со со
ел
о
О5
глюкозы, 80 мл 1 М порошка 3 г алгината Na
Изобрете}ше относится к медицине, а именно к испытательным средствам, предназначенным для установки компонентов в жидкой пробе.
Цель изобретения - повышение точности определения.
Цель достигается за счет использования сетки, фиксированной на носителе и закрывающей индикаторный слой при этом сетка выполнена из нитей толщиной 20-200 мкм, а величина открытой поверхности индикаторного сло составляет 40-80% от его общей поверхности .
Пример 1 . Р1зготовление испытательной пленки , чувствительной к глюкозе.
20 ки оксидазы ки пероксидазы, 5 цитрата (рН 5), О, 13 г дисперсии поливинилпропината (50%-ная), 0,375 г тетраметилбензи- дина (3, З , 5, 5), 0,1 г 1-фенил- семикарбацида, 1 г диоктилнатриума сульфоянтарной кислоты, 5 мл метокси этанола, 10 г геля кремния, 12 мл во дь обрабатывают до гомогенной массы и через зазор шириной О, мм наносят на поликарбонатную пленку толщиной 100 мк. Полученную таким образом пленку разрезают на полоски шириной 6 мм, каждую полоску обклеивают с помощью двусторонней клеящей ленты вблизи одной продольной кромки полос кой шириной 6 см из поливинилхлорид- ной пленки толи1иной около 0,5 мм. Затем разрезают поперек к обклеенной полосе на куски шириной 6 мм.
Если полученные таким образом не- пытательные полоски на короткое врем погружают в содержащую глюкозу мочу, то после реакции, длящейся 1 мин, получается зависящее от концентрации глюкозы ступенчатое, от зеленого до сине-зеленого, окрашивание. Несмотря на тщательное снятие испытательных полосок с края сосуда для проб испытательная площадка окрашивается неравномерно из-эа неравномерной толщи ны отстающей пленки жидкости, причем из-за предотвращения доступа воздуха к местам, в которых находится утолщенная пленка жидкости, реакция идет более слабо. После 5 мин, в течение которых жидкостная пленка полностью высушивается, эти места из-за более высокой концентрации, напротив, окрашиваются более интенсивно.
0
5
Q
0
5
Равномерное окрашивание может быть достигнуто тогда, когда испытательную полоску погружают в испытуемый раствор на 30-60 с, а затем после извлечения тщательно сушат путем обтирания мягкой ватой и считывают реакцию через одну .
Пример 2. Изготовление гидрофобного слоя.
Фильтрующая бумага пропитывается раствором, содержащим 50 нл силиконовой смолы ИК 15а (Wacker) , 5 мл от- вердителя (10% алюмоацетилацетоната в толуоле), 1 л бутилэфируксусной кислоты, и высушивается при 130.
Полученная таким образом гидрофобная бумага режется аналогично примеру 1 на полоски шириной 6 мм и наклеивается на поливинилхлоридную пленку. Другой липкой лентой индикаторная пленка согласно примеру 1 закрепляется на гидрофобной бумаге и снова режется поперек к этим лентам на полосы шириной 6 мм.
Если полученные таким образом полосы погрузить в содержащую глюкозу мочу, то можно наблюдать, что мостик мочи, находящийся рядом с кон- тpoлиpyющ м участком, быстро отсасывается через гидрофобную бумагу и удаляется, в то время как возможная неравномерная пленка жидкости на испытательной пленке, как в примере 1, отстает и медленно высыхает. Реакции с различными концентрациями глюкозы и неравномерное окрашивание полностью соответствуют наблюдениям согласно примеру 1.
Пример 3. Изготовление средства для контроля глюкозы.
На полоску из поливинилхлорида толщиной 0,5 мм и шириной 6 см (первый носитель) накладывают согласно примеру 1, отступив от продольной кромки на 3 мм, полоску шириной 6 мм и 0,5 мм, выполненную из фильтрующей бумаги, гидрофобирован- ной силиконовым маслом согласно примеру 2 (второй всасывающий слой) и на нее накладывают также шириной 6 мм полоску из поликарбонатного слоя толщиной 100 мк (не пропускающий третий жидкость слой), на котором находится слой, состоящий из высушенной водной, содержащей реагенты поливинилпропио- новой дисперсии толщиной 0,1 мм согласно примеру 1 (индикаторный слой). На эти слои накладывают нейлоновую
- 31
сетку шириноГг 12 мм (с толщиной ните 60 мк и площ;адью отверстий 45%) (пятый сетчатый слой) и с помощью плавящегося клеящего вещества из полиамида, температура плавления которого 50°С, наклеивают выступающие за пределы слоев зоны сетчатого слоя на носитель 1 прокатыванием нагретого до 90 С стального валка, имеющего диа- метр 20 см. После этого полоску деля поперек на отдельные куски шириной 6 мм.
Если полученные таким образом полоски опустить на 1 с в мочу к стря}: нуть их легко о край сосуда с пробой то можно установить, что находяи еся рядом с контролирующим участком мостики жидкости быстро отсасываются, и поверхность устройства, которая была вначале блестящей из-за пленки жидкости, находящейся между ячейками сетки, через 2-5 с становится матовой, так как излишки жидкости отсасываются с контролирующей поверхности через гидрофобную бумагу. В отличие от испытаний по примерам 1 и 2 вся поверхность пленки окрашена (в зависимости от концентрации глюкозы) более или менее сильно, однако равномерно.
Пример 4. Изготовление предлагаемого средства.
Согласно примеру 1 на полихлорвиниловую пленку с одной стороны наносится слой плавкого клеящего вещества, на который поочередно слоями укладываются полоса гидрофобной бумаги (согласно примеру 2), полоса пленки, используемой для проведения глю- козньгх испытаний (согласно примеру 1) и сетка шириной 12 мм (с толщиной нитей 20 мкм и открытой поверхностью индикаторного слоя, составляющей 80%) С помощью нагретого валика, имеющего в месте расположения испытательной пленки выемку глубиной 2 мм, нейлоновая сетка прижимается с обеих сторон к испытательной пленке и закрепляется посредством плавкого клеящего
слоя. После этого средство разреза„ ,
ется на полоски шириной о мм.
Пример 5. Изготовление предлагаемого средства.
Согласно примеру 1 на полихлорвиниловую пленку с одной стороны наносится слой плавкого клеящет-о вещест- ва, на коюрый поочередно слоями укладываются полоса гидрофобной бумаги (согласно примеру 2), полоса
Q
п 5
0
0
5
506
пленки, используемой для проведения глюкозных испытаний (согласно примеру 1) , и виниловая сетка шириной 12 мм (с толщиной нитей 200 мкм и открытой поверхностью индикаторного слоя, составляющей 40%). С помощью нагретого валика, имеющего в месте расположения испытательной пленки выемку глубиной 2 мм, нейлоновая сетка прижимается с обеих сторон к испытательной пленке и закрепляется посредством плавкого клеящего слоя. После этого средство разрезается на полоски шириной 6 мм.
Средства, изготовленные по примерам 4 и 5 приобретают при их погружении в глюкозосодержащую мочу равномерную окраску, соответствующую окраске средств, полученных по примеру 3.
Пример 6. Исследование продуктов на реакцию с водными растворами глюкозы.
1.Стандартные испытательные полосы для глюкозы изготовленные по известному способу. Эти полосы состоят из пластмассовых полос шириной 5 мм, длиной 8 см, на нижний конец которых наклеена испытательная зона 5x5 мм. Она состоит из двойной липкой ленты для фиксации гидрофобной бумаги, второй двойной липкой ленты для связывания и реактивной бумаги.
2.Испытательная для глюкозы полоса, в которой реактивная пленка (6x6 мм) согласно примеру 1 с помощью двойной липкой ленты приклеена на пластмассовую полосу.
3.Испытательная .для глюкозы полоса, которая изготовлена согласно примеру 3.
Испытательные полосы (до 10) погружают в водные растворы глюкозы указанных концентраций и путем обрывания кромки на краю пробирки освобождаются от избыточного субстрата. Через 1 мин измеряется обесцвечивание с помощью ремиссиоиного фотометра в виде % ремиссии при 500 нм. Хотя в качестве области измерения измеряется круговой сектор испытательного участка диаметром примерно 4 мм, показано, что наблюдаемые визуально пятна в полосах 1 и 2 приводят к сильному разбросу значений измерений, т.е. низкой точности. Предлагаемая полоса равномерно окрашена и дает
незначительны разброс измеренных значений.
Пример 7. Для изготовления апенки для определения холестерина в сыворотке приготавливают дисперсию со следуюишм составом:
Целлюлоза, г5
Поливинилпропионатдисперсия (50% в
воде), г3
Двуокись титана- порошок, г2 Метилгидроксипропил- целлюлоза, г 0,042 Холестеринэстераза, U 1200 Холестериноксидаза, U 800 Пероксидаза26000 Г алловая кислота, г 0,0032 Раствор 0,2 г 3,3 ,5,5- тетраметилбензидина и 0,17 г диоктилнат- рийсульфосукцината в 0,74 мг ацетона, мг . 1 Фосфорнокислый калий, г 0,049 Фосфорнокислый натрий, г 0,167 (динатрийгидрогенфос- фатдигидрат)
Дистиллированная вода, мл 19,5 Смесь наносят на пленку поликар- боната, образуя на ней слой толщиной 300 , который затем высушивают теплым воздухом и согласно примерам 1-3 перерабатывают в испытательные полосы. Полученный таким образом реактивный слой (испытательная полоска) дает с содержащими холестерин сыворотками (в зависимости от концентрации холестерина) хорошее по ступеням окрашивание в голубой цвет.
Пример 8. Пленка для определения нитрита в моче была получена следующим способом.
В раствор (а) вводили при помешивании 10 г целлюлозы, отфильтровыва- ли и высушивали теплым воздухом. Раствор а:
3-Гидрокси-,2,3,4-тетра- гидробензо-(L)-хинолин, г 0,392 Сульфаниламид, г 0,344 L-винная кислота, г 5,00 Метанол р.А., мл 200 Из пропитанной таким образом целлюлозой была получена следуюп;ая масс для покрытия:
Пропитанная целлюлоза, г 10,00 Метилгидроксипропил- целлюлоза, г0,09
Поливинилпропионатдисперсия (50% в
воде), г5
10%-ный раствор диоктилиатрийсульфосукцината
в ацетоне, мл3
Дистиллированная вода, г 35
На пленку из сложного полизфира наносили слой этой массы толщиной 400 fj , а затем высушивали теплым воздухом и согласно примерам перерабатывали в испытательную пленку. Во донерастворимая пленка при взаимодествии с содержащими нитриты жидкостми, например с мочой или жесточными жидкостями,имела красное окрашивани
Пример 9. Для определения гемоглобина в крови была изготовлен пленка из следующей смеси:
Целлюлоза, г20
Цоливинилпропионатдисперсия (50% в
воде), г15
Диоктилнатрийсульфосукцинат, г0,3
0,5 моль РО -буфера,
рН 7, мл75
Смесь наносили на пленку сложного полиэфира слоем толщиной 200 , а затем высушивали теплым воздухом и перерабатывали в испытательную полоску.
Если воздействовать в течение 1 мин одной каплей из ряда разведени крови с различным содержанием в ней гемоглобина, то без смывания капли ватой получают гамму окрашивания.
Названные в примерах материалы можно охарактеризовать следующим образом.
Несущей пленкой является поливи- нилхлоридная пленка толщиной 0,5 мм В качестве непроницаемого для жидкости слоя является поликарбонатная пленка толщиной 100 мк. Материалом всасывающего слоя в примере 2 является фильтрующая бумага, пропитанная силиконовой смолой. В качестве индикаторного слоя в примере 1 - поливи- нилпропионатная дисперсия. Покрывающий слой сетки в примере 3 представляет собой нейлоновую сетку - поли- конденсаиионный продукт из гександи- амиаа и алипиновой кислоты. Двусторонней клейкой лентой может быть те- зафикг, представляющий собой полиэфирные пленки, покрытые с двух сторон клеящим вещес1вом. Б к-зчестве
клейкого вещества в примере 3 используют полиамидную смолу, которая размягчается при 45-50 С.
Формула изобретения
I. Средство цля определения метаболитов в биологической жидкости, состоящее из отдельных, закрепленных между собой слоев, расположенных в следующей последовательности: носитель, слой, замедленно впитываюп1ий жидкую фазу, слой, непроницаемый для жидкой фазы, индикаторный слой, о т- личающееся тем, что, с целью повьппения точности определения.
индикаторный слой выполнен из полимера, над ним расположена сетка, фиксированная на носителе и охватывающая все слои средства, при этом сетка выполнена из нитей толщиной 20-200 мкм, а величина открытой поверхности индикаторного слоя равна 40-80% от его общей поверхности.
2.Средство по п. 1, отличающееся тем, что слой, замедленно впитьгоающий жидкую фазу, выполнен из гидрофобной бумаги.
3.Средство по п. 1, отличающееся тем, что сетка вьтолне- на из полимера или целлюлозы.
Изобретение относится к биохимии. Цель изобретения - повьшение точности определения. На полоску из поливинилхлорида накладывают полоску из фильтровальной бумаги, гидрофоби- рованной силиконовым маслом. Затем накладывают полоску из поликарбонатного слоя, на котором находится слой, состоящий из высушенной водной, содержащей реагенты поливинилпропионо- вой дисперсии. На эти слои накладывают нейлоновую сетку и с помощью плавящегося клеящего вещества из полиамида наклеивают выступающие за пределы слоев зоны сетчатого слоя на носитель. 2 з.п.ф-лы, I табл.
Среднее значение/1 с. 46,3/А,2 29,4/5,0 12,6/2,0
Пленка наклеена на фольгу (пример 1)
33 20 34 18 34
20 18
5
7
14 (сильно пятнистая)
45
34
139150610
Продолжение таблицы
Среднее значение/ I с 34,4/5,6 28,2/6,5 12,1/5,0 Пленка на фольге с
| Заявка ФРГ № 2854342, кл | |||
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
