Устройство для жидкостной десквамации клеток тканей трубчатых органов Советский патент 1992 года по МПК A61B10/00 

Фиг2

Изобретение относится к области медицины, а именно : к устройствам для жидкостной десквамации клеток животных тканей любых полостных образований.

Известен способ определения адгезии животных клеток в тканях, определенный термином Жидкостная дезинтеграция сущность которого заключается в определении скорости отрыва клеток струей изотонической жидкости с определением срывающей силы струи. Для реализации предложенного выше способа авторами использовались дезинтеграторы двух типов. Они и признаны нами как аналоги.

Ближайшим аналогом нами избран Способ усановления давности наступления смерти А.С. СССР №602547,1977, МКИ 2 С 12 4 1/00. В.И.Неводник, В.И.Архипен- ко, В.Д.Васюченко (п р.о т о т и п). Используемое в данном способе устройство содержит конструкцию, которая обеспечивает жидкостную десквамацию клеток тканей трубчатых органов, что позволяет использовать его как прототип. При использовании этого устройства срыв клеток с кусочков ткани производится с поверхности кусочка движущейся струей жидкости. При этом кусочек ткани имеет прямоугольную форму строго определенного размера, соответственно площади камеры дезинтегратора. Кусочек ткани укреплен в камере таким образом, что между поверхностью ткани и стенкой камеры располагается узкий зазор. Жидкость, проходя по поверхности ткани в этом зазоре отрывает клетки. Струя жидкости направляется на поверхность ткани поршнем шприца, поэтому отрыв клеток происходит циклически при движении поршнем шприца. Вверх - фаза изгнания жидкости, вниз - фаза наполнения шприца жидкостью. Данные движения шприца (вернее его поршня) производятся электромеханическим приводом, состоящим из электрического двигателя, приспособления фиксации камеры и шприца, поршень которого соединен с редуктором двигателя. При этом поршню сообщается циклическое движение: вверх-вниз.

К недостаткам известного способа, основанного на работе дезинтегратора, следует отнести: 1) возможность применения его для исследования адгезии клеток животных тканей только плоских кусочков, что обусловлено конструктивными особенностями дезинтегратора; 2) невозможность применения известного дезинтегратора для исследования адгезии клеток целостных полостных образований, поскольку конструкция камеры исключает помещение и фиксацию в ней полостных образований; 3)

возможность использования известного дезинтегратора только для определенного стандартного размера исследуемых кусочков тканей, ограничивающиеся размерами

самой камеры дезинтегратора; 4) невозможность проведения исследования в условиях, максимально приближенных к физиологическим, что объясняется конструктивными особенностями не только самой ткани камеры, но и конструкцией электромеханического привода;5) циклическое движение струи десквамирующей жидкости (вверх-вниз) по поверхности кусочка исследуемой ткани.что не создает при этом движению жидкости в

направлении, которое соответствует ее движению в условиях живого организма; 6) невозможность обеспечить десквамирующей жидкости тех параметров, которые предъявляются при проведении эксперимента к

жидкости при биологических исследованиях (параметры: скорость, давление, расход, температура, т.п.).

Целью изобретения является поддержание стабильных условий для десквамации клеток по всему внутреннему объему исследуемого органа.

Поставленная цель достигается тем, что устройство содержит два штуцера, на которых фиксируется полостное образование

(например сосуд, кишка, проток),помещен- ное в систему герметически замкнутых контуров (контура), в котором обеспечивают движение десквамирующей жидкости в направлении, адекватном движению тех или

иных субстратов в условиях живого организма. Сущность предлагаемого устройства поясняется чертежами и графиками, фотографиями.На фиг.1 схематически изобра-. жено устройство, а именно: герметически

замкнутый контур десквамирующей жидкости с включенным дезинтегратором /2/, в котором зафиксировал исследуемый объект /3/. В качестве подающего насоса /1/ может быть использован любой насос объемно-пульсирующего типа, обеспечивающий прокачивание десквамирующей жидкости через трубопровод /4/ и полостное образование /3/. На фиг. 2 представлен в разрезе дезинтегратор с зафиксированным полостным образованием /1/, включенным в герметически замкнутую систему десквамирующей жидкости. На фиг. 2 видно, что дезинтегратор состоит из жесткого полого прозрачного цилиндра /2/, торцы

которого вклеены в пазы металлических наконечников /3,4/ (в качестве склеивающего материала может быть использован эпоксидный клей). Исследуемое полостное обра- зование /1/ фиксируют на съемных

штуцерах /5, 6/ (для надежности фиксации

накладывают лигатуры). В зависимости от объекта исследования часть съемных штуцеров, на которых фиксируется исследуемый объект /5а, 66/, может быть выполнена различной величины, то есть, различного диаметра, без изменения его других составных частей. Съемные штуцера /4, 5/ и уголковые штуцеры /7, 21/ снабжены несъемными свободно вращающимися прижимными гайками /8/ и уплотнительными прокладками кольцевидной формы /9/ для соединения с уголковыми штуцерами /7,21/ и съемными штуцерами /4, 5/, что обеспечивает герметическое соединение с трубопроводом /10/. Кроме того съемный штуцер /5/ по периметру окружности с наружной стороны снабжен прорезями (на чертеже не показано) для удобства при закручивании указанного штуцера /5/ в нзконечнике/3/. Для лучшего понимания сущности предпо- латаемого изобретения обращаем внимание на то, что соединение между наконечниками /3,4/ и съемными штуцерами /5, 6/ снабжено уплотнительными кольцевыми прокладками /11, 12/, а съемный штуцер /6/ в наконечнике /4/ - прижимной гайкой /13/. Через отверстие /18/ производят выпуск воздуха из системы, после чего отверстие /18/ закрывают заглушкой /19/, которая снабжена резьбой. Канал /15/ сое- диняюг с отверстием /20/ с помощью гибкого трубопровода, чем достигают одинакового давления в системе циркулирующей жидкости в контуре десквамирующей жидкости и в кольцевой полости. /14/. Для этого в наконечниках /3, 4/ выполнены каналы /16, 17/. Кольцевая полость /14/ заполняется через отверстие /15/ жидкостью, идентичной десквамирующей, для создания давления на полостное образование. После заполнения кольцевой полости /14/жидкостью и выпуска воздуха через отверстие /18/, канал /17/ закрывают заглушкой /19/, снабженной резьбой. Канал /16/ соединяют гибким трубопроводом с отверсти- ем /20/ в уголковом штуцере /21/, чем создают давление на исследуемое полостноа образование (идентичное в системе десквамирующей жидкости), уравновешивающее давление в его просвете, адекватное давле- ние на него со стороны мягких тканей, органов в физиологических условиях живого организма. Отверстие /20/ в уголковом штуцере /21/ одновременно служит и для выпуска десквамирующей жидкости после исследования (система, выпуска жидкости наяертежах не показана). Отверстие /22/ в уголковом штуцере /7/ предусмотрено для выпуска воздуха из системы при ее заполнении десквамирующей жидкостью. Выпускное отверстие /22/ снабжено заглушкой с резьбой. Съемный штуцер /6/ имеет внутреннюю резьбу /23/ для соединения с вспомогательным стержнем при проведении зафиксированного на штуцерах полостного образования через наконечники /3/. После прокачивания жидкости (экспозиция прокачивания десквамирующей жидкости избирается в зависимости от объекта и цели исследования), через полостное образование производят ее выпуск через отверстие /20/ в уголковом штуцере /21 / для дальнейшего ее исследования. Одновременно открывают заглушку /22/, при открытии которой создаются условия для выпуска десквамирующей жидкости из системы. В зависимости от цели, задач и объекта исследования дезинтегратор может быть изготовлен любого размера. Движение потока десквамирующей жидкости в замкнутом контуре в направлении, адекватном ее движению и условиях живого организма, ее давление, расход, скорость и температура, обеспечиваются применением электромеханической части аппарата выпускаемого отечественной промышленностью искусственное сердце-легкое ИСЛ-2. в соответствии с условиями ее циркуляции в организме (например, для бедренной артерии давление крови составляет 120 мм рт. ст. при систоле и 80 мм рт.ст. при диастоле; скорость 660 мм/с при систоле и 600 мм/с при диастоле; расход 5 л в минуту; температура 37° С). Аппарат ЙСЛ-2 снабжен роликовым насосом объемно-пульсирующего типа, который обеспечивает заданную скорость потока десквамирующей жидкости, а также системой контроля ее параметров, что позволяет осуществлять контроль за ее давлением (манометр), скорость (тахометр) и расход, который контролируется в зависимости от числа оборотов двигателя. Вал электродвигателя с помощью редуктора соединен с коронкой насоса, снабженное роликами, степень давления которых на полиуретановые трубы также регулируется. Полиуретановые трубопроводы при трении роликов насоса с наружной стороны нагреваются, что обеспечивает нагрев десквамирующей жидкости внутри трубопроводов до температуры 37 С. Смонтированный дезинтегратор включают в герметически замкнутую систему контура. Десквамирующую жидкость путем ввинчивания накидных гаек /8/ с уголковыми штуцерами /7. 2 1 /. После этого систему заполняют десквамирующей жидкостью (например, физиологическим раствором) через отверстия /20, 22/, выполненные в уголковых штуцерах. После проведенного исследования (экспозиция в

зависимости от цели и объекта исследования десквамирующую жидкость, содержащую сорванные клетки, сливают, окрашивают, измеряют объем и ею заполняют счетную камеру для подсчета десквами- рующих клеток в единицу времени. Систему при каждом исследовании промывают и готовят к следующему эксперименту,

Кроме того, принцип конструкции дезинтегратора, включенного в герметически замкнутый контур с протекающей жидкостью, может быть использован не только при изучении биологических объектов, но и при изучении влияния различных химических и других жидкостей на поверхности (как наружные, так и внутренние) полых объектов разных форм и величин.

Использование предлагаемого устройства - Дезинтегратора для жидкостной де- сквамации клеток тканей полостных образований по сравнению с существующими дезинтеграторами имеет следующие преимущества:

1)возможность применения его при изучении адгезии клеток целостных полостных образований (например, сосуд, клетка, проток и т.п.);

2)возможность проведения исследования в условиях, максимально приближенных к физиологическим;

3)возможность обеспечения десквами- рующей жидкости тех параметров, которые максимально приближены к физиологическим условиям существования исследуемого органа.

Все вышеперечисленные признаки позволяют повысить точность исследования

адгезии клеточных элементов, а значит и повысить точность определения давности наступления смерти. Устройство простое в обращении, доступно для работы. Для его изготовления не требуется дополнительных

приборов и устройств, кроме выпускаемых отечественной промышленностью. Формула изобретения Устройство для жидкостной десквама- ции клеток тканей трубчатых органов, содержащее корпус со средствами крепления концов трубчатого органа и насос, включенные в замкнутый контур, отличающее- с я тем, что, с целью поддержания стабильных условий для десквамации клеток по всему внутреннему объему исследуемого органа за счет создания противодавления с наружной стороны его стенок, корпус выполнен в виде цилиндра с торцевыми заглушками, в которых имеются размещенные

вдоль оси цилиндра отверстия для установки средств крепления концов трубчатого органа в виде штуцеров, выступающих в полость цилиндра, при этом в одной из заглушек выполнен сквозной канал для сообщения

полости цилиндра с атмосферой, имеющий гнездо для установки пробки, а-в другой заглушке - канал со. штуцером для подачи рабочей среды в полость цилиндра.

Использование: медицина, в устройствах для жидкостной десквамации клеток тканей любых полостных образований. Устройство содержит корпус в виде цилиндра 2 с торцовыми заглушками, в которых установлены штуцеры 5 и 6 для закрепления концов исследуемого полого органа 1 и насос, включенные в замкнутый контур, В одной из заглушек выполнен сквозной канал для сообщения полости цилиндра с атмосферой, а во второй заглушке - канал со штуцером для подачи рабочей среды в полость цилиндра. 2 ил.