ПРОКЛАДКА ДЛЯ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ПЕРЕКРЕСТНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ РЕАГЕНТОМ ИЛИ РАСТВОРОМ, ГЕРМЕТИЗИРОВАННАЯ ФОЛЬГОЙ КАССЕТА Российский патент 2006 года по МПК G01N33/50 

Данные об одновременно рассматриваемых заявках

Эта заявка является частично продолжающей заявку на патент США, серийный № 08/093106, поданную 18 июля 1993 г., которая является продолжением заявки на патент США, серийный № 08/092157, поданной 15 июля 1993 г., и в настоящее время аннулированной.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Это изобретение относится к области количественных определений агглютинации и, в частности, к прокладкам для предотвращения перекрестного загрязнения реагентом или раствором из одной колонки кассеты для количественного определения агглютинации в другую колонку кассеты, а также к герметизированной фольгой кассете для количественного определения агглютинации, содержащей шесть реакционных сосудов, расположенных на ней в линию, содержащей корпус и связанные с ним шесть конических элементов.

Серология групп крови требует определения совместимости клеток крови между донором и реципиентом крови перед трансфузией или трансплантацией органов пациенту. Совместимость клеток крови определяется отсутствием иммунологической реакции между антителами, содержащимися в сыворотке крови пациента, и антигенами, присутствующими на клетках крови от донора.

На поверхности эритроцитов каждого человека обнаруживается много различных антигенов групп крови. Определение группы крови, в целом, представляет собой процесс тестирования эритроцитов для определения, какие антигены присутствуют и какие отсутствуют. Это обычно осуществляется с помощью антител известной специфичности.

Для выявления антител в сыворотке или плазме пациента реактивы, содержащие клетки крови, имеющие известные антигены, смешивают с образцом сыворотки. Реактивы инкубируются в течение периода времени, достаточного для обеспечения агглютинации эритроцитов, которая происходит, когда присутствуют антитела против тех антигенов. Затем смесь центрифугируют, и если агглютинированные клетки крови присутствуют, такие агглютинаты отчетливо видны на дне реактора, указывая таким образом на присутствие антител в образце, направленных против известных антигенов на эритроцитах. Если в образце не присутствуют антитела, направленные против известных антигенов на эритроцитах, агглютинация не происходит, и на это указывает отсутствие агглютинированных эритроцитов после центрифугирования.

Недавно были разработаны системы, в которых реакция агглютинации проводится в одной части сосуда, а отделение агглютинированных эритроцитов происходит в другой части того же сосуда с помощью матрицы, которая отделяет агглютинированные клетки от других компонентов в смеси реагент/образец. Одна такая система раскрыта в описании в одновременно рассматриваемых заявках на патент США №№03/407747 и 08/112402, которые являются продолжением заявки на патент США серийного №08/023500, в настоящее время аннулированной, причем обе заявки являются собственностью владельца данной заявки. Содержание каждой из этих заявок включено в эту заявку в виде ссылок. Сосуды для проведения реакции агглютинации и отделения агглютинатов в соответствии с настоящим изобретением и используемые также в изобретениях, раскрытых в упомянутых выше заявках, изготавливает и продает компания "Ortho Diagnostic Systems Inc.", Raritan, New-Jersey, под торговой маркой BIOVUE^тм. Такие реакционные сосуды изготавливают с форме колонки, имеющей верхнюю камеру и нижнюю камеру, где верхняя камера имеет более широкий диаметр, чем нижняя камера. Нижняя камера содержит матрицу для отделения агглютинированных клеток от неагглютинированных клеток. Диаметр нижней камеры достаточно узок настолько, что когда реактивы и пробы добавляют в верхнюю камеру, обычно с помощью пипетки, реактивы и образцы остаются в верхней камере и не поступают в нижнюю камеру до тех пор, пока не прикладывается дополнительная сила.

Непрямая антиглобулиновая проба, известная как проба Кумбса, представляет собой анализ крови, используемый для определения наличия в сыворотке пациента IgG антител к определенным антигенам на поверхности эритроцитов. При пробе Кумбса сыворотка инкубируется в присутствии участвующих в реакции эритроцитов для обеспечения возможности связывания антител с антигенами на поверхности эритроцитов. Эти IgG антитела чаще всего сами по себе не агглютинируют эритроциты или агглютинируют лишь недостаточно для визуального выявления с помощью обычных методик. Для содействия видимой агглютинации обычно необходимо добавление второго антитела, направленного против IgG человека.

Для типирования эритроцитов при анализе крови, используемом для определения, присутствуют ли определенные антигены на поверхности эритроцитов, анализируемые эритроциты добавляют в верхнюю камеру с последующим приложением силы, такой как, например, центробежная сила, которая перемещает их в нижнюю камеру, содержащую антитела к определенным антигенам эритроцитов, и разделительную матрицу. Если эритроциты на своей поверхности имеют антиген(ы), способные соединяться со специфическими антителами в нижней камере, то будут образовываться агглютинаты и отделяться матрицей.

При других типах анализов крови, таких как обратное типирование, при которых в сыворотке пациента производится количественное определение вызывающих прямую агглютинацию антител против антигенов эритроцитов, сыворотка пациента и реагент в виде эритроцитов с известными антигенами на их поверхности добавляют в верхнюю камеру, и прилагается сила, такая как, например, центробежная сила, которая перемещает реактивы в нижнюю камеру, содержащую жидкую среду и разделительную матрицу, но не антитело. При этом количественном определении присутствие в сыворотке пациента антител, вызывающих прямую агглютинацию, приведет к образованию агглютинатов, которые будут отделены матрицей.

Еще при одном типе анализа крови реактив в виде антитела с известной специфичностью к антигену эритроцитов помещается в верхнюю камеру вместе с эритроцитами пациента. Если антитело-реагент является антителом, вызывающим прямую агглютинацию, сила, такая как, например, центробежная сила, должна быть приложена без предшествующей инкубации, и содержимое под действием силы должно перемещаться в нижнюю камеру, содержащую разделительную матрицу в водном растворе. Затем с помощью матрицы должны отделяться агглютинаты. Альтернативно, эритроциты пациента помещаются в верхнюю камеру, и добавляется реагентное IgG антитело с известной специфичностью с последующей инкубацией для обеспечения возможности прикрепления антитела к предположительным антигенам на поверхности эритроцитов. После инкубации прикладывается сила, такая как, например, центробежная сила, которая перемещает реактивы в нижнюю камеру, содержащую разделительную матрицу и анти-IgG антитела, специфичные для реагентного IgG антитела, используемого для инкубации эритроцитов в верхней камере. Если реагентное антитело присутствует на поверхности клеток пациента, анти-IgG антитело в нижней камере будет способствовать образованию агглютинатов, которые будут отделены матрицей.

После того как образцу и реактивам была предоставлена возможность инкубации в течение достаточного периода времени для обеспечения либо прямой агглютинации, как в случае пробы типирования эритроцитов, или реакции антител-антигенов, как в случае пробы Кумбса, сосуд, где происходит реакция, подвергается воздействию давления, например, посредством центрифугирования, так, что реактивы вытесняются в нижнюю часть колонки и на разделительную матрицу. В результате центрифугирования неагглютинированные материалы мигрируют вниз через разделительную матрицу, тогда как агглютинированные клетки остаются на верхней части разделительной матрицы или распределяются внутри матрицы в зависимости от степени агглютинации. Более сильные реакции агглютинации приводят к тому, что клетки остаются по направлению к верхней части разделительной матрицы, тогда как более слабые реакции агглютинации приводят к распределению агглютинатов на различные расстояния от поверхности матрицы.

Задержка образца и реактивов в верхней части колонки во время фазы инкубации является результатом поверхностного натяжения, действующего через верхний край нижней части колонки, где диаметр уменьшен относительно верхней части. Были установлены два потенциальных источника ошибки при проведении анализа с помощью колонки. Во-первых, если реактивы и образец пипетируются прямо вниз по центру реактивной камеры с избыточной силой, реактивы могут осаждаться прямо на верхушке разделительной матрицы в нижней камере и не задерживаться в верхней камере во время фазы инкубации. Таким образом, реактивы начнут поступать в разделительную матрицу перед завершением агглютинации. Во-вторых, есть возможность того, что растворитель или раствор, который содержит разделительную матрицу, может поступить в верхнюю камеру. Это может произойти в результате забрызгивания или других нарушений, например, во время транспортировки и использования сосудов. В некоторых случаях, когда раствор или растворитель, содержащий разделительную матрицу, также содержит антитела или другие реактивы, которые непосредственно влияют на результат теста, такое забрызгивание может привести к перекрестному загрязнению колонок определенными реактивами из других колонок. Это может произойти, когда пользователь вставляет кончик пипетки в реактивную камеру, загрязняющую кончик разбрызганным реактивом, который может затем переноситься пипеткой в другой сосуд. Это может привести к ложным результатам при анализе агглютинации.

Таким образом, задачей настоящего изобретения является создание усовершенствованного механизма для поддержания разделения образца и реактивов во время фазы инкубации анализа агглютинации. Еще одной задачей изобретения является создание средства предотвращения смешения материалов, содержащихся в нижней части колонки.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение предоставляет усовершенствованный сосуд для проведения реакции агглютинации и отделения агглютинатов.

В одном варианте исполнения изобретение содержит прокладку, которая принимает форму конического элемента, имеющего отверстие через суженную верхушку. Помещенная в верхнюю часть и проходящая в колонку реактора такая прокладка перед введением с помощью пипетки образца в сосуд предотвратит перекрестное загрязнение вследствие попадания растворителя или раствора из одного сосуда в другой сосуд, тогда как в противном случае во время такого введения с помощью пипетки может произойти перекрестное загрязнение. Указанная прокладка удобно вставляется в верхнюю часть колонки конечным пользователем перед введением реактивов с помощью пипетки. Прокладка может принимать форму единого блока, имеющего шесть конических элементов или ячеек, расположенных бок о бок; общая площадь и форма прокладки такие же, как и у верхней стороны кассеты BIOVUE^тм.

Прокладка содержит корпус и, по меньшей мере, один конический элемент, связанный с ним, в котором указанный конический элемент имеет отверстие в его суженной верхушке, и в котором указанный конический элемент имеет герметизирующее приспособление, расположенное в позиции, отделенной от указанной суженной верхушки. Конический элемент содержит первый конец, имеющий указанную суженную верхушку, и второй конец, отделенный от него и примыкающий к корпусу, в котором указанное герметизирующее приспособление расположено на или примыкает ко второму концу. Герметизирующее приспособление содержит уплотнительное кольцо, окружающее указанный конический элемент, и уплотнительное кольцо может быть объединено с указанным коническим элементом. В предпочтительном варианте исполнения прокладка имеет шесть конических элементов, линейно связанных с корпусом, и размер прокладки подобран таким образом, чтобы подходить для реакторов кассеты. Прокладка предпочтительно изготовлена из акриловой смолы.

Изобретение далее предполагает уплотненную прокладкой из фольги кассету, содержащую шесть реакционных сосудов, расположенных в ней в линию, и прокладку, содержащую корпус и шесть линейно связанных с ней конических элементов, в которой конические элементы содержат суженную верхушку, приспособленную для прокола указанного уплотнения с прокладкой из фольги, и при вставлении такая прокладка входит во фрикционное зацепление с указанной кассетой так, чтобы герметизировать соединение между кассетой и вкладышем. Приспособлением для герметизации соединения являются уплотнительные кольца, окружающие каждый из конических элементов и предпочтительно являющиеся составной частью каждого из конических элементов.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фиг.1 представляет вид сбоку кассеты (1) реакционных сосудов, содержащей колонку (2), имеющую верхнюю камеру (3) и нижнюю камеру (4).

На фиг.2 показана одна ячейка (5) прокладки (6), сконструированная для обеспечения возможности помещения в верхнюю камеру колонки реакционного сосуда. Каждый конический элемент или ячейка (5) имеет уплотнительное кольцо (7), расположенное вокруг ячейки (5) ниже корпуса прокладки (6).

На фиг.3 показана прокладка (6), содержащая шесть конических элементов (8) или ячеек, имеющих заостренные верхушки (9), предназначенные для помещения в верхние камеры кассеты, имеющей шесть колонок реакционных сосудов. Каждый элемент имеет уплотнительное кольцо (7), окружающее элемент ниже корпуса прокладки (6). Кроме того, каждый элемент имеет верхушку (9), приспособленную для прокалывания уплотнительной прокладки из фольги, покрывающей колонки реакционных сосудов в кассете.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В соответствии с настоящим изобретением, сосуды для проведения реакций агглютинации и отделения агглютинатов будут описаны с точки зрения различных вариантов исполнения. Определенные варианты исполнения изобретения можно ясно понять из описания сосудов для проведения реакций агглютинации и отделения агглютинатов, которые изготавливаются и продаются компанией "Ortho Diagnostic Systems Inc.", Raritan, New Jersey, под торговой маркой BIOVUE^тм.

Сосуды настоящего изобретения могут быть изготовлены из любого подходящего материала, который не будет мешать реакции агглютинации или отделению агглютинатов и зрительной оценке результатов, такого как стекло или различные пластики. В предпочтительном варианте исполнения, сосуды изготовлены из полипропилена.

Верхняя камера (3) сосуда может быть любой формы и размера, пригодных для удерживания реагентов и образца в то время, пока проводится инкубация. Обычно, верхняя камера (3) имеет цилиндрическую форму в своей самой верхней части. Барьер между верхней (3) и нижней (4) камерами обычно определяет нижнюю границу верхней камеры и верхнюю границу нижней камеры. В предпочтительном варианте исполнения барьер, который образует нижнюю часть верхней камеры, имеет форму конуса с верхушкой, простирающейся по направлению или внутрь нижней камеры. Часть барьера сконструирована таким образом, чтобы удерживать реагенты и образец в верхней камере во время инкубации в условиях нормальной силы тяжести и атмосферного давления, в то же время обеспечивая возможность перетекания жидкости из верхней камеры в нижнюю камеру, когда прилагается сила, такая как повышенное давление или центробежная сила.

Одним вариантом исполнения изобретения является прокладка (6), которая может быть вставлена в верхушку (9) реакционного сосуда непосредственно перед добавлением образца. Такая прокладка (6) содержит корпус и один или предпочтительно множество элементов или ячеек, в зависимости от корпуса, причем такие ячейки имеют коническую или воронкообразную форму. Суженная верхушка ячейки (5), имеющая отверстие, при вставлении в кассету ориентирована по направлению внутрь сосуда, как показано на фиг.2 и 3. Прокладка (6) может использоваться в сосудах, имеющих и не имеющих барьерные приспособления, такие как изгибы или вкладыши. В предпочтительном варианте исполнения, прокладка содержит ячейку, имеющую отверстие с диаметром, достаточно маленьким для удержания образца, введенного в сосуд, до тех пор, пока сосуд не будет подвержен воздействию силы (например, путем центрифугирования), при условии, что время инкубации не увеличивается любым теплоизолирующим влиянием воздушного зазора между верхушкой и разделительной матрицей в колонке; или достаточно большим, чтобы дать возможность введенному образцу свободно пройти в камеру реакционного сосуда, при условии, что тестирующая система может выдерживать ранний контакт с брызгами реагента. Ячейки (5) прокладки (6) предпочтительно имеют герметизирующее приспособление, расположенное на расстоянии от суженной верхушки (9), например, на ее наружных верхних частях, непосредственно ниже корпуса прокладки. В этом отношении сделаны ссылки на фиг.2 и 3. Герметизирующим приспособлением является возвышающееся кольцо, предпочтительно являющееся составной частью прокладки. Ячейка прокладки соответствует по размеру верхней камере сосуда, где происходит реакция, так, чтобы она не стала легко смещаемой во время обычных манипуляций. Возвышающееся кольцо или уплотнительное кольцо (7) упрется в край вокруг сосуда на верхней поверхности кассеты (1), герметизируя, таким образом, контакт между прокладкой и кассетой. Возвышающееся кольцо или уплотнительное кольцо (7) препятствует капиллярному действию любого содержимого колонки, забрызгиваемого из одной колонки в другую.

Как обсуждалось выше, при отсутствии вкладыша, которым снабжены сосуды, растворитель или раствор, содержащий разделительную матрицу, может попасть в верхнюю камеру во время транспортировки и манипуляций. В таком случае, и когда разделительная матрица может также содержать антитела или другие реагенты, которые будут непосредственно влиять на результаты теста, такое забрызгивание может привести к перекрестному загрязнению колонки реагентом из других колонок. Это может произойти, когда пользователь вставляет кончик пипетки в верхнюю камеру реакционного сосуда, загрязняя кончик разбрызганным реагентом, который может быть затем на пипетке перенесен в другой сосуд. Последнее может привести к ложным результатам количественного метода определения агглютинации.

Назначением прокладки (6) является предотвращение перекрестного загрязнения реагентом из одного сосуда в следующий во время переноса пипеткой; этот реагент может забрызгиваться в верхнюю камеру во время транспортировки и манипуляций.

Прокладка может принимать форму одиночного конического элемента или ячейки для индивидуального помещения поверх каждого сосуда, где происходит реакция. Однако в предпочтительном варианте исполнения и со ссылкой на фиг.3 прокладка принимает форму одиночного блока, имеющего шесть таких конических ячеек, расположенных бок о бок, как составной части корпуса прокладки. Такая конфигурация позволяет помещать одиночный блок прокладки, содержащий шесть отдельных ячеек, поверх кассеты BIOVUE^тм из шести реакционных сосудов.

Со ссылкой на фиг.2 и 3 каждая коническая ячейка прокладки имеет суженную заостренную верхушку с проходящим через нее отверстием. Поскольку сосуды BIOVUE^тм предоставляются в виде кассеты (1), содержащей шесть колонок (2), покрытых сверху уплотнительной прокладкой (6) в виде полоски фольги, при ручном надавливании заостренные верхушки прокладки проколют уплотнительную прокладку из фольги над всеми шестью колонками. Проба (пробы) образца затем может быть перенесена пипеткой прямо в ячейки. Чистые ячейки прокладки, таким образом, свободны от любого загрязняющего реагента или разделительной матрицы, которые в противном случае могут вступить в контакт с образцом и могут быть перенесены в другую колонку.

Прокладка удобно вставляется в колонки конечным пользователем вручную или с помощью снабженного зубцами инструмента. Для вставления шестиячеечной прокладки в кассету BIOVUE^тм фольга кассеты протыкается наконечниками прокладки, и прокладка полностью вставляется с помощью движения качания. Использование снабженного зубцами инструмента помогает выравниванию прокладки и кассеты во время вставления. Поскольку корпус прокладки имеет для удобства такую же площадь и форму, как и верхняя поверхность кассеты, прокладка может удобно оставаться на месте во время обработки кассеты. Использование прокладок, таким образом, не мешает проведению количественного определения и не искажает его результаты (например, центрифугирование, свободное прохождение неагглютинированных эритроцитов через разделительную матрицу и вход агглютинированных эритроцитов в колонку). Однако колонки (2) без уплотнительных колец (7) не предотвращали перекрестное загрязнение колонок реагентом во время использования. Сравнительные функциональные тесты прокладок с уплотнительными кольцами и без них представлены в примерах 1 и 2. Представленные там результаты демонстрируют, что уплотнительные кольца (7) предотвращают перекрестное загрязнение колонок (2) реагентом, которое может происходить вследствие "капиллярного затекания" реагента между фольгой кассеты и прокладкой, что в результате ведет к потоку реагента по верхней части кассеты (1).

Прокладка и ее ячейки могут быть изготовлены из любого подходящего материала, который не помешает реакции агглютинации или отделению агглютинатов, такого как, например, стекло или пластик. Материал должен быть подходящим для прокалывания уплотнительной прокладки из фольги на кассете. Для обеспечения возможности эффективной подачи пробы в верхнюю камеру из ячейки прокладки, предпочтительно, чтобы стенка ячейки прокладки была относительно гладкой по структуре и полированной. Материалом является предпочтительно пластик, такой как, например, полиэфирный пластик, ацеталь, акриловая смола, акрилоннитрилбутадиенстирол (АБС), нейлон, поликарбонат, полиамид или полипропилен. В предпочтительном варианте исполнения материал является акриловой смолой.

Следующие примеры приводятся только в целях иллюстрации, а не в форме ограничения сферы притязаний изобретения.

ПРИМЕР 1.

Колонки BIOVUE^тм с прокладками, имеющими уплотнительные кольца, сравнивали с колонками с прокладками без уплотнительных колец для определения того, предохраняют ли уплотнительные кольца от перекрестного загрязнения колонок реагентом.

Кассеты подвергали имитационной транспортировке для создания забрызгивания в верхнюю камеру и на фольгу путем постукивания или ударов кассеты о твердую рабочую поверхность.

Исследовали 192 кассеты с прокладками, на имеющими уплотнительных колец, на наличие капиллярного затекания после вставления в колонки кассеты. Половина прокладок (96) вставлялась в кассеты вручную, а другая половина - с помощью снабженного двумя зубцами инструмента, обсужденного выше.

Исследовали 336 кассет с прокладками, имеющими уплотнительные кольца, на наличие капиллярного затекания, как указано выше. Половина прокладок (168) вставлялась в кассеты вручную, а 168 вставлялись с помощью снабженного двумя зубцами инструмента.

Капиллярное затекание в колонки оценивают визуально путем осмотра верхней стороны кассеты. Капиллярное затекание определяют при обнаружении жидкости реагента между покровной фольгой кассеты и пространством под корпусом прокладки.

В таблице 1 представлено количество и процент кассет с капиллярным затеканием по отношению к общему количеству испытанных кассет. Способ вставления прокладки не влиял на результаты при использовании прокладки, имеющей уплотнительное кольцо, но влиял на результаты при использовании прокладки без уплотнительного кольца. Как показано, количество кассет с затекшим реагентом, когда прокладки вставляют вручную (кассеты в перевернутом положении), почти вдвое превышает количество таких кассет при вставлении прокладок с использованием инструмента (кассеты в нормальном вертикальном положении).

ТАБЛИЦА 1Способ вставления прокладкиПрокладки без уплотнительных колецПрокладки с уплотнительными кольцамиИнструмент39/96 (40,6%)0/168Ручной74/96 (77,1%)0/168

ПРИМЕР 2

Кассеты с прокладками, не имеющими уплотнительных колец, сравнивали в функциональном испытании с кассетами, имеющими уплотнительные кольца.

Кассеты подвергают имитационной транспортировке для создания забрызгивания реагента в верхнюю камеру и на фольгу, как описано в примере 1.

Прокладки вставляют в колонки кассеты как вручную, так и с помощью инструмента с двумя зубцами, как описано выше. В половину кассет в каждую колонку вносят 10 мкл 4%-ой суспензии эритроцитов (в физиологическом растворе) с помощью пипетки BIOVUE^тм BioHit (Ortho Diagnostic Systems Inc., Raritan, NJ). В колонки другой половины кассет вносят пипеткой 50 мкл 0,8%-ой суспензии эритроцитов (в физиологическом растворе), имеющих поверхностный антиген, как показано ниже в таблице 2. В половине испытуемых кассет используют кассету Ortho BIOVUE^тм ABE International (Ortho Diagnostic Systems Inc., Raritan, NJ); в другой половине испытуемых кассет используют кассету BIOVUE^тм RHK (Ortho Diagnostic Systems Inc., Raritan NJ). Кассеты ABE и RHK подготавливают с антителами в соответствующих колонках, как показано ниже в таблице 2.

ТАБЛИЦА 2КАССЕТА ABEколонкаАнтителоожидаемый результат с клетками A₁ rr1анти-А+2анти-В-3анти-АВ+4анти-D-5анти-CDE 6Контроль (растворитель)-КАССЕТА RHKколонкаАнтителоожидаемый результат с клетками R₁ R₁ K (-)1анти-С+2анти-Е-3анти-с-4анти-е+5анти-К-6контроль (растворитель)-

При использовании кассет ABE в качестве образца используют клетки A₁ rr. При использовании кассет RHK в качестве образца используют клетки R₁ R₁ (-). Пипетирование проводят, начиная с самой крайней слева колонки кассеты и продвигаясь вправо. Кассеты центрифугируют в центрифуге Ortho BIOVUE™ (Ortho Diagnostic Systems Inc., Raritan, NJ); в течение 2 минут при (794±16)×g, затем в течение 3 минут - при (1510±30)×g. Каждую колонку с отрицательной реакцией (отсутствие агглютинации эритроцитов) оценивают на полноту свободного прохождения эритроцитов через всю колонку. Ложно положительная реакция произойдет, если, например, анти-А антитело из колонки кассеты ABE переносится в другую колонку, и теперь клетки вступают в реакцию в другой колонке.

Результаты показаны в таблице 3. В колонках с уплотнительным кольцом все ожидаемые положительные реакции были положительными. Однако все ожидаемые отрицательные реакции не были отрицательными. Был один ложно положительный результат. Причиной этого, хотя она не установлена, было не капиллярное затекание реагента. В таблице 3 представлено количество и процент кассет и колонок с ложно положительной реакцией по отношению к общему количеству испытанных кассет. Способ вставления прокладки не влиял на результаты при использовании прокладки с уплотнительными кольцами, но косвенно влиял на результаты при использовании прокладки без уплотнительных колец, потому что все ложно положительные результаты были в кассетах с видимым затеканием реагента.

ТАБЛИЦА 3Способ вставления прокладки Прокладка без уплотнительных колецПрокладка с уплотнительными кольцамиИнструментКассеты1/96 (1%)1/96 (1%)(нормальное вертикальное положение)Колонки1/384 (0,3%)1/384 (0,3%)РучнойКассеты9/96 (10%)0/96(перевернутое положение)Колонки10/384 (2,6%)0/384ВсегоКассеты10/192 (5,2%)1/192 (0,5%) Колонки11/768 (1,4%)1/768 (0,1%)

Изобретение относится к области количественного определения агглютинации. Прокладка содержит корпус и по меньшей мере один зависимый от него конический элемент, имеющий отверстие в своей суженной верхушке и уплотнитель, расположенный в позиции, отделенной от суженной верхушки. Герметизированная фольгой кассета содержит шесть реакционных сосудов, расположенных на ней в линию, и прокладку, содержащую корпус и зависимые от него шесть конических элементов, причем конические элементы содержат суженную верхушку, приспособленную для прокалывания уплотнительной прокладки из фольги, причем при вставлении такая прокладка способна входить во фрикционное зацепление с указанной кассетой для герметизации соединения между кассетой и прокладкой. Технический результат заключается в обеспечении надежного разделения образца и реактивов во время дозы инкубации анализа агглютинации. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл.

1. Прокладка для предотвращения перекрестного загрязнения реагентом или раствором из одной колонки кассеты для количественного определения агглютинации в другую колонку указанной кассеты, причем указанная прокладка содержит корпус и, по меньшей мере, один конический элемент, связанный с корпусом, отличающаяся тем, что указанный конический элемент имеет отверстие в своей суженной верхушке и уплотнительное кольцо, окружающее конический элемент.2. Прокладка по п.1, отличающаяся тем, что конический элемент включает в себя первый конец, содержащий указанную суженную верхушку, и второй конец, отделенный от него, примыкающий к корпусу, в котором указанное уплотнительное кольцо расположено в или прилегает к указанному второму концу.3. Прокладка по п.2, отличающаяся тем, что уплотнительное кольцо является составной частью указанного конического элемента.4. Прокладка по п.3, отличающаяся тем, что содержит шесть расположенных в линию конических элементов, связанных с указанным корпусом.5. Прокладка по п.4, отличающаяся тем, что имеет размер, позволяющий размещение в реакционных сосудах кассеты.6. Прокладка по п.5, отличающаяся тем, что она изготовлена из акриловой смолы.7. Прокладка для предотвращения перекрестного загрязнения реагентом или раствором из одной колонки кассеты для количественного определения агглютинации в другую колонку указанной кассеты, содержащая корпус и связанные с ним шесть конических элементов, отличающаяся тем, что каждый конический элемент содержит первый конец, отделенный от указанного корпуса и имеющий отверстие в его суженной верхушке, и второй конец, отделенный от указанного первого конца, имеющий уплотнительное кольцо, окружающее конический элемент, и являющееся составной частью указанного конического элемента.8. Герметизированная фольгой кассета для количественного определения агглютинации, содержащая шесть реакционных сосудов, расположенных на ней в линию, и прокладку, содержащую корпус и шесть расположенных в линию конических элементов, связанных с корпусом, отличающаяся тем, что конические элементы содержат суженную верхушку, приспособленную для прокалывания указанной уплотнительной прокладки из фольги, причем при вставлении такая прокладка выполнена с возможностью входить во фрикционное зацепление с указанной кассетой для герметизации соединения между кассетой и прокладкой, а приспособлением для герметизации указанного соединения являются уплотнительные кольца, окружающие каждый из указанных конических элементов прокладки и являющиеся составной частью каждого из указанных конических элементов.