СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА ИЗ СЫРЬЯ ПАНТОВОГО ОЛЕНЕВОДСТВА Российский патент 2004 года по МПК A61K35/32 A61P3/00 A61P9/12 A61P37/04 

Описание патента на изобретение RU2223106C2

Изобретение относится к переработке оленеводческой продукции, в частности к способу получения биологически активного экстракта из консервированных хвостов пантовых оленей.

Известен способ получения биологически активного вещества (велкорнина) путем многократного экстрагирования измельченных пантов подкисленным этиловым спиртом при температуре его кипения (см. патент РФ 2008906, МКИ А 61 К 35/32).

Однако высокая концентрация этилового спирта и температура (70-75oС) способствуют денатурированию большой части белков, а в том числе и белковой части гормонов и ферментов, снижая биологическую активность экстракта.

Известен способ получения биологически активного препарата (рантарина), включающий экстракцию пантов северного оленя 40%-ным раствором этилового спирта. Недостатком данного способа является то, что низкое содержание этилового спирта не обеспечивает полной экстракции липидной фракции (а.с. 355830; А 61 К 17/00).

Известен способ получения биологически активного вещества (пантокрина) путем измельчения (до величины частиц 0,5-2 мм) и экстракции пантов (марала, изюбра, оленя пятнистого) после удаления кожного покрова 50%-ной уксусной кислотой в течение 6 суток (см. В.Н.Иванов, М.П.Сошнянина, Панты и пантокрин, Чита, 1991 - прототип).

Однако, как следует из многочисленных исследований (см. кн. Пантовое оленеводство, В. Н. Егерь, Н.Г.Деев, М.: Колос, 1994, с.34, кн. Пантокрин, Сборник научных трудов, Горно-Алтайск, 1969, с.27), из панта при его экстракции подкисленным спиртом в раствор переходит лишь 3% его массы. Таким образом, известные методы экстрагирования пантов не обеспечивают полного выделения ценных веществ.

Хвосты пантовых оленей как ценный продукт пантового оленеводства характеризуется наличием в хвостовой железе биологически активных веществ.

Необходима разработка способа получения биологически активного вещества, позволяющего рационально использовать побочный продукт пантового оленеводства (хвосты) и интенсифицировать процесс.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе получения биологически активного вещества из сырья пантового оленеводства, включающем измельчение сырья, его экстракцию этиловым спиртом и подкисление экстракта уксусной кислотой в качестве сырья используют консервированные хвосты, а измельчение проводят до частиц 150-400 мкм, при этом хвосты экстрагируют вначале 70%-ным этиловым спиртом в течение 72 часов при соотношении спирт: сырье 6:1, далее экстракт сливают, а оставшуюся массу заливают 60%-ным спиртом на 48 часов при соотношении спирт:сырье 4:1, на третьем этапе оставшуюся после удаления экстракта массу заливают 50% этиловым спиртом в соотношении спирт: сырье 2:1 и экстрагируют 24 часа. После чего экстракты со всех трех этапов объединяют и подкисляют уксусной кислотой до рН 4,7, вымораживают при температуре минус 15-20oС и фильтруют.

Сущность способа заключается в том, что хвостовые железы по своей структуре представляют зернистую, нежную массу, поэтому воздействие этиловым спиртом высокой концентрации, а тем более при высоких температурах, отрицательно сказывается на эффективности конечного продукта. В то же время низкая концентрация этилового спирта при экстрагировании также не обеспечивает высокого качества даже при длительном воздействии.

Было исследовано влияние факторов концентрации этилового спирта, время экстракции и соотношение компонентов. Так, при экстракции 90%-ным, 80%-ным, 70%-ным, 60%-ным спиртом сначала в течение 24 (все четыре концентрации), далее 48, 72, 96 часов (также все четыре концентрации этилового спирта на каждую длительность) наиболее оптимальным по показателю отсутствия денатурированных белков и эффективности конечного продукта оказался режим экстракции 70%-ным этиловым спиртом в течение 72 часов. Опыт проводился при соотношении спирт: сырье 3:1. Исследования по выявлению оптимального соотношения при экстракции 70%-ным спиртом в течение 72 часов показало, что оптимальным соотношением компонентов пои данном режиме является 6:1. Опираясь на то, что сырье (жом) после первого этапа экстракции стало наиболее подготовленным, а точнее более уязвимым, в последующем эксперименте были испытаны по той же схеме более низкие концентрации этилового спирта, а именно 70, 60, 50%-ные при 24, 43, 72 часах длительности (при каждой концентрации). Опыты проводились при соотношении спирт:сырье 4:1. Оптимальным оказался режим экстракции 60%-ным спиртом в течении 48 часов. При выявлении оптимального соотношения компонентов спирт: сырье в режиме экстракции 60%-ным спиртом в течение 48 часов исследовались 2: 1, 3:1, 4:1, 5:1. Оптимальным оказалось соотношение спирт:сырье 4:1. Третий этап экстракции, обоснованный по той же схеме - снижение концентрации спирта при снижении времени экстракции и соотношения спирт: сырье, характеризовался следующим режимом: экстракция 50%-ным спиртом в течение 24 часов при соотношении спирт:сырье 2:1. Подкисление объединенного со всех трех этапов экстракта до рН 4,7 обеспечило в дальнейшем выпадение длинноциклических белковых молекул в осадок при вымораживании. Граничные значения температур, при которых проводилось вымораживание (-15 - -20oС), обусловлены тем, что при температурах выше -15oС процесс выпадения белков более длительный, а ниже -20oС происходит кристаллизация связанной воды, что в дальнейшем снижает активность препарата. Измельчение хвостов до частиц свыше 400 мкм резко снижало качество готового экстракта, которое стабилизировалось при экстрагировании сырья с величиной частиц 150-170 мкм. Поэтому за оптимальный принят размол сырья до частиц 150-400 мкм.

Пример. Хвосты после консервирования измельчают первоначально в костедробилке, затем в криогенной шаровой мельнице конструкции ИТК "ФТИНТ", с использованием которой в процессе размола не происходит нагревание продукта, что также способствует сохранению биологически активных веществ. Хвосты размалывали в порошок до частиц 150-400 мкм (150 мкм - 60%, 400 мкм - 12%, от 150 до 400 мкм - остальное). Величина таких частиц способствовала созданию большей поверхности взаимодействия продукта с экстрагирующим веществом (водным раствором этилового спирта), а следовательно, полному и более быстрому их извлечению. Экстрагирование проводили по следующей схеме: на первом этапе измельченное сырье заливали 70%-ным водным раствором этилового спирта в соотношении спирт: сырье 6:1 и настаивали в течение 72 часов. На втором этапе экстракт сливали, а оставшуюся массу (жом) повторно заливали 60%-ным водным раствором этилового спирта в соотношении спирт:сырье 4:1 и настаивали в течение 48 часов. На третьем этапе после слива экстракта оставшуюся массу заливали третий раз 50%-ным водным раствором этилового спирта при соотношении спирт:сырье 2:1 и настаивали в течение 24 часов. Все три экстракта объединяли и подкисляли уксусной кислотой до рН 4,7. Все три этапа экстрагирования проводили при 22oС, а вымораживание - при -18oС в течение 3 суток. Биологический состав порошка из хвостовых желез и из пантов марала представлен в таблицах 1, 2.

Биохимический состав порошка из хвостов и пантов маралов показывает, что значительных отличий практически нет. В хвостовых железах больше жира, меньше фосфолипидов. Содержание общего азота в хвостовой железе 5,6 на 100 г, в пантах 7,9 г. Аминокислотный состав экстракта, приготовленный из хвостовых желез заявленным способом и по прототипу, в сравнении с экстрактом из пантов представлен в таблице 3.

В опыте было изучено влияние экстракта по заявленному способу из хвостов пантовых оленей и пантокрина на иммобилизационный стресс. С этой целью было взято четыре группы белых мышей по 10 в каждой с массой тела 19-20 г. Первой группе мышей вводили экстракт из хвостов пантовых оленей в дозе 1,5 мл/кг, второй - соответственно в аналогичной дозе пантокрин, третью и четвертую группы подвергали интактному и стрессированному контролю. Препараты вводили в течение 6 дней. Иммобилизационный стресс вызывали подвешиванием животных за шейную складку на 18 часов. После этого подопытных лабораторных животных снимали и через 15 минут у них изучали ориентировочно-исследовательское поведение в открытом поле. При эмоциональной реакции по Броди (1953) оценивалась реакция со стороны лабораторных животных на 4 вида воздействия - захват в клетке, в которой постоянно живет мышь, захват в руки после помещения животного на плоскую поверхность, реакция на приближение пинцета, реакция на толчок пинцетом. Дополнительно при этих манипуляциях регистрировали дефекацию с мочеиспусканием, писк и мышечное напряжение. Каждая реакция оценивалась по 4-балльной системе, затем их суммировали, давая общую оценку эмоциональной реакции. Подсчитывали количество лейкоцитов в периферической крови. После этого животных подвергли убою, определяли вес надпочечников, селезенки, тимуса с последующим расчетом весовых коэффициентов органов на 20 г массы тела по методу Добрякова (1976), подсчитывали в банках проявления стресса у лабораторных животных.

Экспериментальная установка "открытое поле" представляла собой камеру размером 60•60•30 см из оргстекла. Камера разделена на 24 квадрата, в каждом из которых имелось отверстие диаметром 3 см. На высоте 1 м располагали лампочку освещения мощностью 100 Вт. Каждую мышь помещали в один из углов камеры, а ориентировочно-поведенческие реакции оценивали в течение 2 минут по следующим показателям: количество пересеченных квадратов, количество заглядываний в отверстия, количество вставаний на задние лапки, количество умываний (груминг), количество дефекаций. Рассчитывали коэффициент г/о, представляющий соотношение горизонтальной активности и заглядывания в отверстия. Результаты исследований приведены в таблицах 4 и 5. Из приведенных данных можно заключить, что экстракт из хвостов пантовых оленей не уступает, а по отдельным показателям даже превосходит препарат пантокрин по антистрессорному действию, нормализуя активно поведенческие и соматические показатели стрессированных лабораторных животных. В другом опыте оценку антистрессовых, адаптогенных свойств препарата из хвостовых желез в сравнении с пантокрином определяли по времени интенсивной мышечной работы по методике плавания путем регистрации спонтанного времени плавания испытуемых животных до полного утопления (до момента гибели). В опыт было взято три группы мышей по 15 животных в каждой весом 18-20 г. Первой группе лабораторных животных вводили экстракт из хвостов пантовых оленей в дозе 1,5 мм/кг, второй - соответственно пантокрин в течение 5 дней до испытания. Группе контрольных животных вводили дисстилированную воду. Полученные результаты показали, что среднее время от начала эксперимента до полной утопляемости в опытных группах было в 4 раза выше, чем в контрольной. Оба лекарственных средства повышают адаптогенные свойства животных, причем экстракт из хвостов пантовых оленей не уступал пантокрину.

Для изучения стимулирующего действия препаратов использовали тест, основанный на изменении уровня артериального давления у кроликов в остром опыте (ТУФ 204755). Препарат (экстракт) из хвостовых желез вызывает снижение кровяного давления у всех трех использованных животных на следующие величины 23,8; 28,5; 26,1%. Следовательно, препарат обладает гипотензивным действием.

Таким образом, использование заявленного способа получения биологически активного вещества из хвостов позволило получить лекарственное средство, близкое по стимулирующему действию с пантокрином, что позволяет расширить арсенал средств, обладающих биологической активностью, и более полно и рационально использовать продукцию пантового оленеводства.

Похожие патенты RU2223106C2

название год авторы номер документа
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА "ТРИОКРИН" 2010
  • Луницын Василий Герасимович
  • Назаров Александр Викторович
  • Рябцев Сергей Васильевич
RU2423880C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА, ОБЛАДАЮЩЕГО ГИПОТЕНЗИВНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2005
  • Луницын Василий Герасимович
RU2353375C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА "ТЕСТИСИЛ" ИЗ ПЕНИСОВ С СЕМЕННИКАМИ СЕВЕРНЫХ ОЛЕНЕЙ С ВКЛЮЧЕНИЕМ ПРИРОДНЫХ АНТИОКСИДАНТОВ И ПОЛИСАХАРИДОВ 2015
  • Кайзер Андрей Александрович
  • Марцеха Евгений Владимирович
  • Кайзер Генрих Андреевич
RU2588648C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА ПАНТОВОГО ОЛЕНЕВОДСТВА 2008
  • Неприятель Алексей Анатольевич
  • Луницын Василий Герасимович
RU2355403C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА ИЗ ПАНТОВ И/ИЛИ РОГОВ СЕВЕРНЫХ ОЛЕНЕЙ 2005
  • Кайзер Андрей Александрович
  • Лайшев Касим Анверович
  • Тюпкина Галина Ивановна
  • Кисвай Надежда Ивановна
RU2302141C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА ПАНТОВОГО ОЛЕНЕВОДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ГИПОТЕНЗИВНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2006
  • Луницин Василий Герасимович
RU2314110C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА ИЗ ХВОСТОВ ПАНТОВЫХ ОЛЕНЕЙ 2007
  • Луницын Василий Герасимович
  • Попова Маргарита Владимировна
  • Володкина Анна Ивановна
RU2327476C1
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ ДОБАВКИ "ЭРОСИЛ" ИЗ ОРГАНОВ СЕВЕРНОГО ОЛЕНЯ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНАЯ ДОБАВКА "ЭРОСИЛ", СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КОМПЛЕКСНОЙ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ ДОБАВКИ "ПЕНИСИЛ" И КОМПЛЕКСНАЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНАЯ ДОБАВКА "ПЕНИСИЛ" 2001
  • Осинцев Н.С.
  • Дорохин В.В.
  • Канюков А.А.
  • Маркин Н.П.
  • Матвейчук В.В.
  • Тренев В.Н.
RU2218030C2
Способ получения экстракта из пантов оленя 1990
  • Кершенгольц Борис Моисеевич
  • Ахременко Александр Кузьмич
  • Рогожин Василий Васильевич
SU1822785A1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПАНТОКРИНА ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ 1992
  • Даценко Зоя Михайловна[Ua]
  • Губченко Екатерина Николаевна[Ua]
  • Юрьев Николай Родионович[Ru]
RU2063235C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 223 106 C2

Реферат патента 2004 года СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРОДУКТА ИЗ СЫРЬЯ ПАНТОВОГО ОЛЕНЕВОДСТВА

Изобретение относится к переработке оленеводческой продукции, в частности к способу получения биологически активного экстракта из консервированных хвостов пантовых оленей. Способ включает измельчение сырья, его экстракцию этиловым спиртом и подкисление экстракта уксусной кислотой, при этом в качестве сырья используют консервированные хвосты, а измельчение проводят до частиц 150-400 мкм, экстракцию осуществляют при комнатной температуре вначале 70%-ным этиловым спиртом в течение 72 ч при соотношении спирт:сырье 6:1, затем 60%-ным спиртом в течение 48 ч при соотношении спирт:сырье 4:1 и далее 50%-ным спиртом в течение 24 ч при соотношении спирт:сырье 2:1, с последующим объединением экстрактов, подкислением уксусной кислотой до рН 4,7, вымораживанием при температуре минус 15-20oС и фильтрованием целевого продукта. Технический результат: способ обеспечивает рациональное использование побочного продукта пантового оленеводства и позволяет интенсифицировать процесс. 5 табл.

Формула изобретения RU 2 223 106 C2

Способ получения биологически активного продукта из сырья пантового оленеводства, включающий измельчение сырья, его экстракцию этиловым спиртом и подкисление экстракта уксусной кислотой, отличающийся тем, что в качестве сырья используют консервированные хвосты, а измельчение проводят до частиц 150-400 мкм, при этом экстракцию осуществляют при комнатной температуре вначале 70%-ным этиловым спиртом в течение 72 ч при соотношении спирт:сырье 6:1, затем 60%-ным спиртом в течение 48 ч при соотношении спирт:сырье 4:1, и далее 50%-ным спиртом в течение 24 ч при соотношении спирт:сырье 2:1, с последующим объединением экстрактов, подкислением до рН 4,7, вымораживанием при температуре минус 15-20°С и фильтрованием целевого продукта.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2004 года RU2223106C2

ИВАНОВ В.Н
и др
Панты и пантокрин
- Чита, 1991
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТОНИЗИРУЮЩЕГО СРЕДСТВА ИЗ ПАНТОВ "ВЕЛКОРНИН" 1991
  • Шелепов Виктор Григорьевич
  • Осинцев Николай Сергеевич
RU2008906C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПАНТОКРИНА 1991
  • Тряпичкин С.Ф.
  • Якименко М.Н.
RU2019179C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО АДАПТОГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2000
  • Нагаслаева Л.А.
  • Николаева Г.Г.
  • Калмыков С.В.
  • Николаев С.М.
  • Асеева Т.А.
  • Белозерцев Ю.А.
  • Брызгалов Г.Я.
  • Даргаева Т.Д.
  • Цыренжапова О.Д.
  • Бальхаев И.М.
  • Дашинамжилов Ж.Б.
  • Лубсандоржиева П.Б.
  • Богданова Т.Б.
RU2187317C2
RU 2059411 С1, 10.05.1996
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПАНТОКРИНА 1992
  • Ахременко А.К.
  • Ануфриев А.И.
  • Кузьмина В.Ф.
  • Шарина Н.Н.
  • Попов А.С.
RU2077331C1
Способ консервирования пантов и хвостов оленя 1931
  • Крушельницкий Г.А.
SU29232A1
US 5408041 А, 18.04.1995
CN 1302618 A1, 11.07.2001.

RU 2 223 106 C2

Авторы

Луницын В.Г.

Даты

2004-02-10Публикация

2002-04-24Подача