СПОСОБ РАННЕЙ СТИМУЛЯЦИИ ПОЛОВОЙ ЦИКЛИЧНОСТИ У КОРОВ ПОСЛЕ РОДОВ Российский патент 2007 года по МПК A61K35/54 

Предлагаемое изобретение относится к области животноводства, в частности к ветеринарному акушерству, и может быть применено при профилактике бесплодия у коров после родов.

Известно, что первый раз после родов коровы могут приходить в состояние охоты уже на 30-е сут и оплодотворяться к 65-77 дню (Dowlen Н., Richardson D. Reproductive management at the dairy experiment station. - Jersey J., 1977, v. 24, №6. - p.46; Kupferschmiedt Н. Untersuchungen über die postpartale Rastzeit beim Rind. Schweizer Archiv für Tierheilkunde, 1975, Bd.117, Н.5. - S.243-254). За счет уменьшения сервис-периода количество оплодотворенных коров за год можно увеличить примерно на 5% (Kräusslich Н. et. al. Der Einfluss der Rastreit auf verschiedene Fruchtbarkeitsparameter. - Berl. mid Munch. Tierarztl., Wschr., 1977, Bd.90, Н.3. - S.55-57).

Известны способы ранней стимуляции половой цикличности для уменьшения сервис-периода путем применения гормональных препаратов как отдельно, так и в сочетании с биогенными стимуляторами до и после родов (Семенов Б.Я. Использование различных средств и методов половой возбудимости коров / Б.Я.Семенов // В кн. Вопросы ветеринарной фармации и фармакотерапии. - Рига. - 1982. - 284 с.; Акатов В.А. Влияние синестрола, эстрадиола-дипропионата и окситоцина на моторику матки / В.А.Акатов, В.Д.Мисайлов // Ветеринария, 1970. - №2. - С.89-93; Губаревич Я.Г. Влияние некоторых медикаментозных средств на сократительную деятельность матки коров / Я.Г.Губаревич, В.М.Воскобойников // Вопр. теории и практики ветеринарии и зоотехники: Ученые зап. Витебского вет. ин-та. // Минск, Уроджай, 1970. - т.22. - С.85-91).

Применение данных способов без предварительного исследования гормонального статуса у животных может привести к негативным последствиям. Кроме того, эти препараты обладают недостаточной иммуностимулирующей активностью повышения неспецифической резистентности организма коров в послеродовой период (Осетров А.А. Система показаний и противопоказаний для восстановления, стимуляции и синхронизации воспроизводительной функции коров и телок / А.А.Осетров // Республиканская науч. - производ. конф. По профилактике бесплодия и болезней молочной железы сельскохозяйственных животных // Казань, 1984. - С.62-63).

Известен также способ гормональной стимуляции половой цикличности у коров (Мингазов Т.А. Оплодотворяемость коров при использовании гормональных препаратов / Т.А.Мингазов, Л.В.Бабышева // Зоотехния, 1994. - №5. - С.29-30), который позволяет сократить сервис-период при анэструсе на 20 дней. Данный способ не обеспечивает повышения уровня неспецифического иммунитета у животных.

Задача изобретения - повышение качества стимуляции половой цикличности у коров в ранний послеродовой период.

Это достигается тем, что в качестве стимулирующего средства применяют иммуномодулятор (RU 2036651, 5 А61К 31/00, 1995) - плацента денатурированная суспендированная (ПДС). ПДС - средство, нормализующее метаболические процессы в организме, оказывающие иммуномодулирующее и адаптогенное влияние за счет наличия в его составе полипептидов, аминокислот и нуклеиновых кислот.

В связи с тем, что на организм коров комплексно влияет ряд факторов, в том числе: функциональное состояние половой системы, кормление, содержание, особенности технологии использования, которые вызывают прежде всего расстройство нейроэндокринной регуляции половой цикличности (Ильинский Е.В. Профилактика бесплодия коров в условиях интенсификации молочного скотоводства / Е.В.Ильинский // Краснодар. - 1983. - С.37-50; Сорра V., Bertoni J. Jnsufficiente fertilita bovina ja cause di natura alimentare / V.Coppa, J.Bertoni // Zootecnia e veterinaria, 1980. - v.36, №11. - p.9639-9646; Vallat Andre. Jnfecondite collective des bovines Aspects nutrionnels / A.Vallat // Science veterinary. - Medicine comparative. - 1982. - v.84. - №1. - p.37-49), то введение животным препарата ПДС будет способствовать становлению адаптационно-метаболического гомеостаза, повышению естественной резистентности и активации нейроэндокринной регуляции половой цикличности у коров.

Предложен способ ранней стимуляции половой цикличности у коров путем введения бионормализатора перед родами или сразу после родов, при котором животным вводят иммуномодулятор ПДС подкожно в дозе 20 мл/гол/сут (200 мг) не более 10 сут.

Пример. Первой группе коров (35 гол) ПДС вводили в течение 10 сут перед родами. Животным второй группы (38 гол) ПДС вводили в течение 10 сут после родов. Третья группа (41 гол) - контрольные животные после родов, которые не подвергались обработке.

Эффективность применения препарата учитывали по показателям воспроизводительной функции у коров.

В результате отмечено (табл.1), что в 1-й группе при 10-дневной обработке коров ПДС за 10 сут до предполагаемых родов приход в охоту в среднем составил 19,5 сут. При этом 27 гол оплодотворилось после первого, 4 гол после второго, 2 гол после третьего и 2 гол после четвертого осеменения. Оплодотворяемость за период наблюдения - 64 сут после обработки составила 100% (35 гол).

Во второй группе при обработке ПДС в течение 10 сут сразу после родов приход в охоту в среднем по группе составил 15,0 сут. При этом 34 гол оплодотворились после первого, 3 гол после второго и 1 гол после третьего осеменения. За период наблюдения 49 сут после обработки ПДС оплодотворяемость составила 100% (38 гол).

В третьей группе (контроль) приход в охоту составил 63 сут. Оплодотворяемость за период наблюдения 71 сут равнялась 100% (41 гол). Таким образом, наилучший эффект по стимуляции половой цикличности в ранний послеродовой период отмечен во 2-й группе, так как время прихода коров в охоту было наименьшим при высокой оплодотворяемости и наименьшем индексе осеменения.

Таблица 1
Эффективность различных вариантов применения ПДС№ группыКоличество животныхВремя введения ПДСПоявление половой цикличности, сут (в среднем)Количество осеменений, голПлодотворное осеменение, через сутИндекс осемененияОплодотворилось, гол %1234135До родов19,52742264,11,435 (100)238После родов15,03431-49,51,138 (100)341 63,021115471,31,541 (100)

1) Кровь на определение содержания в сыворотке эстрадиола, прогестерона, кортизола, характеризующих степень активности нейроэндокринной регуляции половой цикличности, а также показателей альбумина, α-, β-, γ-глобулинов и иммуноглобулинов, β-липопротеидов, холестерола, активности амилазы, аланинаминотрансферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), отражающих уровень адаптационно-метаболических изменений, брали из яремной вены у коров до и после обработки ПДС за 10 сут перед родами (1-я группа) и аналогично при обработке ПДС в течение 10 сут сразу после родов (2-я группа). В качестве контроля использовали интактных животных, у которых в это же время проводили отбор и определение показателей крови.

Полученные данные содержания гормонов (табл.2, 3) при применении ПДС в течение 10 сут до родов показали, что концентрация прогестерона сразу после родов снижается в 3 раза больше, чем в контроле. Снижение концентрации эстрадиола при этом также было более выраженным после обработки ПДС по сравнению с контрольными животными, что указывает на активность фетоплаценгарной системы и представляет собой один из доминирующих факторов начала родов (Митрофанов И.А. Изменение показателей иммунитета в течение нормального менструального цикла / И.А.Митрофанов // Акушерство и гинекология, 1984. - №3. - С.8-9).

Обработка коров ПДС сразу после родов в аналогичной дозе показала, что после окончания курса стимуляции наметилась тенденция повышения эстрадиола против его неизменного состояния в контроле. Это указывает на активизацию процессов фолликулогенеза и маточного кровотока, так как снижение уровня эстрадиола характерно при его нарушениях (Бурлев В.А. // Вестник академии вет. наук СССР, 1990. - №5. - С.10-14).

Таким образом, лютеоингибирующие процессы, способствующие снижению прогестерона и повышению эстрадиола в крови, происходят, очевидно, за счет наличия в составе испытуемых препаратов низкомолекулярных полипептидов, которые обладают определенной активностью по отношению к индукции мембраной клетки арахидоната (арахидоновая кислота), которая путем целого ряда биохимических реакций превращается в простагландины (Руководство по иммунофармакологии: Пер. с англ. / Под ред. М.М.Дейла и Дж.К.Формена. - М.: Медицина, 1998. - 332 с.).

Снижение уровня прогестерона связывается в данном случае с индукцией ПДС простагландинов, активно вызывающих лизис желтого тела полового цикла.

Повышение уровня эстрадиола - 17β (при обработке после родов), свидетельствует, очевидно, о нарастании процессов ингибирования перекисного окисления липидов мембран и митохондрий клетки, что приводит к усилению их транспортных функций, активности ферментных систем, а также субстратной специфичности.

Таблица 2
Гормональные показатели крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут до родовВремя взятия крови (n-4)Эстрадиол, нмоль/лПрогестерон, нмоль/лКортизол, нмоль/лопытконтрольопытконтрольопытконтроль1. 3а 10 сут до родов (до обрабоки)4,73±0,403,80±0,8320,25±5,0816,85±2,6932,18±11,4820,20±2,782. После родов, на 2-е сут2,64±1,444,12±1,020,84±0,202,20±0,9637,33±11,7028,88±4,443. Через 24 сут после родов4,89±0,254,95±0,160,68±0,081,83±1,0327,50±2,4722,75±3,31

Таблица 3
Гормональные показатели крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут после родовВремя Взятия крови (n=4)Эстрадиол, нмоль/лПрогестерон, нмоль/лКортизол, нмоль/лопытконтрольопытконтрольопытконтроль1. После родов (до обработки)2,99±1,072,90±1,291,31±0,660,71±0,1341,50±11,1121,93±2,912. Через 10 сут после начала обработки ПДС3,91±0,714,57±0,701,00±0,470,64±0,0436,33±12,8221,43±4,603. Через 24 сут после начала обработки ПДС4,82±0,324,89±0,250,63±0,071,48±0,5646,53±3,4336,63±9,53

Учитывая то, что эстрадиол-17β способен в организме превращаться в эстриол, следует полагать, что увеличение его при обработке коров ПДС после родов способствует появлению наиболее выраженного стимулирующего влияния на пролиферативную активность шейки матки, влагалища и вульвы.

Тенденция увеличения уровня кортизола у животных, обработанных ПДС в течение 10 сут до родов, свидетельствует об активизации гипофизарно-надпочечниковой системы матери и плода через активизацию секреции адренокортикотропного гормона (АКТГ) и рилизинг-гормона гипоталамуса (Макаров И.А. О функциональном состоянии гипофизарно-надпочечниковой системы при нормально протекающей беременности / И.А.Макаров // Акушерство и гинекология, 1981. - №5. - С.30-31).

В связи с вышеизложенным, механизм бионормализующего влияния ПДС на стимуляцию половой цикличности в ранний послеродовой период происходит за счет снятия тормозящего воздействия прогестерона, вследствие чего активизируются гипоталамо-гипофизарные связи, развивается фолликулогенез и одновременно нарастает в крови уровень эстрогенов.

2) Одновременно проведенные биохимические исследования гуморальных показателей уровня обменных процессов и естественной резистентности у коров показывают, что после введения ПДС за 10 сут до родов наиболее выраженные изменения отмечены в отношении β-глобулинов, γ-глобулинов и общих иммуноглобулинов (табл.4), где повышение концентрации исследуемых фракций было более интенсивным по отношению к контролю. Изменения белковых фракций при обработке коров в течение 10 сут после родов (табл.5), характеризуются, в основном, одинаковой тенденцией изменений между собой, а также схожестью общего направления изменений с контрольными животными.

Активность индикаторных ферментов сыворотки крови характеризует адаптивный механизм коров-матерей и их способность в дальнейшем к проявлению половой цикличности (табл.6, 7).

Таблица 4
Изменения белковых показателей в крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут до родовСодержание белковых фракций (n=4)Альбумины, %α-глобулины, %β-глобулины, %γ-глобулины, %А/ГИммуноглобулины, едопытконтрольопытконтрольопытконтрольопытконтрольопытконтрольопытконтроль1. За 10 сут до родов (до обработки)42,79±1,1543,44±2,3414,54±1,5013,95±1,5316,54±1,1913,31±0,6126,13±1,3729,30±1,900,740,7725,28±0,7621,91±1,622. После родов, на 2-е сут41,05±1,9642,39±2,3415,86±1,0913,80±1,1515,44±1,9513,24±0,9427,65±1,7830,57±2,320,700,7424,78±0,8922,03±1,663. Через 24 сут после родов35,98±1,9441,17±0,6814,72±1,1513,04±1,2813,34±1,4513,32±1,1535,96±2,0332,47±1,450,570,7030,64±2,2223,56±1,22- р<0,05 (здесь и далее)

Таблица 5
Изменения белковых показателей в крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут после родовСодержание белковых фракций (n=4)Альбумины, %α-глобулины, %β-глобулины, %γ-глобулины, %А/ГИммуноглобулины, едопытконтрольопытконтрольопытконтрольопытконтрольопытконтрольопытконтроль1. На 2-е сут после родов46,01±1,1443,38±1,4014,15±0,0215,08±1,0313,63±3,3716,18±0,9626,21±1,5025,36±1,230,850,7721,47±1,4520,99±3,572. Через10 сут после начала обработки ПДС42,24±1,8641,80±2,8715,84±1,1915,67±0,5914,72±1,2313,83±1,6427,20±2,3028,70±1,650,730,7222,23±0,2525,17±2,793. Содержание в крови через24 сут после родов41,05±0,9538,25±1,1715,46±1,0314,58±1,1812,94±0,5414,02±0,8730,55±1,9634,15±1,600,700,6127,73±2,0126,86±4,07

Таблица 6
Ферментативная активность крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут до родовАктивность ферментов (n=4)Амилаза, мг/ч×лЩелочная фосфатаза, нмоль/с×лАланинаминотрансфераза, мкмоль/лАспартатаминотрансфераза, мкмоль/лопытконтрольопытконтрольопытконтрольопытконтроль1. За 10 сут до родов (до обработки)11,38±1,0713,60±1,55512,08±132,95648,65±30,110,40±0,010,42±0,080,84±0,081,01±0,092. После родов, на 2-е сут21,25±4,2917,20±2,58500,8±78,78593,58±70,130,28±0,070,35±0,050,70±0,030,68±0,163. Через 24 сут после родов12,25±2,3515,43±3,06545,00±98,67327,65±78,430,44±0,190,48±0,160,97±0,120,94±0,10

Таблица 7
Ферментативная активность крови коров при обработке ПДС в течение 10 сут после родовАктивность ферментов (n-4)Амилаза, мг/ч×лЩелочная фосфатаза, нмоль/с×лАланинаминотрасфераза, мкмоль/лАспартатаминотрансфераза, мкмоль/лопытконтрольопытконтрольопытконтрольопытконтроль1.На 2-е сут после родов18,73±5,7317,93±5,20626,48±143,47328,58±93,850,62±0,070,48±0,031,24±0,240,94±0,112. Через 10 сут после начала обработки ПДС12,60±1,3519,58±1,84330,98±14,01319,93±29,580,26±0,070,26±0,060,96±0,130,80±0,073. Через 24 сут после начала обработки ПДС28,03±1,9113,78±1,81572,60±126,27412,38±96,990,32±0,070,39±0,060,86±0,080,79±0,06

Известно (Голиков П.П. Активность индикаторных ферментов сыворотки крови как показатель нарушений кислородного гомеостаза у больных при неотложных состояниях. / П.П.Голиков // Пат. физиология и экспериментальная терапия, 1986. - №6. - С.60-64), что стрессовая ситуация для организма, возникающая в процессе родов, сопровождается переключением углеводного обмена на липидный за счет глюкокортикоидов, а изменение гормонального фона организма увеличивает проницаемость мембран. Уровень глюкозы в свою очередь зависит также от активности АлАТ и АсАТ, а глюкозоаланиновый переход активизируется посредством дефосфорилирования ЩФ. В опытах изменения ферментативной активности при использовании ПДС до родов характеризуются тенденцией увеличения ЩФ, амилазы и АсАТ. Повышение активности ЩФ очевидно связано с выходом глюкозы из тканей после дефосфорилирования. В свою очередь, повышение активности АсАТ может объясняться более значительной интенсивностью и взаимосвязью белкового, углеводного и липидного обменов. На фоне относительной гипопротеинемии повышение активности АлАТ также можно рассматривать как усиление аланинглюкозного пути с выбросом из клеток глюкозы за счет ее дефосфорилирования повышенной активностью ЩФ, то есть как синдром метаболического блока по отношению к глюкозе и активацию путей компенсаторного синтеза по отношению к белкам. В целом, активность индикаторных ферментов крови отражает активное состояние гомеостаза организма при начальных этапах его нарушения.

3) Гистоструктурные изменения в яичниках коров после обработки ПДС показывают, что в корковом слое находятся целые генерации фолликулов на разных стадиях развития (фиг.1). Наблюдается интенсивное рассасывание белого тела 1, отмечают вторичные фолликулы 2. Наибольшим было количество созревающих с большой полостью фолликулов и яйцеклеток. Такая картина характерна для органа, подвергнутого стимулирующей нагрузке, когда выявляется определенная положительная зависимость между величиной фолликула и концентрацией стероидных гормонов в фолликулярной жидкости (Торганова И.Т. Об относительной автономности стероидо- и оогенеза в фолликуле яичника женщины / И.Т.Торганова // Акушерство и гинекология, 1983. - №2. - С.15-17). О бионормализующем влиянии ПДС свидетельствуют отмеченные нами явления гиперплазии в лимфоузлах (фиг.2), где четко выражена ретикулярная ткань 3 и мякотные шнуры 4; увеличение количества фолликулов 5 и центров размножения 6 селезенки (фиг.3); полнокровие синусов и вен, а также вакуолизация гепатоцитов в печени (фиг.4), при котором наблюдаются печеночные трабекулы (балки) 7, триады печени 8, состоящие из междольковой артерии 9, междолькового (желчного) клубочка 10 и междольковой вены 11, а также гепатоциты 12.

Технико-экономическая эффективность

Экономическая эффективность применения ПДС при обработке в дозе 20 мл/гол/сут в течение 10 сут до предполагаемых родов составила 78,0 руб., а при обработке в той же дозе в течение 10 сут после родов составила 91,7 руб. на 1 рубль затрат соответственно (в ценах 2005 года).

Источники информации

1. Dowlen H., Richardson D. Reproductive management at the dairy experiment station. - Jersey J., 1977, v.24, №6. - p.46.

2. Kupferschmiedt H. Untersuchungen über die postpartale Rastzeit beim Rind. Schweizer Archiv für Tierheilkunde, 1975, Bd.117, H.5. - S.243-254.

3. Krüusslich H. et. al. Der Einfluss der Rastreit auf verschiedene Fruchtbarkeitsparameter. - Berl. und Munch. Tierarztl., Wschr., 1977, Bd.90, H.3. - S.55-57.

4. Семенов Б.Я. Использование различных средств и методов половой возбудимости коров / Б.Я.Семенов // В кн. Вопросы ветеринарной фармации и фармакотерапии. - Рига. - 1982. - 284 с.

5. Акатов В.А. Влияние синестрола, эстрадиола-дипропионата и окситоцина на моторику матки / В.А.Акатов, В.Д.Мисайлов // Ветеринария, 1970. - №2. - С.89-93.

6. Губаревич Я.Г. Влияние некоторых медикаментозных средств на сократительную деятельность матки коров/ Я.Г.Губаревич, В.М.Воскобойников // Вопр. теории и практики ветеринарии и зоотехники: Ученые зап. Витебского вет. ин-та. // Минск, Уроджай, 1970. - т.22. - С.85-91.

7. Осетров А.А. Система показаний и противопоказаний для восстановления, стимуляции и синхронизации воспроизводительной функции коров и телок / А.А.Осетров // Республиканская науч. - производ. конф. По профилактике бесплодия и болезней молочной железы сельскохозяйственных животных // Казань, 1984. - С.62-63.

8. Мингазов ТА. Оплодотворяемость коров при использовании гормональных препаратов / Т.А.Мингазов, Л.В.Бабышева // Зоотехния, 1994. - №5. - С.29-30.

9. RU 2036651, 5 A61K 31/00, 1995.

10. Ильинский Е.В. Профилактика бесплодия коров в условиях интенсификации молочного скотоводства / Е.В.Ильинский // Краснодар. - 1983. - С.37-50.

11. Сорра V., Bertoni J. Jnsufficiente fertilita bovina ja cause di natura alimentare / V.Сорра, J.Bertoni // Zootecnia e veterinaria, 1980. - v.36, №11. - p.9639-9646.

12. Vallat Atldre. Jnfecondite collective des bovines Aspects nutrioimels / A.Vallat // Science veterinary. - Medicine comparative. - 1982. - v.84. - №1. - p.37-49.

13. Митрофанов И.А. Изменение показателей иммунитета в течение нормального менструального цикла / И.А.Митрофанов // Акушерство и гинекология, 1984. - №3. - С.8-9.

14. Бурлев В.А. // Вестник академии вет. наук СССР, 1990. - №5. - С.10-14.

15. Руководство по иммунофармакологии: Пер. с англ. / Под ред. М.М.Дейла и Дж.К.Формена. - М.: Медицина, 1998. - 332 с.

16. Макаров И.А. О функциональном состоянии гипофизарно-надпочечниковой системы при нормально протекающей беременности / И.А.Макаров // Акушерство и гинекология, 1981. - №5. - С.30-31.

17. Голиков П.П. Активность индикаторных ферментов сыворотки крови как показатель нарушений кислородного гомеостаза у больных при неотложных состояниях. / П.П.Голиков // Пат. физиология и экспериментальная терапия, 1986. - №6. - С.60-64.

18. Торганова И.Т. Об относительной автономности стероидо- и оогенеза в фолликуле яичника женщины / И.Т.Торганова // Акушерство и гинекология, 1983. - №2. - С.15-17.

Изобретение относится к области животноводства, в частности к ветеринарному акушерству. Коровам подкожно в дозе 20 мл/гол/сут не более 10 сут перед родами или сразу после родов вводят препарат ПДС (плацента денатурированная суспендированная). Способ позволяет уменьшить время сервис-периода при оптимальной оплодотворяемости коров за счет повышения уровня адаптационно-метаболического гомеостаза и активизации нейроэндокринной регуляции половой цикличности. 7 табл., 4 ил.

Способ ранней стимуляции половой цикличности у коров после родов путем введения бионормализатора, отличающийся тем, что перед родами или сразу после родов коровам вводят иммуномодулятор ПДС (плацента денатурированная суспендированная) подкожно в дозе 20 мл/гол/сут (200 мг) не более 10 сут.