СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ СОСТОЯНИЯ ПЛОДА ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ, ОСЛОЖНЕННОЙ МНОГОВОДИЕМ И НАЛИЧИЕМ В КРОВИ АНТИТЕЛ КЛАССА G K CHLAMYDIA TRACHOMATIS Российский патент 2011 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству.

Известно, что наличие урогенитальной инфекции у беременных часто приводит к развитию плацентита, многоводию, недостаточности фетоплацентарной системы (ФПН), задержке внутриутробного развития и инфицированию плода. Пораженная дистрофическим и воспалительным процессами плацента становится не столько барьером, сколько резервуаром для инфекции, усугубляет патологическое течение беременности, вплоть до развития преэклампсии и спонтанных выкидышей. При этом у женщин репродуктивного возраста распространены вялотекущие формы урогенитальных инфекций, при которых в крови присутствуют антитела к инфекционному антигену (например класса G в титрах 1:20-1:40 к Chlamydia trachomatis), но клинические проявления практически или полностью отсутствуют. Поскольку антибиотикотерапия может оказать негативное влияние на плод, отсутствие клинических признаков воспаления при обнаружении в крови беременных женщин антител к Chlamydia trachomatis, довольно часто является причиной отказа от назначения специфического лечения врачом либо отказа от его применения самими женщинами. Однако при этом остается угроза развития многоводия, ФПН, других осложнений беременности и, что главное, угроза инфицирования плода. В этой связи особо актуальным становиться поиск способа оценки состояния плода, обусловленный наличием внутриутробной инфекции, до родов у группы беременных женщин (38-40 нед) или рожениц, в крови которых выявлены антитела к Chlamydia trachomatis, но при этом клинические проявления урогенитальной инфекции отсутствуют, с целью своевременного принятия лечебных мероприятий по отношению к новорожденному.

Известен способ прогнозирования акушерской патологии (Крымшокалова З.С., Авруцкая В.В., Шомахова З.С., Друккер Н.А., Погорелова Т.Н., пат. РФ №2339954, МПК G01N 33/68, опубликовано 27.11.2008). Сущность способа: в сыворотке крови женщины в первом триместре беременности определяют содержание фактора роста плаценты и сосудисто-эндотелиального фактора роста. Рассчитывают коэффициент их соотношения. При его величине, равной 2, прогнозируют синдром задержки роста плода (СЗРП). При величине, равной 3, прогнозируют гестоз, при его величине, равной 4, - преждевременные роды.

Использование способа позволяет повысить точность прогнозирования развития основных тяжелых акушерских патологий различного генеза на ранних сроках гестации, что дает возможность своевременно скорректировать акушерскую тактику.

Недостатком данного способа является тот факт, что упомянутые маркеры позволяют оценить факторы, определяющие рост плаценты, но не учитывают такие факторы, как наличие инфекционных агентов, а также воспаления, способного оказать существенное влияние на состояние плода. Таким образом, данный способ не позволяет провести комплексную оценку состояния плода до родов, особенно у женщин с наличием антител к урогенитальным инфекциям из группы риска по развитию внутриутробной инфекции.

Известен способ прогнозирования перинатальной патологии у беременных с хроническими инфекционно-воспалительными заболеваниями (Тареева Т.Г. и соавт, пат. РФ №2256914, МПК G01N 33/49, G01N 33/53, опубликовано 20.07.2005), который осуществляют путем определения способности лейкоцитов крови беременной к продукции γ-интерферона, определения антител к γ-интерферону и аутоантител к белкам ОБМ и S-100. При снижении продукции γ-интерферона менее 16 МЕ/мл, аутоантител к ОБМ и S-100 менее (-) 40 усл.ед. для каждого показателя и повышении антител к γ-интерферону более 20 усл.ед. прогнозируют перинатальную патологию.

Предлагаемый способ не требует хирургического вмешательства для получения спинномозговой жидкости. Своевременное проведение адекватных лечебно-профилактических мероприятий беременным, у которых при использовании предлагаемого способа прогнозировалась перинатальная патология, позволило авторам сократить частоту тяжелых форм внутриутробной инфекции с 26,7% до 11,9%; частоту перинатальной патологии инфекционного характера с 25,2% до 13,3%.

В целом данный способ позволяет прогнозировать патологию инфекционного генеза до родов, но не позволяет оценить общее состояние плода, к тому же уровни цитокинов и аутоантител отличаются значительной индивидуальной вариабельностью, способной оказать серьезное влияние на достоверность получаемых результатов.

Известен способ прогноза исхода беременности у женщин из группы риска по внутриутробному инфицированию плода (Останин А.А. и соавт., пат. РФ №2238559, МПК G01N 33/48, опубликовано 20.10.2004). Сущность способа: во втором триместре беременности у женщин из группы риска по внутриутробному инфицированию оценивают комплекс клинико-лабораторных показателей матери/плода. Учитывают течение беременности, осложненное развитием гестоза средней или тяжелой степени (ДК=+6.3), не осложненное развитием гестоза (ДК=-7,5); наличие УЗИ-маркеров пренатальной патологии плода (ДК=+2,9); чистоту влагалищных мазков 3-6 степени (ДК=+1,8); количество сегментоядерных нейтрофилов в материнской крови ≥70% (ДК=+7,9), ≤65% (ДК=-2,9); лейкоцитоз в плодовой крови ≥4,5*10⁹/л (ДК=+6,8), ≤3,0*10⁹/л (ДК=-6,9); абсолютный лимфоцитоз в плодовой крови ≥3,0*10⁹/л (ДК=+4,1); абсолютное содержание СБ3⁺Т-клеток ≥1,9*10⁹/л (ДК=+5,4), ≤1,2*10⁹/л (ДК=-3,7) и уровень IgA в крови плода ≤0,3 г/л (ДК=+2,5), ≥0,4 г/л (ДК=-5,5); относительное количество HLA-DR⁺ моноцитов и HLA-DR⁺ лимфоцитов в крови плода соответственно ≥88 и 30% (ДК=-6,2) и (ДК=-4,0). При суммарной величине положительных диагностических коэффициентов (Σ ДК=+13 и выше) прогнозируют развитие неблагоприятного перинатального исхода, а при суммарной величине отрицательных диагностических коэффициентов (Σ ДК=-17 и ниже) - благоприятный исход беременности.

Способ позволяет оптимизировать тактику ведения беременных женщин, но инвазивен для плода и требует значительных затрат времени и средств на проведение длительных и дорогостоящих тестов. Кроме того, он не позволяет оценить состояние плода, позволяя дифференцировать только общий исход беременности.

Задачей изобретения является разработка обладающего достаточной чувствительностью способа прогнозирования состояния плода при беременности, осложненной многоводием у женщин с антителами класса G к Chlamydia trachomatis в крови, без клинических проявлений патогенной инвазии, путем исследования крови матери на содержание лактоферрина.

Поставленная задача достигается способом прогнозирования состояния плода при беременности, осложненной многоводием и наличием в крови антител класса G к Chlamydia trachomatis, без клинических проявлений патогенной инвазии, путем исследования крови матери.

В сыворотке крови матери на 38-40 неделе беременности определяют содержание лактоферрина (ЛФ) методом твердофазного иммуноферментного анализа и при его концентрации менее 4,5 мкг/мл прогнозируют отсутствие внутриутробной инфекции у плода и рождение здорового ребенка, соответствующего 8-9 баллов по шкале Апгар. При концентрации лактоферрина, равной и более 4,5 мкг/мл, прогнозируют наличие внутриутробной инфекции у плода и рождение ребенка с низкой оценкой по шкале Апгар, равной или менее 7 баллов.

Новизна способа;

- В сыворотке крови матери на 38-40 неделе беременности, осложненной многоводием и наличием в крови антител класса G к Chlamydia trachomatis, без клинических проявлений патогенной инвазии, определяют содержание лактоферрина (ЛФ) методом твердофазного иммуноферментного анализа.

- При концентрации лактоферрина менее 4,5 мкг/мл прогнозируют отсутствие внутриутробной инфекции у плода и рождение здорового ребенка, соответствующего 8-9 баллов по шкале Апгар.

- При концентрации лактоферрина, равной и более 4,5 мкг/мл, прогнозируют наличие внутриутробной инфекции у плода и рождение ребенка с низкой оценкой по шкале Апгар, равной или менее 7 баллов.

По результатам проведенного исследования, чувствительность способа составила 65-75%, а специфичность при прогнозировании состояния плода в родах колебалась в пределах 75-80%.

При этом предложенный способ не инвазивен для плода и не требует особых условий забора крови у матери. Уровень лактоферрина может быть определен в том же образце, что и другие показатели, определяемые при плановом лабораторном обследовании перед родами.

При осуществлении теста используется иммуноферментный метод анализа, внедренный в большинстве лабораторных баз и не требующий дополнительного обучения персонала. Своевременная оценка состояния плода и наличия внутриутробной инфекции позволяет принять своевременные терапевтические меры и повысить шансы на выживание и выздоровление ребенка в неонатальном периоде.

Используемый в предлагаемом методе ЛФ выбран нами вследствие целого ряда присущих данному белку свойств, позволяющих использовать его для комплексной оценки состояния плаценты и плода при наличии воспаления. Во-первых, лактоферрин является, в определенной степени, белком беременности. Безусловно, изменения его концентрации не столь специфично зависят от сроков гестации, как уровни признанных белков беременности ассоциированного с беременностью альфа-2-гликопротеина, ТБГ, РАРР-А и прочих, но в целом, повышение уровней ЛФ при беременности общеизвестно. Известно также, что ЛФ принимает участие в инвазии цитотрофобласта. Во-вторых, ЛФ является очень чувствительным маркером воспалительной реакции, в том числе и инфекционного генеза. Наконец, данный белок участвует в транспорте железа, в том числе и в комплексе с кислородом, к тканям, особенно там, где кровоснабжение ограничено. При этом способность ЛФ опосредованно транспортировать ионы кислорода делает его достаточно чувствительным показателем оксидативного стресса тканей. Кроме того, повышенные концентрации ЛФ часто взаимосвязаны с увеличением уровней аутоантител к ряду транспортных белков крови, ОБМ и пр. Таким образом, изменения уровней данного белка свидетельствуют не только о наличии беременности как таковой, но и об адекватности формирования и дальнейшего функционирования плаценты, а также сигнализируют о наличии и выраженности проявлений воспалительной реакции и оксидативного стресса тканей.

Данным методом обследовано 33 женщины с диагнозом многоводие и наличием в крови антител к Chlamydia trachomatis. Тест на сывороточный уровень ЛФ проводился в сроке 38-40 недель, перед родами, состояние родившихся детей оценивали по шкале Апгар, наличие внутриутробной инфекции устанавливали клинико-лабораторными методами исследования в раннем неонатальном периоде и подтверждалось результатами гистологического исследования плаценты. Полученные данные по состоянию новорожденных сопоставлялись с определенными ранее уровнями ЛФ.

Способ осуществляется следующим образом: У женщин с верифицированными наличием в крови антител класса G к Chlamydia trachomatis и многоводием, находящимся на 38-40 неделе беременности, забирают не менее 5 мл крови из локтевой вены и оставляют до образования кровяного сгустка. Образовавшийся сгусток выбрасывают, а в оставшейся сыворотке крови дополнительно определяют концентрацию лактоферрина (ЛФ) методом твердофазного иммуноферментного анализа (Конышева Т.В., Лыкова С.Ф., Архипова С.В., и др. "Иммуноферментный метод определения лактоферрина" // Клин. Лаб. Диагн. 1998, №4: с.33-34). При выявлении концентрации ЛФ в сыворотке крови менее 4,5 мкг/мл с вероятностью 75-80% прогнозируется отсутствие внутриутробной инфекции у плода и рождение здорового ребенка, соответствующего 8-9 баллов по шкале Апгар, а при выявлении концентрации ЛФ в сыворотке крови, равной и более 4,5 мкг/мл, с вероятностью 75-80% прогнозируется наличие внутриутробной инфекции у плода и рождение ребенка с низкой оценкой по шкале Апгар, равной или менее 7 баллов.

Пример 1.

Пациентка М., 19 лет, первобеременная, первородящая. Соматически здорова. На учете в женской консультации с 11 недель беременности. Беременность протекала без осложнений. Проведено 2 биохимических скрининга в 13 и 16 недель. Риск врожденных пороков развития низкий. Проведено 3 УЗИ скрининга в 14, 23, 32 недели. При сроке беременности 32 недели по УЗИ диагностировано многоводие. Обнаружены антитела класса G к Chlamydia trachomatis в титре 1:40 в первой половине беременности. Специфическое лечение не проводилось.

Уровень ЛФ в сыворотке крови в 40 нед - 1,83 мкг/мл. Прогнозировалось рождение здорового ребенка соответствующего 8-9 баллов по шкале Апгар без признаков внутриутробной инфекции у плода.

Роды в 40 недель, длительность родового акта 8 ч 45 мин. Безводный период 7 ч. Родился мальчик 3,7 кг, 50 см, 9 баллов по шкале Апгар. Период новорожденности без осложнений. По результатам гистологии: зрелая плацента.

Пример 2.

Пациентка Б., 22 года, первобеременная, первородящая. Соматический анамнез: вегето-сосудистая дистония по гипотоническому типу. На учете в женской консультации с 13 недель беременности. Беременность протекала без осложнений. Проведен 1 биохимический скрининг в 15 недель. Риск врожденных пороков развития низкий. Проведено 3 УЗИ скрининга в 14, 23, 32 недели. При сроке беременности 32 недели по УЗИ диагностировано многоводие. Обнаружены антитела класса G к Chlamydia trachomatis в титре 1:40 в первой половине беременности. Специфическое лечение не проводилось.

Уровень ЛФ в сыворотке крови в 38 недель - 7,93 мкг/мл. Прогнозировалось рождение ребенка с низкой оценкой по шкале Апгар, равной или менее 7 баллов, и внутриутробной инфекцией у плода.

Роды в 40 недель, длительность родового акта 10 ч 25 мин. Безводный период 9 ч. Родился мальчик 4,0 кг, 52 см, 5 баллов по шкале Апгар и признаками внутриутробной инфекции. Период новорожденности протекал с желтухой новорожденного, транзиторной лихорадкой. По результатам гистологии: восходящая инфекция I ст., серозный хорионамнионит, патологическая незрелость плаценты.

Таким образом, нам удалось разработать достаточно эффективный способ прогнозирования состояния плода при беременности, осложненной многоводием у женщин с наличием в крови антител класса G к Chlamydia trachomatis, без клинических проявлений заболевания, позволяющий с достаточно высокой точностью прогнозировать состояние плода и наличие у него внутриутробной инфекции, что позволяет оптимизировать лечебную тактику новорожденных и своевременно начать лечение внутриутробной инфекции.

Изобретение относится к области медицины и касается способа прогнозирования состояния плода при беременности, осложненной многоводием и наличием в крови антител класса G к Chlamydia trachomatis. Сущность способа заключается в том, что в сыворотке крови пациентки на 38-40 неделе беременности определяют содержание лактоферрина (ЛФ). При выявлении ЛФ менее 4,5 мкг/мл прогнозируют отсутствие внутриутробной инфекции у плода и рождение здорового ребенка, соответствующего 8-9 баллов по шкале Апгар. При выявлении ЛФ 4,5 мкг/мл и более прогнозируют наличие внутриутробной инфекции у плода и рождение ребенка с низкой оценкой по шкале Апгар, равной или менее 7 баллов. Использование способа позволяет с высокой точностью прогнозировать состояние плода и наличие у него внутриутробной инфекции, что позволяет оптимизировать лечебную тактику новорожденных и своевременно начать лечение внутриутробной инфекции.

Способ прогнозирования состояния плода при беременности, осложненной многоводием и наличием в крови антител класса G к Chlamydia trachomatis, без клинических проявлений патогенной инвазии, путем исследования крови матери, отличающийся тем, что в сыворотке крови матери на 38-40 неделе беременности определяют содержание лактоферрина (ЛФ) методом твердофазного иммуноферментного анализа и при его концентрации менее 4,5 мкг/мл прогнозируют отсутствие внутриутробной инфекции у плода и рождение здорового ребенка, соответствующего 8-9 баллов по шкале Апгар, а при его концентрации, равной и более 4,5 мкг/мл, прогнозируют наличие внутриутробной инфекции у плода и рождение ребенка с низкой оценкой по шкале Апгар, равной или менее 7 баллов.