ШТАММ BACTERIOPHAGUM SHIGELLOSUM Б4, АКТИВНЫЙ В ОТНОШЕНИИ SHIGELLA BOYDII 4 Российский патент 1994 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к способам лабораторной диагностики шигеллезов (Бойд 4), и может быть использовано в научных и практических лабораториях, занимающихся индикацией и идентификацией возбудителей бактериальной дизентерии.

Для идентификации шигелл в исследуемом материале известен способ, заключающийся в поэтапном выделении из исследуемого материала чистой культуры шигелл, изучении ее свойств и заключительной идентификации серологическим способом (реакция агглютинации). Окончательный результат становится возможным на 4-е сутки при типичных формах и на 6-7-е сутки при атипичных формах возбудителя.

Штамм Bacteriophagum shigellosum Б4 хранится в официальной коллекции-депозитарии Республики Узбекистан (Республиканская коллекция микроорганизмов) при Научно-исследовательском институте эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний при Республиканском научном центре по борьбе с инфекционными и паразитарными заболеваниями Минздрава Республики Узбекистан под N 21 и характеризуется следующими морфологическими признаками.

Относится к третьей морфологической группе. Размер головки 350± 40, отростка - 180± 50. Тип нуклеиновой кислоты - ДНК, молекулярный вес 6000 кдальтон.

Питательный агар (по ФС 42-188 ВС-88). На газоне Shigella Boуdii 4 величина негативных колоний 3,0±0,5 мм в диаметре. Край колоний ровный, дно прозрачное.

Питательный бульон (по ФС 42-224 ВС-88). При посевной дозе 1˙10⁷микробных клеток в 1 мл среды и множественности инфекции 1:10 вызывает просветление взвеси и накапливается n˙10⁸ корпускул на 1 мл среды.

Одиночный цикл развития характеризуется продолжительностью минимального латентного периода, равного 18 мин. Урожайность - 87 корпускул на 1 инфицированную клетку.

Серологические свойства. Константа скорости нейтрализации антифаговой сыворотки - 25,2 мл в 1 мин.

Цель изобретения - получить штамм специфического бактериофага для идентификации бактерий Shigella Boydii 4, выделяющихся на территории Узбекистана и других регионов, т.е. фаг, обладающий строгой спефицичностью для указанной группы шигелл и пригодный для их ускоренной лабораторной диагностики.

Предлагаемый штамм Bacteriophagum shigellosum Б 4 новый и в патентной литературе не описан.

П р и м е р. На плотную питательную среду (питательный агар) бактериологической петлей наносят полоску свежей (не более 1 суток) бульонной культуры или взвеси микробов из конденсационной жидкости столбика трехсахарного агара. На полоску культуры пастеровской пипеткой или бактериологической петлей наносят каплю бактериофага. Посев инкубируют 18 ч при 37^oC.

В случае, если исследуемая культура является Shigella Boуdii 4, на полоске в месте нанесения бактериофага наблюдают четкую зону специфического лизиса. Наличие лизиса является диагностическим признаком для идентификации культуры, который подтверждается серологическим путем (реакция агглютинации), после чего выдается ответ.

Применение диагностического фага Bacteriophagum shigellosum Б 4 позволяет сократить сроки лабораторной диагностики минимум на 1 сут за счет сокращения процесса диагностики (частичное сокращение этапа биохимического исследования - "пестрый ряд"). Достигается также экономический эффект за счет целенаправленного использования дорогостоящих агглютинирующих сывороток.

Использование: медицинская микробиология. Сущность изобретения: для идентификации возбудителя Бойд 4 используется специфический бактериофаг НИИЭМИЗ РНЦБИПЗ N 21. Эффект от предлагаемого изобретения заключается в сокращении сроков диагностики на 1 сут при типичных формах возбудителя и на 2 - 3 сут при атипичных формах возбудителя.

Штамм Bacteriophagum shigellosum Б4 НИИЭМИЗ РНЦБИПЗ N 21, активный в отношении Shigella Boydii 4.