СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ИММУНОДЕФИЦИТА У КОРОВ В СУХОСТОЙНЫЙ И ПОСЛЕРОДОВОЙ ПЕРИОДЫ Российский патент 2002 года по МПК A61K33/38 A61K35/78 

Изобретение относится к ветеринарной медицине.

Известны модуляторы иммунной системы человека (см. ЕПР, з.0042064, кл. А 61 К 35/14, 1981 г.), под которыми принимаются любые вещества, способные вызывать прямую или косвенную реакцию животного или человека, части организма или вещества, взятого из организма, на антигены, к которым организм предварительно был сенсибилизирован, или такая реакция присуща функции иммунной системы человека или животного. Модуляторы обладают широким действием на всю иммунную систему. Эти модуляторы выделены из диализата экстракта лейкоцитов. Известно использование иммуностимулирующих веществ на основе растительного сырья, например, эхинацеи (Bauer R., Wagner H. Echinacea species as potential immunostimulatori drugs. In: Wagner H., Farnsworth N.R. (eds.), economic and Medicinal Plant Research. Vol. 5. New York: Akademic Press, 1991, pp.253 - 351 - прототип) для профилактики иммунодефицита организма.

Недостатком известных технических решений является ограничение действия. Кроме того, известные иммуностимулирующие препараты получают синтетическим путем. Способ их приготовления трудоемкий и экономически не выгоден.

Техническим решением задачи является повышение эффективности профилактики иммунодефицита за счет использования растительного сырья.

Задача достигается способом профилактики иммунодефицита у коров в сухостойный и послеродовой периоды, включающем использование иммуностимулирующего препарата на основе растительного сырья, например эхинацеи, отличающимся тем, что в сухостойный период коровам дают в качестве иммуностимулятора водно-спиртовую настойку эхинацеи с ионами серебра, суточная доза которой 20 - 25 мл, из расчета, на 500 кг массы животного, а в послеродовой период для усиления действия иммуностимулятора коровам дают водно-спиртовую настойку из травы эхинацеи, корневища солодки и девясила с ионами серебра, при следующем соотношении растительного сырья - 2:1:1, суточную дозу 20-25 мл, из расчета, на 500 кг живой массы.

Спиртовые настойки из эхинацеи и эхинацеи, солодки и девясила приготавливают на 70% этиловом спирте, разбавленном водой насыщенной ионами серебра, до 30% спиртового раствора.

Новизна заявленного предложения обусловлена тем, что за счет ступенчатого приема фитопрепаратов во время сухостойного периода, когда организм животного мобилизирует все силы для сохранения потомства, и послеродовой период, когда организм особенно предрасположен к различным гинекологическим заболеваниям, устраняется иммунодефицит в сухостойный период и усиливается иммунитет в послеродовой период. Таким образом, такая последовательность приема фитопрепаратов обеспечивает эффективность профилактики иммунодефицита. Иммуностимулятор на основе эхинацеи солодки и девясила с ионами серебра не дает побочных эффектов, прост в технологии получения и способе применения, в лечебно-профилактических дозах не токсичен. Препараты приготовлены из недефицитного, экологически чистого сырья и экономически выгодны. Эхинацея пурпурная, солодка и девясил содержат разные биологически активные вещества, сбалансированные самой природой (эхинацин, оксикоречные кислоты - цикориевая кислота, глицеризиновая кислота, кофеиновая кислота, гликозиды). .Данные вещества играют большую роль в проявлении иммуностимулирующих свойств растения. Биологически активные вещества используемого сырья оказывают стимулирующее действие на лимфатическую систему, повышая активность Т-, В-лимфоцитов, которые являются важными посредниками в иммунной системе организма. Способствуют выработке эритроцитов в организме животных, гемоглобина, общего белка и других показателей. Кроме того, применение препарата у коров в сухостойный период, обеспечило устранение иммунодефицита как в предродовой, так и послеродовой период, что оказывало непосредственное влияние на сохранность потомства, а также на физиологическое состояние животных в послеродовой период. У опытной группы потреблявшей препарат не наблюдались эндометриты, маститы, отмечалось повышение воспроизводительной способности, т.е. своевременное осеменение коров. Следовательно, фитопрепарат, по-видимому, оказывает положительное действие на выработку половых гормонов, способствующих своевременному созреванию яйцеклеток. Так как эхинацея обладает более выраженным иммуностимулирующим действием и при длительном применении (2-месяца) и повторных курсах происходит привыкание организма, эффект действия снижается. Поэтому в послеродовой период для повышения иммунитета используют сбор, содержащий эхинацею пурпурную в два раза больше, чем солодку и девясил, которые активизируют механизм действия самой эхинацеи. Кроме того, солодка и девясил обладают противовоспалительным, противомикробным, анальгезирующим действием и повышают функции половых желез.

Способ профилактики иммунодефицита у коров в сухостойный и послеродовой периоды осуществляется следующим образом: коровам в сухостойный период дают водно-спиртовую настойку эхинацеи с ионами серебра из расчета 20-25 мл на 500 кг массы животного в сутки. Для удобства применения рекомендуется растворить препарат в 200 мл воды.

В послеродовой период животным дают водно-спиртовую настойку сбора травы эхинацеи, корневища солодки и девясила также с ионами серебра 20-25 мл на 500 кг массы животного один раз в сутки.

Суточную дозу препарата при необходимости можно увеличить вдвое, втрое при этом препараты не оказывают токсического действия.

Был проведен основной эксперимент в условиях производства на маточном поголовье крупного рогатого скота. Длительность применения препарата от 14 до 60 дней с обязательным перерывом 10 дней после 25 - 35 дневного курса, в зависимости от иммунного статуса организма животного (в среднем 14 дней). Курсы применения фитопрепарата желательно проводить в осенне-зимний и зимне-весенние периоды, когда организм животного наиболее ослаблен и предрасположен к различным инфекционным заболеваниям. Применяемый препарат в лечебных дозах нетоксичен.

Механизм действия растительного сырья
Эхинацея пурпурная (Echinacea purpurea) в своем составе содержит вещество эхинацин, которое стимулирует организм на выработку своего собственного интерферона - важного белка, блокирующего деление РНК- и ДНК-содержащих вирусов. Стимулирует активность Т-клеток, являющихся важным посредником в иммунной системе организма. Стимулирует кору надпочечников, повышая обменные процессы, при этом не вызывает его истощения. Также обладает антибактериальным, антифунгицидным и антивирусным свойствами. Препарат получил свое название "аргэхин" из двух частей: латинского "Argentum" - серебро и названия травы - эхинацея.

Девясил высокий (Inula helenium) содержит в своем составе: эфирное масло, состоящее из геленина, алантола проазулена и смеси сесквитерпеновых лактонов, кроме того, найдены витамин Е, сапонины, смолы, камеди, слизи, незначительное количество алкалоидов, а также полисахариды, главным образом инулин, псевдоинулин, инулицин, обладающие следующими свойствами:
противомикробными, противовоспалительными, антигипоксантными, мочегонными, отхаркивающими, секретолитическими, анальгезирующими (болеутоляющими), местноанестезирующими, обволакивающими, вяжущими, желчегонными, иммуностимулирующими, общеукрепляющими, повышают секрецию желудочного сока, регулируют солевой обмен.

Солодка голая (Clycyrrhiza glabral) содержит в своем составе глицирризин, глицирризиновую кислоту, флавоновые гликозиды, а также обнаружены витамины (в частности аскорбиновая кислота) и обладает теми же свойствами, что и девясил, а также: спазмолитическим, сосудорасширяющим, противоатеросклеротическим, бронхолитическим, слабительным, тонизирующим нервную систему, повышает функции половых желез, десенсибилизирующим и противозудным действием.

Пример конкретного осуществления способа профилактики иммунодефицита у коров в сухостойный и послеродовой периоды
Предварительно готовят настойку эхинацеи, сырье закупали на предприятии северокавказского ЗОС ВИЛАР. Высушенное сырье измельчали, стебли, листья - до 3 мм цветки - до 5 мм. Затем готовят водно-спиртовую настойку травы. Для этого берут 1 часть сырья, добавляют 5 частей 70% этилового спирта (т.е. в разведении 1: 5), перемешивают, помещают в посуду из темного стекла, плотно закрывают и помещают в термостат при 37^oС на 10 дней, периодически перемешивают. Затем процеживали через бактериальный фильтр, предварительно хорошо отжав сырье. Полученную настойку доводят до 30% концентрации водой, насыщенной ионами серебра, после чего перемешивали, настаивали в течение суток для лучшей диффузии. Таким образом, препарат готов для внутреннего применения и в сухостойный период коровам дают в дозе 20-25 мл. При применении дозы ниже оптимальной 20 мл препарат не проявлял иммуностимулирующего эффекта. Суточную дозу препаратов при необходимости можно увеличить вдвое, втрое при этом препараты не оказывают токсического действия.

Для приготовления препарата, который использовали в послеродовой период на основе сбора травы эхинацеи, корневища солодки и девясила, сырье закупали на предприятии северокавказского ЗОС ВИЛАР. Высушенное сырье измельчали, корневища, стебли, листья - до 3 мм, цветки - до 5 мм, что смешивали в определенных массовых соотношениях, указанных выше в рецепте. Затем готовили водно-спиртовую настойку сбора. Для этого брали 1 часть сырья, добавляли 5 частей 70 этилового спирта (т.е. в разведении 1:5), перемешивали, помещали в посуду из темного стекла, плотно закрывали и помещали в термостат при 37^oС на 10 дней, периодически перемешивали. Затем процеживали через бактериальный фильтр, предварительно хорошо отжав сырье. Полученную настойку доводили до 30% концентрации водой, насыщенной ионами серебра, после чего перемешивали, настаивали в течение суток для лучшей диффузии. Таким образом, препарат готов для внутреннего применения в послеродовой период из расчета 20-25 мг на 500 кг массы животного.

Предварительно для определения дозировки испытание проводили на белых мышах. Был разработан способ применения препарата на белых мышах из расчета массы животного - суточная доза препарата, применяемая вовнутрь. На 20 грамм массы мыши оптимальной дозой является 0,0008 мл препарата. Для удобства введения разводили 1 мл водно-спиртового препарата в 500 мл воды. При этом 1 мл полученного раствора содержал в себе 0,002 мл препарата. Для введения 0,0008 мл препарата задавали 0,4 мл раствора вовнутрь.

Был проведен основной эксперимент в условиях производства на маточном поголовье крупного рогатого скота. Длительность применения препарата от 14 до 60 дней с обязательным перерывом 10 дней после 25-35 дневного курса, в зависимости от иммунного статуса организма животного (в среднем 14 дней). Курсы применения фитопрепарата желательно проводить в осенне-зимний и зимне-весенние периоды, когда организм животного наиболее ослаблен и предрасположен к различным инфекционным заболеваниям. Применяемый препарат в лечебных дозах нетоксичен. При применении дозы ниже оптимальной 20 мл препарат не проявлял иммуностимулирующего эффекта. Суточную дозу препаратов при необходимости можно увеличить вдвое, втрое, при этом препараты не оказывают токсического действия.

Коровам в сухостойный период дают водно-спиртовую настойку эхинацеи с ионами серебра из расчета 20-25 мл на 500 кг массы животного в сутки. Для удобства применения препарата рекомендуется растворить препарат в 200 мл воды.

В послеродовой период животным дают водно-спиртовую настойку сбора травы эхинацеи, корневища солодки и девясила, также с ионами серебра 20-25 мл на 500 кг массы животного один раз в сутки.

Результаты исследования применения водно-спиртового сбора на коровах
Для изучения иммунобиологических свойств, подбора дозы препаратов проводили опыты на коровах. Были подобраны группы животных: контрольная, опытная 1, получавшая настойку эхинацеи пурпурной, опытная 2 - фитосбор. При этом проводили биохимические, гематологические и некоторые иммунологические исследования.

Морфологические и биохимические показатели крови коров
Морфологические показатели имеют важное значение в диагностике и профилактике болезней сельскохозяйственных животных. По гематологическим показателям в той или иной степени можно судить о гомеостазе внутренней среды организма. При нарушении соотношений морфологических показателей крови (см. таблицу) наблюдалось снижение естественной резистентности организма животных.

Анализируя данные таблицы видно, что у животных, получавших настойку эхинацеи пурпурной (опыт 1), наблюдалось повышение количества эритроцитов на 15,3%, а при применении сбора (опыт 2) наблюдалось повышение количества эритроцитов на 17,3% по отношению к контрольной группе; лейкоцитов (опыт 1) - на 14,93%, а во второй группе - на 15,5%. Однако наблюдалось снижение лимфоцитов в первой опытной группе на - 13,9%, а во второй опытной группе на 14,9%, за счет увеличения процента сегментоядерных нейтрофилов, что является основным показателем повышения уровня фагоцитарной активности крови у исследуемых животных.

При биохимических исследованиях сыворотки крови коров были получены следующие данные: общий белок у контрольных животных составил 4,6%, у опытной группы 1 - на 19,9%, у второй опытной - на 28,3% данный показатель был выше контрольной; содержание глюкозы в крови у контрольной группы составило 80,5 мг/%, в первой опытной группе составил 87,7 мг/%, что на 8,9% выше контрольной, у второй опытной группы - 93,9 мг/%, на 17% выше контрольной; содержание мочевины в контроле составило 30,5 мг/%, у первой опытной 20,8 мг/%, что на 32% ниже относительно контроля, у второй опытной - 16,5 мг/%, т.е. на 45,9% ниже относительно контроля; содержание холестерина у всех групп было примерно на одинаковом уровне и составил 53,1 мг/%; из полученных результатов можно сделать вывод: применение настойки эхинацеи пурпурной - "аргэхин" и сбора - "содэхин" стимулирует обменные процессы в организме и повышает естественную резистентность животных.

Иммунологические показатели крови
Процент фагоцитоза у контрольных животных - фагоцитировало 75% нейтрофилов, у 1 и 2 опытной - 85%, что на 10% выше контрольной группы; количество активных фагоцитов в контрольной группе составило 1,41, а у опытной 1 - 2,91 на 206,4% больше, чем в контроле, а у опытной 2 - 3,9 на 276% больше, чем в контроле. Процент переваримости составил 79% у контрольной группы, 82% - у опытной 1, что соответственно на 3,8% выше. 84% - у опытной 2, что соответственно на 6,3% выше контрольной группы.

Фагоцитарное число у контрольных животных было 1,8, у первой опытной - 2,8, что на 55,5% выше контрольной, у второй опытной - 3,4, что на 88,9% выше.

При определении содержания Т- лимфоцитов наблюдалось увеличение в первой опытной группе на 68%, во второй опытной группе - на 124%, выше по отношению к контрольной. Количество В-лимфоцитов увеличилось в первой опытной группе на 84,7%, а во второй опытной группе на 85,7%.

Исходя из результатов исследований можно сделать вывод, что применение настойки "аргэхин" и водно-спиртового сбора "содэхин" оказывает стимулирующее действие на лимфатическую систему, повышая тем самым активность Т-, В-лимфоцитов, которые являются важными посредниками в иммунной системе организма. Препараты способствуют выработке гемоглобина, общего белка и других показателей крови организма животных.

Изобретение относится к ветеринарной медицине. Для повышения эффективности профилактики иммунодефицита коровам давали в сухостойный период водно-спиртовую настойку эхинацеи с ионами серебра, а в послеродовой период - водно-спиртовую настойку эхинацеи, солодки, девясила с ионами серебра. Способ обеспечивает повышение активности Т-, В-лимфоцитов и способствует выработке эритроцитов, гемоглобина, общего белка и повышению других показателей крови организма животных. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

1. Способ профилактики иммунодефицита у коров в сухостойный и послеродовой периоды, включающий использование иммуностимулирующего препарата на основе растительного сырья, например, эхинацеи, отличающийся тем, что в сухостойный период коровам дают в качестве иммуностимулятора водно-спиртовую настойку эхинацеи с ионами серебра, суточная доза которой 20-25 мл из расчета на 500 кг массы животного, а в послеродовой период, для усиления действия иммуностимулятора, коровам дают водно-спиртовую настойку из травы эхинацеи, корневища солодки и девясила с ионами серебра при следующем соотношении растительного сырья - 2: 1: 1 в суточной дозе 20-25 мл, из расчета на 500 кг живой массы.

2 Способ по п. 1, отличающийся тем, что спиртовые настойки из эхинацеи и эхинацеи, солодки и девясила приготавливают на 70% этиловом спирте, разбавляют водой, насыщенной ионами серебра до 30% спиртового раствора.