СПОСОБ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА ЛИЦ, ИНФИЦИРОВАННЫХ ВИРУСОМ ГЕРПЕСА Российский патент 2009 года по МПК A61N5/06 

Изобретение относится к медицине, в частности к способам терапевтического воздействия на лиц, инфицированных вирусом герпеса.

Как известно, слово "герпес" (ползти) используется XXV веков. Лихорадочный герпес был описан римским врачом Геродотом в 100 г. до н.э. О генитальном герпесе впервые сообщил французский врач J.Astruc в 1736 г. В конце XIX в. была показана заразность для человека жидкости из очагов герпеса на губах больных. В 1923 г. Blecfen и соавт. произвели первую попытку пассивной иммунизации герпеса. Для этой цели использовалась сыворотка людей, переболевших ветряной оспой. В 1925 г. вирус был выращен in vitro.

В 1921 г. В. Lipshutz инокулировал материал из очагов генитального герпеса в кожу человека и получил клиническую картину герпеса. На основании того, что вирусный кератит легче развивался при заражении материалами из очагов генитального, чем лабиального герпеса, он предположил различия в эпидемиологии между этими формами герпеса. До него большинство исследователей предполагали наличие одного возбудителя. В начале 60-х годов ученые Германии и США показали, что вирус простого герпеса при помощи нейтрализационного теста может быть разделен на два антигенных типа и что существует связь между антигенным типом и местом проявления инфекции.

Герпес занимает второе место по распространенности среди заболеваний, передающихся половым путем, после трихомониаза. Заболевания, вызванные ВПГ, занимают второе место (15,8%) после гриппа в качестве причин смерти от вирусных инфекций (не считая СПИДа). В США проблема герпеса является одной из ведущих медико-социальных проблем уже 25 лет. Генитальный герпес поражает все группы населения. 98% взрослого населения во всем мире имеют антитела к вирусу простого герпеса (ВПГ) 1 или 2. В 7% случаев генитальный герпес протекает бессимптомно.

Герпесвирусы обладают способностью к инфицированию, суперинфицированию и аутоинфицированию практически любого индивида, пожизненной персистенции в нервных клетках при очень низкой смертности хозяев, способности в любое время переходить из латентного состояния в форму, заразную для окружающих, независимо от наличия или отсутствия клиники.

Вирус проникает через восприимчивые слизистые (ротоглотка, шейка матки, конъюнктива, уретра, прямая кишка) или через микротрещины кожи. Далее вирус частично задерживается в очагах, а в основном восходит по периферическим нервным окончаниям в сенсорные и вегетативные ганглии, где персистирует.

Факторами, способствующими проявлению и/или рецидивированию генитального герпеса, являются: снижение иммунологической реактивности, переохлаждение или перегрев организма, сопутствующие заболевания, медицинские манипуляции, в том числе аборты и введение внутриматочной спирали.

Основные клинические признаки: появление на коже и слизистых оболочках сгруппированных мелких напряженных пузырьков на отечном гиперемированном основании. Пузырьки обычно локализуются на лице, иногда на половых органах; могут поражаться слизистые оболочки рта, гортани, миндалин, а также конъюнктива. Отмечаются чувство жжения, иногда недомогание, общая слабость. Очаги исчезают на 7-9-й день.

Антитела появляются через 2-5 дней после высыпаний, достигают наивысшего титра к 2-3 неделе. IgM и А - короткоживущие, через год уже не обнаруживаются, IgG циркулирует в крови несколько лет.

Рецидивирование встречается у людей, имеющих специфический комбинированный иммунодефицит лимфоидного типа. Отмечено свойство ВПГ паразитировать не только за счет лимфоцитов, но и адсорбироваться на поверхности, а затем проникать в цитоплазму микроорганизмов, в частности гонококков. Локализация ВПГ в гонококках предохраняет его от воздействия защитных сил организма, в силу чего формируется специфическая невосприимчивость. Вирус может переживать неблагоприятные периоды, а сочетанная инфекция может усиливать воспалительный процесс в урогенитальном тракте. Люди с герпетической инфекцией чувствительны к ВИЧ и более восприимчивы к последующему развитию острой ВИЧ-инфекции с клиническими проявлениями.

В настоящее время существуют специфические противовирусные препараты для лечения инфекций, вызываемых ВПГ-1 и ВПГ-2, вирусом varicella-zoster, ЦМВ. Препаратами выбора для системной терапии герпетической инфекции являются ацикловир, валацикловир, пенцикловир и фамцикловир. Среди препаратов, рекомендуемых в настоящее время для лечения герпетической инфекции, эти препараты обладают доказанной эффективностью.

Делаются попытки одновременного применения иммуномодуляторов, индукторов интерферона, гормонов тимуса, адаптогенов и т.п. с целью активизации факторов иммунной защиты и повышения эффективности лечения. Несмотря на многочисленные и длительные исследования, до сих пор не получено эффективной профилактической вакцины против герпесвирусов, за исключением вируса varicella-zoster. Локальный характер поражения и латентное течение инфекции без вирусемии приводят к тому, что даже успешная выработка антител не предотвращает очередного рецидива.

Также осуществляется местное лечение очагов поражения наружными формами специфических препаратов. При его осуществлении в продромальном периоде или сразу после первичных проявлений длительность обострения уменьшается и выраженность симптомов смягчается. В дополнение к специфическим препаратам целесообразно местное применение антисептиков при вторичной бактериальной инфекции, что способствует более быстрой эпителизации эрозивно-язвенных поражений.

Таким образом, на сегодняшний день поиск новых эффективных и безопасных для организма человека методов лечения герпетической инфекции является не просто актуальным, но жизненно необходимым.

В этой связи большой интерес вызывают исследования с использованием света различных областей спектра. Как правило, это очень широкие области спектра - от нескольких десятков до сотни нанометров. Обычно исследователи такой свет называют синий, красный и т.д. Так английская фирма "Вирулайт" начала выпуск карманного прибора для лечения герпеса. Устройство размером с электробритву, работающее на встроенном аккумуляторе, облучает поврежденную кожу инфракрасным светом. Обычно для устранения вируса достаточно двух сеансов облучения по три минуты, в более сложных случаях - до семи сеансов. Если захватить болезнь на начальной стадии, когда она проявляется только в покалываниях в уголках губ, бывает достаточно одного сеанса. Все лечение занимает вдвое меньше времени, чем лечение антивирусным кремом. Свет действует собственно не на вирус, а на иммунные клетки кожи, стимулируя их деятельность, а уж они загоняют вирус в спящее состояние, когда он ничем не проявляет себя (1).

Однако данный способ воздействия, прежде всего, не учитывает механизмы репликации вируса, в частности роль ионов металлов, участвующих в этом процессе, и поэтому не может являться достаточно эффективным при лечении герпетической инфекции.

Известно, что вирус простого герпеса относится к группе альфа-вирусов, размер вирионов составляет в среднем 120-150 нм, вирион состоит из трех основных компонентов - нуклеоида, капсида, покрывающего нуклеоид, и липидсодержащей оболочки. Вирион содержит ДНК, белок, спермин, спермидин, липиды, гликопротеиды.

В жизненном цикле вируса большую роль играет ДНК, для которой характерны все три фундаментальных процесса выражения генетической информации: репликация, транскрипция и трансляция. Заметим, что каждый этап выражения генетической информации, обеспечивающий синтез закодированных белков, происходит с участием ионов металлов. Без них ни один из указанных процессов не протекает, что свидетельствует о важном значении комплексообразования макромолекул с металлами в биохимии нуклеиновых кислот (2). Также следует заметить, что речь идет о целом комплексе металлов, каждый из которых выполняет в работе генома строго определенные специфические функции. К металлам, выполняющим наиболее важные функции в работе генетического аппарата, относятся, в частности магний, цинк и др.

Так, при репликации ДНК для работы ДНК-полимеразы кроме матричной ДНК и дезоксинуклеотидтрифосфата необходимы ионы магния. Кроме магния ДНК-полимераза содержит еще и два иона цинка.

Копирование кода ДНК в форме нуклеотида мРНК осуществляется с помощью фермента РНК-полимеразы, который нуждается в ДНК в качестве матрицы, и ионов магния и цинка, которые проявляют при этом наибольшую активность.

От наличия ионов металлов также сильно зависит и процесс трансляции, заключающийся в распознавании молекул тРНК (специфичной для каждой аминокислоты) и кодонов мРНК.

Важно также отметить и то обстоятельство, что ионы металлов связаны со способностью взаимодействовать со многими электродонорными центрами нуклеиновых кислот: фосфатными группами, основаниями и гидроксильными группами рибозы. В работе (3) показано, что ионы металлов имеют различное сродство к этим центрам и что присоединение макромолекул к таким центрам в полинуклеотидах вызывают лигандные реакции, нарушая тем самым структуру макромолекул.

Таким образом, из вышесказанного следует, какую огромную роль играют ионы металлов в работе генетического аппарата нуклеиновых кислот.Нельзя не обратить внимание и на тот факт, что в работе ДНК и РНК принимает участие огромное количество различных металлов, каждый из которых выполняет строго определенную специфическую функцию. В этом случае замена хотя бы одного металла на другой или изменение его концентрации, или нарушение его нормальной работы путем воздействия на него каким-либо внешним фактором может привести к ошибочному соединению оснований нуклеотидов, а это, в свою очередь приведет к созданию источника ошибок в распространении генетической информации.

Однако, как было показано в наших работах, для выполнения ионом металла важнейших функций в ходе биохимических реакций необходимо сохранение стабилизации его электронной оболочки от возмущающего действия света, в противном случае это приведет к нежелательным последствиям, связанным с конформационными изменениями активных центров ферментов и молекулы в целом (4).

В этой связи имеется уникальная возможность в процессе репликации вируса повлиять на его инфекционность электромагнитным полем, в частности светом, путем воздействия его на ионы металлы, содержащиеся в молекулах ДНК и РНК.

Выполненные нами многочисленные эксперименты in vitro показали (5), что вирусы можно инактивировать путем облучения его светом с длиной волны, соответствующей электронным переходам магния и цинка. Исследования in vitro явились необходимым шагом для обоснования возможности проведения клинических испытаний предлагаемого способа для лечения больных герпетической инфекцией.

Уже первые исследования in vivo показали, что для эффективного ее лечения недостаточно облучать пациентов светом только на линиях магния.

Наибольший эффект был получен тогда, когда пациентов облучали светом на длинах волн, соответствующих электронным переходам металлов, ответственных за процесс передачи генетической информации (репликации, транскрипция, трансляция), а также за процессы, связанные со стабилизацией и дестабилизацией упорядоченной структуры нуклеиновых кислот, за раскручивание и скручивание молекулы ДНК и др. К таким металлам относятся магний и цинк.

Кроме того, воздействие монохроматическим излучением, как известно, приводит и к активизации иммунной системы, что также позволяет использовать данный метод для лечения больных герпесом.

Таким образом, все вышеизложенное привело нас к созданию способа лечения, сущность которого заключается в том, что больным герпесом проводят облучение импульсным светом местно на очаги поражения (места высыпания) и/или системно на все тело больного одновременно группой длин волн: 516.7, 517.2, 518.2 и/или 636.2 с частотой следования импульсов 1-10 Гц, суммарной мощностью облучения в пределах от 250 до 1000 Вт, временем облучения 10-30 мин.

Испытания заявляемого способа осуществлялись в институте кардиологии им. акад. Н.Д.Стражеско АМНУ (Киев) и в Минской городской клинической инфекционной больнице.

Цель клинических испытаний состояла в оценке эффективности лечения больных герпетической инфекцией в изучении безопасности применения заявляемого способа для человека.

Решались следующие задачи:

1. Исследовать переносимость и безопасность применяемого способа у человека и определение терапевтической эффективности монохроматического излучения.

2. Отработать терапевтические схемы с применением прибора монохроматического света.

3. Исследовать и установить экспозицию облучения.

Был составлен также протокол клинико-лабораторных испытаний, в котором были отражены сведения о каждом больном в отдельности, анализы крови (общий и биохимический) и мочи. Анализы крови и мочи оценивались до начала исследования, а также через 2,4 недели и через 3,6,12 и 18 месяцев после воздействия света на организм. В течение курса воздействия проводился контроль иммунного статуса пациента.

Все клинические испытания нами осуществлялись с помощью газоразрядных ламп высокого давления, работающих на строго определенных длинах волн.

Определение времени облучения и выбор мощности лампы определяется поставленной задачей и выбирается таким образом, чтобы не нанести вред больному. В нашем случае время облучения составляло 10-30 мин, а мощность находилась в пределах от 250 до 1000 Вт. Количество процедур определяется лечащим врачом согласно динамике лечения.

Облучение производилось лампами, одновременно наполненными парами магния (длина волны 516,7; 517,2; 518,2 нм) и цинка (длина волны 636,2 нм), но в разных соотношениях. Эти соотношения должны быть такими, чтобы количество света, излучаемое от одной лампы, соответствовало вполне определенной величине, т.е., например, лампа, наполненная парами магния и цинка, имеющая мощность 400 Вт, должна излучать, например, 100 Вт света, соответствующего магнию, и 300 Вт, соответствующего цинку, и т.д.

Заявленный способ описывается следующим примерами конкретной реализации.

Было обследовано двадцать больных.

Для контроля действия монохроматического излучения (МХИ) использовалось 10 практически здоровых лиц (доноров крови).

До начала каждого сеанса больные сдавали кровь для оценки иммунного статуса и вирусной нагрузки, уровень которых оценивался в специальной лаборатории. Это позволило нам до начала клинических исследований располагать полной априорной информацией о степени заболеваемости каждого пациента. При этом процедура отбора крови и оценка по ней показателей, характеризующих степень заболеваемости, повторялась перед каждым сеансом.

Для подтверждения верифицированного диагноза герпесной инфекции была проведена молекулярно-генетическая идентификация носительства вирусного агента - методом ПЦР с использованием тест-систем фирмы АмплиСенс, электрофореза и системы фирмы Биотех «Geldoc-2000»; выявление уровня антител к инфекционной форме - методом ИФА, с использованием тест-систем фирмы Diaclon (Франция), с учетом реакции на ELISA-процессоре (фирма Beringer).

Кроме того, проведены следующие иммунологические исследования:

количество и субпопуляционный состав лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD16, CD19) с использованием моноклональных антител и учетом реакции на Facsstat (Becman Dickenson, США);

- уровень иммуноглобулинов классов IgG, IgM, IgA по методу Манчини;

- уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) по Digion спектрофотометрическим методом;

- внутриклеточный кислородозависимый метаболизм фагоцитов (Мц и Нф) по НСТ-тесту (спонтанному и индуцированному пирогинилом) морфологическим методом;

- уровень провоспалительных цитокинов в супернатанте мононуклеарных клеток - ФНО-α, ИЛ-6 и γ-ИФ - ИФА методом, с использованием тест-систем фирмы Diaclon (Франция) с учетом реакции на ELISA-процессоре (фирма Beringer);

- уровень аутоантител к ткани печени и поджелудочной железы (по Кондрашовой Н.И.).

После отбора крови и получения количественных показателей течения инфекции в заранее назначенный день производилось облучение пациентов. Перед началом сеанса с каждым больным велась беседа, где было подробно рассказано о физической сути метода и возможных побочных явлениях. Заканчивалась беседа подписанием больным соглашением его на участие в клинических испытаниях. Подписанное соглашение оставляло право больному в любое время приостановить его участие в клинических испытаниях без объявления на то причин.

После выполнения всех этих формальных процедур производился сеанс. Для этого больной раздевался, закрывал глаза специальной темной повязкой и ложился на топчан. Время одного сеанса в данной серии испытаний составляло от 10 до 20 мин.

Заметим, что по крови, которую сдавали пациенты перед началом каждого сеанса оценивались не только количественные показатели течения инфекции, но и все основные биохимические показатели крови: гемоглобин, ЭР, ЦП, тромбоциты, лейкоциты, СОЭ, общий билирубин, АЛТ, ACT, тимол, холестерин, мочевина, общий белок, глюкоза.

Такая процедура была необходима для контроля безопасности применения монохроматического излучения на здоровье человека.

Первым этапом исследований явилась оценка состояния наиболее чувствительных к облучению параметров клеточного и гуморального звеньев иммунитета у практически здоровых лиц после воздействия света на кровь индивидов.

В результате исследований установлено, что воздействие света на наиболее чувствительные к облучению параметры иммунной системы не ведет к негативным последствиям на уровне функциональной активности иммунокомпетентных клеток и гуморальных факторов, что свидетельствует об отсутствии негативного влияния на здорового человека

Уже после проведения первых процедур была обнаружена эффективность предлагаемого метода. Подтверждением этому является существенное улучшение объективных показателей течения инфекции, нормализация как биохимического состава крови, так и иммунологических показателей практически у всех обследуемых пациентов. У них наблюдалось снижение количества вируса.

По нашему мнению, предложенная схема лечения оказалась достаточно эффективной, т.к. ее использование позволило сократить длительность субъективных ощущений до 1,6 дня, длительность периода регресса герпетических высыпаний до 2,1 дня и увеличить период ремиссии заболевания до 6 месяцев, улучшить качество жизни и снизить клинический индекс и индекс симптоматики.

Важно также отметить, что применяемые схемы воздействия источником монохроматического света не оказывали каких-либо побочных эффектов на формулу крови и биохимические показатели.

Следует заметить, что в случае облучения пациентов лампами, содержащими другое соотношение мощностей, никакого эффекта не наблюдалось. Таким образом, для лечения больных герпетической инфекцией необходимо применять лампы на строго определенных длинах волн, соответствующих электронным переходам тех металлов, которые указаны выше, и определенных мощностей.

Логичным выводом наших исследований является то, что предлагаемый способ может являться, конечно, при дальнейшем условии его разработки дополнительным способом лечения больных герпетической инфекцией.

Список литературы

1. Лечение герпеса инфракрасным светом, Наука и техника, 2004, №7.

2. Мархоцкий Я.Л. Профилактика ВИЧ-инфекции. Минск, "Вышэйшая школа", 2003 г.

3. Эйгорн Г. Неорганическая биохимия, Т.2 М.: Мир, 1978 г.

4. Кондратьев К.Я., Федченко П.П., Тонкая структура спектра солнца и ее роль в эволюции биосферы. С.-П.: ПРОПО. 1992 г.

5. Федченко П.П., Чижик А.С., Куликов А.А., Федченко К.П. Способ воздействия на вирус СПИДа. Патент RU 2245178, 2005 г.

Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения герпетической инфекции. Проводят облучение импульсным светом местно и/или системно на все тело больного одновременно группой волн 516.7, 517.2, 518.2 и/или 636.2 нм. Частота следования импульсов 1-10 Гц. Суммарная мощность облучения в пределах от 250 до 1000 Вт. Время облучения 10-30 мин. Способ позволяет активизировать иммунную систему, нормализовать биохимический состав крови, сократить длительность периода регресса герпетических высыпаний, увеличить период ремиссии.

Способ терапевтического воздействия на лиц, инфицированных вирусом герпеса, включающий воздействие светом, отличающийся тем, что проводят облучение импульсным светом местно и/или системно на все тело больного одновременно группой волн 516.7, 517.2, 518.2 и/или 636.2 нм с частотой следования импульсов 1-10 Гц, суммарной мощностью облучения в пределах от 250 до 1000 Вт, временем облучения 10-30 мин.