СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ЭНДОМЕТРИТА ПОСЛЕ КЕСАРЕВА СЕЧЕНИЯ Российский патент 1999 года по МПК A61K38/19 A61B17/42 

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству и гинекологии и может быть использовано в клинике для профилактики эндометрита после кесарева сечения у родильниц группы высокого риска по развитию гнойно-септических осложнений.

Одним из общепризнанных способов профилактики эндометрита после операции кесарева сечения является антибиотикопрофилактика до, во время или после операции, с использованием антибиотиков широкого спектра действия (В.И. Краснопольский и соавт. Кесарево сечение.- К., 1993. - 272 с.).

К недостаткам данных методов следует отнести то, что применение антибиотиков мало эффективно из-за значительного снижения концентрации препарата в очаге инфекции вследствие перифокальной воспалительной реакции в области плацентарной площадки и раны на матке, местных нарушений лимфо- и микроциркуляции, наличия сгустков крови и фибрина в полости матки. Кроме того, назначение антибиотиков еще более усугубляет иммунодефицитное состояние, наблюдаемое у родильниц вообще и тем более после операции. Также учитывая аллергические реакции на антибиотики у многих родильниц, необходимость ограничения фармакологической нагрузки на организм женщины и организм новорожденного в период грудного вскармливания, данный метод имеет свои ограничения применения.

В последнее время в профилактике гнойно-септических послеоперационных осложнений большое значение отводится иммунокоррегирующей терапии, направленной на повышение иммунорезистентности организма родильниц (Л.С. Мареева и соавт. Неспецифическая профилактика гнойно-септических осложнений после кесарева сечения и оценка ее эффективности. - Вестник Российской ассоциации акушеров-гинекологов. - 1995. N 3. - С. 3-8.). К недостаткам следует отнести то, что назначение данных препаратов требует отбора больных в соответствии с их соматическим и иммунным статусом, и не может быть применено с профилактической целью во всех случаях ведения послеоперационного периода.

Сущность изобретения состоит в том, что во время операции кесарева сечения полость матки и область швов орошают комплексом естественных цитокинов, выделенных из культуры стимулированных фитогемагглютинином мононуклеарных клеток периферической крови самой пациентки в количестве 9 мл с концентрацией белка 150-200 мкг/мл и повторно в 1 сутки послеоперационного периода в полость матки по катетеру также вводят комплекс естественных цитокинов в количестве 6 мл.

Комплекс естественных цитокинов получен в результате стимуляции фитогемагглютинином мононуклеарных клеток периферической крови in vitro. Лечебный эффект обусловлен сочетанным воздействием комбинации естественных полипиптидов в оптимальных концентрациях и соотношениях (интерлейкин 1, интерлейкин 2, интерлейкин 6, фактор некроза опухоли, гамма-интерферон).

Введение комплекса цитокинов в область швов на матке инициирует развитие первичной воспалительной реакции за счет миграции и повышения фагоцитарной активности нейтрофильных лейкоцитов и макрофагов, препятствующих распространению и ускоряющих элиминацию инфекционных агентов, способствует более быстрому формированию рубца вследствие стимуляции макрофагов и фибробластов. Кроме этого, цитокины запускают локальный цитокиновый каскад. В области плацентарной площадки кроме вышеперечисленных эффектов ускоряются процессы тромбообразования и регенерации эндометрия.

Объем комплекса естественных цитокинов 9 мл (3 мл вводятся под plica vesicouteryna (серозно-серозный ряд швов), 6 мл - в полость матки) и 6 мл в первые сутки послеоперационного периода выбран потому, что именно это количество жидкости достаточно для проведения профилактики гнойно-септических осложнений.

Способ осуществляют следующим образом: во время операции кесарева сечения в полости матки оставляют катетер, который выводят через цервикальный канал во влагалище (его фиксируют кетгутовой лигатурой к задней поверхности матки). Комплекс цитокинов в количестве 3 мл подводят в область швов на матке под серозно-серозный ряд швов, 6 мл - в полость матки по катетеру непосредственно сразу после окончания операции, и 6 мл вводят в полость матки по катетеру в 1 сутки послеоперационного периода. Катетер удаляют после введения.

Готовят комплекс естественных цитокинов за два дня до операции. Получение комплекса естественных цитокинов, которые являются супернатантом аутологичной культуры мононуклеарных клеток осуществляется следующим методом. У беременной проводят забор 20 мл венозной крови из кубитальной вены в стерильную силиконизированную пробирку, содержащую 0,5 мл гепарина (5000 ед/мл). Из полученной крови выделяют мононуклеарные клетки путем центрифугирования на градиенте плотности Фиколл-Верографина. Выделенные мононуклеарные клетки трижды отмывают раствором Версена, затем готовят взвесь клеток с концентрацией 5 • 10⁶/мл в среде 199, содержащей гентамицин (80 мкг/мл). К полученной взвеси мононуклеарных клеток добавляют фитогемагглютинин из расчета 20 мкг/мл, инкубируют 3 часа в термостате при температуре 37^oC. Трижды отмывают клеточную взвесь раствором Версена, добавляют до первоначального объема среду 199 и инкубируют в термостате в течение 20 часов при температуре 37^oC. Взвесь мононуклеарных клеток центрифугируют 10 минут при скорости 1500 оборотов в минуту. Полученные супернатанты фильтруют через стерильные фильтры synpore или millipore 0.22. Биологическую активность супернатантов оценивают в тесте фагоцитарной активности нейтрофилов. Количество общего белка в супернатанте определяют по Лоури спектрофотометрическим методом. Супернатант, содержащий комплекс эндогенных цитокинов, расфасовывают в стерильные флаконы и хранят в морозильном отделении холодильника при температуре минус 20^oC.

Предложенный способ профилактики эндометрита кесарева сечения с использованием комплекса естественных цитокинов имеет ряд существенных преимуществ. Во-первых, комплекс цитокинов получают из крови пациентки и аллергической реакции на применение комплекса цитокинов в наших работах не было и в опубликованной литературе такие данные не встречались. Во-вторых, методика достаточно проста и легко выполнима. В-третьих, не требует дополнительного введения антибактериальных препаратов с профилактической целью.

Пример 1. Пациентка П. находилась в первом родильном отделении городской клинической больницы с 21 февраля по 21 марта по поводу: Роды 2 срочные оперативные в головном предлежании живой девочкой. О.А.Г.А. (Эрозия шейки матки, хронический аднексит). Несостоятельность рубца на матке после операции кесарева сечения. Лапаротомия. Кесарево сечение в нижнем сегменте.

Из анамнеза: менструации с 14 лет, установились сразу, по 3-5 дней через 28 дней регулярные, безболезненные. Хронический аднексит 4 года, эрозия шейки матки с 1993 года - не лечилась.

В отделении обследована: Общий анализ крови от 22.02 Эр. 4,1•10 Нв 121 г\ л Ц. п. 0,86 Л. 11,7•10 э-1 п-2 с-85 л-9 м-3 СОЕ 26 Общий анализ мочи от 22. 02 в норме. Биохимия крови в пределах нормы.

11 марта 1996 года в плановом порядке произведено кесарево сечение. Операция прошла без технических особенностей, кровопотеря составила 500 мл. Во время операции комплекс цитокинов подводился в количестве 3 мл под серозно-серозный ряд швов, 6 мл по катетеру в полость матки непосредственно по окончании операции и 6 мл в первые сутки послеоперационного периода. В послеоперационном периоде получала утеротоническую, гемостимулирующую, инфузионную терапии. В первые сутки послеоперационного периода отмечался подъем температуры до 37,0 - однократно. Послеоперационный период протекал без осложнений. Швы сняты на 7 сутки - заживление первичным натяжением. УЗИ на 8 сутки - матка 88•53•86 мм гомогенной эхоструктуры, полость щелевидная, область швов без особенностей. Пациентка выписана на 9 сутки в удовлетворительном состоянии.

Профилактика гнойно-септических осложнений была проведена у 31 пациентки группы высокого риска по развитию гнойно-септических заболеваний. Контрольную группу составили 10 женщин, основным компонентом профилактики гнойно-септических осложнений которых, явились: антибактериальная и иммуностимулирующая терапия. Основную группу составили: 21 пациентка, которым местно применялся комплекс естественных цитокинов, выделенных из периферической крови самой больной, во время операции кесарева сечения и в первые сутки послеоперационного периода по данной методике.

Контроль за эффективностью лечения осуществлялся на основании следующих параметров: клинических наблюдений, общих анализов крови, биохимических анализов крови, иммунного статуса крови, данных УЗИ.

При анализе результатов отмечено, послеоперационный период протекал благоприятно у пациенток основной группы: температурная реакция отмечалась только в 1 или 1 и 2 сутки послеоперационного периода, в это же время в контрольной группе температурная реакция отмечалась более длительно (до 5-6 суток), максимальные цифры в основной группе - 37,5 в контрольной - 38,8. В основной группе отмечалось более гладкое течение послеоперационного периода, более выраженная инволюция матки, швы с передней брюшной стенки сняты на 1-1,5 суток раньше. По данным УЗИ - в основной группе быстрее протекала инволюция матки, тогда как в контрольной группе в области швов на матке отмечалась гиперэхогенность, а также в миометрии - участки гипоэхогености. В 8 процентах случаев у пациенток контрольной группы послеродовый период осложнился эндометритом. Исследование иммунного статуса проведено у 11 пациенток основной и 10 контрольной групп. Отмечено иммунодефицитное состояние, проявляющееся снижением общего количества Т-лимфоцитов, дисбалансом субпопуляций Т-хелперов и Т-супрессоров, снижением иммунорегуляторного индекса. Показатели гуморального звена иммунитета и фагоцитарной активности нейтрофилов оставались в пределах возрастной нормы. После лечения у пациенток основной группы выявлена тенденция к повышению общего количества Т-лимфоцитов с нормализацией субпопуляций Т-хелперов и Т-супрессоров, повышение фагоцитарной активности нейтрофилов.

Таким образом, проведенные исследования доказали высокую эффективность местного применения комплекса эндогенных цитокинов при профилактике гнойно-септических осложнений во время операции кесарева сечения.

Использование предлагаемого способа профилактики гнойно-септических осложнений во время операции кесарева сечения у пациенток из группы риска по развитию гнойно-септических заболеваний обеспечивает следующие преимущества:
1. Сокращается время пребывания пациенток в стационаре.

2. Повышается эффективность профилактики (клинические проявления, данные лабораторных исследований и УЗИ значительно лучше).

3. Снижается фармакологическая и аллергическая нагрузка на организм больной, так как используется лекарственный препарат, полученный из крови самой пациентки.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии. Предложено местно во время операции кесарева сечения использовать комплекс, естественных цитокинов, выделенных из культуры стимулированных фитогемагглютинином мононуклеарных клеток периферической крови пациентки с концентрацией белка 150-200 мкг/мл в количестве 9 мл во время операции на область швов и в полость матки и 6 мл в первые сутки после операции в полость матки. Способ позволяет достигнуть более быстрой репарации тканей в области рубца на матке, более гладкого течения послеоперационного периода, сокращения времени пребывания в стационаре, снижения фармакологической нагрузки на организм пациентки, повышения эффективности профилактики гнойно-септических осложнений после кесарева сечения.

Способ профилактики эндометрита после кесарева сечения, включающий местное применение лекарственного препарата, отличающийся тем, что в качестве лекарственного препарата используют комплекс естественных цитокинов, выделенных из культуры стимулированных фитогемагглютинином мононуклеарных клеток периферической крови самой пациентки с концентрацией белка 150-200 мкг/мл в количестве 9 мл во время операции на область швов и в полость матки и 6 мл в первые сутки послеоперационного периода.