Способ получения препарата синхронизирующего половую охоту норок Советский патент 1992 года по МПК A01K67/00 A61K31/557 A61K35/12 

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для интенсификации воспроизводства пушных животных клеточного содержания, например норок.

У многоплодных животных с провоцированным характером овуляции, в том числе и у норок, на величину помета оказывает влияние время спаривания. Оно должно быть приурочено к моменту, когда в яичниках созреет максимальное число яйцеклеток.

Период спаривания у норок длится около 40 дн., но оптимальные сроки лежат в пределах 5-6 дн. (с 10 по 15 марта), при спаривании ранее или позже этих сроков плодовитость животных резко падает.

Применение различных химиотерапев- тических препаратов синхронизирует и стимулирует охоту животных в разные сроки спаривания, что приводит к увеличению выхода щенков,

Для стимуляици и синхронизации охоты крупного и мелкого рогатого скота, а также пушных зверей в исследовательских целях в

последнее время применяется препарат эн- зопрост (2), представляющий собой оптически активный простагландин.

Однако действие этого препарата не всегда однозначно, синхронизирующий эффект низок при малых дозах, препарат резко снижает специфические свойства при хранении, не производится в СССР.

Известен синтетический лютеолитиче- ский препарат эстрофан фирмы Спофа (3), применяемый для синхронизации половой охоты у телок, коров, кобыл и свиноматок. Обработанных эстрофаном животных в течение суток нельзя забивать на мясо. Препарат в СССР не производится.

В литературе имеются сообщения о применении препарата, содержащего анти- оксиданты природного происхождения (4), а также синтетических простагландиновых препаратов - Эстуфалона (5), Синхронола- 669 - для синхронизации половых циклов животных. Однако все эти препараты находятся в стадии изучения, в печати отсутству

Ё

ч| VI

О СО

VJ

ел

ют сведения о составе и способе получения препаратов.

Наиболее близким к заявляемому способу является способ получения хориогони- ческого гонадотропина (1), который используется на практике для синхронизации охоты пушных зверей. Гонадотропин получают из мочи беременных женщин путем подкисления, осветления, адсорбции на каолине с кизельгуром, промызки подкисленной водой, элюирования водным раствором гидроокиси аммония и кислоты с добавкой органического растворителя и осаждения ацетоном. Препарат имеет ограниченное сырье и обладает недостаточно высоким синхронизирующим эффектом.

Целью изобретения является повышение биологической активности препарата.

Поставленная цель достигается тем, что арахидоновую кислоту, выделенную из микроорганизма (простейшее) A.Lbnga по технологии (авт.св. СССР № 1132947 (7) инкубируют в буфере при 37вС с суперна- тантом пузырьковых желез баранов в присутствии растворимой соли магния, добавляют спирт, центрифугируют, подкисляют, экстрагируют и хроматографируют известным способом.

Обработка самок норок а -астазеном повышает оплодотворяемость, снижает процент пропустовавших маток и неблагополучных родов, что приводит к увеличению выхода щенков до 5,43 ± 0,44 на одну самку, что на 1,66 больше по сравнению с контрольной группой (3,77 ±0,63), обработанной в эти же сроки хориогониче- ским гонадотропином. Результаты щенения самок норок, обработанных этим препаратом простагландинов приведены в акте испытаний.

Использование в технологии препарата простагландинов другой арахидоновой кислоты (животного происхождения) дает препарат простагландинов, который лишь незначительно (на 0,43) повышает выход щенков у норок в сравнении с хориогониче- ским гонадотропином (см. таблицу).

П р и м е р. В 200 мл супернатанта из 168 г бараньих пузырьков желез в 0,2 М фосфатном буфере рН 8 приливают раствор 210 мг (0.5 М) арахидоновой кислоты

70% чистоты, выделенной из простейшего Astasla Longa по авт.св. № 1132947 (7). Затем в реакционную смесь добавляют 29.5 (4- 10 1 М)сульфата магния в 50 мл фосфатного буфера, 22 мг (0,16-10 3 М) гидрохинона в 50

мл буфера и 200 мг глютатиона (0. М). , Смесь инкубируют при 37° С ± 0,5 °С в течение 1 30 мин при аэрации, после чего в реакционную колбу добавляют этиловый спирт. Реакционную массу оставляют на 2 ч при 4°С,

фильтруют и центрифугируют. Простаглан- дины выделяют путем экстракции этиловым эфиром уксусной кислоты из подкисленного водного остатка. Этиловый эфир уксусной кислоты упаривают в вакууме, и сухой остаток хроматографируют известным способом на кремниевой кислоте, простагландины (Јастазен) вымывают 30%-ным раствором метанола в этиловом эфире уксусной кислоты . Растворитель

удаляют в вакууме, остаток растворяют в этиловом спирте и сохраняют в закупоренных склянках с инертным газом при 4°С. Для синхронизации охоты норок а -астазен растворяют в физиоло/ическом

растворе в концентрации 0,2 мг/мл и вводят внутримышечно в поздние сроки спаривания.

35

Формула изобретения

Способ получения препарата, синхронизирующего половую охоту норок, включающий хроматографическое выделение, отличающийся тем, что, с целью

повышения биологической активности препарата, предварительно проводят аэробное инкубирование арахидоновой кислоты микробиологического происхождения с супер- натантом пузырьковых желез барана и

растворимой солью магния в буфере при соотношении 1:800:140-1-1000:150.

Использование: звероводство. Сущность изобретения: арахидоновую кислоту, выделенную из простейшего Astasla Longa, инкубируют в буфере при 37°С с суперка- тантом пузырьковых желез баранов в присутствии растворимой соли магния, добавляют спирт, центрифугируют, подкисляют, экстрагируют и хроматографируют на кремниевой кислоте. Простагландины вымывают 30%-ным. раствором метанола в этиловом эфире уксусной кислоты, растворитель выпаривают, остаток растворяют в этиловом спирте и хранят при 4°С в атмосфере инертного газа. 1 табл.