СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТРАВМАТИЧЕСКОГО И НЕТРАВМАТИЧЕСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ ГНИЛОСТНО ИЗМЕНЕННЫХ СПАЕК Российский патент 2014 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к области медицины.

Изобретение относится к способу для определения травматического или нетравматического происхождения гнилостно измененных спаек по результатам их морфологического исследования.

Известны способы морфологической дифференциальной диагностики травматического или нетравматического происхождения спаек, суть которых заключается в макроскопической и микроскопической диагностике места, окружающего спаечный процесс. При этом посттравматический характер можно предположить при наличии в мягких тканях кровоизлияний, послеоперационных рубцов, посттравматических шрамов и т.д. [Воробьев А.А. и Бебуришвилли А.Г. Хирургическая анатомия оперированного живота и лапароскопическая хирургия спаек. Волгоград. 2001 г.].

Недостатком этих методов при исследовании спаечного процесса в условиях гнилостного распада является их малая специфичность и информативность - в процессе гниения трупов происходит распад тканей, который не позволяет достоверно точно установить наличие или отсутствие кровоизлияний, послеоперационных рубцов. Более четкие критерии наличия или отсутствия травмы, как причины спайкообразования, позволили бы увеличить информативность судебно-медицинского исследования в части, касающейся идентификации трупа, давности и вида травматического воздействия.

Задачей изобретения является разработка простого и удобного способа морфологической диагностики травматического или нетравматического характера спайкообразования, основанного на обнаружении признаков кровоизлияния в области спайки даже на гнилостно измененных тканях.

При травме происходит нарушение целостности сосудистой стенки и излияние эритроцитов в межклеточное пространство. Дальнейшие события в очаге кровоизлияния связаны с ликвидацией очага клетками иммунной системы, в процессе которых происходит разрушение эритроцитов и окисление двухвалентного железа гемоглобина до трехвалентного. Данный окислительный процесс происходит не только при жизни, но и может существовать после смерти организма, поскольку для окисления двухвалентного железа в трехвалентное требуется наличие активных форм кислорода, количество которых может нарастать в момент смерти и спустя некоторое время после нее.

Сущностью изобретения является использование известной гистологической окраски - по Перлсу с желтой кровяной солью (Р. Лилли, 1968) для обнаружения соединений трехвалентного железа, в частности, гемосидерина в области спаечного процесса в гнилостно измененных трупах. Критерий диагностики травматического и нетравматического происхождения спаек основан на обнаружении соединений трехвалентного железа. Данный критерий основан на выявлении гемосидерина - соединения трехвалентного железа, который происходит из гемоглобина эритроцитов, разрушающихся в очаге кровоизлияния при травме [К вопросу экспертной оценки морфодинамики посттравматических реактивных изменений. Е.В. Гридасов, О.М. Виноградов (Тула). Материалы шестого всероссийского съезда судебных медиков: «Перспективы развития и совершенствования судебно-медицинской науки и практики» (посвященные 30-летию Всероссийского общества судебных медиков). Москва-Тюмень: Издат. центр «Академия», 2005. 316 с.]. В случае отсутствия травмы гемосидерин не выявляется.

Для проверки существующей гипотезы нами было проведено клиническое исследование на трупном материале, целью которого было установление зависимости между травматическим или нетравматическим происхождением спаечного процесса и положительной реакцией на трехвалентное железо.

Работа была выполнена на 26 гнилостно измененных трупах с обнаруженным при судебно-медицинском вскрытии спаечным процессом брюшной полости. Гнилостные изменения варьировали в пределах от 7 до 30 суток. Во всех исследуемых случаях было проведено опознание трупов, что позволило собрать документальный анамнез.

В 17 случаях в анамнезе были обнаружены оперативные вмешательства на органах брюшной полости (опытная группа). В 9 случаях вскрытий (группа контроля) при анализе медицинской документации операций у данных респондентов обнаружено не было, что позволяет предположить спонтанный характер спайкообразования.

В качестве материала исследования нами были выбраны спайки в месте прикрепления к висцеральной брюшине передней брюшной стенки.

Выбор обусловлен тем, что при оперативном вмешательстве или острой или тупой травме в мягких тканях из области прикрепления спайки кровоизлияния меньше всего подвергаются рассасыванию. С образцов спаек были получены гистологические срезы, которые окрашивали по общепринятой методике: гематоксилином и эозином. Для выявления трехвалентного железа использовали окраску по Перлсу.

Протокол окраски по Перлсу:

1. Препарат обесцвечивают метанолом или солянокислым спиртом.

2. Ополаскивают в дистиллированной воде.

3. Заливают 1 N раствором соляной кислоты на 30 мин.

4. Добавляют в кислоту равное количество 2% раствора гексацианоферрата тригидрата (желтой кровяной соли), перемешивают и окрашивают в течение 10 мин.

5. Ополаскивают в дистиллированной воде.

6. Высушивают.

При исследовании было обнаружено, что в опытной группе происходило накопление красителя сине-зеленого цвета в виде гранул в спайке и мягких тканях из места прикрепления или в виде пропитывания красителем соединительной ткани и гнилостно измененных мышечных волокон.

В группе контроля при окраске по Перлсу положительной реакции зафиксировано не было.

Исходя из результатов исследования, можно говорить о том, что кровоизлияния, сформировавшиеся при травматическом воздействии (операционной травме, острой или тупой травме), и сопровождающиеся, в дальнейшем, спайкообразованием, могут быть диагностированы на гнилостно измененных трупах при окраске на трехвалентное железо по Перлсу, что может служить диагностическим критерием для постмортальной морфологической диагностики травматического и нетравматического происхождения спаек.

Изобретение касается способа диагностики травматического и нетравматического происхождения гнилостно измененных спаек на гистологических срезах спаек. Способ заключается в окраске по методу Перлса путем последовательной обработки гистологических срезов метанолом или солянокислым спиртом, ополаскивания в дистиллированной воде, обработки 1 N раствором соляной кислоты в течение 30 минут, окрашивания в течение 10 минут раствором, содержащим равное количество 2% раствора гексацианоферрата тригидрата (желтой кровяной соли) и 1 N раствора соляной кислоты, ополаскивания в дистиллированной воде, высушивания. Выявляют следы кровоизлияний в области спаек на наличие соединений трехвалентного железа. В случае накопления красителя сине-зеленого цвета в виде гранул в спайке и мягких тканях из места прикрепления или в виде пропитывания красителем соединительной ткани и гнилостно измененных мышечных волокон диагностируют травматическое происхождение гнилостно измененных спаек, а при отсутствии положительной реакции диагностируют их нетравматическое происхождение.

Способ диагностики травматического и нетравматического происхождения гнилостно измененных спаек на гистологических срезах спаек, заключающийся в их окраске по методу Перлса путем последовательной обработки гистологических срезов метанолом или солянокислым спиртом, ополаскивания в дистиллированной воде, обработки 1 N раствором соляной кислоты в течение 30 минут, окрашивания в течение 10 минут раствором, содержащим равное количество 2% раствора гексацианоферрата тригидрата (желтой кровяной соли) и 1 N раствора соляной кислоты, ополаскивания в дистиллированной воде, высушивания, отличающийся тем, что выявляют следы кровоизлияний в области спаек на наличие соединений трехвалентного железа, и при накоплении красителя сине-зеленого цвета в виде гранул в спайке и мягких тканях из места прикрепления или в виде пропитывания красителем соединительной ткани и гнилостно измененных мышечных волокон диагностируют травматическое происхождение гнилостно измененных спаек, а при отсутствии положительной реакции диагностируют их нетравматическое происхождение.