СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ДИНАМИКИ МАЛЫХ АНОМАЛИЙ РАЗВИТИЯ СЕРДЦА У ДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ Российский патент 2007 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования динамики малых аномалий развития сердца (МАРС) у доношенных новорожденных.

Актуальность разработки способа определяется высокой частотой встречаемости МАРС у новорожденных - аномально расположенных хорд, открытого овального окна, удлиненного Евстахиева клапана, пролапсов трикуспидального и митрального клапанов, аневризм межпредсердной и межжелудочковой перегородок или их сочетания [1], возможностью развития при данной патологии таких осложнений как инфекционный эндокардит, легочное сердце, тромбэмболии, нарушения ритма и проводимости сердца, а в редких случаях синдрома внезапной смерти ребенка [2]. МАРС имеют нестабильный характер - они могут сохраняться, частично редуцироваться или исчезать совсем в связи с изменением морфофункциональной структуры сердца. Одной из причин неблагоприятной (отрицательной или стабильной) динамики и развития осложнений при данной патологии у детей является отсутствие достаточно быстрых, точных и объективных способов прогнозирования динамики МАРС у детей первых лет жизни. Поэтому разработка способа прогнозирования динамики МАРС у доношенных новорожденных является актуальной. Способ позволит назначить своевременное наблюдение и адекватную терапию и предотвратить неблагоприятную динамику и развитие осложнений данного заболевания.

Из общедоступных сведений нами не выявлено аналогов по прогнозированию динамики МАРС у доношенных новорожденных.

Техническим решением заявляемого способа является прогнозирование динамики МАРС у доношенных новорожденных путем определения в периферической венозной крови на 4-5 день жизни ребенка относительного содержания HLA-DR+ лимфоцитов. При значении показателя, равном 12% или менее, динамика МАРС к году жизни ребенка оценивается как неблагоприятная (сохранение МАРС), а при значении более 12% как положительная (частичное или полное исчезновение МАРС) в 82,14% случаев.

Новизна способа

Впервые предлагается прогнозировать у доношенных детей 4-5 дня жизни динамику МАРС к году жизни по определению относительного содержания HLA-DR+ лимфоцитов в периферической венозной крови.

По результатам ранее проводимых исследований отмечалось повышение значения этого показателя, относительно норматива соответствующего возраста, при атопическом дерматите [3], перинатальном поражении ЦНС [4], лекарственной аллергии [5]. Снижение относительного содержания HLA-DR+ лимфоцитов отражает недостаточность функциональной активности иммунокомпетентных клеток при индукции иммунного ответа, их способности к активации, пролиферации и дифференцировке, то есть факторов, приводящих к развитию неполноценного иммунного ответа. Мы считаем, что возможное участие механизмов аутоиммунного повреждения ведет к нарушению процессов депозиции коллагена и эластина в интерстиции соединительной ткани сердца и в конечном итоге приводит к неблагоприятной динамике МАРС.

Отличительные признаки способа:

Установлен прогностический параметр относительного содержания HLA-DR+ лимфоцитов в периферической венозной крови доношенных новорожденных 4-5 дня жизни, когда при значении этого параметра, равном 12% или менее, прогнозируют неблагоприятную динамику (сохранение МАРС, усугубление клинических проявлений, развитие осложнений), а при значении более 12% прогнозируют положительную динамику (исчезновение одного или всех вариантов МАРС, улучшение клинической картины) к году жизни.

Способ осуществляется следующим образом:

1. У доношенных новорожденных 4-5 дня жизни производят забор 0,5 мл периферической венозной крови.

2. Выделение лимфоцитов из 0,5 мл периферической венозной крови осуществляется стандартным методом - центрифугированием в градиенте плотности фиколл-верографин при 1500 об/мин в течение 30 минут [6].

3. В пробирку, содержащую 100 мкл лимфоцитов в концентрации 1×10⁶ кл/мл, добавляют 20 мкл моноклональных анти-HLA-DR антител, меченных FITC или РЕ. Клетки инкубируют с моноклональными антителами в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, после чего отмывают 1 раз 1 мл физиологического раствора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 2 минут. Клетки в пробирках ресуспендируют в 500 мкл физиологического раствора [7].

4. Учет реакции проводят на проточном цитометре, определяя в лимфоцитарном гейте процентное (относительное) содержание HLA-DR+ клеток.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами:

Пример 1. Ребенок Г. родился от III беременности (в анамнезе 1 своевременные роды и 1 медицинский аборт), осложнившейся гестозом (нефропатия I степени). II своевременные роды в 38-39 недель. Оценка по шкале Апгар 7-8 баллов. Общее состояние оценено как удовлетворительное с момента рождения. Масса тела - 3200 г, длина тела - 52 см. При аускультативном исследовании тоны сердца ясные, шумов нет. По данным ЭКГ: нормограмма, ритм синусовый, ЧСС - 117 уд/мин. Заключение по ЭХО-КГ, проведенному в 1-й день жизни: наличие у верхушки левого желудочка аномально расположенной (поперечной) хорды (МАРС), сократительная функция миокарда в норме. На 4 сутки по заявляемому способу в периферической венозной крови новорожденного определялось содержание HLA-DR+ лимфоцитов, которое составило 5,2%, что ниже заявляемого уровня (12%). Согласно заявляемому способу прогнозируют неблагоприятную динамику МАРС к году жизни. При повторном обследовании в 1 год жизни ребенка по данным ЭХО-КГ наблюдалось сохранение в полости левого желудочка сердца аномально расположенной (поперечной) хорды, по данным аускультации сердца и ЭКГ отклонений от нормы не выявлено, что говорит об отсутствии положительной динамики.

Таким образом, прогноз по предлагаемому способу подтвердился.

Пример 2. Ребенок Б. родился от I беременности, протекавшей на фоне хронического пиелонефрита вне обострения и осложнившейся гестозом (нефропатия I степени). I своевременные роды в 39 недель. Оценка по шкале Апгар 6-7 баллов. Общее состояние оценено как близкое к удовлетворительному с момента рождения. Масса тела - 3450 г, длина тела - 54 см. При аускультативном исследовании слышен легкий систолический шум на верхушке сердца, тоны сердца ясные. По данным ЭКГ: правограмма, ритм синусовый, ЧСС - 107 уд/мин. Заключение по ЭХО-КГ, проведенному в 1-й день жизни: наличие у верхушки и в средней трети левого желудочка аномально расположенных хорд (МАРС), сократительная функция миокарда умеренно снижена. На 5 сутки по заявляемому способу в периферической венозной крови новорожденного определялось содержание HLA-DR+ лимфоцитов, которое составило 12%, что равно заявляемому уровню (12%). Согласно заявляемому способу прогнозируют неблагоприятную динамику МАРС к году жизни. При проведении повторного обследования в 1 год жизни ребенка по данным ЭХО-КГ наблюдалось сохранение у верхушки и в средней трети левого желудочка аномально расположенных хорд, при аускультации сердца - небольшой систолический шум на верхушке сердца, по данным ЭКГ - нормограмма, ритм синусовый, неполная блокада правой ножки пучка Гиса, что говорит об отсутствии положительной динамики.

Таким образом, прогноз по предлагаемому способу подтвердился.

Пример 3. Ребенок Г. родился от I беременности, протекавшей на фоне анемии I степени. II своевременные роды в 39 недель. Оценка по шкале Апгар 7-8 баллов. Общее состояние оценено как удовлетворительное с момента рождения. Масса тела - 3600 г, длина тела - 54 см. При аускультативном исследовании тоны сердца приглушены, шумов нет. По данным ЭКГ: нормограмма, ритм синусовый, ЧСС - 102 уд/мин. Заключение по ЭХО-КГ, проведенному в 1-й день жизни: наличие в полости левого желудочка аномально расположенной хорды, Евстахиева заслонка удлиненна (малые аномалии развития сердца), сократительная функция миокарда в норме. На 5 сутки по заявляемому способу в периферической венозной крови новорожденного определялось содержание HLA-DR+ лимфоцитов, которое составило 13,4%, что выше заявляемого уровня (12%). Согласно заявляемому способу прогнозируют благоприятную динамику МАРС к году жизни. При проведении повторной ЭХО-КГ в 1 год жизни ребенка наблюдалось сохранение в полости левого желудочка сердца только аномально расположенной хорды, по данным аускультации сердца и ЭКГ отклонений от нормы нет, что говорит о наличии положительной динамики.

Таким образом, прогноз по предлагаемому способу подтвердился.

Пример 4. Ребенок П. родился от II беременности (в анамнезе 1 медицинский аборт), осложнившейся угрозой прерывания беременности в 18 недель. I своевременные роды в 38 недель. Оценка по шкале Апгар 7-8 баллов. Общее состояние оценено как удовлетворительное с момента рождения. Масса тела - 3550 г, длина тела - 54 см. При аускультативном исследовании тоны сердца ясные, шумов нет. По данным ЭКГ: нормограмма, ритм синусовый, ЧСС - 122 уд/мин. Заключение по ЭХО-КГ, проведенному в 1-й день жизни: в средней трети левого желудочка аномально расположенная (поперечная) хорда, открытое овальное окно - 2 мм (малые аномалия развития сердца), сократительная функция миокарда снижена. На 4 сутки по заявляемому способу в периферической венозной крови определялось содержание HLA-DR+ лимфоцитов, которое составило 13,3%, что выше заявляемого уровня (12%). Согласно заявляемому способу прогнозируют благоприятную динамику МАРС к году жизни. При проведении повторной ЭХО-КГ в 1 год жизни у ребенка не наблюдалось каких-либо аномалий развития сердца, по данным аускультации сердца и ЭКГ отклонений от нормы нет, что говорит о положительной динамике.

Таким образом, прогноз по предлагаемому способу подтвердился.

Преимущества способа:

1. Возможность объективной оценки прогноза динамики МАРС у доношенных новорожденных к году жизни.

2. Заявляемый способ не требует больших временных затрат и осуществляется за 1 ч 10 мин.

3. Исследование может быть проведено в любое время суток.

4. Предлагаемый способ имеет высокую точность - 82,14%.

5. Исследуется малый объем крови (0,5 мл).

6. Позволяет своевременно назначить необходимое наблюдение за детьми 1-го года жизни, внести коррекцию в лечебные мероприятия, улучшить исходы и предотвратить развитие осложнений МАРС у детей 1-го года жизни.

Указанным способом обследовано 28 доношенных новорожденных детей 4-5 дня жизни с различными вариантами МАРС.

Результаты исследования представлены в таблице 1.

Таблица 1Результаты исследованийКоличество обследованных28Истинно положительные результаты13Истинно отрицательные результаты10Ложно положительные результаты1Ложно отрицательные результаты4Точность способа82,14%Чувствительность способа76,47%Специфичность способа90,91%

ЛИТЕРАТУРА

1. Меньшикова Л.И., Макарова В.И., Сурова О.В., Ефимова Н.В., Кузьмина Г.К. Значение малых аномалий развития сердца в формировании патологии сердечно-сосудистой системы у детей //Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 2001. - №5. - С.39-42.

2. Земцовский Э.В. Соединительно-тканные дисплазии сердца //СПб: ТОО «Политекс-Норд-Вест», 1998. - 96 с.

3. Гасич Н.А. Изменение иммунного статуса и оптимизация терапии больных атопическим дерматитом: Дис... к.м.н. - Красноярск, 1996. - 200 с.

4. Ефанова Е.А. Субпопуляционный состав лейкоцитов крови у новорожденных с респираторным дистресс-синдромом и гипоксическим поражением центральной нервной системы //Материалы II Российского конгресса «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии». - М., 2003. - С.503-504.

5. Васнева Ж.П., Торопова Н.Е. Иммунологическое обследование пациентов с лекарственной непереносимостью и поствакцинальными осложнениями // Материалы научно-практической конференции «Факультету постдипломной подготовки СамГМУ - 15 лет». - Самара, 1998. - С.227-229.

6. Boum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood and bone marrow //Scand. J. Clin. Invest. - 1968. - V.21. - N97. - P.77.

7. Ohta G., Fujiwara K., Nishi Т., Oka H. Normal values of peripheral lymphocyte populatuon and Т cell subsets at a fixed time of day: A flow cytometric analysis with monoclonal antibodies in 210 healthy adults //Clin. Exp. Immunol. - 1986. - V.64. - P.146-149.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования динамики малых аномалий развития сердца у доношенных новорожденных. Сущность способа: на 4-5 день жизни ребенка в периферической венозной крови определяют относительное содержание HLA-DR+ лимфоцитов. При его значении, равном 12% или менее, прогнозируют сохранение малых аномалий развития сердца к году жизни, а при содержании HLA-DR+ лимфоцитов более 12% частичное или полное исчезновение малых аномалий развития сердца к году жизни. Использование способа позволяет повысить точность прогнозирования, дает возможность назначить своевременное наблюдение и адекватную терапию, а также предотвратить неблагоприятную динамику и развитие осложнений данной патологии у детей раннего возраста. 1 табл.

Способ прогнозирования динамики малых аномалий развития сердца у доношенных новорожденных, отличающийся тем, что в периферической венозной крови новорожденного на 4-5 день жизни определяют относительное содержание HLA-DR+ лимфоцитов и при его значении, равном 12% или менее, прогнозируют сохранение малых аномалий развития сердца, а при значении более 12% - частичное или полное исчезновение малых аномалий развития сердца к году жизни.