ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ САХАРНОГО ДИАБЕТА У ЖИВОТНОГО СЕМЕЙСТВА ПСОВЫЕ, СОДЕРЖАЩАЯ ЭНАВОГЛИФЛОЗИН Российский патент 2024 года по МПК A61K31/7048 A61K38/28 A61P3/10 

Область техники настоящего изобретения

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для профилактики или лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые, включающей энавоглифлозин в качестве активного ингредиента.

Предшествующий уровень техники настоящего изобретения

Сахарный диабет (DM) является одним из распространенных метаболических нарушений, поражающих собак среднего и пожилого возраста, и характеризуется потерей массы тела из-за гипергликемии, глюкозурии и абсолютного или относительного дефицита инсулина.

Поскольку количество людей, которые имеют собак-компаньонов, быстро растет, все больше и больше владельцев обращают внимание на здоровье своих собак-компаньонов. Кожные заболевания, экзема и т.п. в общем, встречаются у собак-компаньонов, но с возрастом увеличивается заболеваемость сахарным диабетом, заболеваниями сердца, заболеваниями почек и раком. В частности, когда у собаки-компаньона проявляются симптомы полидипсии и полиурии и собака быстро теряет массу тела, следует предположить развитие сахарного диабета. В отличие от людей, которые более склонны к инсулинонезависимому сахарному диабету (сахарный диабет второго типа) из-за ожирения и малоподвижного образа жизни, почти все собаки, страдающие сахарным диабетом, страдают инсулинозависимым сахарным диабетом (сахарный диабет первого типа).

Хотя инсулинотерапия все еще остается основным способом лечения собак, страдающих сахарным диабетом, строго контролировать сахарный диабет сложно из-за неудобств, связанных с необходимостью делать инъекции инсулина несколько раз в день, и ограниченной дозой, вызванной гипогликемией. Следовательно, существует неудовлетворенная потребность в инсулинотерапии и вспомогательной терапии для решения двойственной проблемы гипергликемии и гипогликемии.

Между тем, ингибиторы натрий-глюкозного котранспортера 2 (SGLT2) представляют собой новый класс антигипергликемических средств. Ингибиторы SGLT-2 снижают реабсорбцию глюкозы в проксимальном канальце нефрона и увеличивают экскрецию глюкозы посредством механизма, независимого от инсулина, а безопасность и эффективность ингибиторов SGLT2 для лечения сахарного диабета второго типа были подтверждены в многочисленных исследованиях. В частности, в публикации патента США №2015/0152075 раскрыт энавоглифлозин в качестве соединения, имеющего дифенилметановый фрагмент, которое проявляет ингибирующую активность в отношении SGLT2, и в указанном документе раскрыто, что энавоглифлозин обладает превосходным ингибирующим действием в отношении активности SGLT2 человека и, таким образом, эффективен для лечения сахарного диабета.

Раскрытие настоящего изобретения

Техническая задача

В результате введения энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом, для решения проблемы, состоящей в том, что для лечения собак, страдающих сахарным диабетом, не существует подходящего способа лечения помимо инъекции инсулина, авторы настоящего изобретения подтвердили, что энавоглифлозин обладает превосходным эффектом регулирования уровня глюкозы в крови, что лежит в основе настоящего изобретения.

Следовательно, задача настоящего изобретения состоит в предоставлении фармацевтической композиции для профилактики или лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые, включающей энавоглифлозин в качестве активного ингредиента.

Техническое решение

Как описано выше, сахарный диабет у животных семейства Псовые характеризуется метаболическими нарушениями, такими как гипергликемия, дефицит инсулина и потеря массы тела. Это соответствует сахарному диабету первого типа у людей и подлежит лечению в основном с помощью инъекций инсулина.

Клиническими симптомами сахарного диабета являются полидипсия, полиурия и полифагия. В то время как нормальное потребление воды животным семейства Псовые составляет 50 мл/кг, потребление воды животным семейства Псовые, страдающим сахарным диабетом, может увеличиться до 100 мл/кг и более. У животного семейства Псовые, страдающего сахарным диабетом, могут возникнуть такие осложнения, как диабетическая катаракта, увеит и кетоацидоз.

Сахарный диабет диагностируют путем комплексной оценки результатов клинических симптомов, проверки уровня глюкозы в крови, определения уровня глюкозы в моче, теста на уровень фруктозамина и т.п., как описано выше.

Как подтверждено в следующих примерах, энавоглифлозин показал эффекты снижения уровня глюкозы в крови, улучшения концентрации фруктозамина, снижения необходимой суточной дозы инсулина и снижения артериального систолического давления у собак, страдающих сахарным диабетом.

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для профилактики или лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые, включающую энавоглифлозин в качестве активного ингредиента.

Иллюстративным примером животного семейства Псовые является собака. К животным семейства Псовые помимо собак относятся лиса, волк, енот и подобные.

В контексте настоящего изобретения термин «профилактика» относится ко всем действиям, которые подавляют наступление сахарного диабета или отсрочивают наступление сахарного диабета путем введения фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению.

Кроме того, в контексте настоящего изобретения термин «лечение» относится ко всем действиям, которые облегчают или благотворно изменяют симптомы сахарного диабета путем введения фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению. Более конкретно, лечение может определяться снижением концентрации фруктозамина или уровня глюкозы в крови натощак, что является индексом контроля уровня глюкозы в крови, или жировых отложений и т.п.

Согласно иллюстративному варианту осуществления настоящего изобретения сахарный диабет может представлять собой инсулинозависимый сахарный диабет, т.е. сахарный диабет первого типа. Сахарный диабет первого типа возникает из-за отсутствия продукции инсулина в поджелудочной железе и вызван разрушением или потерей бета-клеток поджелудочной железы. Все еще не существует эффективного способа лечения помимо прямой инъекции инсулина. Между тем, сахарный диабет имеет тенденцию к возникновению осложнений из-за повышенного уровня глюкозы в крови, поэтому у животного семейства Псовые могут возникнуть осложнения, такие как без ограничения сахарный диабет, а также диабетическая катаракта, увеит и кетоацидоз.

Доза энавоглифлозина, которую можно применять для профилактики или лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые, не ограничена конкретным образом и может быть надлежащим образом скорректирована в зависимости от тяжести заболевания, массы тела, возраста, пола и наличия или отсутствие осложнений у животного семейства Псовые, которому проводится введение.

Согласно иллюстративному варианту осуществления настоящего изобретения энавоглифлозин можно вводить при дозе от 0,01 до 0,1 мг/кг, например, от 0,01 до 0,08 мг/кг, от 0,01 до 0,05 мг/кг и от 0,02 до 0,05 мг/кг один раз в день, но доза не ограничена таким образом. Согласно иллюстративному варианту осуществления настоящего изобретения энавоглифлозин можно вводить при дозе от 0,02 до 0,03 мг/кг один раз в день. Альтернативно, энавоглифлозин можно вводить при дозе от 0,01 до 0,1 мг/кг, например, от 0,01 до 0,08 мг/кг, от 0,01 до 0,05 мг/кг и от 0,02 до 0,05 мг/кг один раз каждые три дня. Например, энавоглифлозин можно вводить при дозе от 0,02 до 0,03 мг/кг один раз каждые три дня.

В следующих примерах авторы настоящего изобретения вводили энавоглифлозин при дозе 0,025 мг/кг наряду с инсулином собаке, страдающей сахарным диабетом, один раз каждые три дня или один раз в день в течение восьми недель. В результате было подтверждено, что артериальное систолическое давление далее снижалось у собаки, страдающей сахарным диабетом, когда энавоглифлозин вводили один раз в день, по сравнению с введением энавоглифлозина один раз каждые три дня (фиг. 1В), и фруктозамин, уровень глюкозы в крови натощак и доза инсулина также заметно снижались (фиг. 2). Кроме того, в результате введения при том же применении и дозе в течение 6 месяцев было подтверждено, что уровень глюкозы в крови натощак и доза инсулина снижались статистически значимым образом при введении один раз в день (фиг. 3). На основании этих результатов настоящее изобретение демонстрирует, что частота введения энавоглифлозина для лечения собаки, страдающей сахарным диабетом, то есть введение один раз в день, приводит к оптимальному эффекту, и энавоглифлозин безопасен, даже если его вводят в течение длительного периода времени.

Продолжительность введения энавоглифлозина может регулироваться клиницистом подходящим образом на основании профилактического или терапевтического эффекта в отношении сахарного диабета у животных семейства Псовые в соответствии с введением энавоглифлозина. Фармацевтическую композицию, включающую энавоглифлозин в качестве активного ингредиента, можно вводить один раз в день в течение по меньшей мере 8 недель и по меньшей мере 6 месяцев для профилактики или лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые, но продолжительность лечения не ограничена таким образом. Кроме того, фармацевтическую композицию можно вводить в течение по меньшей мере от 8 недель до 6 месяцев.

Введение фармацевтической композиции оказывает эффект снижения одного или нескольких показателей, выбранных из группы, состоящей из фруктозамина, глюкозы в крови натощак и артериального систолического давления.

Согласно иллюстративному варианту осуществления сахарный диабет представляет собой сахарный диабет первого типа, и фармацевтическую композицию согласно настоящему изобретению можно вводить в комбинации с терапевтическим средством для лечения сахарного диабета первого типа. Например, терапевтическое средство для лечения сахарного диабета первого типа может представлять собой инсулин. Как может быть подтверждено следующими примерами, введение фармацевтической композиции, включающей энавоглифлозин, оказывает эффект заметного снижения дозы инсулина у животного семейства Псовые, тем самым обеспечивая терапевтически значимое преимущество.

При этом способ введения фармацевтической композиции, включающей энавоглифлозин, согласно настоящему изобретению не ограничен таким образом, но фармацевтическую композицию можно вводить перорально или парентерально в соответствии с желаемым способом. Препараты для перорального введения могут быть выбраны из различных форм, таких как сиропы, таблетки, капсулы, кремы и леденцы. Препарат в форме сиропа обычно содержит суспензию или раствор соединения или его соли в жидком носителе, необязательно включающем ароматизатор или краситель, например, этанол, арахисовое масло, оливковое масло, глицерин или воду. Когда композиция представлена в форме таблетки, можно использовать любой из фармацевтических носителей, обычно используемых для получения твердого препарата. Примеры таких носителей включают стеарат магния, сульфат кальция, тальк, желатин, аравийскую камедь, стеариновую кислоту, крахмал, лактозу и сахарозу. Когда композиция находится в форме капсулы, можно использовать одну из общих процедур инкапсуляции, например, с использованием указанного выше носителя в твердой желатиновой оболочке капсулы. Когда композицию получают в форме капсулы с мягкой желатиновой оболочкой, любую из фармацевтических композиций, обычно используемых в форме дисперсий или суспензий, можно получить с использованием водной камеди, целлюлозы, силиката или масла. Препараты для внутримышечного или подкожного введения могут быть в форме жидкости, например, раствора, включающего водный растворитель, такой как вода, физиологический раствор и раствор Рингера, или липофильный растворитель, такой как жирные масла, кунжутное масло, кукурузное масло и синтетические сложные эфиры жирных кислот.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые, причем способ предусматривает введение фармацевтической композиции, включающей энавоглифлозин в качестве активного ингредиента, животному семейства Псовые, нуждающемуся в лечении.

Животное семейства Псовые, нуждающееся в лечении, может иметь без ограничения метаболическое нарушение, выбранное из группы, состоящей из гипергликемии, дефицита инсулина и потери массы тела.

Согласно иллюстративному варианту осуществления настоящего изобретения способ лечения может представлять собой введение фармацевтической композиции для профилактики или лечения сахарного диабета в комбинации с инсулином.

Поскольку фармацевтическую композицию для профилактики или лечения сахарного диабета применяют в способе лечения сахарного диабета, описания их перекрывающихся содержаний будут опущены во избежание чрезмерного описания.

Преимущественные эффекты

Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению для профилактики или лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые, включающая энавоглифлозин в качестве активного ингредиента, оказывает отличный эффект контроля уровня глюкозы в крови и, таким образом, может эффективно применяться для лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые.

Краткое описание чертежей

На фиг. 1А показан индекс активности заболевания после совместного введения инсулина и энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом: TOD представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня, и SID представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз в день. Столбиковые диаграммы представляют среднее значение для каждой переменной, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

На фиг. 1В показано артериальное систолическое давление после совместного введения инсулина и энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом: TOD представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня, и SID представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз в день. Столбиковые диаграммы представляют среднее значение для каждой переменной, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

На фиг. 1С показаны результаты подтверждения степени потери массы тела после совместного введения инсулина и энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом: TOD представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня, и SID представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз в день. Столбиковые диаграммы представляют среднее значение для каждой переменной, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

На фиг. 1D показаны результаты подтверждения степени потери массы тела после совместного введения инсулина и энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом: TOD представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня, и SID представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз в день. Столбиковые диаграммы представляют среднее значение для каждой переменной, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

На фиг. 2А показаны результаты подтверждения уровня глюкозы в крови натощак после совместного введения инсулина и энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом: TOD представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня, и SID представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз в день. Столбиковые диаграммы представляют среднее значение для каждой переменной, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

На фиг. 2В показаны результаты подтверждения концентрации фруктозамина после совместного введения инсулина и энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом: TOD представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня, и SID представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз в день. Столбиковые диаграммы представляют среднее значение для каждой переменной, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

На фиг. 2С показаны результаты подтверждения дозы инсулина после совместного введения инсулина и энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом: TOD представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня, и SID представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз в день. Столбиковые диаграммы представляют среднее значение для каждой переменной, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

На фиг. 3А показаны результаты подтверждения уровня глюкозы в крови натощак после совместного введения инсулина и энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом в течение 6 месяцев: TOD представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня, и SID представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз в день. Столбиковые диаграммы представляют среднее значение для каждой переменной, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

На фиг. 3В показаны результаты подтверждения концентрации фруктозамина после совместного введения инсулина и энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом в течение 6 месяцев: TOD представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня, и SID представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз в день. Столбиковые диаграммы представляют среднее значение для каждой переменной, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

На фиг. 3С показаны результаты подтверждения дозы инсулина после совместного введения инсулина и энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом в течение 6 месяцев: TOD представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня, и SID представляет собой группу исследования, которой энавоглифлозин вводят при дозе 0,025 мг/кг один раз в день. Столбиковые диаграммы представляют среднее значение для каждой переменной, планки погрешностей представляют стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

Варианты осуществления настоящего изобретения

Далее один или более конкретных примерных вариантов осуществления будут описаны более подробно посредством примеров. Однако эти примеры приведены только для иллюстративного пояснения одного или нескольких конкретных иллюстративных вариантов осуществления, и объем настоящего изобретения не ограничивается этими примерами.

Экспериментальный способ

1. Дизайн исследования

В ходе этого исследования оценивали безопасность и эффективность энавоглифлозина наряду с инсулинотерапией у собак, страдающих инсулинозависимым сахарным диабетом (сахарный диабет первого типа) в качестве проспективного, открытого, нерандомизированного, многоцентрового и концептуального исследования. Эффективность и безопасность энавоглифлозина оценивали в заранее установленные моменты времени в течение периода лечения.

2. Сведения о лекарственных средствах

Энавоглифлозин имеет следующую химическую формулу 1 и в настоящее время разрабатывается в качестве терапевтического средства для лечения сахарного диабета посредством селективного ингибирования натрий-глюкозного котранспортера 2.

Химическая формула 1

3. Собаки, включенные в клиническое исследование

К участию в клиническом исследовании допускали собак, страдающих сахарным диабетом, отвечающих следующим критериям: собаки небольшого размера в возрасте до 15 лет (менее 10 кг), собаки среднего размера в возрасте до 13 лет (от 11 до 22 кг), стабильная базальная доза инсулинотерапии по меньшей мере за 1 месяц до скринингового визита, постинсулиновый минимальный (надир) уровень глюкозы в крови 200 мг/дл и уровень кетонов в крови менее 0,6 ммоль/л.

Однако были исключены собаки, страдающие сахарным диабетом, отвечающие следующим критериям: собаки с хроническим заболеванием почек (стадия CKD IRIS>2), оценка гипотензии, введение диуретиков или родственных лекарственных средств, подтвержденная беременность и прием лекарственных средств, влияющих на исследование, в течение 14 дней до начала исследования.

4. Процесс исследования

Исследование проводили в течение 8 недель, и собак, участвующих в клиническом исследовании, разделяли на две группы: группа исследования TOD и группа исследования SID в зависимости от дозы вводимого энавоглифлозина. Энавоглифлозин вводили группе исследования TOD и группе исследования SID в дозе 0,025 мг/кг один раз каждые 3 дня и один раз в день, соответственно. Для надлежащей оценки собакам вводили лекарственное средство во время завтрака, и после того, как введение доз было завершено, собак подвергали исследованиям физического состояния, таким как артериальное давление, анализы крови и анализы мочи. После этого исследователи регулировали дозы инсулина для достижения целевых уровней глюкозы в крови в ходе мониторинга (минимальные уровни глюкозы от 80 до 150 мг/дл).

В качестве первичной переменной оценки определяли снижаются ли уровни фруктозамина в крови без развития тяжелой гипогликемии или диабетического кетоацидоза (DKA) после того, как животных случайным образом разделяли на группы. Вторичной переменной оценки было изменение уровней глюкозы в крови натощак, массы тела и средней болюсной дозы инсулина в период от исходного уровня до 8 недель. Тяжелую гипогликемию определяли как гипогликемическое состояние, при котором собаке требовалась помощь, или собака теряла сознание, или у собаки возникали судороги, независимо от уровня глюкозы в крови у собаки. Диагноз диабетического кетоацидоза оценивали на основании наличия метаболического ацидоза с анионным промежутком, связанного с избыточным кетогенезом без других причин. Сведения по безопасности, включая данные о клинических и лабораторных показателях и побочных эффектах, собирали при каждом посещении для исследования.

Кроме того, долгосрочную эффективность подтверждали посредством дополнительного введения энавоглифлозина собакам-компаньонам, участвовавшим в клиническом исследовании, в том же применении и дозе (SID или TOD) в течение до 6 месяцев.

5. Статистический анализ

Различия показателей до и после введения лекарственного средства в группах сравнивали с применением двустороннего t-критерия Стьюдента или рангового критерия Уилкоксона. Кроме того, подтверждали различия между группами после введения лекарственного средства с помощью смешанного теста ANOVA. Статистический анализ проводили с помощью языка программирования R (https://cran.r-project.org/) и GraphPad Prism version 7 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, California). р-значение 0,05 рассматривали как статистически значимое.

Экспериментальные результаты

1. Характеристики собак, участвующих в клиническом исследовании

Восемнадцать собак, участвовавших в клиническом исследовании, разделяли на две группы исследования (группы исследования TOD и SID) в соответствии с вводимой дозой энавоглифлозина, и пол, возраст, оценка физического состояния (BCS) и распределение артериального систолического давления участвующих собак для каждой группы показаны в Табл. 1. В Табл. 1 возраст и BCS указаны как средние значения вместе с диапазонами, а значения артериального систолического давления и дозы инсулина выражены как среднее ± стандартное отклонение.

2. Оценка побочных эффектов после введения энавоглифлозина

Подтверждали, присутствуют ли побочные эффекты путем проверки аппетита, активности и состояния калла после введения энавоглифлозина. В результате подтверждения индекса активности заболевания, как показано в Табл. 2, было подтверждено отсутствие различий между показателями до и после введения в каждой группе исследования.

В начале эксперимента было подтверждено, что два животных в группе исследования TOD и одно животное в группе исследования SID страдают бактериальным циститом, но после введения энавоглифлозина одно из двух животных в группе исследования TOD полностью излечилось от цистита, и одно животное в группе исследования SID не показало облегчение цистита даже после завершения клинического исследования. Однако новые случаи бактериального цистита не наблюдали ни в одной из групп исследования.

Ни в одной из групп исследования не наблюдали тяжелой гипогликемии, приводящей к потере сознания или судорогам.

3. Оценка массы тела и артериального давления после введения энавоглифлозина

Также были подтверждены изменения массы тела и артериального давления после введения энавоглифлозина. Масса тела имела тенденцию к снижению в обеих группах, и не было различий в BCS. Артериальное давление было значительно снижено в группе исследования SID (р=0,033) (фиг. 1В).

4. Оценка функции почек после введения энавоглифлозина

Изменения функции почек до и после введения энавоглифлозина подтверждали посредством анализов крови и мочи. Показатели анализа крови включали азот мочевины в крови (BUN), креатинин, симметричный диметиларгинин (SDMA), цистатин-С, бета-2-микроглобулин (В2М) и N-ацетил-β-d-глюкозаминидазу (NAG). Показатели анализа мочи включали удельный вес мочи (USG) и соотношение белка мочи и креатинина (UPC).

В группе исследования TOD не наблюдали значительных изменений для BUN (от 21,3±11,7 до 22,5±11,7, р=0,723), креатинина (от 0,9±0,2 до 0,9±0,2, р=0,733), SDMA (от 8,8±2,9 до 9,2±5,5, р=0,943), цистатина-С (от 0,6±0,3 до 0,5±0,2, р=0,082), NAG (от 7,0±8,3 до 7,6±5,8, р=0,293), USG (от 1,032±0,016 до 1,034±0,011, р=1) и UPC (от 1,9±3,0 до 1,1±1,8, р=0,185) до и после введения энавоглифлозина.

В группе исследования SID не наблюдали значительных изменений для креатинина (от 0,6±0,1 до 0,6±0,1, р=0,316), SDMA (от 8,9±2,6 до 7,8±1,4, р=0,124), цистатина-С (от 0,5±0,1 до 0,5±0,1, р=0,335), NAG (от 11,0±7,3 до 9,0±4,3, р=0,293), USG (от 1,035±0,016 до 1,043±0,008, р=0,16) и UPC (от 1,2±2,2 до 1,1±1,6, р=0,779) до и после введения энавоглифлозина. Однако в случае BUN значительное увеличение может быть подтверждено после введения (от 15,2±4,9 до 21,9±6,8, р=0,003). Концентрации бета-2-микроглобулина (В2М) менее 0,16 были показаны до и после введения для обеих групп введения (Табл. 3). В Табл. 3 все значения выражены как среднее значение ± стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

5. Оценка метаболического ацидоза после введения энавоглифлозина

Через восемь недель после введения энавоглифлозина подтверждали изменения кетонов в крови, и для группы исследования SID наблюдали тенденцию к увеличению, но увеличение не было значительным. Кроме того, при измерении лактатдегидрогеназы (LDH) не наблюдали значительных изменений для обеих групп исследования по сравнению с показателями до введения. Значение рН крови, бикарбонат (НСО₃) и анионный промежуток подтверждали посредством анализа газов венозной крови, и не наблюдали существенной разницы до и после введения (Табл. 4). В результате подтверждали отсутствие диабетического кетоацидоза. В Табл. 4 все значения выражены как среднее ± стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

6. Оценка липидного обмена после введения энавоглифлозина

Для подтверждения влияния энавоглифлозина на липидный обмен измеряли уровень холестерина в крови. Изменения триглицеридов и общего холестерина (T-Chol) не были статистически значимыми. Липаза также не показала существенное различие до и после введения (Табл. 5). В Табл. 5 все значения выражены как среднее ± стандартное отклонение, и р-значения менее 0,05 рассматривают как статистически значимые.

7. Оценка регуляции уровня глюкозы в крови после введения энавоглифлозина

Регулирование уровня глюкозы в крови до и после введения подтверждали с помощью анализов крови (фруктозамин и глюкоза натощак) и суточной дозы инсулина. В группе исследования TOD уровень глюкозы в крови натощак и суточная доза инсулина снизились, но разница не была статистически значимой. Однако концентрация фруктозамина улучшилась (р=0,041). В то же время в группе исследования SID уровень фруктозамина был в диапазоне от 475,3±107,6 до 393,1±122,9 мкмоль/л (р=0,034), уровень глюкозы в крови натощак был в диапазоне от 330,8±118,0 до 215,5±126,2 мг/дл (р=0,0078), и суточная доза инсулина была в диапазоне от 2,0±0,8 до 1,5±0,5 единиц/кг/день (р=029), при этом все показатели были улучшены статистически значимым образом. Кроме того, в результате сравнения различий между группами исследования через 8 недель не было выявлено существенной разницы в уровне глюкозы в крови натощак, фруктозамине и показателе снижения инсулина. Однако наблюдали тенденцию к снижению в группе SID, принимавшей энавоглифлозин один раз в день, по сравнению с группой TOD, принимавшей энавоглифлозин один раз каждые 3 дня (фиг. 2А-2С).

Кроме того, в результате подтверждения долгосрочной эффективности путем введения энавоглифлозина в том же применении и дозе в течение до 6 месяцев, показатели снижения уровня глюкозы в крови натощак, фруктозамина и инсулина были улучшены для всех групп исследования SID/TOD. В частности, группа введения SID показала статистически значимое снижение уровня глюкозы в крови натощак (р<0,0234) и показатель снижения инсулина (р<0,0234) (фиг. 3А и ЗС), и группа исследования TOD показала статистически значимое снижение фруктозамина (р<0,0313) (фиг. 3В).

Заключение

В настоящем изобретении совместное введение энавоглифлозина и инсулина в течение 8 недель улучшило концентрации фруктозамина и снизило дозы инсулина у собак, страдающих сахарным диабетом первого типа. Кроме того, введение один раз в день энавоглифлозина собакам, страдающим сахарным диабетом, было эффективным для снижения артериального систолического давления. Совместное введение энавоглифлозина и инсулина в течение 6 месяцев значительно снижало уровень глюкозы в крови натощак и дозы инсулина у собак, страдающих сахарным диабетом первого типа.

Результаты показывают, что комбинированная терапия ингибитором SGLT2 энавоглифлозином и инсулином более эффективна, чем монотерапия инсулином у собак, страдающих сахарным диабетом, с точки зрения регуляции уровня глюкозы в крови. Кроме того, подтверждено, что прием энавоглифлозина один раз в день снижает фруктозамина и дозы инсулина более заметно, чем прием энавоглифлозина один раз каждые три дня.

Настоящее изобретение относится к способу лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые, включающему введение комбинации энавоглифлозина и инсулина. Фармацевтическая комбинация согласно настоящему изобретению, включающая энавоглифлозин в качестве активного ингредиента, проявляет отличный эффект контроля уровня глюкозы в крови и, таким образом, может эффективно применяться для лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые. 6 з.п. ф-лы, 10 ил., 5 табл.

1. Способ лечения сахарного диабета у животного семейства Псовые, включающий введение комбинации энавоглифлозина и инсулина животному семейства Псовые, нуждающемуся в лечении, в котором энавоглифлозин вводят в дозе 0,025 мг/кг один раз в день или один раз в три дня.

2. Способ по п. 1, в котором сахарный диабет представляет собой сахарный диабет первого типа.

3. Способ по п. 1, в котором комбинированное введение осуществляют в течение по меньшей мере 8 недель.

4. Способ по п. 1, в котором комбинированное введение осуществляют в течение по меньшей мере 6 месяцев.

5. Способ по п. 1, в котором комбинированное введение снижает один или несколько показателей, выбранных из группы, состоящей из уровня фруктозамина, дозы инсулина, уровня глюкозы в крови натощак и артериального систолического давления.

6. Способ по п. 1, где комбинированное введение осуществляют перорально или парентерально.

7. Способ по п. 1, в котором животное семейства Псовые имеет метаболическое нарушение, выбранное из группы, состоящей из гипергликемии, дефицита инсулина и потери массы тела.