Способ отбора стабилизатора клеточных мембран лейкоцитов Советский патент 1991 года по МПК G01N33/49 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для отбора лекарственного средства, стибилизирующего клеточные мембраны лейкоцитов, при лечении больных с нарушениями мембран- но-рецепторного аппарата лимфоцитов отобранным препаратом.

Цель изобретения - повышение точности отбора стабилизатора1 клеточных мембран лейкоцитов.

П р и м е р 1, Венозную кровь донора в количестве 5 мл забирают натощак, к ней добавляют 0,5 мл полиглюкина и 25 ед. гепарина. В течение 1,5 ч смесь седиментиру- ют при 37°С. В две пробирки разливают по 1 мл лейковзвеси. В первую пробирку помещают 0,1 мл физиологического раствора, во вторую 0,1 мл раствора эритромицина, содержащего 5 тыс.ед., или других препаратов, используемых в следующих концентрациях и разведениях; пенициллина и стрептомицина - 5 тыс. ед в 1 мл лейковзвеси, те же

разведения ампициллина; 0,1 мл раствора левомицетина, содержащего 0,5 мг вещст- ва;0,01 мг тетраолеана; 0,1 мл 1%-ного раствора анальгина, сульфасаллицилового натрия, витаминов Bi, Be; 1 гр витамина Biz; 0,1 мл 0,1%-ного раствора новокаина, димедрола, 0,1 мл 0,25%-ного раствора иода. Смесь инкубируют в течение 15-20 мин в термостате при 37°С. В стандартные пробирки с 4 мл гептан-изопропиловой смеси, приготовленной в соотношении 1:1, помещают 0,2 мл проинкубированной смеси ле- ковзвеси с препаратом и трясут в течение 10 мин. В пробирки добавляют по 1 мл соляной кислоты при рН 2. В каждой пробирке образовываются две фазы, верхняя, состоящая из гептана с липидным экстрактом, и нижняя. Объем верхней фазы доводится гептаном до 4 мл. После 10-минутного центрифугирования из пробирок отсасывается верхний слой и измеряется на спектрофотометре при 232 нм. Вычисляется

О

VI

го

CJ

о со

процентная разница между контрольным и опытным исследованиями и при снижении концентрации диеновых конъюгатов на 30% и более по отношению к контролю отбирается стабилизатор клеточных мембран лейкоцитов. Таким образом, в качестве испытуемых используются самые различные препараты от антибиотиков, анальгетиков до антигистаминных, витаминов и т.д. У людей новокаин, эритромицин, ампициллин являются стабилизаторами клеточных мембран лейкоцитов, следовательно, эти препараты рекомендуются для лечения больных с нарушениями мембранно-рецеп- торного комплекса лейкоцитов (БА)

П р и м е р 2. Больной Г.Д.А. 53 лет, в анамнезе непереносимость стрептомицина. Использование известного способа позволило выявить гиперчувствительность к стрептомицину при инкубации лейкоцитов больного с этим препаратом: исходный уровень ДК 27,2 мкм/мл, стимулированный 40 мкм/мл. Обработав лейкоциты больного стабилизатором новокаином, устанавливают его стабилизирующий эффект, заключающийся в убыли концентрации ДК после инкубации клеток крови больного с новокаином: исходный уровень 40 мкм/мл, после обработки 13 мкм/мл. Это позволило бы назначить препарат с целью коррекции измененного состояния мембранно-рецеп- торного комплекса лейкоцитов.

При обработке этим стабилизатором клеточных мембан лейкоцитов (новокаином) лейковзвеси 13 здоровых лиц снижение концентрации ДК на 30% и более обнаружено у 100% исследованных. Стрептомицин 7 24 ± 13 12 ± 6,1 - 28 ± 3.7 - -29 ±17

Левомицетин 12 34 ± 7,6 22 ± 6.4 -28 ± 3,7 - - 23 ± 79

Анальгин 11 36 ±7,3 21 ±7.1 - 28 ±3,7 - -36+9,7

Известный способ не позволяет в полной мере отобрать средство - стабилизатор клеточных мембран лейкоцитов. В то время как предложенный способ выявил эти свойства у новокаина, эритромицина и ампициллина, различие в уровне ДК до и после воздействия этих препаратов на лейкоциты человека статистически достоверны.

Следовательно, использование предлагаемого способа позволяет достичь следующего: выбрать препарат - стабилизатор клеточных мембран лейкоцитов и использовать его для коррекции состояния,

протекающего с нарушениями мембранно- рецепторного комплекса лейкоцитов.

Проведены сравнительные наблюдения за 11 больными инфекционно-аллергиче- ской формой БА легкой и средней степени

тяжести (1-я группа) и 12 подобными же больными (2-я группа). Первая группа больных пролечена левомицетином в течение 5 - 7 дн. вторая - эритромицином. Наряду с антибактериальными препаратами больные

получали бронхолитические препараты, витамины, физиолечение. В результате проведенных наблюдений отмечено, что нормализация клинических показателей обострения заболевания у больных 2-й группы наблюдалась в 85% случаев на 7 - 8-й день от начала лечения, в то время как у больных 1-й группы к этим дням нормализовалась клиническая картина заболевания лишь в 45% наблюдений. Наряду с клиническими показателями наблюдалась нормализация лабораторных показателей и функции внешнего дыхания.

35

Формула изобретения

Способ отбора стабилизатора клеточных мембран лейкоцитов путем воздействия лекарственных средств на лейкоциты человека с последующей оценкой их реакции, отличающийся тем, что. с целью повышения точности отбора, воздействие осуществляют на лимфоциты человека здоровых лиц и измеряют уровень диеновых конъюгаторов и при снижении их уровня на

30% по сравнению с контролем отбирают данный препарат в качестве стабилизатора клеточных мембан.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для отбора стабилизаторов клеточных мембран лейкоцитов при лечении больных с нарушениями мембранно-рецепторного аппарата лимфоцитов. Цель - повышение точности отбора стабилизатора клеточных мембран лейкоцитов. Для определения стабилизирующего действия испытуемого препарата на клеточные мембраны лейкоцитов выявляется динамика диеновых конъюгатов до и после воздействия препарата и при снижении уровня на 30% и более по сравнению с исходным определяется стабилизация клеточных мембран лейкоцитов. При помощи способа возможен подбор препарата, коррегирующего состояния, протекающие с нарушением мембранно-рецепторного комплекса лимфоцитов.