КОМПОЗИЦИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ВЫЖИВАЕМОСТИ ОСЕТРОВЫХ РЫБ ПРИ ИСКУССТВЕННОМ ВОСПРОИЗВОДСТВЕ Российский патент 2012 года по МПК A01K61/00 

Изобретение относится к рыбоводству, в частности к созданию многокомпонентного средства для повышения выживаемости посадочного материала при искусственном воспроизводстве и товарном выращивании осетровых рыб.

Известен биологически активный препарат "Эпин-экстра", действующей субстанцией которого является эпибрассинолид, повышающий жизнестойкость личинок и молоди осетровых рыб при воздействии неблагоприятных гидрохимических факторов (см. Егоров М.А., Витвицкая Л.В. Использование биологически активных веществ в искусственном воспроизводстве осетровых Волго-Каспийского региона: моногр. Астрахань: Изд-во АГТУ. - 2002. - 100 с.).

Однако механизм действия данного препарата узок, а для эффективной защиты организма осетровых рыб от неблагоприятных факторов окружающей среды необходим комплексный препарат с широким спектром действия.

Прототип заявленного решения не выявлен.

Техническая задача: создание многокомпонентной композиции биологически активных препаратов в качестве иммуномодулирующего и токсикопротекторного средства для осетровых рыб.

Технический результат: повышение выживаемости осетровых рыб на ранних стадиях онтогенеза.

Он достигается путем обработки посадочного материала осетровых рыб при искусственном воспроизводстве композицией биологически активных веществ состава: эпибрассинолид - 22.73 мас.%, гидроксикоричные кислоты - 23.86 мас.%, калиевая соль урацил-4-карбоновой (оротовой) кислоты (оротат калия) - 53.41 мас.%., при следующих концентрациях: эпибрассинолид - 10^-15 мг/л, гидроксикоричные кислоты - 10^-13 мг/л, оротат калия - 10^-14 мг/л.

Из современных биологически активных препаратов наиболее эффективными являются: эпибрассинолид, увеличивающий проницаемость мембран клеток; гидроксикоричные кислоты, обладающие антиоксидантными свойствами, а также выполняющие функции рострегуляторов и антистрессовых адаптогенов; оротат калия, стимулирующий рост клеток и, следовательно, активирующий скорость обменных процессов на ранних стадиях развития. Поэтому данные вещества были отобраны для создания многокомпонентной композиции биологически активных веществ.

Гидроксикоричные кислоты, а именно кофейная (3,4-дигидроксикоричная) и ее производные - цикориевая(2,3-дикофеоилвинная) и хлорогеновая (5-кофеоилхинная) кислоты (в равном количественном соотношении) обладают высокой биологической активностью, которую связывают также с иммуномодулирующей активностью.

Композиция получается известным способом путем смешивания исследованных биологически активных веществ в установленных концентрациях и составе.

Исследования, проведенные в течение ряда лет, показали, что оптимальными концентрациями данных веществ для спермы осетровых являются следующие значения: эпибрассинолид - 10^-15 мг/л, гидроксикоричные кислоты - 10^-13 мг/л и оротат калия - 10^-14 мг/л (см. Сидорова Л.А., Тихомиров A.M., Шавель И.И., Рябухин Ю.И. Исследование влияния биологически активных препаратов и оротата калия на сперму русского осетра и белуги. - Вестник АГТУ. - 2007. - №6 (41). - С.31-33).

По результатам лабораторных исследований (табл.1) с использованием метода «крутое восхождение» по теории «Планирование экспериментов» удалось получить композицию биологически активных препаратов следующего состава: эпибрассинолид (X₁) - 22.73 масс.%, гидроксикоричные кислоты (X₂) - 23.86 масс.%, оротат калия (Х₃) - 53.41 масс.%.

Таблица 1 Матрица эксперимента и результаты определения оптимального состава композиции БАП Опыт Фактор Значение у; У_сред. y_j Х₀ X₁ X₂ Х₃ К₁=5,27 K₂=4,4 К₃=6,36 5,34   1 + - - - 4,53 4,48 5,15 4,72 -0,62 2 + + - - 4,38 3,50 4,50 4,13 -1,21 3 + - + - 5,35 4,42 6,45 5,40 +0,06 4 + + + - 4.40 4,22 4,55 4,39 -0,95 5 + - - + 5,23 4,10 4,21 4,51 -0,83 6 + + - + 6,10 5,35 7,04 6,16 +0,82 7 + - + + 4,14 4,31 6,38 4,94 -0,40 8 + + + + 4,36 4,23 5,42 4,67 -0,67 b_i -0,47 -0,03 -0,02 +0,2   Шаг в область оптимального состава композиции Шаг Величина шага Контроль (К) Опыт (О) Y_i=K-O 1 5 11,26 12,71 +1,45 2 11,30 12,56 +1,26 3 10,16 11,36 +1,20 4 10,19 3,20 -6,99

Пошаговое определение состава композиции производили согласно условиям планирования эксперимента. Из данных табл.1 следует, что оптимальной по составу является композиция, соответствующая первому шагу (Y_i=+1,45), поскольку время подвижности сперматозоидов белуги в 3,1 раза превышает контрольное значение.

Также проведена полупроизводственная проверка действия композиции биологически активных препаратов на личинку и молодь осетровых в лаборатории и цехах Александровского рыбоводного завода Астраханской области.

На основании проведенных исследований можно отметить, что композиция биологически активных препаратов является иммуномодулятором и оказывает токсикопротекторную защиту от влияния на личинку севрюги растворов сульфата меди и фенола, увеличивая их выживаемость в 5,26 и 1,09 раза соответственно по сравнению с контролем (табл.2). Также данная композиция обладает токсипротекторными свойствами в отношении действия сульфата меди и синтетических поверхностно-активных веществ для личинок русского осетра (выживаемость личинок в 1,22 и 1,11 раза выше контроля соответственно) (табл.3).

Таблица 2 Влияние композиции ЭЦОК на выживаемость личинок севрюги при действии факторов   Факторы % CuSO₄ Фенол «Sarma» Контроль 4.38±0.47 0.42±0.21 28.70±0.73 19.25±0.63 Композиция 6.20±0.29** 2.21±0.63** 31.17±0.25** 19.19±0.19

Таблица 3 Влияние композиции ЭЦОК на выживаемость личинок русского осетра при действии факторов   Факторы % CuSO₄ Фенол СПАВ Контроль 15.14±1.30 1.22±0.48 3.56±0.38 7.54±0.92 Композиция 19.97±1.27** 1.49±0.27** 3.17±0.25 8.36±0.78**

Звездочками отмечены величины, достоверно отличающиеся по критерию Стъюдента от соответствующих значений в контроле, р<0,05.

По результатам других исследований в отношении молоди осетровых выявлено, что композиция биологически активных препаратов способна защитить молодь русского осетра от действия тяжелых металлов (снижая возбудимость ЦНС и общую двигательную активность молоди и ее реактивность на внешние раздражители) при искусственном содержании в случае залповых выбросов и падании их в технологическую воду рыбоводных предприятий (табл.4).

Таблица 4 Показатели поведения в тесте «Открытое поле» молоди русского осетра в норме и при действии сульфата меди   ОА ФА РА-1 РА-2 РА-3 Контроль 29.83±1.38 30.26±1.36 25.40±1.05 22.70±0.78 12.50±0.97 Композиция 36.53±1.26* 25.30±1.31 20.00±0.84 20.10±1.02 17.30±0.85* Контроль - CuSO₄ (0.1 мг/л) 23.35±0.89 22.03±0.95 17.50±0.67 16.40±0.71 11.75±0.62 Композиция - CuSO₄ (0.1 мг/л) 27.52±0.88* 19.42±0.62 14.60±0.83 16.95±0.63 14.40±0.56

Контроль - CuSO₄ (1.0 мг/л) 7.89±1.07 7.94±1.19 4.83±0.92 8.66±1.28 4.66±1.35 Композиция - CuSO₄ (1.0 мг/л) 13.53±1.40* 12.53±1.43* 11.60±1.16* 14.80±1.10* 3.00±0.64*

ОА - ориентировочная активность, ФА - фоновая активность, РА 1 - реактивность на высокочастотный раздражитель, РА 2 - реактивность на низкочастотный раздражитель, РА 3 - реактивность на световой раздражитель. Звездочками отмечены величины, достоверно отличающиеся по критерию Стъюдента от соответствующих значений в контроле.

Положительный эффект: композиция биологически активных препаратов является перспективным иммуномодулятором для личинок и молоди осетровых. Использование ее в аквакультуре при существующих технологиях искусственного воспроизводства способствует более уравновешенному состоянию центральной нервной системы осетровых на ранних стадиях содержания, снижает отход и повышает качество рыбоводной продукции. Она может быть использована на рыбоводных заводах при подготовке производителей к искусственному нересту, при обработке икры и спермы в период оплодотворения, а также при обработке предличинок и молоди осетровых рыб. Преимущества предлагаемой композиции биологически активных препаратов: низкие рабочие дозы, требующие относительно небольших количеств препаратов; доступность.

Изобретение относится к рыбоводству, в частности к созданию многокомпонентной композиции - биологически активного препарата для повышения выживаемости посадочного материала при искусственном воспроизводстве осетровых рыб. Композиция биологически активного препарата для повышения выживаемости осетровых рыб при искусственном воспроизводстве включает следующие компоненты, мас.%: эпибрассинолид - 22.73%, при концентрации 10^-15 мг/л, гидроксикоричные кислоты - 23.86%, при концентрации 10^-13 мг/л, оротат калия - 53.41%, при концентрации 10^-14 мг/л. Использование предлагаемого изобретения позволит повысить выживаемость осетровых рыб на ранних стадиях онтогенеза. 4 табл.

Композиция биологически активных препаратов для повышения выживаемости осетровых рыб при искусственном воспроизводстве, включающая следующие компоненты, мас.%:
Эпибрассинолид 22,73 Гидроксикоричные кислоты 23,86 Оротат калия 53,41