Чистокровная верховая (n=60), Арабская (n=55), на основании этих исследований был установлен процентильный интервал рассчитанный по сумме молей токсичных микроэлементов (75 процентиль), соответствующий предельному уровню концентрации для данной группы животных, принятый по рекомендациям, в качестве «физиологической нормы» (Skalnaya М. G. The limits of physiological (normal) content Ca, Mg, P, Fe, Zn and Cu in human hair. Mikroelementy v meditsine/ M.G. Skalnaya, V. A. Demidov, A. V Skalny. //Microelements in medicine. - 2003. P. 5-10.).

На втором этапе у 215 голов лошадей пород: Башкирская (n=25), Кабардинская (n=30), Вятская (n=25), Тувинская (n=25), Якутская (n=25), Мезенская (n=25), Чистокровная верховая (n=25), Арабская (n=25) были отобраны для изучения по 17-ти локусам микросателлитов ДНК - волосяные луковицы, для определения содержания токсичных микроэлементов - волос с гривы. (Храброва Л.А. Взятие и транспортировка проб для генетического анализа. Генетический метод контроля происхождения лошадей // [Электронный ресурс] URL: http://www.ruhorses.ru/genetic/genetic.html (дата обращения: 07.11.2018); Храброва Л.А. Инструкция (образцы волосы). Правила взятия проб волос для анализа ДНК // [Электронный ресурс] URL: https://medre.ru/dnk-test/instruction-hair.php (дата обращения: 07.11.2018))

Тестирование лошадей проводили в лаборатории генетики ВНИИ коневодства. Выделение ДНК из волосяных луковиц проводили с использованием реагентов «Extra Gene ТМ DNA Prep 200» (ООО «Лаборатория Изоген», Москва). Амплификацию ДНК проводили методом ПНР с использованием 17-плексного набора праймеров для генотипирования лошадей «StockMarksR» в амплификаторе 2720 Thermal Cycler согласно рекомендациям производителя. Разделение и детекция продуктов амплификации проводилась методом капиллярного электрофореза на генетическом анализаторе АВ 3130 (Applied Biosystems). Идентификацию результатов осуществляли с использованием профиля контрольной ДНК и данных международных сравнительных испытаний (Horse Comparison Tests).

Элементный состав волос определяли методами атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии (АЭС-ИСП и МС-ИСП) в испытательной лаборатории АНО «Центр биотической медицины», г. Москва (Registration Certificate of ISO 9001:2000, Number 4017 - 5.04.06). Озоление биосубстратов проводили с использованием микроволновой системы разложения MD-2000 (США). Оценка содержания элементов в полученной золе осуществлялась с использованием масс-спектрометра Elan 9000 (Perkin Elmer, США) и атомно-эмиссионного спектрометра Optima 2000 V (Perkin Elmer, США). Элементный состав биосубстратов исследовали по 6 показателям (Al, Cd, Pb, Sn, Hg, Sr).

На основании анализа элементного состава волос гривы лошадей (n=415), были посчитаны суммы молей токсических микроэлементов, дентальным методом определены границы 75% процентиля который составлял 3,09 ммоля/кг.

Анализ аллелей микросателлитов ДНК по 17-ти локусам: VHL20, HTG4, АНТ4, HMS7, HTG6, АНТ5, HMS6, ASB23, ASB2, HTG10, HTG7, HMS3, HMS2, ASB17, LEX3, HMS1, СА425 с суммой токсичных микроэлементов (Sr, Al, Cd, Pb, Sn, Hg), показал, что по локусу HMS7 выявлена четкая взаимосвязь полиморфизма с накоплением токсичных микроэлементов в волосе с гривы (Табл. 1).

Следует отметить, что у лошадей всех 8 изучаемых пород: Башкирской, Кабардинской, Вятской, Тувинской, Якутской, Мезенской, Чистокровной верховой, Арабской обнаружены желательные полиморфы аллелей.

ОСУЩЕСТВЛЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Для подтверждения способа были суммированы желательные полиморфы аллелей: OQ, LO, JM, NO, NQ, которые вошли в первую группу сумма молей токсических элементов которых составляла 2,03 мкмоль/г и аллели KO, KL, LL, KM, JO, JJ, Ж, LN, LM, MN, OO, JL, KK, KN, MM, JN, LQ, NN, МО которые вошли во вторую, сумма молей составила 5,32 мкмоль/л, что достоверно (Р≤0,01) выше чем в первой группе (Табл 2).

* Р≤0,05; ** Р≤0,01, *** Р≤0,001 по сравнению с I группой

Исходя из полученных результатов, рекомендуется проводить отбор лошадей с содержанием суммы токсических микроэлементов ниже 3,09 ммоля/кг, по желательным аллелям: OQ, LO, JM, NO, NQ микросателлитной ДНК по локусу HMS7, концентрация которых не превышает установленной нормы.

Похожие патенты RU2699520C1

название год авторы номер документа
Способ отбора особей крупного рогатого скота с высоким уровнем молочной продуктивности, Ca и Mn по полиморфизму гена LRP4 2022
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Тарасова Екатерина Ивановна
  • Дускаев Галимжан Калиханович
  • Завьялов Олег Александрович
  • Рахматуллин Шамиль Гафиуллович
RU2794793C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ РЕЗВОСТНЫХ КАЧЕСТВ ЖЕРЕБЦОВ ЧИСТОКРОВНОЙ ВЕРХОВОЙ ПОРОДЫ ПО ЭЛЕМЕНТНОМУ СОСТАВУ ВОЛОС 2021
  • Калашников Валерий Васильевич
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Зайцев Александр Михайлович
  • Калашникова Татьяна Валерьевна
  • Атрощенко Михаил Михайлович
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Завьялов Олег Александрович
  • Блохина Нина Васильевна
  • Фролова Наталья Александровна
RU2781015C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ СКОРОСТНЫХ КАЧЕСТВ ЖЕРЕБЦОВ ЧИСТОКРОВНОЙ ВЕРХОВОЙ ПОРОДЫ ПО ЭЛЕМЕНТНОМУ СОСТАВУ ВОЛОС 2020
  • Калашников Валерий Васильевич
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Зайцев Александр Михайлович
  • Атрощенко Михаил Михайлович
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Завьялов Олег Александрович
  • Калашникова Татьяна Валерьевна
  • Блохина Нина Васильевна
RU2751141C1
СПОСОБ ОТБОРА ЖЕРЕБЦОВ АРАБСКОЙ ЧИСТОКРОВНОЙ ПОРОДЫ С ВЫСОКОЙ ВЫЖИВАЕМОСТЬЮ СПЕРМАТОЗОИДОВ ДО И ПОСЛЕ КРИОКОНСЕРВАЦИИ ПО ЭЛЕМЕНТНОМУ СОСТАВУ ВОЛОС 2019
  • Калашников Валерий Васильевич
  • Зайцев Александр Михайлович
  • Атрощенко Михаил Михайлович
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Завьялов Олег Александрович
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Калинкова Лилия Владимировна
  • Калашникова Татьяна Валерьевна
  • Блохина Нина Васильевна
RU2723622C1
СПОСОБ ОТБОРА ЖЕРЕБЦОВ АРАБСКОЙ ЧИСТОКРОВНОЙ ПОРОДЫ С ВЫСОКОЙ КРИОУСТОЙЧИВОСТЬЮ СПЕРМЫ ПО КОНЦЕНТРАЦИИ КАДМИЯ В ВОЛОСАХ С ГРИВЫ 2019
  • Калашников Валерий Васильевич
  • Зайцев Александр Михайлович
  • Атрощенко Михаил Михайлович
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Завьялов Олег Александрович
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Курилкина Марина Яковлевна
  • Калинкова Лилия Владимировна
  • Калашникова Татьяна Валерьевна
  • Блохина Нина Васильевна
RU2723951C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНЫХ КАЧЕСТВ ЖЕРЕБЦОВ ПО ЭЛЕМЕНТНОМУ СОСТАВУ ВОЛОС С ГРИВЫ 2018
  • Калашников Валерий Васильевич
  • Зайцев Александр Михайлович
  • Атрощенко Михаил Михайлович
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Завьялов Олег Александрович
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Рогачев Борис Георгиевич
  • Курилкина Марина Яковлевна
  • Калинкова Лилия Владимировна
  • Калашникова Татьяна Валерьевна
  • Блохина Нина Васильевна
RU2703383C1
СПОСОБ ОТБОРА ЖИВОТНЫХ ПО ПРИЗНАКАМ, НАСЛЕДУЕМЫМ ПО МЕХАНИЗМУ РОДИТЕЛЬСКОГО ИМПРИНТИНГА 1999
  • Андерссон Лейф
  • Жорж Мишель
  • Спинсемайлле Герт
  • Незер Карин Даниель Андре
RU2262229C2
СПОСОБ ОЦЕНКИ РЕЗВОСТНЫХ КАЧЕСТВ ЛОШАДЕЙ РЫСИСТЫХ ПОРОД ПО ЭЛЕМЕНТНОМУ СОСТАВУ ВОЛОС 2017
  • Калашников Валерий Васильевич
  • Зайцев Александр Михайлович
  • Атрощенко Михаил Михайлович
  • Калинкова Лилия Владимировна
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Завьялов Олег Александрович
  • Рогачев Борис Георгиевич
RU2675704C1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДОСТОВЕРНОСТИ ПРОИСХОЖДЕНИЯ И ЧИСТОПОРОДНОСТИ СВИНЕЙ 2019
  • Харзинова Вероника Руслановна
  • Костюнина Ольга Васильевна
  • Карпушкина Татьяна Вячеславовна
  • Зиновьева Наталия Анатольевна
RU2744733C1
СПОСОБ ОТБОРА ПРОБ ВОЛОС ЛОШАДЕЙ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ НА ЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ 2017
  • Калашников Валерий Васильевич
  • Зайцев Александр Михайлович
  • Атрощенко Михаил Михайлович
  • Калинкова Лилия Владимировна
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Завьялов Олег Александрович
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Рогачев Борис Георгиевич
RU2675584C1

Реферат патента 2019 года СПОСОБ ОТБОРА ЛОШАДЕЙ С НИЗКИМ УРОВНЕМ ОБМЕНА ТОКСИЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ ПО ЖЕЛАТЕЛЬНОМУ ГЕНОТИПУ

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ отбора лошадей с низким уровнем обмена токсичных элементов по желательному генотипу для селекционного процесса, включающий определение полиморфизма микросателлитной ДНК по локусу HMS7, отбор животных производят по желательным аллелям: OQ, LO, JM, NO, NQ, средние значения которых не превышают концентрацию 3,09 ммоль/кг суммы токсических микроэлементов (Sr, Al, Cd, Pb, Sn, Hg). Изобретение позволяет отобратьлошадей с низким уровнем обмена токсичных элементов по желательному генотипу для селекционного процесса. 2 табл.

Формула изобретения RU 2 699 520 C1

Способ отбора лошадей с низким уровнем обмена токсичных элементов по желательному генотипу для селекционного процесса, включающий определение полиморфизма микросателлитной ДНК по локусу HMS7, отбор животных производят по желательным аллелям: OQ, LO, JM, NO, NQ, средние значения которых не превышают концентрацию 3,09 ммоль/кг суммы токсических микроэлементов (Sr, Al, Cd, Pb, Sn, Hg).

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2019 года RU2699520C1

КАЛАШНИКОВ В.В
и др., Интервальная характеристика концентрации химических элементов в волосах лошадей, Коневодство и конный спорт, N 2, 2018, с.35-36
КАЛАШНИКОВ В.В
и др., Концентрации токсичных элементов в волосах лошадей из различных регионов РФ, Коневодство и конный спорт, N 6, 2017, с.20-22.

RU 2 699 520 C1

Авторы

Калашников Валерий Васильевич

Зайцев Александр Михайлович

Атрощенко Михаил Михайлович

Мирошников Сергей Александрович

Фролов Алексей Николаевич

Завьялов Олег Александрович

Харламов Анатолий Васильевич

Рогачев Борис Георгиевич

Калинкова Лилия Владимировна

Калашникова Татьяна Валерьевна

Блохина Нина Васильевна

Даты

2019-09-05Публикация

2018-12-10Подача