СПОСОБ ТЕРАПИИ ПАТОЛОГИИ ШЕЙКИ МАТКИ ВИРУСНОЙ ЭТИОЛОГИИ Российский патент 1999 года по МПК A61K38/19 

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству и гинекологии, и может быть использовано в клинике для лечения больных с патологией шейки матки вирусной этиологии в сочетании с лазерной деструкцией.

Одним из общепризнанных способов лечения патологии шейки матки вирусной этиологии является лазерная деструкция патологически измененных участков шейки матки CO₂ лазером при выходной мощности 12 - 16 Вт, глубиной от 0,4 до 0,8 см в сочетании с последующим назначением противовирусных препаратов, иммуномодуляторов, подводимых к шейке матки в виде тампонов с 7 сутками послеоперационного периода (Пинегин Б.В., Минкина Г.Н., Манухин И.П., Сапрыкина О. А. Влияние глюкозаминилмуранилдипептида на иммунный статус и клиническое состояние больных с поражением шейки матки вирусом папилломы человека. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1.993. N 2. стр. 168- 169); озонотерапии до и после деструкции в виде местных аппликаций в течение 7-14 дней и внутривенного капельного введения озонированного физиологического раствора от 3 до 8 раз (Джибладзе М. А. Комплексный метод лечения кандиломатоза у женщин с использованием лазерного излучения и озонотерапии. - Автореф. на соискание степени канд. мед. наук.-1994).

Недостатками данных методов являются длительная эпителизация раневой поверхности, применение фармакологических препаратов, обладающих побочными эффектами, низкая эффективность, рецидив наступает в 10-14,3% случаев.

Сущность способа терапии патологии шейки матки вирусной этиологии состоит в том, что больной после лазерной деструкции патологически измененных участков к шейке матки подводится тампон с комплексом эндогенных цитокинов в количестве 3 мл с концентрацией белка 150-200 мкг/мл на 6 часов. Повторно тампон с комплексом эндогенных цитокинов подводится после отторжения струпа на 6 часов ежедневно курсом 5 процедур.

Комплекс эндогенных цитокинов получен в результате стимуляции фитогемагглютинином мононуклеарных клеток периферической крови in vitro. Лечебный эффект обусловлен сочетанным воздействием комбинации естественных полипиптидов в оптимальных концентрациях и соотношениях (интерлейкин 1, интерлейкин 2, интерлейкин 6, фактор некроза опухоли).

Цитокины выполняют двойственную функцию. С одной стороны, они активизируют нейтрофильные лейкоциты и макрофаги в месте их воздействия, инициируют миграцию клеток крови, стимулируют кислородный метаболизм и фагоцитарную активность, что ускоряет элиминацию инфекта и наступление фазы регенерации. С другой стороны, цитокины запускают локальный цитокиновый каскад. Вышеперечисленные эффекты комплекса эндогенных цитокинов в сочетании с лазерной деструкцией патологически измененных участков шейки матки обуславливает клинический эффект у больных с вирусными поражениями.

Тампон представляет из себя марлевый шарик диаметром около 1,5 сантиметров, пропитанный комплексом эндогенных цитокинов.

Объем комплекса эндогенных цитокинов 3 мл выбран потому, что именно это количество жидкости необходимо и достаточно для проведения одной процедуры обработки шейки матки.

Продолжительность курса 6 процедур (1 - сразу же после лазерной деструкции и 5 после отторжения струпа) выбрана потому, что к 8 суткам происходит полное закрытие раневой поверхности многослойным плоским эпителием.

Способ осуществляется следующим образом. За 2 дня до предполагаемой лазерной деструкции шейки матки готовят комплекс эндогенных цитокинов. Получение комплекса эндогенных цитокинов, которые являются супернатантом аутологичной культуры мононуклеарных клеток осуществляется следующим методом. У больной проводят забор 20 мл венозной крови из кубитальной вены в стерильную силиконизированную пробирку, содержащую 0,5 мл гепарина (5000 ед/мл). Из полученной крови выделяют мононуклеарные клетки путем центрифугирования на градиенте плотности Фиколл-Верографина. Выделенные мононуклеарные клетки трижды отмывают раствором Версена, затем готовят взвесь клеток с концентрацией 5• 10⁶/мл в среде 199, содержащей гентамицин (80 мкг/мл). К полученной взвеси мононуклеарных клеток добавляют фитогемагглютинин из расчета 20 мкг/мл, инкубируют 3 часа в термостате при температуре 37^oC. Трижды отмывают клеточную взвесь раствором Версена, добавляют до первоначального объема среду 199 и инкубируют в термостате в течение 20 часов при температуре 37^oC. Взвесь мононуклеарных клеток центрифугируют 10 минут при скорости 1500 оборотов в минуту. Полученные супернатанты фильтруют через стерильные фильтры synpore или millipore 0.22. Биологическую активность супернатантов оценивают в тесте фагоцитарной активности нейтрофилов. Количество общего белка в супернатанте определяют по Лоури спектрофотометрическим методом. Супернатант, содержащий комплекс эндогенных цитокинов, расфасовывают в стерильные флаконы и хранят в морозильном отделении холодильника при температуре минус 20^oC.

На 5-7 день менструального цикла больной проводится лазерная деструкция патологически измененной шейки матки CO₂-лазером при выходной мощности 12 Вт, глубиной от 0,4 до 0,8 см в зависимости от степени поражения, после которой к шейке матки подводится тампон с комплексом эндогенных цитокинов в количестве 3 мл с концентрацией белка 150-200 мкг/мл на 6 часов. Повторно тампон с комплексом эндогенных цитокинов подводится после отторжения струпа, то есть на 3-4 сутки на 6 часов ежедневно курсом 5 процедур.

Пример. Больная С. , 20 лет находилась на диспансерном учете в женской консультации 1 клинической больницы г. Смоленска с 2.03.95 когда при осмотре гинеколога была обнаружена эрозия шейки матки. Из анамнеза: Менструации с 14 лет по 7 дней, через 30-32 дня, умеренные, безболезненные. Родов, абортов не было. Половая жизнь с 18 лет, регулярная.

Из перенесенных заболеваний отмечает частые ОРВИ.

При влагалищном осмотре выявлена эрозия шейки матки.

Результаты анализов : RW, ВИЧ - отрицательны. Общий анализ крови: Эр- 4,43•10 г/л, Нв 137 г/л, Ц.П-0,93, L 5,8•10 г/л, Э-1, П-4, С-65, Л-27, М-3. Мазки из влагалища: хламидии, гарднерелы не обнаружены, флора соответствует 2 степени чистоты влагалищного мазка. Посев из влагалища - нет роста.

Расширенная кольпоскопия: кандилома шейки матки, папиллярная пунктация, признаки вирусного поражения шейки матки. Взята биопсия.

28.11.95 г. У больной была взята кровь для выделения комплекса эндогенных цитокинов. Приготовлено 6 порций препарата.

30.11.95 г. Произведена лазерная деструкция патологически измененной шейки матки CO₂-лазером при выходной мощности лазерного излучения 12 Вт, глубиной в области цервикального канала 0,8 см. После чего к шейке матки подводился тампон с комплексом эндогенных цитокинов в количестве 3 мл с концентрацией белка 150-200 мкг/мл на 6 часов. Отторжение струпа отмечено на 4 сутки, в это же время наблюдалась активная краевая эпителизация. После отторжения струпа к шейке матки вновь подводился тампон с комплексом эндогенных цитокинов на 6 часов ежедневно курсом 5 процедур. На 8-й день после лазерной деструкции отмечалось "закрытие" раневой поверхности истонченным многослойным плоским эпителием. Полная эпителизация наступила на 16 день.

При расширенной кольпоскопии через 1 месяц 22 дня: весь эктоцервикс покрыт многослойным плоским эпителием.

Всего было обследовано и пролечено 57 пациенток с поражениями шейки матки вирусной этиологии. Контрольную группу составили 25 женщин, основным компонентом лечения которых, явились лазерная деструкция шейки матки и традиционная противовирусная терапия. Основную группу составили 32 пациентки, которым наряду с лазерной деструкцией шейки матки местно применялись тампоны с комплексом эндогенных цитокинов, выделенных из периферической крови самой больной.

Возраст пациенток основной и контрольной групп колебался от 20 до 46 лет.

При расширенной кольпоскопии отмечались признаки атипический эпидермизации: атипический эпителий со структурой мозаики, папиллярной мозаики, пунктации.

При гистологическом исследовании выявлялись признаки пара- и гиперкератоза, лимфоидной инфильтрации, койлоцитоза, то есть данные, характерные вирусному поражению.

Всем пациенткам на 5-7 сутки менструального цикла произведена лазерная деструкция патологически измененной шейки матки CO₂-лазером при выходной мощности 12 Вт, глубиной от 0,4 до 0,8 см в зависимости от степени поражения. Пациенткам основной группы после лазерной деструкции к шейке матки подводился тампон с комплексом эндогенных цитокинов в количестве 3 мл с концентрацией белка 150-200 мкг/мл на 6 часов. Повторно тампон с комплексом эндогенных цитокинов подводился после отторжения струпа, то есть на 3-4 день на 6 часов ежедневно курсом 5 процедур.

Контроль за эффективностью лечения осуществлялся на основании следующих параметров: времени отторжения струпа, начала и окончания эпителизации раневой поверхности по данным кольпоскопии и цитологии, иммунологического, микробиологического и гистологического методов исследований.

При анализе результатов отмечено, что отторжение струпа у пациенток основной группы происходило на 3-4 сутки, в это же время определялась активная краевая эпителизация, полная эпителизация наступала на 16-18, а при обширных поражениях на 21-22 сутки с момента оперативного вмешательства. В контрольной группе отторжение струпа происходило на 6-7, а полная эпителизация раневой поверхности - на 28-30 сутки.

Исследование иммунного статуса проведено у 15 пациенток основной и 14 контрольной групп. Отмечено иммунодефицитное состояние, проявляющееся снижением общего количества Т-лимфоцитов, дисбалансом субпопуляций Т-хелперов и Т-супрессоров, снижением иммунорегуляторного индекса. Показатели гуморального звена иммунитета и фагоцитарной активности нейтрофилов оставались в пределах возрастной нормы. После лечения у пациенток основной группы выявлена тенденция к повышению общего количества. Т-лимфоцитов с нормализацией субпопуляций Т-хелперов и Т-супрессоров, повышение фагоцитарной активности нейтрофилов.

При комплексном обследовании через 1,5 месяца у пациенток основной группы данных за вирусное поражения шейки матки не выявлено. В контрольной группе - у 4 (16%) отмечен рецидив заболевания.

Таким образом, проведенные исследования доказали высокую эффективность местного применения комплекса эндогенных цитокинов при лечении патологии шейки матки вирусной этиологии.

Использование предлагаемого способа терапии патологии шейки матки вирусной этиологии обеспечивает следующие преимущества:
1. Сокращается время отторжения струпа и сроки полной эпителизации раневого дефекта после лазерной деструкции.

2. Повышается эффективность лечения.

3. Снижается фармакологическая и аллергическая нагрузка на организм больной, так как используется лекарственный препарат, полученный от самой пациентки.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и касается лечения патологии шейки матки вирусной этиологии. Предложено местно подводить к шейке матки комплекс эндогенных аутоцитокинов в количестве 3 мл с концентрацией белка 150 - 200 мкг/мл ежедневно курсом 5 процедур после лазерной деструкции патологически измененных участков. Способ позволяет сократить время отторжения струпа, сроки полной эпителизации раневого дефекта, повысить эффективность лечения, снизить фармакологическую и аллергическую нагрузки на организм.

Способ терапии патологии шейки матки вирусной этиологии, включающий лазерную деструкцию патологически измененных участков шейки матки и местное применение лекарственного препарата, отличающийся тем, что в качестве лекарственного препарата используют комплекс естественных аутоцитокинов, выделенных из культуры стимулированных фитогемагглютинином мононуклеарных клеток периферической крови самой больной, в количестве 3 мл с концентрацией белка 150 - 200 мкг/мл, применяемых местно сразу же после лазерной деструкции и после отторжения струпа ежедневно курсом 5 процедур.