Камера для культивирования клеток Советский патент 1992 года по МПК C12M3/00 

Изобретение относится к устройствам, предназначенным ДЛЯкультивирования клеток и тканей животных, и может быть использовано в биологии, медицине и ветеринарии. Преимуществ.енио изобретение предназначено для исследования роста клеток в условиях. Приближенных к условиям in vivo при л решении задач клеточной биологии и биотехнологии. Целью изобретения является расширение функциональных возможнос.тей за счет обеспечения регулирования массо- обмена среды с клетками,, : На фиг.1 изображена предлагаемая камера, вид сверху; на фиг.2 -разрез А-А на фиг. 1, Камера содержит корпус 1, нижнее 2 IJ верхнее 3 стекла, вкладьпп 4. в котором выполнены сквозные отверстия 3, сообщенные между собой сквозными к.аналами 6,; дополнительный вкладыш 7 с уплотнением 8, в которых выполнены отверстия :9 и каналы 10, идентичные вкладышу 4, пористую мембрану 11, уплотня1рщие прокладки 12 и: нижнюю прокладку 13. В прокладке 13 и в нижнем стекле 2 выполнены каналы 14, связывающие полости вкладыша 4 с каналами 15 в нижней части корпуса 1 с патрубка:ми 16. Полости отверстий 9 и ка налов 10, вьщолненных во вкладыше 7, связаны с патрубками. 17, установленными на корпусе 1, Камера содержит также верхнюю крьш1ку 18 корпуса 1, стягивающие винты 19, и снабжена насосом 20 и Набором сосудов 21-для жидкой среды. Камера работает следующим образом. Конструктивные особенности камеры обеспечивают три режима культивироватом, что объект Первый состоит в культивиррванид вводят в отверстия 9 вкладьппа 7 помещая так клетки на пористую мембрану 11. Интенсивный массообмен клеток со средой обеспечивается за счет перфузии среды через отверсти 5 и каналы 6 в-.плоском вкладыше 4, со- единенные с патрубками 16. Этот режим позволяет проводить культивирование только за счет пассивного массообмена спереди с клетками через мембрану 11, Второй режим заключается в том, чт клетки через патрубки 16 вводят в ка- налы 6 и отверстия 5 плоского вкладыша 4. Клетки оседают на нижнее стекло 2 либо на предварительно вложенные в отверстия 5 подложки из стёкла и ока174 зьшаются удаленными от пористой мембраны 1 на расстоянии менее 0,2-0,5 мм, что определяется толщиной вкладыша 4 .и подложек. Такое расстояние обеспечивает интенсивный массообмен клеток со средой, перфузируемой через патрубки 17, отверстия 9 и каналы 10 вкладыша 7. Этот режим допускает модификацию, в которой клетки из выросших мультислойных структур периодически отбирают с помощью прокач-ки среды насосом 20 через патрубки 16. После проКачки цикл культивирования повторяется. .- .. ; . - . ; ., ; , третий режим состоит в том, что одну культуру клеток помещают через патрубки 16 на нижнее стекло 2, а другую культуру через патрубки 17 - на нористую мембрану 11, как в первом реяа1ме. Через патрубки 17 осуществляют перфузию питательной среды, обеспечивая таким образом культивирование ассотдаации двух культур в условиях интенсивного массообмена со средой. Камера, кроме того, обеспечивает хорошие условия для наблюдения за клетками под микроскопом в процессе культивирования. Суспензию клеток концентрацией 2-10 кл,/мл вводят стерильно с помощью насоса 20 через патрубки 16 в отверстия 5 и каналы 6, Устанавливают режим перфузии среды над мембраной 11 через патрубки 17. . Через 5 сут йлотность культуры достигла 2,510 кл./см:, что в 6-7 раз превышает плотность насыщения культуры без перфузии среды и во флаконах Карреля. ; При таких ттотностях образуется мультислойная структура, это свидетельствует об интенсивном массообмене клеток со средой.На шестые сутки с помощью насоса 20 через патрубки 16 смывакт верхний слой мультислойной культуры, оставляя нижний слой и повторяют цикл выращивания без разгерметиз а- ции, промывки и подготовки камеры к вторичному эксперименту, Приведенный пример показьшает, что предлагаемая камера позволяет расширить функциог нальные возможности, включая не только культивирование клеток на пористой пленке, но и культивирование клеток на непористой подложке в условиях интенсивньго массообмена клеток со средой. Камера позволяет делать-отбор части клеток и повторять циклы культивирования без разгерметизации, дает вазмояность осуществлять культиэиро вание ассоциации двух культур |гри нх . интенсивном массообмене со средой. Камера обеспечивает условия для позышения производительности исследований клеток за счет нескольких полостей в одном корпусе и за счет повторения циклов культивиров.аНия после стерильного отбора клеток без разгермётизагт ции камеры. Формула изо б ре те н:и я Камера для культив ровання клеток, содерясасцая корпус с технолргич. патрубками, верхнее и нижнее стекла и rtopHCTyio мембрану, установленную ду ними с уплотнением, отличающая с я тем, что, с целью распирекия функциональных возможностей за ;, счет обеспечения регулирования массообмева среды с клеткаьм, она снабжена tmocKHM вкладышем из эластичного матеЗжала, установленным между нижним стеклом и пористой мембраной, при этом во вкладыше выполнены сквозные отвер стия с образованием в Них полостей между нижним стеклом и мембраной, сообщенных одна с другой продольными ка-г налами и снабженных патрубками для подвода и отвода жидкости, причем на мембране установлен дополнительный вклайым, выполненный аналогично основному, служадай прижимом мембраны, сквозные отверстия которого размещены на одной оси с отверстиями .основного вкяадыща .

Изобретение относится к устройствам для культивирования клеток и • тканей животных, к перфузионным'камерам для исследования их роста и развития в условиях: in vivo. Цель изобретения т расширение фуикцйоналЫшх возможностей за счет обеспече^*я регули- • рования массорбмёна среды с клетка^ми. Камера содержит корпус t >&;нижнее 2 и верхнее 3 стекла, плоский .вкпадапп 4, в котором выполнены сквозные отверстия 5, сообщенные между собой каналашЕ 6, дополнительный вкладьш 7 с уплотнением 8, в которых выполнены отверстия 9 и каналы 10. Камера снабжена также насосом 20 и набором сосудоз для среды, сообщенных через иатрубки 17 с внутренним объемом корпуса. В камере обеспечивается несколько различных режимов культивирования в раз.личных условиях массробмена среды с клетками mra*^ совместное культивирование нескольких культур, что расширяет возможности данной камеры, при исследовании клеток. 2 ип. • . .V- ; : •• • :'' •-, •" . ,. _.;'ko5 618сд •^N^бди 13 i^^^ ^.2