Способ стимуляции спермы рыб Советский патент 1993 года по МПК A01K61/00 

Изобретение относится к промышленному рыбоводству, в частности к способам искусственного разведения рыб. Изобретение может быть использовано для стимуля- ции спермы рыб.

|В рыбоводстве известен способ стиму- спермы рыб биологически активными веществами, а именно гибберелином, гете- роауксином или его калиевой солью, пре- дус|{латривающий обработку спермы рыб веществами.

Известен способ повышения качества . спермы рыб путем обработки ее водным раствором хлористого калия. Обработка спермы по этому способу эллиминирует слабые сперматозоиды, за счет чего улучшается; качество спермы.

.Известно также использование пара- ами;нобензойной кис л оты-био логически активного вещества для стимуляции спермы.

Недостатками этих спо.собов является продолжительное выдерживание спермы в

активирующем растворе и Незначительный активирующий эффект.

Цель изобретения -увеличение продол жительнрсти времени поступательного движения и повышение активности сперматозоидов.. .

Изобретение осуществляется следующим образом.

Простогландин EI Допростон-В разводили физраствором для пресноводных рыб до концентрации в нем 11 -дезоксйпростог- ландин EI до 1,5 мкг/мл раствора. Состав физраствора для пресноводных рыб: NaCI- 7,5 г, КС - 0,2 г, - 0,2 г, ЫаНСОз - 0,2 г, дистиллированной воды до литра. Средство готовили следующим образом: берем исходную ампулу препарата Допростон-В, содержащую 5 мг/мл 11-дезоксипростог- ландина EI и разводим этот препарат физраствором в 10000 раз. Таким образом получаем средство, содержащее 0,5 мкг/мл упомянутого простогландина EI. Стимулирующее действие средства основано на том.

4 Ю ГО СЛ Ю XI

что простогландины, являясь высокоактивными веществами, действуют на клеточном уровне.

Хранят средство в прохладном месте.

Испытания предлагаемого средства проводили в лабораторных условиях на сперме плотвы, леща и карпа, полученной после гипофизарной инъекции.

Сперму отцеживали, общепризнанным в рыбоводстве способом, в сухие пробирки, которые помещали в охлажденный термос и в нем перевозили сперму от рыбоводного хозяйства до лаборатории. Эксперименты ставили следующим образом.

На чистое сухое предметное стекло наносили каплю стимулирующего раствора глазной пипеткой. В этот раствор с помощью препаровальнрй иглы вносили небольшое количество спермы. Качество спермы и стимулятора было постоянным во всех опытах. Рассчитывали ошибку выборки и достоверность различий с контролем. За контроль принимали активность спермы в отстоянной воде. Сперму помещенную в раствор стимулятора хорошо перемешивают и выдерживают одну минуту. В разбавляющем растворе сперма остается неподвижной. При добавлении к этой разбавленной сперме воды сперматозоиды становились подвижными. С помощью микроскопа МБИ-3 при увеличении 8x10 наблюдали за их поведением при естественном или искусственном освещении, в зависимости от условий эксперимента; Секундомером Агат засекали время обработки спермы, то есть период выдерживания спермы в растворе разбавителя без добавления простой воды, а также засекали продолжительность поступательного движения сперматозоидов с точностью до 0,2 сек. В качестве контроля использовали поведение спермы от этого же самца в обычной воде без применения простагландинового препарата. О качестве средства судили по поведению спермы после обработки ее препаратом по отношению продолжительности поступательного движения сперматозоидов, обработанных стимулирующим раствором, и необработанных сперматозоидов. Продолжительность

поступательного движения сперматозоидов у необработанной спермы принята нами за 100%.

Пример. Сперма карпа в воде была подвижной 71,3 с. а сперма этого же самца после обработки предлагаемым способом концентрации простагландина 0,6 мкг/мл оставалась подвижной в течение 438,8 с, таким образом: 71,3 с составляет 100%, а

438,8 с составляет Х%,

отсюда X -. 4388, 1°° 615.4%, то есть

/1 ,о

продолжительность поступательного движения сперматозоидов после обработки спермы простагландином увеличилась более чем в 6 раз.

В таблице приведены результаты испытания предлагаемого способа на плотве, леще и карпе. При высоких концентрациях простагландина от 5000 до 300 мкг/мл раствора сперматозоиды остаются неподвижными и погибают. При использовании простагландина в концентрациях от 300 до

100 мкг/мл активными становятся 10-20% всех сперматозоидов. В опытах при использовании простогландина в концентрациях от 10 до 5 мкг/мл раствора активными становятся 50-70% всех сперматозоидов. В

опытах с использованием простагландина в концентрации от 1,5 до 0,1 мкг/мл раствора отмечается значительное увеличение периода поступательного движения сперматозоидов. Дальнейшее снижение концентрации простагландина ведет к тому, что сперматозоиды становятся подвижными уже в растворе разбавителя, что является отрицательным моментом, так как это ведет к уменьшению периода поступательного

движения сперматозоидов. Наилучший результат получен от использования препарата с концентрацией 0,6 мкг/мл раствора. Оптимальная концентрация простаглэнди- на от 0,01 до 1,5 мкг/мл раствора. Предлагаемый способ позволяет увеличить продолжительность времени поступательного движения и повысить активность сперматозоидов.

Формула изобретения

Способ стимуляции спермы рыб, включающий обработку зрелых спермиев рыб перед1 осеменением икры раствором биологически активного вещества, о тли - чаЬщийся тем, что, с целью увеличения

продолжительности времени поступательного движения и повышения активности сперматозоидов, в качестве биологически активного вещества используют раствор простаглзндин-11-дезоксипростагландина EI в концентрации 0,01-1,5 мкг/мл раствора.

Изобретение относится к промышленном рыбоводству. Изобретение может быт1 использовано для стимуляции спермы рыб. Цель изобретения - увеличение продолжительности времени поступательного движения и повышения активности сперматозоидов. Для достижения этой цепи в качестве биологически активного, стимулирующего вещества предложен простагладин - 11-дезоксипр6стагландйн Е (Допростон), разведенный на физрастворе для пресноводных рыб в концентраций от 0,1 до 1,5 мкг/мл раствора. Использование предло- женногб способа увеличивает активность сперматозоидов рыб в 4-6 раз по сравнению с тактовой для необработанной спермы. 1 табл. J

Влияние Допростона--В на активность спермы рыбы,