Способ микробиологического исследования воздуха и устройство для его осуществления Советский патент 1980 года по МПК C12K1/00 C12K1/10 

1

Изобретение относится к микробиологии, точнее к технике измерения концентрации и дисперсного состава частиц с антимикробными свойствами.

Известен способ микробиологического исследования воздуха путем пропускания его через многокаскадный, многосопловой импактор, подложки которого покрыты питательной средой, содержащей тест-культуру, с последующей инкубацией и определением концентрации и дисперсного состава антимикробных частиц 1.

Известно устройство для реализации такого способа, которое наиболее близко по технической сущности к предлагаемому устройству, состоящее из цилиндрических каскадов, включающих решетку с радиально расположенными соплами, диаметр которых уменьшается по направлению движения воздуха, и съемную подложку для питательной среды 1.

В известных способах для микробиологического исследования воздуха и устройстве для его реализации подсчет негативных колоний на сплошном газоне затруднен из-за различий диаметров зон, образованных после инкубирования. Кроме того, происходит высыхание поверхности плотной питательной среды, особенно иод каждым соплом, что неблагоприятно сказывается на жизнеспособности засеянной тест-культуры и ведет к значительному снижению точности проводимых исследований. В указанном устройстве наблюдается неравномерное 5 распределение частиц по всему сечению подложки, т. е. по периферии осаждается больше частиц, чем в центральной ее части. В результате этого невозможно применение теории вероятности для обработки экснери10 ментальных результатов.

Целью изобретения является повышение точности микробиологического анализа воздуха.

Цель достигается тем, что воздух пропуJ5 екают через импактор перед внесением в питательную среду тест-культуры, причем последнюю пропускают через импактор в виде полидисперсного аэрозоля, а концентрацию и дисперсный состав антимикробных частиц определяют по числу невыросших колоний тест-культуры.

Цель достигается также тем, что сопла в каждой решетке расположены с переменным шагом, уменьшающимся от пери25 ферии к центру.

На чертеже представлено устройство для микробиологического исследования воздуха в двух проекциях. Сущность предлагаемого способа заклю30 чается в том, что тест-культуру пропускаЮт Через импактор в виде полидисперсного аэрозоля и осаждают ее на питательной среде строго под каждым соплом и, кроме того, во избежание травмирующего действия высыхания на жизнеспособность тесткультуры анализируемый воздух пропускают через импактор до внесения тест-культуры.

Устройство для осуществления указанного способа включает цилиндрические каскады 1 инерционного осаждения и разделения частиц по размерам. Каждый каскад содержит несколько идентичных сопловых решеток 2, например четыре, и несколько идентичных подложек 3 с питательными средами. Радиально расположенные сопла 4 отстоят друг от друга с переменным шагом (например, 12,0; 9,0; 6,0; 4,0 мм), уменьшающимся от периферии сопловой решетки к центру.

Устройство работает следующим образом.

Сначала пропускают исследуемый воздух через последовательный ряд многосопловых каскадов для инерционного разделения по размерам и осаждения частиц на подложках, покрытых плотной питательной средой. Затем распыляют в отдельном объеме раствор тест-культуры и получают взвешенные в воздухе полидисперсные микробные частицы, которые, как и на первом этапе, осаждают на подложках, причем число мест, заполненных микробными частицами на любой подложке, равно числу сопел в соответствующем каскаде. Далее подложки с осажденными на них частицами помещают Б термостат для образования в тех местах, где нет частиц с антимикробными свойствами, видимых колоний микроорганизмов и по числу невыросших колоний при условии, что число выросших колоний больше или равно единице, по известной методике рассчитывают концентрацию и дисперсный состав исследуемых частиц.

Пример выполнения способа.

Стерильный агар по 20 мл разливают в подложки, подсушивают в термостате при 37°С. Собранный в стерильных условиях импактор подсоединяют к источнику разрежения и устанавливают расход воздуха, равный 30 л/мин. Время отбора пробы 5 мин. В закрытой камере с внутренним объемом 1 м с помощью барботажного генератора распыляют суспензию Вас. pumilus и получают взвешенные в воздухе полидисперсные микробные частицы с концентрацией 10 частиц/м и средним размером 4 мкм. После этого импактор с осажденными на подложках исследуемыми частицами устанавливают в закрытую камеру и пропускают через него воздух с распыленными частицами тест-культуры со скоростью 30 л/мин в течение 1 мин. Затем импактор извлекают из камеры, разбирают и отработанные подложки помещают в термостат, где выдерживают их 24 ч при 36°С для образования видимых невооруженным глазом колоний Вас. pumilus. Число осажденных частиц с антимикробными свойствами подсчитывают по числу невыросших колоний.

Использование предлагаемого способа для микробиологического исследования воздуха обеспечивает по сравнению с известными способами повышение качества проводимых анализов по определению счетной концентрации и дисперсного состава частиц с антимикробными свойствами, например частиц, содержащих фаги, антибиотики и т. п., а также упрощает методику обработки результатов за счет исключения

визуального подсчета многочисленных негативных колоний. Кроме того, радиально расположенные сопла с переменным шагом обеспечивают равномерное распределение как анализируемых частиц, так и частиц

тест-культуры по всему сечению подложки, благодаря чему достигается высокая точность проводимых анализов.

Формула изобретения

1.Способ микробиологического исследования воздуха путем пропускания его через многокаскадный многосопловой импактор, подложки которого покрыты питательной

средой, содержащей тест-культуру, с последующей инкубацией и определением концентрации и дисперсного состава антимикробных частиц, отличающийся тем, что с целью повышения точности способа, воздух пропускают через импактор перед внесением в питательную среду тесткультуры, причем последнюю пропускают через импактор в виде полидисперсного аэрозоля, а концентрацию и дисперсный состав антимикробных частиц определяют по числу невыросших колоний тест-культуры.

2.Устройство по п. 1, содержащее цилиндрические каскады, включающие решетку с радиально расположенными соплами, диаметр которых уменьшается по направлению движения воздуха, и съемную подложку для питательной среды, отличающееся тем, что сопла в каждой решетке расположены с переменным шагом, уменьшающим от периферии к центру.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Журнал «Гигиена и санитария, 1977, № 6, с. 68-74.

2. J. «Appl. МисгоЬю, 1964, v, 12, № 1, р. 37-43, May К. R. Calibration of а modified Andersen bacterol aerosol samber.

Питате/11 най „ , среда -f- ч ./ /

XIZ