Способ прогнозирования тяжелого течения лимфосаркомы орбиты глаза Советский патент 1992 года по МПК G01N1/30 

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, онкологии и может быть использовано для прогнозирования течения лимфосаркомы орбиты глаза. .

Целью изобретения является повышение точности способа.

П р и м е р 1. Больная Бондаренко А.Н., 36 лет, срок наблюдения в МН.ИИ глазных болезней им. Гельмгольца 5 лет. Впервые обратилась к окулисту с жалобой на выпями1 вание левого глаза. Объективно при первичном осмотре: острота зрения с коррекцией обоих глаз 1,0, осевой экзофтальм 9,5 мм, ограничение движений глаз во все стороны, репозиция отрицательная. Эхографически в центральном отделе выявляется плюс тканы в переднезаднем направлении размером 20,8 мм. Была проведена эксплора- торная орбитотомия без осложнений и курс химиотерапии. На консультации через один год после оперативного вмешательства осевой экзофтальм левого глазного яблока 7,5 мм, острота зрения с коррекцией 1,6, ограничения движений нет, репозиция, затруднена. Эхографически определяется ограниченная слабо гетерогенная выполняющая центральный отдел орбиты и начинающаяся практически сразу за глазным яблоком плюс ткань. Была произведена экзентерацйя орбиты.

В течение последующих четырех лет ежегодное проведение курсов химиотерапии: винкристин и винбластин по схеме. Па- тогистологический диагноз материала орбитотомии и эxзeнтepaпии орбиты идентичен - лимфосаркома. пролимфоцитарный вариант. .

Подготовка материала для морфологического исследования осуществлялась для световой микроскопии по общепринятой методике: кусочки ткани и глазное яблоко фиксировали в 12%-ном формалине, затем проводка по спиртам восходящей концентрации и заливка в парафин, окраска гистологических срезов гематоксилинэозином по Ван-Гизону, Браше и Фельгену. Данные

&

Ј

а

ГЧЭ (X

световой микроскопии: выражена пролиферация пролимфоцитарной клеточной популяции, при этом отмечается их большой ядерный полиморфизм, встречаются ядра с фестончатым контуром, перекрученные и расщепленные ядра. Вокруг сосудов ШИК позитивный материал.

Для электронной микроскопии подготовка материала осуществлялась следующим образом.

Кусочек ткани орбиты площадью 1 - 2 мм фиксировали в 2,5% забуференного г люта ра льде гид а 3,5 ч, промывка в трех сменах буферного раствора - 30 мин, дополнительная фиксация в 1%-ном растворе четырех- окиси осмия - 1 ч. Промывка в двух сменах фосфатного буфера Миллонига или в дистиллированной воде. Обезвоживание в спиртах восходящей концентраций: 70°, 90°. 100° , 110° - две смены по 15 мин, далее кусочек ткани помещали в заливочную смесь аралдитэ при комнатной температуре на 12 ч, затем - в свежую заливочную смесь аралдита на 24 ч при - 50°С и в капсулу;

Срезы изготавливали на ультрамикротоме К-Ш. Срезы толщиной,1 мкм для ориентировки и исследования помещали на предметное стекло и окрашивали метилено- вым синим с бурой. Ультратонкие срезы для электронной микроскопии помещали на сетки и окрашивали водным раствором ура- нилацетата и затем цитратом свинца по Рейнольдсу.

Проводили визуализацию и подсчет клеточных элементов на экране электронного микроскопа при увеличении 6000. Затем подсчитывали процент пролимфоцитов с различной степенью деформации ядра.

Данные морфометрии: пролимфоциты с круглой формой ядра - 6%, с 1 степенью деформации ядра 9%, с 2 степенью деформации ядра 39%, с 3 степенью деформации ядра 35%.

Прогноз неблагоприятный по данным морфометрии.

Клинически выявлен рецидив лимфо- саркомы через 1 год. проведена экзентера- ция орбиты.

П р и м е р 2. Больная Ширяева С.В., 27 лет, диспансерное наблюдение 5 лет. Обратилась к окулисту в связи с появлением образования под кожей верхненаружного орбитального края справа, которое быстро увеличивалось. Объективные данные первичного осмотра: ОД - острота зрения с коррекцией 0,4, отек верхнего века, в наружной половине орбиты пальпируется плотите новообразование, глазная щель сужена глаз смещен к носу, подвижность глаза ограничена кверху и кнаружи.

Репозиция слегка затруднена, экзофтальм 1 мм. На рентгенограмме - правая глазница пониженной прозрачности - отмечается легкое истончение внутренней пластинки

наружной стенки. Эхография - плюс ткань размером 15.7 мм в верхненаружном квадранте. ОПС - результат отрицательный. Компьютерная томография (КТ) в наружном и верхненаружном квадрантах под верхней

0 орбитальной стенкой - плюс ткань с негомогенной структурой и неровными контурами.

Клинический диагноз - новообразование орбиты.

5 Была проведена поднадкостичная орби- тотомия и проведен курс рентгенотерапии с суммарной дозой 5000 рентген.

Рецидив лимфосаркомы через 1 год. Доза повторного облучения 20000 рентген.

0 Спустя 1 г 8 мес после оперативного вмешательства данные КТ: в верхненаружном квадранте в переднем отделе - плюс ткань небольших размеров, проведен курс рентгенотерапии. Через 3 года повторная

5 консультация - увеличение шейных лимфатических узлов.

Подготовка материала для световой микроскопии осуществлялась по следующей методике: фиксация в 12%-ном раство0 .ре формалина, проводка по спиртам восходящей концентрации,заливка в парафин , окраска гистологических срезов гема- токсилинэозином по Ван-Гизону,-Браше, Фельгену.

5 Световая микроскопия: клеточный состав представлен в основном пролимфоци- тами с круглыми и расщепленными ядрами. Пролимфоциты и незначительное количество лимфобластов образуют фолликулопо0 добные образования с герментативным центром. Строма четко выражена в виде нежной фибриллярной сети из тонких волокон, вплетающих комплексы клеточных элементов. Обращает на себя внимание

5 наличие эозинофильных гомогенатов вокруг сосудов.

Патогистологический диагноз - пролим- фоцитарная лимфосаркома с расщепленным ядром и выраженным сосудистым

0 компонентом.

Электронную микроскопию осуществляли следующим образом.

Кусочек ткани орбиты площадью 1-2 мм фиксировали в 2,5%-ном растворе забу5 ференного глютаральдегида 3,5 - 4 ч, промывали в трех сменах буферного раствора 30 мин, дополнительно фиксировали в 1%- ном растворе четырехокиси осмия в течение 1 ч. Промывали в двух сменах фосфатного буфера Миллонига или в дистиллированной

воде. Обезвоживание в спиртах восходящей концентрации: 70°, 90А ..100° , 110° две смены по 15 мин, кусочек помещали в заливочную смесь аралдита при комнатной температуре на 12 ч, затем в свежую заливочную смесь аралдита на 24 ч при 60°С ив капсулу. Срезы изготавливали на ультрамикротоме. Срезы толщиной 1 мкм окрашивали метиленовым синим с бурой для ориентировки и исследования. Ультратон- кие срезы для электронной микроскопии размещали на сетке и окрашивали водным раствором уранилацетата и затем цитратом свинца по Рейнольдсу. Проводят визуализацию и подсчет клеточных элементов лимфо- идного ряда на экране электронного микроскопа при постоянном увеличении, например 6000.

Данные морфометрии: пролимфоциты с круглой формой ядра 7%, с 1 степенью RB-

формации ядра 12%, с 2 степенью деформации ядра 42%, с 3 степенью деформации ядра 21%.,

Прогноз неблагоприятный по данным морфометрии.

Клинически: рецидив в орбите через 1 год, в последующем через 3 года увеличение лимфатических узлов.

Формула изобретения Способ прогнозирования тяжелого течения лимфосаркомы орбиты глаза путем электронно-микроскопического исследования опухолевых клеток, отличающийся тем, что; с целью повышения точности, осуществляют морфометрию ядер с наиболее выраженной степенью деформации про- лимфоцитов и при выявлении их не менее 8% прогнозируют тяжелое течение заболевания.

Изобретение относится к офтальмологии и онкологии и может быть использовано для прогнозирования течения лимфосаркомы орбиты глаза. Целью изобретения является повышение точности прогнозирования. Способ осуществляют путем морфометрии ядер с наиболее выраженной степенью деформации пролимфоцитов и при выявлении их не менее 8% прогнозируя тяжелое течение заболевания.