СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АНОМАЛИЙ РАЗВИТИЯ ЖЕЛЧЕВЫВОДЯЩЕЙ СИСТЕМЫ У НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ Российский патент 1996 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии, и может быть использован для диагностики аномалий развития желчевыводящей системы новорожденных детей.

В настоящее время аномалии развития желчевыводящей системы у новорожденных диагносцируют по данным ультразвукового, рентгенологического методов исследования и совокупности клинических данных. Даже при достаточной квалификации врача не всегда у новорожденных этими методами удается визуализировать желчный пузырь и аномалии его развития, что обусловлено особенностями распределения контрастного вещества, наполнением желчного пузыря желчью и ее свойствами. Введение контрастного вещества, рентгеновские лучи и меньше ультразвуковые вредны для исследуемого, особенно новорожденного ребенка. Оценка врачом клинических данных субъективна и зависит от его опыта и квалификации. В связи с чем возникает необходимость поиска других методов диагностики аномалий развития желчевыводящей системы у новорожденных детей (Малая медицинская энциклопедия. /Под ред В.И. Покровского. М. Cоветская энциклопедия, т.2, 1991, с. 183).

Наш способ отличается тем, что аномалии развития желчевыводящей системы у новорожденных детей определяют на основании содержания желчных кислот в сыворотке крови. Преимущество предлагаемого способа заключается в том, что он позволяет выявить детей с аномалией развития желчевыводящей системы без проведения им рентгенологического, ультразвукового исследований и дуоденального зондирования.

Целью изобретения является улучшение диагностики аномалий развития желчевыводящей системы у новорожденных детей.

Поставленная цель достигается тем, что в сыворотке крови ребенка определяют содержание желчных кислот (таурохолевой, таурохенодезоксихолевой, тауродезоксихолевой, гликохолевой, гликохенодезоксихолевой, гликодезоксихолевой, холевой) методом тонкослойной хроматографии на силикагеле или любым другим методом. Методика описана в методических рекомендациях "Метод определения содержания и состава желчных кислот в биологических материалах", авторы А.Ф. Блюгер, В.И. Смоголь, Б.Р. Гедулина, Л.А. Максимова, Рига МЗ Латвийской ССР 1984. Для этого к 0,2 мл сыворотки крови ребенка приливают 3,0 мл смеси 96- -градусного этанол-трихлорэтана в соотношении 1:1. Cмесь инкубируют в течение минуты и фильтруют через быстро фильтрующийся бумажный фильтр, который промывают 1 мл смеси 96- -градусного этанол-дихлорэтана (1:1). К полученному раствору добавляют 0,6 мл дистиллированной воды. Смесь встряхивают и оставляют на 20 30 мин до получения прозрачного раствора, состоящего из двух фракций: верхняя (водно-этанольная) содержит очищенные желчные кислоты и нижняя фракция, состоящая из трихлорэтана, в котором содержатся липиды и другие примеси. Верхнюю и нижнюю фракции разделяют по нижнему мениску. Полученный экстракт желчных кислот выпаривают досуха. Осадок желчных кислот растворяют в 0,2 мл 96-градусного этанола. Хроматографию проводят на стеклянных пластинах, покрытых слоем силикагеля. Для разделения желчных кислот используют систему растворителей следующего состава: дихлорэтан, уксусная кислота, вода в соотношении 10:10:1. После разделения пластину высушивают на воздухе и опрыскивают 1%-ным раствором концентрированной серной кислоты в 96-градусном этаноле. Пятна желчных кислот идентифицируют в УФ-свете (360 нм). Для количественного определения участки пятен силикагеля с желчными кислотами снимают с пластины, растворяют в 2 мл концентрированной серной кислоты, инкубируют в ультратермостате в течение 1 ч при 60^oC. Силикагель осаждают центрифугированием при 1500 g. Определяют оптическую плотность надосадочной жидкости при длине волны 540 нм. Количество желчных кислот в сыворотке крови в мкмоль/л вычисляют по формуле
А К • Эоп/Эст,
где А количество желчных кислот, мкмоль/л;
Эоп экстинкция опытного образца;
Эcт экстинкция стандартного образца;
К коэффициент для каждой желчной кислоты, вычисленный в зависимости от молекулярного веса: Ктх 39; Ктхдх 40; Ктдх 40; Кгх 42; Кгхдх 44; Кгдх 44; Кх 49, где тх таурохолевая желчная кислота, тхдх - таурохенодезоксихолевая, тдх тауродезоксихолевая, гх гликохолевая, гхдх - гликохенодезоксихолевая, гдх гликодезоксихолевая, х -холевая.

В качестве стандартного образца используют смесь стандартов желчных кислот в концентрации 1 мг/мл. Если содержание желчных кислот превышает значения, указанные в табл.1,2, в 2 3 раза выше нормы, то диагносцируют аномалию желчевыводящей системы новорожденного первых дней жизни.

Эффективность предложенного способа подтверждается следующими примерами.

Пример 1. А-ч А. 1-й день жизни, девочка, родилась от 1-й беременности, протекавшей на фоне токсикоза 1-й и 2-й половины, нейроцируляторной дистонии по гипертоническому типу. Роды преждевременные, безводный период 34 ч. Масса тела при рождении 2050,0 кг, длина тела 43 см, окружность головы 31 см, окружность груди 28 см. Оценка по шкале Апгар 5 6 баллов. Гестационный возраст 33 недели.

Клинический диагноз: недоношенность 2-й степени. Асфиксия новорожденного легкой степени, синдром угнетения УНС. Пневмопатия (рассеянные ателектазы легких).

Содержание желчных кислот в сыворотке крови в мкмоль/л: ТХ-24,4; ТХДХ-64,0; ТДХ-110,0; ГХ-22,0; ГХДХ-77,0; ГДХ-176,0, Х-5,46.

Так как содержание желчных кислот ниже граничных значений, у ребенка отсутствует аномалия развития желчевыводящей системы. При ультразвуковом исследовании желчного пузыря у этого ребенка установлено, что желчный пузырь овоидной формы, длиной 19 мм, в диаметре 7 мм, передняя стенка не визуализируется, содержимое однородное. Данные ультразвукового исследования подтверждают отсутствие аномалии желчевыводящей системы новорожденного.

Пример 2. Г-в Т. 1-й день жизни, девочка. Родилась от 1-й беременности, протекавшей на фоне токсикоза 2-й половины. Роды преждевременные, раннее излитие околоплодных вод, воды зеленые. Девочка родилась в ягодичном предлежании, оказывалось пособие по Цовьянову. Масса тела при рождении 1650,0 кг, длина тела 42 см, окружность головы 28 см, окружность груди 26 см. Оценка по шкале Апгар 3 6 баллов, гестационный возраст 34 недели.

Клинический диагноз: недоношенность 2-й степени. Хроническая гипоксия плода. Асфиксия новорожденного тяжелой степени, нарушение гемо-ликвородинамики 2-й степени, синдром угнетания ЦНС, пневмопатия (рассеянные ателектазы легких).

Содержание желчных кислот в сыворотке крови в мкмоль/л: ТХ-419,2; ТХДХ-416,0; ТДХ-550,0; ГХ-693,0; ГХДХ-858,0; ГДХ-407,0; Х-18,5.

Так как содержание желчных кислот в сыворотке крови выше граничных значений, у ребенка есть аномалия желчевыводящей системы. При ультразвуковом исследовании установлено, что желчный пузырь в форме "бумеранга", длиной 11 мм, диаметром 5 мм. Вдоль его передней стенки визуализируется эхогенная жидкость, толщиной 3 мм.

Таким образом, данные ультразвукового исследования подтверждают вывод, сделанный на основании результатов исследования желчных кислот.

Пример 3. М-н Р. 2-й день жизни, мальчик. Родился от 2-й беременности, протекавшей без осложнений, вторых родов в сроке 40 недель. Масса тела при рождении 3600,0 кг, длина тела 55 см, окружность головы 36 см, окружность груди 35 см. Оценка по шкале Апгар 8 9 баллов. Гестационный возраст 40 недель.

Клинический диагноз:здоров.

Содержание желчных кислот в сыворотке крови в мкмоль/л: ТХ-73,1; ТХДХ-136,0; ТДХ-230,0; ГХ-24,0; ГХДХ-176,0; ГДХ-88,0; Х-1,96.

Так как содержание желчных кислот в крови ниже граничных значений, можно считать, что у новорожденного нет аномалии желчевыводящей системы. При ультразвуковом исследовании установлено, что желчный пузырь грушевидной формы, длиной 29 мм, диаметром 7 мм. Его передняя стенка не визуализируется, содержимое однородное.

Следовательно, данные ультразвукового исследования, подтверждают результаты исследования желчных кислот в сыворотке крови.

Пример 4. П-ва М. 2-й день жизни, мальчик. Родился от 1-й беременности, 1-х срочных родов, протекавших без осложнений. Масса тела при рождении 2970,0, длина тела 49 см, окружность головы 34 см, окружность груди 32 см. Оценка по шкале Апгар 8 9 баллов. Гестационный возраст 39-40 недель.

Содержание желчных кислот в сыворотке крови в мкмоль/л: ТХ-731,3; ТХДХ-384,0; ТДХ-100,0; ГХ-288,0; ГХДХ-1584,0; ГДХ-748,0; Х-33,3.

Так как содержание желчных кислот выше граничных значений, можно считать, что у новорожденного аномалия развития желчевыводящей системы. При ультразвуковом исследовании установлено, что желчный пузырь имеет перегиб и перетяжку в области шейки. Длина желчного пузыря 23 мм, диаметр 10 мм. Передняя стенка не визуализируется, содержимое однородное.

Таким образом, результаты ультразвукового исследования подтверждают данные, полученные при определении содержания желчных кислот в сыворотке крови.

Использование: в области медицины, в частности в неонатологии. Сущность изобретения: в периферической крови детей определяют содержание желчных кислот и при их количестве, в 2 - 3 раза превышающем возрастную норму, диагностируют аномалию развития желчевыводящей системы как у доношенных, так и у недоношенных новорожденных. Способ позволяет снизить травматичность способа. 2 табл.

Способ диагностики аномалий развития желчевыводящей системы у новорожденных детей путем их обследования, отличающийся тем, что определяют содержание желчных кислот в сыворотке крови и при их количестве в 2 3 раза выше возрастной нормы диагностируют аномалию желчевыводящей системы как у доношенных, так и у недоношенных новорожденных.