ШТАММ BACTERIOPHAGUM SHIGELLOSUM, АКТИВНЫЙ В ОТНОШЕНИИ SHIGELLA BOYDII Б15 Российский патент 1994 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к способам лабораторной диагностики шигеллезов (Бойд 15) и может быть использовано в научных и практических лабораториях, занимающихся индикацией и идентификацией возбудителей бактериальной дизентерии.

Для идентификации шигелл известен способ, заключающийся в поэтапном выделении из исследуемого материала чистой культуры шигелл, изучении ее свойств и заключительной идентификации серологическим способом (реакция агглютинации). Окончательный результат становится возможным на 4-е сутки при типичных формах и на 6-7-е сутки при атипичных формах возбудителя (Методические указания по лабораторной диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями. М., Минздрав СССР, 1984).

Штамм Bacteriophagum shigellosum Б15 хранится в официальной коллекции-депозитарии Республики Узбекистан (Республиканская коллекция микроорганизмов) при Научно-исследовательском институте эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний Республиканского научного центра по борьбе с инфекционными и паразитарными заболеваниями Минздрава Республики Узбекистан под N 19 и характеризуется следующими морфологическими признаками.

Относится к третьей морфологической группе. Размер головки 400± 110, отростка - 220± 50. Тип нуклеиновой кислоты - ДНК, молекулярный вес 6000 кдальтон.

Питательный агар (по ФС 42-188 ВС-88). На газоне Shigella Boydii 15 величина негативных колоний 4,0 ± 0,5 мм в диаметре. Край колоний ровный, дно прозрачное.

Питательный бульон (по ФС 42-224 ВС-88). При посевной дозе 1 x 10⁷микробных клеток на 1 мл среды и множественности инфекции 1:10 вызывает просветление взвеси и накапливается n x 10⁸ корпускул на 1 мл среды.

Одиночный цикл развития характеризуется продолжительностью минимального латентного периода равного 15 мин. Урожайность 122 корпускул на 1 инфицированную клетку.

Серологические свойства. Константа скорости нейтрализации антифаговой сыворотки 382 мл в 1 мин.

Цель изобретения - получить штамм специфического бактериофага для идентификации бактерий Shigella Boydii Б 15, выделяющихся на территории Узбекистана и других регионов, т.е. фаг, обладающий строгой специфичностью для указанной группы шигелл и пригодный для их ускоренной лабораторной диагностики.

Предлагаемый штамм Bacteriophagum shigellosum Б 15 новый и в патентной литературе не описан.

П р и м е р. На плотную питательную среду (питательный агар) бактериологической петлей наносят полоску свежей (не более 1 сут) бульонной культуры или взвеси микробов в конденсационной жидкости столбика трехсахарного агара. На полоску культуры наносят пастеровской пипеткой или бактериологической петлей каплю бактериофага. Посев инкубируют в течение 18 ч при 37^оС.

В случае, если исследуемая культура является Shigella Boydii 15, на полоске в месте нанесения бактериофага наблюдают четкую зону специфического лизиса. Наличие лизиса является диагностическим признаком для идентификации культуры, который подтверждается серологическим путем (реакция агглютинации), после чего выдается ответ.

Применение диагностического бактериофага Bacteriophagum shigellosum Б 15 позволяет сократить сроки лабораторной диагностики минимум на 1 сут за счет сокращения процесса диагностики (частичное сокращение этапа биохимического исследования - "пестрый ряд"). Достигается также экономический эффект за счет целенаправленного использования дорогостоящих агглютинирующих сывороток.

Использование: медицинская микробиология. Сущность изобретения: для идентификации возбудителя Бойд 15 используется специфический бактериофаг, который хранится в коллекции НИИЗМИЗ РИЦБИПЗ Минздрава Республики Узбекистан N 19. Эффект от изобретения заключается в сокращении сроков диагностики на 1 сут при типичных формах и на 2 - 3 сут при атипичных формах возбудителя.

Штамм Bacteriophagum shigellosum Б15 НИИЭМИЗ РНЦБИПЗ Минздрава Республики Узбекистан N 19, активный в отношении Shigella Boydii Б15.