Изобретение относится к аналитической биохимии, а именно к способам определения концентрации декстрана в крови и может быть использовано в медицинской практике для определения концентрации кровозаменяющих средств декстрановой природы полиглюкина и реополиглюкина.
Известен способ определения кон.центрации декстрана,основанный на осаждении из щелочного фильтрата,полученного после удаления белков плазмы, медного комплекса с последунхцим определением меди, остающейся над осадком l .,
Однако этот способ весьма трудоемок и неточен, так как в крови всегда присутствуют и другие вещества, образуквдие комплекс с медью.
Известен также способ определения концентрации декстрана в крови методом Меткалфа и Русло. Способ включает центрифугирование содержащей декстран крови, взятой с генерином, добавление к по.пученной плазме равного объема 10%-ной трихлоруксусной кислоты; второе центрифугирование раствора, добавление к центрифугату 94%ного этилового спирта,колориметрирование раствора, и вычисление по калибровочной кривой искомой концентрации раствора декстрана С2 .
Однако известный способ трудоемок и занимает довольно длительное(время 1 ч на пробу). Кроме того, способ недостаточно точен, так как после добавления, спирта оптическая плотность раствора не остается постоянной, а быстро изменяется.
Цель изобретения - сокращение времени определения декстрана и повьпиение точности этого определения.
Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения концентрации декстрана в крови, включающему обработку цельной крови или ее плазмы химическим реагентом, пробу обрабатывают раствором тромбина, определяют тромбиновое время и концентрацию декстрана определяют по форму
ле
декстран аг Ь4-а t+ap
где t - тромбиновое. вреМя
и а коэффициенты, учитываюVщие природу декстрана.
Способ осуществляется следующим образом.
Центрифугируют или отстаийают содержащий декстран препараэ- крови, стабилизированной 3,8%-Hi i раствором цитрата NQ в соотношении 9:1, .дое5авляют к 0,2 мл исследуемой плазмы 0,1 МП предварительно приготовленного раствора тромбина с активностью 2,5 ед/мл в 0,9%-ном раствоfee NaCl. Определяют под влиянием тромбина время свертывания плазмы (тромбиновое время). Вычисляют искомую концентрацию декстрана по формуле. Конкретные значения-коэффициентов полученные на ЭВМ-М-6000 методом наименьших квадратов по 4 экспериментальным точкам, приведены в таб. 1. .Пример. Берут 0,2 мл плазмы, содержащей полиглюкин. Приливают 0,1 мл раствора тромбина. Определяют тромбиновое время по секундомеру. Оно равно 15,1 с. Вычисляют концентр цию полиглюкина в крови по формуле 1 iполиглюкин 0,146t- 5,57t+53,13 0,146.228,01-5,57 15,1+53,13 гЗЗ,28-28-84,1+53,13я2,31, следова:тельно, концентрация декстрана в кро ви равна 2,31 мг/мл. -(Пример 2.Берут 0,4 мл кро:ви/ содержащей реополиглюкин. .Отстаи Коэффициенты для декстрана вают ее. К 0,2 мл плазмы приливают 0,1 мл раствора тромбина. Определяют тромбиновое время (t) по секундомеру. Оно равно 15 с. Вычисляют концентрацию реополиглюкина в крови по формулереополиглюкин asO, 234х-10,15х+ +lio 0,234-225-10,15-15+110 53-153+110 10, следовательно, концентрация декстрана в крови равна 10 мг/мл. Способ позволяет сократить время исследования до нескольких минут. Кроме того, способ менее трудоемок, так как отпадает необходимость второго центрифугирования и построение калибровочной кривой. Повышение точности способа обусловлено тем, что при выводе формуем используют усредненные значения концентрации декстрана в крови, измеренные ранее известным способом.в табл. 2 представлены результаты сопоставительного анализа определения концентрации препаратов декстрана в крови после внутривенного введения в динамике по предложенному и известному способам. Таблица 1 деления концентрации ви
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| РАСТВОР ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ПЕРВИЧНЫХ НАРУШЕНИЙ ГЕМОСТАЗА ПЛАЗМОЗАМЕЩАЮЩИМИ РАСТВОРАМИ НОВОГО СОСТАВА | 2005 |
|
RU2300385C1 |
| ПЛАЗМОЗАМЕЩАЮЩЕЕ СРЕДСТВО, КОРРЕКТИРУЮЩЕЕ ГЕМОДИНАМИЧЕСКИЕ НАРУШЕНИЯ, - НЕОРОНДЕКС | 1992 |
|
RU2043108C1 |
| СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ЛОКАЛЬНЫХ ГЕМОРРАГИЧЕСКИХ ОСЛОЖНЕНИЙ В РАННЕМ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ | 2000 |
|
RU2189598C2 |
| СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СИНДРОМА ДИССЕМИНИРОВАННОГО ВНУТРИСОСУДИСТОГО СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ | 1992 |
|
RU2033611C1 |
| Способ определения тромбинового пути активации системы комплемента | 2019 |
|
RU2717946C1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ ФИБРИНОГЕНА ПЛАЗМЫ КРОВИ ПО СОДЕРЖАНИЮ КАРБОНИЛЬНЫХ ГРУПП В ФИБРИНОВОМ СГУСТКЕ | 2014 |
|
RU2595806C2 |
| СПОСОБ ПРОДУЦИРОВАНИЯ В ВЫСОКОЙ СТЕПЕНИ ВИРУСОБЕЗОПАСНЫХ КОМПОНЕНТОВ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ФИБРИНОВОГО КЛЕЯ ИЗ ПУЛА ПЛАЗМЫ ЧЕЛОВЕКА | 1998 |
|
RU2236237C2 |
| Определение циркулирующего тромбина в тесте активации системы комплемента | 2019 |
|
RU2709341C1 |
| Определение чувствительности эритроцитов человека к лизису при активации системы комплемента по тромбиновому пути | 2019 |
|
RU2696981C1 |
| Стабилизированная стрептокиназа,обладающая тромболитической активностью | 1979 |
|
SU822551A1 |
Полиглюкин 6%
Таблица
Формула изобретения
Способ определения концентрации декстрана в крови, включающий обработку цельной крови или ее плазмы химическим реагентом, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и сокращения времени исследования, пробу обрабатывают раствором тромбина,- определяют тромбиновое время и концентрацию декстрана по формуле
декстран а Ъ+а Ь +ад ,
где t - тромбиновое время в секундах;
Hf, - коэффициенты,учитывающие природу ;дек .страна.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
0
5
М., 1968, (прототип).
