Известным промышленным способом выделения и очистки антибиотика альбомицина, полученного путем десорбции с активированного угля, на котором он был сорбирован из культуральной жидкости, удается получать препарат, содержащий около 80% балластных веществ, обладающий благодаря этому нежелательными пирогенными свойствами.
Предлагаемый способ позволяет в процессе промышленного производства альбомицина из ацетонового элюата получать апирогениый препарат с высокой активностью и значительным выходом.
Отличительная особенность способа заключается в том, что содержащийся в ацетоновом элюате альбомицин, с целью отделения его от балластных примесей, последовательно сорбируют на сульфокатионитной ионообменной смоле СДВ-3, взятой в смешанной водородноаммонийной форме, затем на той же смоле в водородной форме и.
наконец, на смоле КФУ в водородной форме, после чего полученный очищенный концентрат альбомицина обрабатывают известными приемами, а ионообменные смолы регенерируют как обычно.
Способ осуществляется следующим образом.
Ацетоновый элюат подкисляется до рН 2,3-2,6, 2,5%-ной серной кислотой, фильтруется на фильтре и подается на хроматографическую колонку с сульфокатнонитиой смолой СДВ-3 в смешанной аммонийно-водородной форме со скоростью 100-120 мл1см 1час. Количество элюата берется из расчета 10- 25 миллиардов единиц на 1 кг воздушносухой смолы.
Хроматографическое разделение альбомицина и сопутствующих примесей производится элюативным методом. Зона альбомицина перемещается по колонке при пропускании через колонку 0,05 п уксусно-аммонийного буферного раствора рН 5,1-5,3 со скоростью 40-
60 мл/см /час. На выходе из колонны сначала появляются малоокрашенные примеси, а затем выходит окрашенный раствор альбомицина (колориметрический метод анализа по железу). Пропуш,енный через колонку раствор альбомицина с концентрацией по железу более 20-30 гамм1мл направляется на последующее концентрирование, а раствор с меньшей концентрацией по железу присоединяется к исходному ацетоновому элюату для новторной очистки.
Выход на данной стадии составляет 70-85%, причем 60-65% направляется на концентрирование, а 10-20% направляется на повторную очистку.
Раствор альбомицина после хроматографической очистки поступает на колонку со смолой СДВ-3 в водородной форме в количестве 8-10 л раствора на 0,1 кг воздушносухой смолы. Скорость пропускания составляет 100-300 мл/см час. Альбомицин сорбируется полностью, элюация производится 1 н раствором аммиака со скоростью 30- 35 мл/см /час.
Вышедший из колонки концентрированный аммиачный раствор альбомицина (темно-красного цвета) пропускается через колонку, содержашую смолу КФУ в водородной форме 60-100 мл1см 1час в количестве одного литра аммиачного концентрата на 0,2 кг смолы. Далее колонка промывается дистиллированной водой со скоростью 40-
50 мл1см 1час для полного вытеснения альбомицина.
Полученный концентрат альбомицина характеризуется удельной активностью 550000-700000 ед1мг, не является пирогенным и не токсичен.
Выход на данной стадии составляет 75 - 80%.
Методом лиофильной сушки из концентрата получается готовый препарат альбомицина.
Выход от к)льтуральной жидкости с учетом потерь при сорбции на угле составляет 40-45%.
Предмет изобретения
Способ выделения и очистки антибиотика альбомицина из ацетонового злюата в процессе промышленного его производства, отличающийся тем, что, с целью получения апирогенного препарата с высокой активностью, содержащийся в ацетоновом элюате альбомицин для отделения его от балластных примесей, последовательно сорбируют (и десорбируют соответствующими растворителями) на сульфокатионитной ионообменной смоле СДВ-3, взятой в смешанной водородно-аммонийной форме, затем на той же смоле в водородной форме и, наконец, на смоле КФУ в водородной форме, после чего полученный очищенный концентрат альбомицина обрабатывают известными приемами, а ионообмепные смолы регенерируют, как обычно.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|
