Штамм @ @ 37,используемый для очистки промышленных сточных вод от циклимида Советский патент 1984 года по МПК C02F3/34 C12N1/20 C12N1/20 C12R1/38 C02F3/34 C02F101/30 

4

со

Изобретение относится к микробиологическрй промьплленности и касается нового штамма, используемого для очистки промышленных сточных вод от циклимида, например на заводах бытовой химии,

Известны штаммы Citrobacter freundii 2Т, Pseudomonas 1C, Achromobacter euridice TK, разрушающие анионные поверхностно-активные вещества (ПАВ) Г1, С23 и З.

Однако исследования показали, чт они не разрушают амфолитного ПАВ циклимида, которое в кислой среде благодаря наличию аминогрупп диссоциирует, как катионное ПАВ, в щелоч ной за счет имеющихся в их составе карбоксильных групп, - как анионное ПИВ.

Целью изобретения является получение активного деструктора амфолитного ПАВ - циклимида.

Полученный штамм Pseudomonas desmolytica С 37 имеет следующую характеристику .

Морфологические признаки: палочки размером 2-3-х 0,7-0,8 мкм с од ним полярньам жгутиком, грамотрицательные, подвижные,- расположены одиночно.. .

Культуральные признаки: колонии на МПА круглые с ровным краем, гладкие, блестящие с конусовидно приподнятым центром, бурого цвета. Диаметр колоний 4-5 мм. Культура в среду выделяет коричнево-бурый пигмент.

Через сутки на МПБ растет в виде густой мути и пленки, через трое суток пленка оседает на дно пробирки, образуя вязкий осадок.

Физиолого-биохимические признаки: культура оксидазоположительная, каталазоположительная, желатин и крахмал не гидролизует, молоко йе изменяет, не имеет лецитиназы, левансахаразы,не продуцирует индола и сероводорода. Образует аргининкарбоксилазу, активный денитрификатор, аэроб. На минеральной среде Омелянского с водорастворимым индикатором бромтимоловым синим образуе кислоту из глюкозы, мальтозы, лактозы, галактозы и замедленно из ксилозы. Не использует сахарозу, рамнору, арабинозу, раффинозу, сорбит, дульцит, инозит, маннит, салицин, инулин. Как единственный источник углерода хорошо усваивает соли молочной, щавелевой, бензойной, масляной, пеларгоновой, лимонной, пировиногралной кислот.

.Штамм Pseudomonas desmolytica С il разрушает до 0,5 г/л амфолитного ПАВ циклимида.

Штамм получен методом накопи- тельной культуры. В качестве источника микроорганизмов использованы сточная вода и соскобы с полов завода Заря п/о Укрбытхим. Субстраты помещают в колбы с жилкой солевой средой,содержащей,г/л: NaHP04 1, 1, КСЕ 0,5, MgCI 0,1, циклимид 0,5. Эти колбы помещают на круговую качалку и инкубируют до исчезновения в среде циклимида, проверяя его количество каждые сутки. После этого частью среды с микроорганизмами из этой колбы заражают колбу со свежей средой и циклимидом. Опять инкубируют до исчезновения вещества. Такие пассажи проводят не менее 4-х раз. После этого из культуральной жидкости последнего пассажа бактерии рассевают на полноценную среду МПА позволяющую хорошо дифференцировать их по морфологическому принципу, и вьщеляют культуру бактерий, способных разрушать циклимид. Культуру несколько раз проверяют на чистоту а затем испытывают ее способность разрушать циклимид в синтетической жидкой среде, где циклимид является единственным источником углерода Культуру, способную разрушать 0,5 г/л циклимида, отсеивают на косой агар и получают предлагаемый штамм.

Штамм Pseudomonas desmolytica С 37 депонирован в коллекции ВНИИГенетика под № Li inM-2521,- где он хранится на .агаризованной синтетической среде с циклимидом и на МПА под слоем вазелинового масла при комнатной температуре, а также в лиофилизированном состоянии.

Пример 1. На лабораторную установку аэротенк-аэрофильтр, представляющую собой колонку, состо ЩУК) из биофильтра с загрузкой из кусочков огнеупорного кирпича к совмещенного с ним аэротенка, в течение 7-10 сут подают суспензию штамма деструктора для наращивания биопленки на загрузке. После этого в верхнюю часть установки с помощью перистальтического насоса Peripump подают синтетический сток следующего состава, г/л: КаНР04 0,5 КС 0,2, MgCEn 0,1, циклимид 0,5. Дистиллированная вода 1 л, рН среды 7,2. Объем аэротенка 0,25 л, количество подаваемой жидкости 1 л в сутки, аэрация 0.3 л воздуха/мин. Установка работает в течение 3-х ме в очищенной жидкости циклимида не обнаружено.

Пример 2. Условия как в примере 1. Используют среду следующего состава, .г/л: (NH) SO Ij КлНРО. 0,7, 0,3;MgSO -7Н О 0 циклимид 0,5. Деструктивная активность не зависит от солевого состава синтетической среды и является такой же как и в примере 1, т.е. 3 107 циклимид полностью разрушается Pseudomonas desmolytica С 37 в высокой концентрации (0,5 г/л). В очищенной воде вещество не обнаружено. Как следует из представленных примеров, штамм разрушает циклимид в высокой концентрации (0,5 г/л). Использование пр:. ..jiaraeMoro штамма позволит освобождать претльштенные 49034 сточные воды от циклимида на локальных установках без предварительного разбавления этих вод, что удешевить очистку и предотвратит нарушение работы активного ила в сооружениях 5 по биологической очистке, наблюдаемой при поступлении в них высоКоконцентрированных по циклимиду сточных вод.

Штамм Pseudomonas desmolytica С 37 (.депонирован в Центральном Музее промышленных микроорганизмов института ВНИИГенетика, коллекционный номер ЦМПМ В-2521), используемый для очистки промышленных сточных вод от циклимида.