СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЖИЗНЕСТОЙКОСТИ ИКРЫ, ЛИЧИНОК, МОЛОДИ РЫБ И АКСЕЛЕРАЦИИ ИХ РОСТА Российский патент 2004 года по МПК A01K61/00 

Изобретение относится к рыбоводству, а именно способам обработки икры и личинок рыб для повышения жизнестойкости икры, личинок, молоди рыб и акселерации их роста, и может найти применение на предприятиях по разведению и воспроизводству рыб.

В настоящее время для повышения жизнеспособности и выживаемости рыб на ранних стадиях развития широко известно использование биологически активных веществ, влияющих на физиологические процессы у рыб путем обработки икры, личинок и молоди этими веществами (SU 1243667, кл. А 01 К 61/00, RU 2115308 C1, кл. А 01 К 61/00, 1998).

Известен способ профилактики заболеваний икры и молоди рыб сапролегнией, согласно которому икру рыб во время оплодотворения выдерживают в растворе иммуномодулятора, в качестве которого используют 1-->3; 1--> -β-D-глюканы в концентрациях 100-1000 мкг/мл. Способ обработки обеспечивает сохранность икры при транспортировке, увеличивает жизнеспособность зародышей и мальков. Однако данный способ эффективен только в отношении сапролегниевых грибов (RU 2081575 C1, кл. А 01 К 61/00, 20.06.1997).

Известен способ обработки икры осетровых рыб после обесклеивания икры пара-аминобензойной кислотой для повышения ее устойчивости к нарушениям условий внешней среды, снижения процента гибели развивающихся эмбрионов, стимуляции продуктивности и адаптации осетровых рыб. Этот способ предназначен только для осетровых рыб, его использование в промышленных условиях невозможно. (RU 2073971 C1, кл. А 01 К 61/00, 27.02.1997).

Известен способ стимуляции физиологических процессов у рыб на ранних стадиях развития, согласно которому икру и личинки рыб, преимущественно лососевых, выдерживают в растворе биологически активного вещества даларгин в течение 1-4 часов при концентрации даларгина в воде 1-10 мг/л. Даларгин (Dalarginum) - Тирозил-2-аланил-глицил-фенилаланил-лейцил-аргинин. Пептидное соединение, состоящее из остатков 6 аминокислот (гексапептид). Выпускается в виде диацетата (Х=2СН₃СООН). Белый аморфный порошок, легко растворим в воде и спирте. Увеличивает жизнеспособность икры и личинок, стимулирует их рост. (SU 1286138, кл. А 01 К 61/00, 1987). Этот способ выбран в качестве ближайшего аналога заявленного изобретения.

Задачей, на решение которой направлено изобретение, является разработка эффективного и простого в выполнении способа обработки икры и личинок рыб для повышения жизнестойкости и акселерации их роста.

Технический результат, достигаемый от реализации изобретения, заключается в повышении эффективности выживаемости и жизнеспособности эмбрионов, личинок, молоди рыб, увеличения среднего веса особей, ускорение процесса органогенеза у личинок, а главное - повышение жизнестойкости рыб на ранних стадиях онтогенеза.

Для этого оплодотворенную икру инкубируют и подвергают обработке пробиотиком "Субтилис", полученным из биомассы штамма Bacillus subtilis ВКМ В-2250 Д в количестве 14-16 мл на 1000 экземпляров, при этом предпочтительно обработку оплодотворенной икры проводят через 1-1,5 часа после ее инкубации, а обработку личинок проводят в момент ее перехода на экзогенное питание.

Установлено, что "Субтилис" способствует стимуляции не только продуктивности, адаптивности и жизнеспособности рыб, но стимулирует жизнестойкость рыб на ранних этапах онтогенеза и повышает напряженность естественного иммунитета.

Лекарственная форма пробиотика "Субтилис" содержит 80-90% микробных клеток бактерий Bacillus subtilis ВКМ В-2250 Д. Пробиотик обладает специфической активностью: в одной дозе препарата содержится (15-20) млрд. микробных клеток/мл (Проблемы и перспективы развития аквакультуры в России, материалы докладов научно-практической конференции, 2001 КрасНИИРХ, (с.190).

Экспериментальным путем установлено, что пробиотическии эффект "Субтилиса" имеет дозозависимый характер.

Пример 1.

Опыты по обработке оплодотворенной икры пробиотиком осуществляли в трех вариантах. Для этого отбирали по 3000 экземпляров эмбрионов на стадии 4-8 бластомер и помещали в кристаллизаторы.

Во всех вариантах опыты ставились в трех сериях. Результаты представлены в табл. 1. Каждая серия отличалась между собой количествами внесенного в опыт "Субтилиса". В 1-ой серии опыта эмбрионы и личинки инкубировали с добавлением 5 мл, во 2-ой - 10 мл и в 3-ей - 15 мл субтилиса из расчета на 1000 экземпляров. Обработку эмбрионов пробиотиком в 1-ом варианте проводили через 1.5 часа после начала инкубации на стадии 4-8 бластомер; во 2-ом - в момент перехода личинок на экзогенное питание; в 3-ем - через 10 дней после перехода личинок на полное экзогенное питание. Во всех вариантах опытов эмбрионы и личинки первоначально содержались в 1-литровых банках в течение 1-2 часов, а затем их вместе с содержимым банки переносили в 10 литровые аквариумы до конца периода наблюдения. В процессе эксперимента, после перехода личинок на экзогенное питание, рыб подкармливали сначала яичным желтком, затем дафниями.

Контроль за характером развития и выживания эмбрионов и личинок осуществляли ежедневно. Основное внимание обращалось на темпы развития личинок и динамику их гибели.

Проведенные исследования показали, что предварительная обработка эмбрионов и личинок "Субтилисом" увеличивает коэффициент их выживаемости и снижает естественную смертность рыб на личиночной стадии развития.

После обработки эмбрионов и личинок в дозе 5 мл на 1000 экземпляров в 1-ом варианте выжило 65%, во 2-ом - 59%, в 3-ем - 36%. Среди рыб, получивших 10 мл "Субтилиса", соответственно остались в живых: в 1-ом варианте - 75%, во 2-ом - 74%, в 3-ем - 40% рыб. При внесении 15 мл пробиотика выжило в 1-ом варианте - 77%, во 2-ом - 75%, в 3-ем - 45% экземпляров.

В контроле количество выживших рыб без обработки "Субтилисом" было более чем в 2-3 раза ниже, чем в опыте и соответственно равнялось 27%.

Патологоанатомический анализ личинок показал, что у всех погибающих и погибших личинок отмечено интенсивное развитие сапролегний. Максимальная гибель личинок в основном установлена в промежутках между 10-22 днями после начала перехода личинок на экзогенное питание. У более 70-80% рыб в первом и во втором вариантах опыта процесс органогенеза завершается быстрее, чем у контрольных.

Обработка "Субтилисом" повышает жизнестойкость рыб на ранних этапах онтогенеза и напряженность естественного иммунитета. Под влиянием "Субтилиса" процесс органогенеза у личинок ускоряется.

Пример 2.

В крупном рыбоводческом хозяйстве проводили испытания предложенного способа в производственных условиях. Для этого оплодотворенную икру в количествах от 350 до 500 г загружали в аппарат Вета и перемешивали в течение 5-10 мин. После чего добавляли пробиотик "Субтилис" в необходимых количествах. Результаты испытаний представлены в табл. 2. Во всех испытанных группах результаты подтверждают высокую эффективность пробиотика.

По сравнению с контролем увеличены выход личинок, выход молоди, средний вес (навеска) молоди. Особо необходимо отметить эффективность обработки пробиотиком перезревшей (испорченной) икры.

Изобретение относится к рыбоводству и может найти применение на предприятиях по разведению и воспроизводству рыб. Оплодотворенную икру инкубируют и подвергают обработке пробиотическим препаратом "Субтилис", полученным из биомассы штамма Bacillus subtilis ВКМ В-2250 Д, в количестве 14-16 мл на 1000 экз., который вносят в оплодотворенную икру не позднее 1,5 ч от начала инкубации. Обработку личинок проводят в момент перехода на экзогенное питание. Обработка икры, эмбрионов и личинок "Субтилисом" увеличивает коэффициент выживаемости и снижает естественную смертность рыб на личиночной стадии развития, способствует стимуляции жизнестойкости рыб на ранних этапах онтогенеза и напряженности естественного иммунитета. 2 табл.

Способ повышения жизнестойкости икры, личинок, молоди рыб и акселерации их роста, предусматривающий однократную обработку икры биологически активным веществом, отличающийся тем, что икру оплодотворяют, инкубируют до получения эмбрионов и личинок и обрабатывают биологически активным веществом, в качестве которого используют пробиотический препарат “Субтилис”, полученный из биомассы штамма Bacillus subtilis ВКМ В-2250 Д, в количестве 14-16 мл на 1000 экземпляров, при этом оплодотворенную икру обрабатывают не позднее 1,5 ч после начала инкубации, а личинки - в момент перехода на экзогенное питание.