ПРОТИВОАНЕМИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО Российский патент 1997 года по МПК A61K38/42 A61K35/14 A61K31/295 A61K35/78 

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно, к лечению и профилактике железодефицитных состояний у человека и животных.

По данным ВОЗ, каждый 4 человек в мире имеет дефицит железа, то есть страдает железодефицитной анемией. По предварительной оценке в России до 60 млн. человек подвержены этому заболеванию различной степени тяжести. Развитию этого заболевания способствует неполноценное питание населения (особенно резкое снижение потребления мяса основного источника поступления железа в организм человека).

Для профилактики железодефицитных соединений человека и животных широко используются препараты на основе неорганических и органических солей железа [1] Их применяют как для обогащения пищевых продуктов (США, Англия, Швеция, Голландия и др.), так и в качестве лекарственных препаратов.

Наибольшее распространение в клинической практике для лечения малокровия получили препараты, созданные на основе сульфата железа (феоспан, конферон, тардиферрон, актиферрин, ферроградумед и др. ), сульфитов закиси железа (феррокаль, ферроплекс), а также хлорида (гемофер, сироп алоэ с железом) и лактаза железа. Суточная доза препаратов железа должна составлять 4-5 мг элементарного железа на 1 кг массы тела, ее назначают за 1 ч до еды в 3 приема. Лечение продолжают не менее 3 мес при постоянном контроле коэффициента насыщения трансферрина железом (до его нормализации 30-60%). В настоящее время применяют большое количество препаратов, эффективность которых определяется не столько содержанием железа, сколько степенью его абсорбции в кишечнике. Антианемическое действие многих препаратов усиливается сочетанием железа с аскорбиновой кислотой (ферроплекс, железоаскорбат, фитином (фитоферолактол), медью (гемостимулин), алоэ и лимонной кислотой (ферралоэ), с фосфором (глицерофосфат), аминокислотами (например, D,L- серином - актиферрин). Для лучшей абсорбции препараты железа необходимо назначать в сочетании с восстанавливающими или подкисляющими средствами (аскорбиновая кислота, желудочный сок, 1% -ная хлористоводородная кислота) и ферментами (пепсин, панкреатин). В России для внутривенного введения предложен ферковен (содержит сахарат железа и глюконат кобальта). Для внутримышечного введения в зарубежных странах используют коллоидные соединения сахарата железа (феррум-лек), железодекстраны (астрофен, имферон), фербитол (с сорбитолом).

Основными недостатками существующих лекарственных препаратов на основе неорганических и органических солей железа являются:
низкая эффективность, которая приводит к необходимости приема значительных их доз, вызывающих изжогу, отсутствие аппетита, тошноту, рвоту, отрыжку, боли в области желудка, понос;
плохая переносимость (раздражение слизистой тонкой кишки, диспепсия) почти у 10% взрослых пациентов;
из-за связывания железа в кишечнике железа неорганическим сероводородом, являющимся физиологическим стимулятором перистальтики, возникают запоры, образуется нерастворимый сульфид железа, окрашивающий кал в черный цвет;
необходимость дополнительного применения аскорбиновой кислоты, других витаминов, желудочного сока, соляной кислоты для повышения усвояемости железа;
падение кровяного давления, гиперемия лица, шеи, ощущение сжатия в груди, боли в пояснице, головная боль, головокружение, частое возникновение аллергических реакций и даже шоковых состояний больных;
могут вызывать потемнение окраски зубов;
сильна вероятность острого отравления при передозировке;
являются причиной (инъекции декстрана железа) системных поражений в виде лекарственной пурпуры, а также местных воспалительных и дистрофических изменений (локальная липомиодистрофия);
имеются сообщения о канцерогенности отдельных препаратов, например, железодекстранов.

Известен также препарат аналогичного назначения под названием "Гематоген" [2] Детский "Гематоген" вырабатывают перемешиванием при нагревании до 122-125^oС сахарного сиропа, сгущенного молока и патоки до получения густой массы. Затем ее охлаждают до 65-70^oС и добавляют при перемешивании черный пищевой альбумин. "Гематоген" назначают в качестве лечебно-питательного препарата при малокровии, в послеоперационный период, после инфекционных и других заболеваний.

Несмотря на отсутствие явных отрицательных эффектов при его использовании "Гематоген" имеет очень слабо выраженный лечебный и профилактический эффект и поэтому рассматривается как вспомогательное лечебно-питательное средство при малокровии.

Из известных эффективных препаратов, используемых в лечении и профилактике железодефицитных состояний, по составу компонентов наиболее близок к заявленной пищевой противоанемической добавке "Гемостимулин" (ВФС - 42-153-72), который выпускают в России. Этот препарат получают из черного пищевого альбумина (высушенная гемолизированная кровь крупного рогатого скота). В нем использована комбинация белков крови с препаратом молочнокислого железа и сернокислой меди. Для получения "Гемостимулина" к 25 частям альбумина добавляют 50 частей молочнокислого железа, 1 часть сернокислой меди. 1 таблетка "Гемостимулина" содержит крови пищевой 0,123 г, железа лактата - 0,246 г, меди сульфата 0,005 г. Препарат принимают по 1 таблетке 3 раза в день во время еды, запивая разбавленной хлористоводородной кислотой (по 10-15 капель на полстакана воды). Курс лечения продолжается 3-6 месяцев и более.

Этот препарат также имеет ряд существенных недостатков:
необходимость дополнительного ежедневного приема 1,5-2 стаканов 1%-ной соляной кислоты;
проявление побочных эффектов в виде тошноты, нарушения деятельности желудочно-кишечного тракта и т.п.

низкая эффективность препарата, не позволяющая применять его для лечения тяжелых форм анемии; значительные неудобства при использовании этой формы для профилактики анемических состояний в повседневной жизни человека.

Изобретение направлено на создание противоанемического средства, которое обладало бы более высокой эффективностью, биологической ценностью и безвредностью, чем известные примеры.

С этой целью используется противоанемическое средство на основе очищенного от вредных примесей и микроорганизмов гемоглобина крови с/х животных, содержащего железо в двухвалентной форме, а также сублимационно высушенный свекольный сок, аскорбиновая или лимонная кислота и простые сахара при следующем соотношении компонентов, мас. гемоглобин крови сельскохозяйственных животных 20-40; сублимационно высушенный свекольный сок 30-70; аскорбиновая или лимонная кислота 10-40; простые сахара (глюкоза, фруктоза, лактоза) 20-60.

Гемоглобин из крови сельскохозяйственных животных с содержанием основного вещества более 80% (марка "Б") получен путем разделения крови на плазму и эритроциты, проведения гемолиза последних, очистки от балластных веществ фильтрованием, концентрирования с помощью ультрафильтрации с последующей стерилизующей фильтрацией целевого продукта, а также при необходимости, сублимационной (распылительной) сушки.

Данный способ обеспечивает получение гемоглобина, обладающего важными преимуществами перед существующими фирменными препаратами этого белка, а именно: полным отсутствием в технологии его получения потенциально вредных для здоровья человека реагентов (неорганических солей и органических растворителей), микробиологической чистотой, а также сохранением нативной структуры гемоглобина, содержащего железо в высокодоступной двухвалентной геминовой форме.

Основные показатели гемоглобина приведены в табл.1.

Гемоглобин по степени очистки от других белков соответствует фирменным препаратам гемоглобина, которые используются в лабораторных и научно-исследовательских работах. Это убедительно подтверждают результаты электрофоретического разделения гемоглобинов, выпускаемых разными производителями.

В табл. 2 приведены расширенные показатели бычьего гемоглобина марки "Б", который использовался в предварительных испытаниях на поросятах и в клинике на больных.

Данные табл. 2 свидетельствуют о том, что разработанная технология дает возможность нарабатывать продукт с довольно высокими качественными показателями. Особенно это касается отсутствия в гемоглобине примесей тяжелых металлов (кадмий, ртуть, свинец) и мышьяка, а также микробиологической чистоты продукта.

Эти данные дополнительно подтверждают тот факт, что входящий в состав противоанемического средства железосодержащий компонент на основе гемоглобина делает его ценным дополнительным источником железа, других микроэлементов, а также важнейших незаменимых аминокислот. Причем по содержанию аминокислот продукт намного превышает их наличие в говядине, а также нормы ФАО по потребностям в них человека. Гемоглобин содержит 0,285 г% железа, что близко к теоретическому 0,34% и делает его действительно природным источником железа, которое находится в доступной организму геминовой хелатной форме.

Гемоглобин, выпускаемый зарубежными фирмами для аналитических и лабораторных исследований, не пригоден для прямого использования в составе противоанемического средства. Прежде всего из-за высокого содержания тяжелых металлов и микробиальной загрязненностью. В связи с этим фирменные препараты гемоглобина требуют обязательной дополнительной очистки.

Кроме того, большинство фирменных реактивных гемоглобинов плохо и не полностью растворяется в дистиллированной воде. Гемоглобин НПФ "Мобитек" растворяется быстро и полностью в минимальном объеме воды. Убедительным подтверждением того, что тетрамерная молекула гемоглобина (М.в. 6400) легко диссоциируют на субъединицы, является электрофоретическое разделение гемоглобинов, произведенных НПФ "Мобитек" в денатурирующих условиях в присутствии додецилсульфата натрия и меркаптоэтанола, которое подтверждает "нативность" гемоглобиновой добавки, по сравнению, например, с гемоглобином фирмы "Реанал", который является частично денатурированным и, кроме того, не диссоциирует полностью на субъединицы.

Как положительный факт можно рассматривать отсутствие в гемоглобине значительных количеств нуклеиновых и жирных кислот, а также липидов в целом. Незначительные количества общих липидов делают возможным длительное хранение сублимационно высушенного белка при обычных температурах условиях с полным сохранением исходных свойств.

Противоанемическое средство получают путем смешивания гемоглобина крови, а также сублимационно высушенного свекольного сока, аскорбиновой или лимонной кислоты и простых сахаров в указанных выше соотношениях.

Свойства полученного средства представлены в табл.3.

Пример 1. Применение противоанемического средства для лечения и профилактики железодефицитных состояний поросятсосунов.

Для изучения биологической ценности и эффективности применялось противоанемическое средство со следующим соотношением входящих в ее состав компонентов, мас. гемоглобин крови с/х животных (ТУ 2423-001-10837785-96) 25; сублимированный свекольный сок (ТУ 10.0418-71-92) 33; аскорбиновая кислота 10; лимонная кислота 10; лактоза (ОСТ 49-63- 85) 22.

Свекольный сок представляет собой легко растворимый в воде порошок темно-бурого цвета с характерным запахом столовой свеклы. Одна часть сублимированного порошка свекольного сока соответствует тридцати частям свежей свеклы.

Опыт проведен в условиях вивария ВНИИ физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных (г.Боровск) на 29 поросятах-сосунах от их рождения до 56 дня (7 недель). Поросята опытной группы (14 голов) получали дополнительно к рациону предлагаемое средство по схеме, приведенной в табл.4.

Как показывают данные табл.5, анемия у поросят, не получавших средство, начинает развиваться сразу же после рождения и достигает кульминационной точки примерно к трехнедельному возрасту. Известен факт, что существует прямо пропорциональная зависимость тяжести малокровия от снижения в крови уровня гемоглобина, эритроцитов и гематокрита.

В опытной группе все изученные гематологические показатели были достоверно выше таковых в контроле. Но, если содержание гемоглобина и железа в плазме крови опытных поросят к семидневному возрасту достигло физиологического уровня, то показатели эритроцитов и гематокрита были ниже нормы (нижняя граница нормы для гемоглобина составляет 8,8 г% эритроцитов 4,6 млн/мм гематокрита 33% и плазменного железа 70-75 мкг% Эти данные свидетельствуют о наличии скрытой формы анемии у поросят опытной группы. В последующих экспериментах, по-видимому, необходимо увеличить дозу введения гемоглобиновой добавки на 20-30% И все же высокие показатели гемоглобина и плазменного железа свидетельствуют о том, что организм поросят в состоянии поддерживать уровень потребления кислорода неизменным.

Необходимо отметить повышенное содержание общего белка в крови опытных животных. Этот показатель в значительной степени связан с биосинтетическими процессами. К 56-му дню живая масса опытных поросят достигала 16±0,6 кг (в контроле 12,4±0,4 кг). При этом среднесуточный прирост живой массы в опытной группе был на 66 г больше, чем в контрольной. Эти результаты подтверждают положение о том, что предлагаемое средство являться, с одной стороны, источником незаменимых аминокислот, а с другой, благодаря "кооперативному" эффекту увеличивает усвоение питательных веществ в рационе в целом.

В этой связи важно отметить достоверное увеличение в крови гаммаглобулинов, что свидетельствует о повышении резистентности организма поросят. С этим связана более высокая сохранность поросят в опытной группе. Необходимо отметить также полное отсутствие побочных отрицательных эффектов при скармливании им средства.

Пример 2. Применение противоанемического средства для лечения и профилактики железодефицитных состояний у больных в условиях клиники.

Для проведения клинических испытаний было изготовлено противоанемическое средство со следующим соотношением компонентов, мас. гемоглобин крови сельскохозяйственных животных 30; сок свекольный сублимированный 30; аскорбиновая кислота 10; лимонная кислота 10; лактоза 20.

Испытания средства были проведены в Медицинском радиологическом научном центре РАМН (г.Обнинск) на 25 больных с выраженным синдромом дефицита железа (20 женщин и 5 мужчин) в возрасте от 36 до 54 лет. Им давали таблетки, содержащие по 063 г гемоглобина 3 раза в сутки в течение 3 недель.

Оценку эффективности средства проводили по клиническим признакам, состоянию показателей крови, содержанию сывороточного альбумина, общей железосвязывающей скорости сыворотки крови (ОЖСС). Результаты исследования приведены в табл.6.

Из приведенных в табл.6 данных видно, что во всех группах больных наблюдается достоверное увеличение (Р < 0,05) содержания гемоглобина, количества эритроцитов и сывороточного железа при одновременном снижении ОЖСС (Р < 0,01).

Поскольку основной контингент больных составляли женщины, следует учитывать, что увеличение показателей обмена железа в ходе эксперимента наблюдалось у них на фоне продолжавшихся месячных.

Дополнительное потребление больными во время эксперимента ежесуточно около 2,6 мг железа улучшило также их общее самочувствие (82%), увеличило физическую работоспособность (73%) и аппетит (62%). Следует отметить хорошую переносимость средства ни в одном случае не было зарегистрировано побочных отрицательных эффектов. Это подтверждает отсутствие в нем аллергенных высокомолекулярных соединений, низкомолекулярных потенциально токсичных веществ, а также микробиологическую чистоту продукта. Все это в целом определяет безвредность предлагаемого противоанемического средства.

Таким образом, изучение биологической ценности и безвредности противоанемического средства на основе гемоглобина в клинических условиях подтвердило его высокую эффективность в лечении и профилактике анемических состояний человека и сельскохозяйственных животных.

Приведенные выше примеры показали высокую эффективность предлагаемого противоанемического средства для лечения и профилактики железодефицитных состояний и позволяют сделать вывод о его преимуществах перед зарубежными и отечественными препаратами, а именно: полном отсутствии побочных эффектов, что позволяет использовать высокие дозы средства при тяжелых формах анемий; высокой биологической доступности железа гемоглобина (легко усвояемая двухвалентная хелатная гемовая форма); быстром и выраженном лечебном и профилактическом эффекте; препараты являются дополнительным источником незаменимых аминокислот.

Исходя из вышеперечисленных уникальных свойств средства на основе гемоглобина можно сделать вывод о перспективности его использования для лечения и профилактики железодефицитных анемий в медицинской и ветеринарной практике.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к лечению и профилактике железодефицитных состояний у человека и животных. Целью настоящего изобретения является повышение эффективности, биологической ценности и безвредности противоанемического средства по сравнению с существующими аналогичными препаратами. Это достигается введением в состав противоанемического средства железосодержащего компонента - очищенного от вредных примесей и микроорганизмов гемоглобина крови с/х животных, содержащего железо в двухвалентной форме, а также сублимационно высушенного свекольного сока, аскорбиновой и/или лимонной кислоты и простых сахаров в следующем соотношении, мас. %: гемоглобин крови сельскохозяйственных животных 20-40; сублимационно высушенный свекольный сок - 30-70; аскорбиновая или лимонная кислота 10-40; простые сахара (глюкоза, фруктоза, лактоза) 20-60. Испытание противоанемического средства для профилактики и лечения анемических состояний на людях и поросятах убедительно продемонстрировало его преимущество перед зарубежными и отечественными препаратами, а именно: полное отсутствие побочных эффектов, что позволяет использовать высокие дозы средства при тяжелых формах анемий; высокая биологическая доступность железа гемоглобина (легко усвояемая двухвалентная хелатная гемовая форма); быстрый и выраженный лечебный и профилактический эффект; средство является дополнительным источником незаменимых аминокислот. 6 табл.

Противоанемическое средство, включающее комплекс компонентов, одним из которых является железосодержащий, отличающееся тем, что в качестве железосодержащего компонента используется очищенный от вредных примесей и микроорганизмов гемоглобин крови сельскохозяйственных животных, содержащий железо в двухвалентной форме, а также сублимационно высушенный свекольный сок, аскорбиновую или лимонную кислоту и простые сахара при следующем их соотношении, мас.

Гемоглобин крови сельскохозяйственных животных 20 40
Сублимационно высушенный свекольный сок 30 70
Аскорбиновая или лимонная кислота 10 -40
Простые сахара глюкоза, фруктоза 20 60.