ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ КОМПЛЕКСНОГО ДЕЙСТВИЯ И СПОСОБ ЕГО ПРОИЗВОДСТВА Российский патент 2014 года по МПК A61K38/21 A61K39/395 A61P37/00 

Настоящая группа изобретений относится к медицине, к фармакотерапевтической группе - МИБП-цитокин, конкретно к лекарственному комбинированному иммуномодулирующему, иммуностимулирующему, противовирусному, антибактериальному и противовоспалительному препарату Кипферон Форте, содержащему в качестве активных веществ человеческий интерферон рекомбинантный альфа-2, иммуноглобулиновый комплексный препарат (КИП), цинка глюконат моногидрат, алоэ экстракт сухой и предлагаемому к использованию в форме вагинальных и ректальных суппозиториев (дозированная лекарственная форма, твердая в обычных условиях и легко расплавляющаяся при температуре тела).

Область применения заявляемой группы изобретений определяется преимущественно проблемами терапии наиболее распространенных и социально значимых инфекций вирусной и бактериальной этиологии (ОРВИ, грипп, хронический бронхит, пневмония, ОКИ, урогенитальные инфекции, в том числе хламидиоз, инфекции вирусов герпеса, гепатита), крайне актуальна в настоящий момент, поскольку эти инфекции относятся к самым распространенным вирусным инфекциям среди населения. Сложности при идентификации возбудителя, изменчивость возбудителей и их устойчивость к химиопрепаратам требуют применения для терапии вышеуказанных заболеваний универсальных противовирусных и антибактериальных средств, обладающих активностью по отношению к широкому спектру возбудителей инфекций.

Таким образом, разработка нового комбинированного лекарственного препарата в виде суппозиториев, включающего указанные выше активные фармацевтические субстанции, является перспективной задачей. Актуальным при этом является выбор вспомогательных веществ, входящих в состав лекарственной формы.

В данной области медицины известна биологически активная добавка к пище, включающая иммунобиологический препарат, причем в качестве иммунобиологического препарата она содержит человеческий рекомбинантный интерферон α2 из расчета 10³-10⁹ ME на 1 г приемлемого пищевого продукта. Она дополнительно содержит иммуноглобулины человека, при массовом соотношении иммуноглобулины человека:пищевой продукт, равном 100:1- 1:100 (RU №2125389).

Известна также композиция, обладающая противовирусным и антимикробным действием, для перорального применения, содержащая рекомбинантный человеческий интерферон-α, консорциум иммуноглобулинов и целевые добавки, которая представляет собой смесь, состоящую из порошка, включающего рекомбинантный человеческий интерферона, целевые добавки, способные образовывать стабильную структуру, и порошка, включающего субстанцию, содержащую консорциум иммуноглобулинов IgA, IgG и IgM, и выполнена в форме твердой капсулы при следующем содержании компонентов:

Рекомбинантный человеческий интерферон-α 10000-3000000 ME Консорциум иммуноглобулинов IgA, IgG и IgM 0,05-0,95 г Целевые добавки остальное

При этом капсула покрыта слоем кишечно-растворимого вещества, выбранного из ряда: шеллак, олеиновая кислота, гидроксипропилцеллюлоза, ацетатфталатцеллюлоза, воск пчелиный, твин-20, твин-80, касторовое масло, полиэтиленоксид или их смесь. (RU №2457856).

В России зарегистрированы четыре лекарственных препарата интерферона альфа-2 в форме суппозиториев - виферон, гиаферон, генферон и кипферон.

Лекарственное средство Виферон (ООО «Ферон») - препарат человеческого рекомбинантного интерферона альфа-2b. Вспомогательные вещества: кислота аскорбиновая 0,022 г, альфа-токоферола ацетат 0,055 г, масло какао или твердый жир.

Выпускают суппозитории ректальные в дозировках по 150000, 500000. 1000000, 3000000 ME. Эффект препарата обусловлен способностью Виферона модулировать взаимодействия иммунокомпетентных клеток. Противовирусный эффект заключается в подавлении синтеза белков вирусной оболочкой и подавлении синтеза матричной вирусной РНК. Интерферон, связываясь с клеточными рецепторами, вызывает активацию ферментов протеинкиназы и аденилатсиптетазы. Изменение мембраны препятствует прикреплению и внедрению вирусов. Таким образом, интерферон обладает ингибиторным эффектом в отношении репликации вирусов. [http://www.viferon.su].

Гиаферон (ЗАО «Фирма «Витафарма»). В состав препарата входит человеческий рекомбинантный ИФН-а2b в дозировке 500000 ME, гиалуропат натрия. Вспомогательные вещества: жир кондитерский, парафин и эмульгатор Т-2 в качестве наполнителя, гиалуронат натрия - 0,012 г.

Применение средства позволяет сохранить аутогенную ткань, являющуюся мишенью аутореактивных Т-лимфоцитов. Кроме того, наблюдается уменьшение воспаления, отека, освобождения цитокинов, обусловленного активацией Т-лимфоцитов. При использовании средства в качестве ранозаживляющего средства показано, что препарат обладает биостимулирующим эффектом, ускоряя регенеративные процессы при длительно незаживающих трофических язвах, пролежнях, ранах. Выраженное противомикробное действие достигалось при использовании сшитых гелей и коллагена с гидрофильными полимерами, отличающимися повышенной скоростью (http://www.vitafarma.ru/gf.html).

Генферон (ООО "Биокад") содержит: интерферон человеческий рскомбинантный альфа-2а - 250000 ME, 500000 ME или 1000000 ME, а также таурин 0,01 г и анестезин 0,055 г; вспомогательные вещества: твердый жир, декстран 60000, полиэтиленоксид 1500 (макрогол 1500), полисорбат (твин) 80, эмульгатор 12, натрия цитрат, кислота лимонная, вода очищенная. Интерферон альфа-2 оказывает противовирусное, антибактериальное и иммуномодулирующее действие. Под воздействием интерферона альфа-2 в организме усиливается активность естественных киллеров, Т-хелперов, фагоцитов, а также интенсивность дифференцировки В-лимфоцитов. Активизация лейкоцитов, содержащихся во всех слоях слизистой оболочки, обеспечивает их активное участие в ликвидации первичных патологических очагов и обеспечивает восстановление продукции секреторного иммуноглобулина. Таурин, входящий в состав препарата, обладает регенерирующими, репаративными, мембранно- и гепатопротективными, антиоксидантными, противовоспалительными свойствами. Анестезин является местным анестетиком. Уменьшает проницаемость клеточной мембраны для ионов натрия, вытесняет ионы кальция из рецепторов, расположенных на внутренней поверхности мембраны, блокирует проведение нервных им пульсов. Препятствует возникновению болевых импульсов в окончаниях чувствиительных нервов и их проведению по нервным волокнам. (http://www.piluli.ru/product/Genferon).

Кипферон (ООО «Алфарм»). Представляет собой консорциум (комбинацию) иммуноглобулинового комплексного препарата (КИП), содержащего иммуноглобулины трех основных классов: G, А и М, и рекомбинантного человеческого интерферона альфа-2. Вспомогательные вещества: «жир кондитерский СолПро», парафин, эмульгатор Т-2.

Рекомбинантный альфа-2 интерферон ингибирует внутриклеточные стадии развития вирусов, хламидий, риккетсий, действует на бактерии, обладает иммунокоррегирующим и противоопухолевым свойствами, стимулирует антибактериальный и антивирусный иммунитет.

Эффект Кипферона проявляется как во внутриклеточной, так и внеклеточной среде организма за счет прямого действия на возбудителей заболевания и стимуляции механизмов местного и общего иммунитета. Суппозитории Кипферон активно используются при комплексном общепринятом лечении вирусных (ротавирусных), бактериальных и кишечных инфекций (сальмонеллез, дизентерия, коли-инфекция); часто и длительно рецидивирующих заболеваниях респираторного тракта, таких как хронический бронхит и пневмонии. (http://www.dialog.ru/75/108/328/_7089.html).

Известен лекарственный препарат противовирусного действия, включающий человеческий интерферон и синергист, в качестве последнего он содержит иммуноглобулины человека при массовом соотношении человеческий интерферон: синергист 1:600-300000. В качестве человеческого интерферона он содержит рекомбинантный альфа-, или бета-, или гамма-интерферон человека, в качестве иммуноглобулинов человека он содержит смесь IgA, IgM и IgG. Препарат дополнительно содержит фармацевтически приемлемые целевые добавки. (RU №2073522, прототип лекарственного средства).

Известен также способ получения мягких лекарственных форм, обладающих противовирусным действием, включающий смешение иммуноглобулинов, интерферона и наполнителя, причем при смешении к жидкой субстанции иммуноглобулинов добавляют жидкую субстанцию рекомбинантного альфа-2-интерфсрона из расчета 10⁵-10⁶ ME на 1,0 г препарата. К жидкой субстанции иммуноглобулинов добавляют лиофилизированный рекомбинантный альфа-2-интерферон. В качестве вспомогательных веществ используются ланолин, вазелин, парафин (RU №2116083, прототип способа).

Существенным недостатком вышеперечисленных лекарственных препаратов и известных способов является ограниченная эффективность использования входящих в их состав активных веществ, что приводит к необходимости достаточно длительного их применения.

Технической задачей группы изобретений, связанных единым изобретательским замыслом, является создание более эффективного лекарственного препарата, обладающего иммуномодулирующим, иммуностимулирующим, противовирусным, и антибактериальным и противовоспалительным действием и более широкой областью его медицинского применения по сравнению с существующими лекарственными препаратами в суппозиторной форме.

Технический результат, обеспечивающий решение поставленной задачи, состоит в повышении фармакологической активности препарата за счет добавления в его состав дополнительных активных веществ, увеличения скорости и полноты высвобождения активных веществ из суппозиторной основы за счет применения современных вспомогательных веществ и расширения спектра действия лекарственного препарата заявляемого состава, получаемого заявляемым способом.

Сущность изобретения в части лекарственного средства заключается в том, что лекарственный препарат комплексного действия содержит в качестве активных компонентов комплекс иммуноглобулинов классов G, М, А, интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный, цинка глюконат, а также вспомогательные компоненты: Тизоль, буферный раствор, пчелиный воск, полисорбат и твердый жир в виде гомогенизированной суппозиторной массы, при следующем содержании компонентов на один суппозиторий:

Комплекс иммуноглобулинов классов G, М, А -0,14-0,60 г Интерферон альфа-2b человеческий   рекомбинантный -150000-3000000 ME Цинка глюконат моногидрат -0,04-0,17 г Тизоль -0,03-0,14 г Натрия гидрофосфата додекагидрат -0,03-0,16 мг Натрия дигидрофосфата дигидрат -0,01 0,05 мг Натрия хлорид -0,07-0,30 мг Вода очищенная -0,01-0,04 г Пчелиный воск -0,03-0,14 г Полисорбат -0.02-0.09 г Твердый жир до массы суппозитория от 1.0 до 4,0 г

Предпочтительно, препарат содержит алоэ экстракт сухой с размером частиц менее 250 мкм в количестве от 0,04 г до 0,17 г на один суппозиторий.

Препарат может содержать иммуноглобулиновый комплексный препарат, включающий иммуноглобулины классов G, М, А, выделенные из плазмы или сыворотки крови человека, проверенной на отсутствие антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 типов, вирусу гепатита С и поверхностного антигена вируса гепатита В. При этом комплекс иммуноглобулинов содержит IgG -50-70%, IgM - 15-25%, IgA - 15-25%.

Предпочтительно препарат содержит интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный в количестве от 150000 ME до 3000000 ME в одном суппозитории, представляющий собой белок, синтезированный штаммом Escherichia coli SX50, в генетический аппарат которого встроен ген человеческого лейкоцитарного альфа-2 интерферона.

Предпочтительно препарат содержит Тизоль, представляющий собой аквакомплекс титана глицеросольвата, в состав которого входят полипептиды и полисахариды, имеющий рН в пределах 4,0-5,5 и относительную вязкоеть 1,95-2,10, а также содержит полисорбат, представляющий собой неионное поверхностно-активное вещество, а также содержит твердый жир, имеющий число омыления 210-260 мг КОН/г, гидроксильное число не более 55 мг КОН/г, йодное число не более 3, кислотное число не больше 0,5, пероксидное число не более 3, а также содержит буферный водный раствор натрия хлорида, натрия гидрофосфата додекагидрата и натрия дигидрофосфата дигидрата, и имеющий рН в пределах 5,0 7,0 с микробиологической чистотой, Ед/мл, не более 100.

При этом суппозитории выполнены конусообразной или цилиндрической формы с заостренным концом.

Сущность изобретения в части способа производства заключается в том, что способ производства лекарственного препарата комплексного действия предусматривает, что готовят жировую основу в виде смеси, в которую входят пчелиный воск в виде твердого вещества от белого до желто-бурого цвета, полисорбат в виде маслянистой жидкости лимонного цвета и твердый жир в виде белой или почти белой восковой хрупкой массы с температурой плавления от 30°С до 45°С, для чего помещают эти компоненты в бак из нержавеющей стали для автоклавирования и стерилизации в течение 15 мин при температуре 121±1^оС, после чего при включенной мешалке вводят в расплавленную основу цинка глюконат и перемешивают жировую основу до образования однородной системы, а также готовят смесь рабочих растворов активных субстанций, для чего смешивают между собой предварительно подготовленный буферный раствор с комплексом иммуноглобулинов классов G, М, А и интерфероном, добавляют к ним гелеобразную массу Тизоля и перемешивают до образования однородного раствора смеси активных субстанций, а затем вводят последний в жировую основу, доведенную до температуры 38°С, и тщательно перемешивают до образования гомогенной суппозиторной массы.

Предпочтительно, непосредственно после введения цинка глюконата в расплавленную основу вводят и перемешивают алоэ экстракт сухой с размером частиц менее 250 мкм, жировую основу после стерилизации перемещают в термостат и хранят при температуре 57±2°С в течение суток, а после получения гомогенной суппозиторной массы ведут процесс дозированного розлива суппозиториев в индивидуальные упаковки при непрерывном перемешивании суппозиторной массы, постепенно снижая скорость вращения мешалки со 180 об/мин до 120 об/мин в начале розлива, затем 130-120 об/мин в середине процесса и 130-100 об/мин к концу розлива, при этом температуру разливаемой суппозиторной массы поддерживают на уровне 38±1°С, а полученные суппозитории в течение 15-25 минут охлаждают при температуре (10-20)±2°С.

В процессе дозирования получают суппозитории массой от 1,0 г до 4,0 г при следующем содержании компонентов на один суппозиторий

Комплекс иммуноглобулинов классов G, М, А 0,14-0,60 г Интерферон альфа-2b человеческий   рекомбинантный 150000-3000000 МЕ Цинка глюконат моногидрат 0,04-0,17 г

Тизоль 0,03-0,14 г. Натрия гидрофосфата додекагидрат 0,03-0,16 мг Натрия дигидрофосфата дигидрат 0,01-0,05 мг Натрия хлорид 0,07-0,30 мг Вода очищенная 0,01-0,04 г Пчелиный воск 0,03-0,14 г Полисорбат 0,02-0,09 1 Твердый жир до массы суппозитория от 1,0 до 4.0 г

Предпочтительно, получают суппозитории с содержанием алоэ экстракта сухого в количестве от 0,04 г до 0,17 г на один суппозиторий.

Высокий терапевтический эффект в заявляемом лекарственном препарате при его вагинальном и ректальном применении обеспечивают входящие в его состав четыре активные фармацевтические субстанции - комплекс иммуноглобулинов (КИП) классов А, М и G (IgA, IgM и IgG), выделенных из плазмы или сыворотки крови человека, проверенных на отсутствие антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 типов, вирусу гепатита С и поверхностного антигена вируса гепатита В; интерферон человеческий рекомбинантный альфа-2; цинка глюконат и алоэ.

Комплекс иммуноглобулинов (КИП) представляет собой иммунологически активную белковую фракцию, выделенную при фракционировании сывороток донорской крови.

IgG является основным иммуноглобулином сыворотки здорового человека, составляет 70-75% всей фракции иммуноглобулинов, он наиболее активен во вторичном иммунном ответе и антитоксическом иммунитете. IgM появляется при первичном иммунном ответе В-лимфоцитами на неизвестный антиген, составляет до 10% фракции иммуноглобулинов. IgA является секреторным и представлен в димерной форме в комплексе с секреторным компонентом, содержится в серозно-слизистых секретах (например, в слюне, слезах, молозиве, молоке, отделяемом слизистой оболочки мочеполовой и респираторной системы). Перспективной лекарственной формой с КИП являются суппозитории, обеспечивающие высокий терапевтический эффект субстанции как при вагинальном, так и при ректальном способе введения. Входящие в состав КИП иммуноглобулины трех классов IgA, IgM и IgG ответственны за фармакологическую активность препарата. Так, IgM оказывает бактерицидный эффект на патогенные микроорганизмы; IgA затрудняет их прикрепление к эпителию слизистой оболочки, размножение и обеспечивает быстрое удаление из кишечника; IgG нейтрализует микробные токсины и вирусы, опосредует "прилипание" бактерий к макрофагам с последующим их фагоцитозом. Помимо выведения из организма патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, КИП способствует росту нормальной микрофлоры кишечника (бифидобактерий, лактобактерий, энтерококков и непатогенных кишечных палочек), повышает выработку секреторного IgA и нормализует измененные показатели системного иммунитета

Интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный представляет собой белок, синтезированный штаммом Escherichia coli SX50, в генетический аппарат которого встроен ген человеческого лейкоцитарного альфа-2 интерферона. Интерферон человеческий рекомбинантный альфа-2 является аналогом нативного интерферона-α человека, относящегося к интерферонам первого типа, обладает противовирусными, иммуномодулирующими и антипролиферативными свойствами и антимикробной активностью за счет способности стимулировать систему фагоцитов. Интерферон является универсальным противовирусным средством и высокоэффективен в отношении широкого спектра вирусов.

Цинк играет важную роль в функционировании иммунной системы. Он служит фактором иммунной защиты, необходим для созревания специфических иммунных клеток, выработки цитокинов, резистентности организма. Цинк необходим для пролиферации, трансформации, функционирования поверхностных рецепторов лимфоцитов. Накапливаясь в лимфатических узлах при элиминации белковых молекул, цинк может активно влиять на формирование образующихся здесь лимфоцитов. Участвует в активизации более 60 ферментов в человеческом организме, регулирует их структуру. Цинк участвует в синтезе белков, ДНК и РНК; в процессе деления клеток, их роста и регенерации. Оказывает прямое воздействие на образование коллагеновых волокон, отвечающих за эластичность кожи; на формирование соединительной ткани, суставных поверхностей. Цинк является сильным антиоксидантом. Стимулирует рост и входит в состав фактора роста нервов.

Участвует в восстановлении структуры нервов при их повреждении. Уравновешивает сахар крови и помогает поджелудочной железе вырабатывать инсулин. Защищает печень и почки от химических токсинов. Цинк способствует образованию объемных гидратных или сольватных оболочек вокруг молекул иммуноглобулина, способствует наиболее стабильной конформации белковых глобул. Гидратные оболочки играют решающую роль в образовании третичной и четвертичной структуры молекулы иммуноглобулина и в ее стабильности. Цинка глюконат является незаменимым микроэлементом, стимулирует выработку антител, участвует в формировании Т-клеточного иммунитета, стабилизирует мембраны клеток, являяется кофактором, стабилизирующим в активной конформации многие регуляторные пептиды. Обладает бактериостатическими свойствами, участвует в нормализации перекисного окисления. В результате, наличие цинка в заявляемом средстве обеспечивает наиболее высокую активность и эффективность воздействия в комплексе иммуноглобулинов и интерферона и пролонгированное действие средства в целом.

В предпочтительных случаях реализации композиции комплексный препарат Кипферон Форте содержит алоэ экстракт сухой.

Алоэ воздействует на систему иммунитета, активируя макрофаги, вызывает высвобождение интерферонов и интерлейкинов. Полипептиды и полисахариды, в составе сока алоэ, (например, Acemannan) воздействующие на систему иммунитета, играют ключевую роль в активизации макрофагов. Химический состав алоэ включает оксипроизводные антрахинона; карбоновые кислоты; микроэлементы: Si, Al, Са, Fe, Mg, Ni, Ti, V, Mo, Cu, Ag, P, Ba, Mg, Na, Zn, Pb, Rb. Cr, La; 15 свободных аминокислот; витамины: B1, B2, B6. С, Р; углеводы: галактоза, фруктоза, сахароза и другие вещества: пектины, флавоноиды, дубильные вещества. Алоэ являемся биогенным стимулятором, противовоспалительным и антибактериальным средством, стимулятором регенерации тканей, иммуностимулятором и обладает антимутагенной активностью.

Вспомогательными веществами в композиции комплексною препарата Кипферон Форте являются Тизоль, полисорбат (Твин-80), пчелиный воск, буферный раствор и твердый жир.

Тизоль - химическое название аквакомплекс титана глицеросольвата, общая химическая формула ТiO₄(С₃Н₇О₂)₄(С₃Н₈О₃)₁₀(Н₂О)₄₀. Является органическим титансодержащим соединением. Атом титана, химически связанный с молекулами глицерина, является комплексообразующим центром для составляющих молекулу препарата фрагментов: глицерина и воды. Этим взаимодействием определяется гелевая структура Тизоля и его фармакологические свойства. По физико-химическим свойствам глицеросольват титана представляет густую, не текучую, не прозрачную массу белого цвета с сероватым оттенком и слабым специфическим запахом, который практически не уловим и никак не повлияет на будущую лекарственную форму. Используется в качестве вспомогательного вещества, обеспечивающего проводимость активных субстанций через ткани человеческого организма, увеличивает скорость высвобождения активного вещества по сравнению с чисто жировыми основами на 30% (для мягких лекарственных форм). Тизоль при смешивании с активными веществами лекарственного средства образует с ними устойчивые гели, способствует повышению их активности за счет транскутанных свойств и транспортировки к патологическому очагу, обеспечивает общую токсикологическую приемлемость для организма активных веществ заявляемого препарата. Кроме того, Тизоль обладает противовоспалительным, противоотечным, противозудным, антисептическим действием, стимулирует регенерацию тканей, локальный кровоток. Наряду с этими свойствами Тизоль обладает уникальной способностью транскутанного глубокого до 8 см проведения через кожу и слизистые, превышающую проводимость Диметилсульфоксида (ДМСО) и не имеет его недостатков. Тизоль хорошо сочетается с активными веществами настоящею препарата, не разрушает их, позволяет повысить их активность и токсикологическую приемлемость для организма. Облегчает их высвобождение из суппозиторной основы и транспортировку к патологическому очагу, вследствие чего позволяет добиться сокращения времени на получение лечебного эффекта, усиления совместного действия активных субстанций и сокращение курса приема комплексного препарата Кипферон Форте.

Твин 80 (синонимы: полисорбат, полиэтилен гликоль сорбит моноолеат) (ФС 42-2540-88) служит в качестве стабилизатора консистенции суппозиторной массы. Представляет собой неионное поверхностно-активное вещество, обладающее свойством сохранения поверхности в смоченном состоянии. Твин 80 относится к неионогенным поверхностно-активным веществам - это группа соединений, используемая в фармацевтической практике для улучшения технологических или терапевтических свойств различных лекарств. Применение поверхностно-активных веществ в производстве лекарств и медицине непрерывно возрастает, что связано с рядом весьма ценных их свойств - стабилизирующей и эмульгирующей способностью, значительным влиянием на мембранную проницаемость кожных покровов и слизистых оболочек и т.д. Твин 80 разрешен Государственной Фармакопеей РФ (XI, XII изд.) к применению в различных лекарственных формах в качестве эмульгатора, стабилизатора и сорастворителя.

Пчелиный воск - жироподобное зернистое вещество (ГОСТ 21179-2000). Он необходим для создания необходимой консистенции при формовании свечей (суппозиториев). Состоит из смеси сложных эфиров (до 75%), свободных карбоновых кислот и предельных углеводородов, богат витамином А (в 100 г сотового пчелиного воска содержится 4096 ME витамина А). Удельная масса 0,956-0,969. Плавится при температуре 62-72°С. Нерастворим в воде; легко растворяется в эфире, хлороформе, бензоле, бензине, скипидарном масле.

В качестве жировой липофильной основы для изготовления заявляемого препарата в форме суппозиториев в качестве базовой основы используется твердый жир марки "Hard fat" (ТУ 9369-001-28910991-10). Эта марка твердого жира имеет достаточно большой разброс по температуре плавления (34 37.5°С), что дает преимущества в технологическом аспекте. Кроме того, он разрешен к применению в сфере здравоохранения при производстве суппозиториев.

Для обеспечения стабильности субстанции Интерферон человеческий рекомбинантный альфа-2 в пределах срока годности лекарственного препарата необходимо использование буферного раствора, содержащего натрия гидрофосфат додекагидрат (натрия фосфорно-кислый двузамещенный 12-водный) (ГОСТ 41 72-76)., натрия дигидрофосфат дигидрат (натрия фосфорнокислый однозамещенный 2-водный) (ГОСТ 245-76), натрия хлорид (натрий хлористый) (ГОСТ 4233-77) и воду очищенную (ФС 42-2619-97).

Влияя на фармакологическую активность лекарственного препарата, указанные вспомогательные вещества в совокупности способны усиливать активность лекарственного средства, обеспечивать местное или общее воздействие на организм, изменять скорость наступления эффекта (ускорять или пролонгировать действие), обеспечивать направленный транспорт или регулируемое высвобождение лекарственных веществ.

Эти вещества влияют не только на терапевтическую эффективность лекарственного вещества, но и на стабильность лекарственных форм в процессе их изготовления и хранения, что имеет не только медицинское, но и экономическое значение, позволяя не только сократить курс приема лекарственного препарата, но и увеличить срок его годности. Вследствие указанных причин заявляемому новому комбинированному препарату присвоен статус «Форте».

Суппозитории Кипферон Форте проверены на противовирусную активность в сравнении с суппозиториями Кипферон, содержащими в качестве активных субстанций только КИП и человеческий рекомбинантный интерферон альфа-2b. Методы контроля определены нормативными документами [1,2].

Результаты определения противовирусной активности приведены в таблице 1.

Таблица 1 Состав Противовирусная активность в одном суппозитории (ME) 1. КИП, интерферон альфа-2b, вода, буферный раствор, парафин, эмульгатор Т-2, жир кондитерский «СолПро» до массы суппозитория 1,5 г, произведенный согласно RU №2116083 (Кипферон) 606000 2. КИП, интерферон альфа-2b, вода, буферный раствор, цинка глюконат, Тизоль, пчелиный воск, твин-80, твердый жир «Hard Fat» до массы суппозитория 1,5 г(Кипферон Форте) 800456 3. КИП, интерферон альфа-2b, вода, буферный раствор, цинка глюконат, алоэ экстракт сухой, Тизоль, пчелиный воск, твин-80, твердый жир «Hard Fat» до массы суппозитория 1,5 г(Кипферон Форте) 829333

Противовирусная активность образца препарата почти на 40% превышает противовирусную активность прототипа, содержащего только КИП и интерферон альфа-2b, а также иной состав вспомогательных компонентов. ME (международная единица) в фармакологии - это единица измерения количества вещества, основанная на биологической активности.

Способ производства заявляемого комплексного лекарственного препарата Кипферон Форте реализуется следующим образом.

Производство заявляемого лекарственного препарата Кипферон Форте происходит в несколько этапов:

подготовительные этапы - подготовка воздуха, подготовка дезинфицирующих растворов, подготовка технологического оборудования, подготовка технологической одежды, микробиологический мониторинг производственной среды, подготовка питательных сред осуществляются стандартными методами.

Кроме того, способ получения суппозиториев Кипферон Форте предусматривает следующие этапы:

Приготовление буферного раствора

Для приготовления стабилизирующего (буферного) раствора используют:

- Натрия хлорид (натрий хлористый) по ГОСТ 4233-77, квалификации «хч» с массовой долей основного вещества не менее 99,9%, прошедший входной контроль и соответствующий требованиям нормативной документации;

- Натрия гидрофосфата додекагидрат (натрий фосфорно-кислый двузамещенный 12-водный по ГОСТ 4172-76, квалификации «хч» с массовой долей основного вещества 99-101%, прошедший входной контроль и соответствующий требованиям нормативной документации;

- Натрия дигидрофосфата дигидрат (натрий фосфорно-кислый однозамещенный 2-водный) по ГОСТ 245-76, квалификации «чда», с массовой долей основного вещества не менее 99,9%, прошедший входной контроль и соответствующий требованиям нормативной документации.

Приготовленный раствор в количестве 350-400 мл разливают во флаконы для крови и кровезаменителей вместимостью 500 мл, закрывают резиновыми пробками, накрывают алюминиевыми колпачками, закатывают и стерилизуют в автоклаве при температуре (120±1)°С в течение 15 мин. Стабилизирующий раствор хранят при комнатной температуре в течение 30 дней.

Измельчение ингредиентов.

Измельчения требуют цинка глюконат и алоэ экстракт сухой, вводимые при производстве в суппозиторную основу в виде порошков. Указанные субстанции измельчаются на мельнице, затем передаются на следующую стадию.

Просеивание ингредиентов.

Просеивания требуют цинка глюконат и алоэ экстракт сухой. Данные субстанции вводятся в сухом виде в основу, а значит на качество суппозиториев повлияет размер частиц. Просеивание осуществляется на вибросите с диаметром отверстий 250 мкм.

Отвешивание ингредиентов.

Количество отвешиваемых компонентов, необходимое для получения серии препарата с регламентируемой средней массой суппозитория 1,4 г,рассматривают исходя из утвержденного состава, расходного коэффициента (процента потерь) и вместимости бункера дозирующей машины.

На весоизмерительном приборе последовательно проводится отвешивание измельченных и просеянных цинка глюконата и алоэ экстракта сухого, а также Тизоля. твердого жира, Твин-80 и пчелиного воска.

Подготовка рабочего раствора интерферона.

Субстанцию интерферона размораживают при комнатной температуре в течение 1-3 часов.

В простерилизованный флакон вносят расчетное количество стерилизованного стабилизирующего раствора и расчетное количество субстанции интерферона.

Флаконы закрывают простерилизованными резиновыми пробками, герметично укупоривают с помощью парафина.

Допускается хранение рабочего раствора интерферона в холодильнике при температуре от +2 до +8°С не более 7 суток.

Подготовка рабочего раствора КИП

Для приготовления рабочего раствора КИП используют иммуноглобулиновый комплексный препарат (КИП) для энтерального применения (сухой), или лиофилизат для приготовления раствора, или субстанцию иммуноглобулинового комплексного препарата (КИП) с содержанием сухого остатка 26-35%.

Количество иммуноглобулинового комплексного препарата (КИП), необходимого для получения серии препарата с регламентируемой средней массой суппозитория 1,4 г, рассчитывают исходя из утвержденного состава ФСП, сухого остатка иммуноглобулинового комплексного препарата (КИП), расходного коэффициента и вместимости бункера дозирующей машины.

Емкости с иммуноглобулиновым комплексным препаратом (КИП) перемещают в бокс подготовки активных субстанций.

На весах в емкость для смеси активных субстанций отвешивают рассчитанную навеску КИП. Стерилизованным мерным цилиндром отмеряют расчетное количество растворителя (стерилизованная вода очищенная - для КИП сухого и лиофилизата или стабилизирующий раствор - для субстанции КИП) и выливают в емкость с навеской субстанции КИП.

Перемешивают смесь до однородного состояния вручную при помощи лопатки из нержавеющей стали.

Приготовленную таким образом субстанцию КИП хранят в холодильнике при температуре +2-(+8)°С не более суток.

Подготовка жировой основы

Количество компонентов жировой основы, необходимых для получения серии препарата, с регламентируемой средней массой суппозитория 1,4 г рассчитывают исходя из утвержденного состава, расходного коэффициента и вместимости бункера дозирующей машины.

Компоненты жировой основы - твердый жир, воск пчелиный, прошедшие входной контроль и соответствующие требованиям нормативной документации, освобождают от упаковки и помещают в емкости из нержавеющей стали для измельчения компонентов, предварительно обработанные 70% paствором спирта этилового.

Измельчение осуществляют вручную при помощи инструментов из нержавеющей стали, откалывая куски размером 5-15 см. На весах делают навески измельченных компонентов жировой основы в соответствии с произведенными расчетами и помещают их в бак из нержавеющей стали для последующего их расплавления и стерилизации методом автоклавирования. Добавляют навеску полисорбата (Твин 80).

Стерилизацию проводят в автоклаве при температуре 121±1°С в течение 15 мин.

Бак с расплавленной и простерилизованной жировой основой аккуратно вынимают из автоклава, проверяют тест-индикаторы контроля режима стерилизации. Бак перемещают в термостат и хранят при температуре 57±2°С в течение суток.

Допускается использование жировой основы непосредственно после автоклавирования.

Получение суппозиторной массы.

Приготовленная расплавленная и стерилизованная жировая основа загружается в бункер гомогенизатора. Устанавливают соответствующие параметры работы гомогенизатора, включают его и перемешивают жировую основу на скорости 40 об/мин.

Отвешенный цинка глюконат и алоэ экстракт сухой последовательно вводят в расплавленную основу при включенном гомогенизаторе и перемешивают массу до образования однородной системы.

Затем производят введение жидкой фазы активных веществ в основу. Подготовленные, как описано выше, активные субстанции (рабочий раствор КИП и рабочий раствор интерферона) извлекают из холодильника. Выливают рабочий раствор интерферона в емкость с рабочим раствором КИП, добавляют туда гелеобразную массу Тизоля и перемешивают.

Полученную рабочую смесь интерферона, КИП и Тизоля добавляют в бункер гомогенизатора.

Гомогенизирование суппозиторной массы.

Полученную суппозиторную массу в бункере гомогенизатора доводят до температуры +38°С, тщательно перемешивают, после чего включают гомогенизатор до образования гомогенной массы.

Изготовление суппозиториев.

После получения гомогенной суппозиторной массы ее перемещают из гомогенизатора в бункер суппозиторной машины и приступают к операции розлива (дозированию) в индивидуальные упаковки (ячейки). Процесс дозирования ведут при непрерывном перемешивании, постепенно снижая скорость вращения мешалки со 180 об/мин до 120 об/мин в начале розлива, затем 130-120 об/мин в середине процесса и 130-100 об/мин к концу розлива. Температуру суппозиторной массы поддерживают на уровне 38+1°С.

После полного заполнения всех контейнеров (ячеек) их помещают для охлаждения в холодильный модуль на 15-25 минут (до полного застывания суппозиторной массы). Температуру в холодильном модуле устанавливают (10-20)±2°С.

После застывания суппозиторной массы осуществляется высокотемпературная запайка, маркировка и нарезка ленты с ячейками на блистеры.

Получаемый препарат представляет собой суппозитории светло-бежевого цвета с желтоватым или коричневатым оттенком, с характерным запахом, цилиндрической формы с заостренным концом. На продольном срезе допускается неоднородность, наличие воздушного стержня или воронкообразного углубления. Допускается неоднородность окраски в виде мраморности. Средняя масса суппозитория и однородность по массе от 1,33 до 1,47 г.

Проводится контрольный отбор по 10 суппозиториев в начале, середине, конце розлива для определения средней массы. При отклонении средней массы от заданного показателя объем дозирования регулируется.

Нарезанные блистеры помещают в специальные пластиковые контейнеры и передают через передаточный шлюз для дальнейшего транспортирования в холодильник на участке карантинного хранения полуфабриката.

Готовая продукция подвергается проверкам.

Подлинность.

В препарате должны выявляться белки, свойственные белкам сыворотки крови человека, и отсутствовать белки животного происхождения. Интерферон должен представлять собой человеческий интерферон альфа-типа.

Время полной деформации: Не более 10 минут. Испытания проводят в соответствии с требованиями ГФ, изд. XI, вып. 2, с.152.

Микробиологическая чистота: Категория 2. ГФ РФ,изд. XII.

Токсичность: Препарат должен быть нетоксичным.

Специфическая активность:

- Титр антител класса G к родоспецифическому антигену хламидий должен быть не менее 1:100 в одном суппозитории.

- Препарат должен обладать специфической противовирусной активностью в диапазоне от 150000 до 3000000 ME в одном суппозитории (для разных дозировок препарата при лечении различных заболеваний и категорий пациентов - взрослые, дети).

Штаммы, используемые для контроля: При контроле используется вирус везикулярного стоматита, штамм "Индиана", депонированный в Институте вирусологии им. Д.И.Ивановского (номер в коллекции ГКВ-29).

Проведены доклинические исследования препарата «Кипферон Форте, суппозитории вагинальные и ректальные».

В ходе проведенной работы были осуществлены следующие виды экспериментальных проверок.

1. Изучение острой токсичности препарата в экспериментах на белых мышах и крысах.

Результаты токсикометрии, данные наблюдений за экспериментальными животными, а также данные патоморфологических исследований после острого применения исследуемого препарата позволяют отнести препарат Кипферон Фортс к V классу практически нетоксичных лекарственных веществ.

2. Исследование подострой (субхронической) токсичности.

По результатам некропсии и гистологического исследования, ежедневное пероральное (внутрижелудочное) введение испытуемой лекарственной формы препарата Кипферон Форте, в дозах 70 мг/кг и 700 мг/кг в течение 14 дней крысам обоего пола не вызывает раздражения, воспаления или деструкции тканей желудочно-кишечного тракта, а также не сопровождается развитием дистрофических, деструктивных, очаговых склеротических изменений в паренхиматозных клетках и строме внутренних органов.

3. Изучение возможных аллергизирующих свойств.

Исследования по разделам: реакция общей анафилаксии (анафилактический шок); реакция непрямой дегрануляции тучных клеток; реакция иммунных комплексов; конъюнктивальная проба свидетельствовали об отсутствии у препарата Кипферон Форте аллергенных свойств. Сделан вывод о том, что исследуемый препарат Кипферон Форте не обладает аллергизирующим действием.

4. Оценка иммунотоксичности.

Исследования по разделам: влияние препарата на гуморальное звено иммунитета; влияние препарата Кипферон Форте на клеточный иммунитет; влияние на неспецифическую резистентность показало, что препарат Кипферон Форте эффективен как стимулятор фагоцитоза, в особенности кислородзависимых систем биоцидности. Выраженная активация макрофагов при использовании препарата является одним из основных компонентов усиления иммунного ответа. Иммунотоксическими свойствами препарат Кипферон Форте не обладает.

5. Изучение мутагенности.

Изучены мутагенные свойства Кипферон Форте на микроорганизмах в тесте Эймса. Исследована цитогенетическая активность препарата методом учета хромосомных аберраций в клетках костного мозга крыс. Изучено влияние препарата на индукцию доминантных летальных мутаций в зародышевых клетках мышей. По результатам тестов показано, что исследуемый препарат не индуцирует доминантные летальные мутации в зрелых спермиях, поздних и ранних сперматидах. В дозе 3500 мг/кг (50 терапевтических доз для человека) препарат не проявляет мутагенную активность (по тесту хромосомных аберраций) и не вызывает летальных мутаций в репродуктивных клетках у мышей, т.е. не обладает мутагеным действием в исследованных тестах, а также не является потенциальным канцерогеном.

6. Исследование антипромоторной активности.

Препарат проявил себя как классический адгезионный фактор (контактин), увеличивая силу сцепления клеток в 2 раза в печени и в 1,5 раза - в легких in vitro и in vivo. Это свидетельствует о том, что Кипферон Форте не обладает промоторной активностью и не является потенциальным канцерогеном.

7. Изучение возможного местно-раздражающего действия

Местное действие препарата оценивали на модели мерцательного эпителия пищевода лягушки и при внесении в конъюнктивальный мешок глаза кролика. В опытах на лягушках было установлено, что нанесение на слизистую оболочку пищевода препарата не отражалось на функции мерцательного эпителия. В экспериментах на кроликах, при гистологическом исследовании как в опыте, так и в контроле не было выявлено изменений в строении оболочек глаза. Препарат не оказывает местно-раздражающего действия.

8. Оценка эмбриотоксичности.

Исследование эмбриотоксического действия препарата Кипферон Форте было проведено в 2 этапа. На первом этапе производилась оценка действия препарата Кипферон Форте в пренатальный период, на втором этапе изучались постнатальные проявления его действия. Результаты исследования на первом этапе свидетельствуют о том, что гибели или других признаков интоксикации у крыс-самок не отмечалось ни в опытных, ни в контрольной группах. Достоверных различий в темпах прироста массы тела беременных самок опытных и контрольной групп также не отмечалось. Воздействие препарата Кипферон Форте с 1-го по 19-й дни беременности в дозах 70 и 700 мг/кг не вызывало увеличения пред- и постимплантационной смертности, а также отставания в росте и развитии плода. Увеличения частоты наружных аномалий или аномалий скелета и внутренних органов не обнаружено. Во втором этапе исследований гибели самок не было отмечено пи в подопытных, ни в контрольной группах. Отклонений в протекании беременности, родов, заботе о потомстве в подопытных группах также не наблюдалось. Результаты проведенного исследования свидетельствуют об отсутствии у препарата Кипферон Форте эмбриотоксического действия при ректальном пути введения.

9. Фармакокинетика препарата Кипферон Форте

Результаты исследования фармакокинетики препарата «Кипферон форте» на кроликах показали, что максимальный уровень концентрации интерферона альфа-2b (в пределах 100-150 мг/мл) в крови экспериментальных животных достигается через 1 час после введения препарата в дозе 1,406 мг - 0,47 мг/кг. Общее среднее время присутствия препарата в организме - показатель MRT - составляет около 7,5 часов. Период полуэлиминации препарата Т_1/2 составил порядка 5 часов. Величина кажущегося стационарного объема распределения составила порядка 160 мл/кг. Эффективная длительность действия препарата составляет около 12 часов. Свидетельств о накоплении препарата в организме и возможности кумуляции исследованиями не выявлено.

Результаты проведенного доклинического исследования обще токсического действия, специфических видов токсичности, фармакокинетики препарата «Кипферон Форте» позволяют рекомендовать его в качестве практически нетоксичного средства, не вызывающего отдаленных неблагоприятных эффектов.

Примеры клинических испытаний

Проведено клиническое испытание вагинальных суппозиториев, включающих в качестве активных компонентов комплекс иммуноглобулинов, интерферон, цинк и алоэ в лечении больных генитальным герпесом, в частности цитомегаловирусной инфекцией.

Генитальный герпес является одним из самых распространенных вирусных заболеваний человека. Цитомегаловирусную инфекцию вызывает вирус, относящийся к семейству вируса герпеса.

Клиническая картина вирусного женского заболевания пациенток характеризовалась местными и общими симптомами.

Местные изменения выражаются появлением в области пораженного участка множественных везикул на фоне гиперемированной, отечной слизистой оболочки. Везикулы в последующем (через 2-3 дня) вскрываются и образуются язвочки с желтоватым налетом, заживающие через 2-3 недели. В случаях присоединения вторичной инфекции язвы увеличиваются в размерах и существуют более продолжительное время. В области поражения отмечается зуд, жжение, болезненность. Может иметь место увеличение регионарных лимфатических узлов. Из общих симптомов отмечаются головная боль, миалгия, тошнота, субфебрильная температура, раздражительность, нарушение сна. По мере заживления язв и исчезновения других местных проявлений болезни проходят и общие симптомы.

В исследование было включено 30 пациенток в возрасте от 20 до 45 лет с впервые выявленным генитальным герпесом.

Все пациентки были разделены на 3 группы по 10 человек, из которых 2 группы - экспериментальные, в которых пациентки получали в качестве терапии заявленные лекарственные формы на основе комплекса иммуноглобулинов, интерферона, алоэ, цинка, тизоль, включающие буферный раствор, пчелиный воск, полисорбат и твердый жир, а именно:

1-я группа - вагинальные суппозитории Кипферон Форте, в которых активными компонентами являются комплекс иммуноглобулинов, интерферон и цинк, вспомогательные вещества - тизоль, буферный раствор, пчелиный воск, полисорбат и твердый жир;

2-я группа - вагинальные суппозитории Кипферон Форте, в которых активными компонентами являются комплекс иммуноглобулинов, интерферон, цинк, алоэ, вспомогательные вещества - тизоль, буферный раствор, пчелиный воск, полисорбат и твердый жир;

3-я группа - контрольная, в которой пациентки получали лечение комплексом иммуноглобулинов и интерферона в суппозиториях под названием «Кипферон, суппозитории вагинальные и ректальные».

Лечение всем пациенткам проводили по аналогичной схеме: вводили вагинальные суппозитории по 1 свече 2 раза в сутки в течение 10 дней. Продолжительность лечения определяли по динамике клинико-лабораторных показателей.

Диагностику проводили на основании объективных клинических данных (осмотра слизистой влагалища в зеркалах), жалоб пациенток на выделения, жжение, раздражение слизистой влагалища. Часть больных предъявляла жалобы на дизурию и диспареунию.

В результате клинических исследований было подтверждено, что заявленные фармацевтические композиции (для пациентов группы 1 и 2) обладают высокой терапевтической эффективностью в отношении возбудителей вирусных инфекций (Табл. 2, 3).

Эффективность заявленных композиций (для пациентов группы 1 и 2) существенно превышала эффективность препарата Кипферон (Табл.4).

Все пациентки наблюдались после проведенного курса лечения в течение 12 последующих месяцев, при этом ни в одном случае рецидива заболевания в группах 1, 2 не было зарегистрировано.

Таблица 2 Результаты лечения пациенток 1-й группы Показатели В К, n=10 До лечения После лечения Язвочки с желтоватым налетом, заживающие через 2-3 недели. В случаях присоединения вторичной инфекции язвы увеличиваются в размерах и существуют более продолжительное время 100% 2-3% В области поражения отмечается зуд, жжение, болезненность. Может иметь место увеличение регионарных лимфатических узлов 60% 7% Из общих симптомов отмечаются головная боль, миалгия, тошнота, субфебрильная температура, раздражительность, нарушение сна 60% 4%

таблица 3 Результаты лечения пациенток 2-й группы Показатели ВК, n=10 До лечения После лечения Язвочки с желтоватым налетом, заживающие через 2-3 недели. В случаях присоединения вторичной инфекции язвы увеличиваются в размерах и существуют более продолжительное время 100% 1% В области поражения отмечается зуд, жжение, болезненность. Может иметь место увеличение регионарных лимфатических узлов 65% 2% Из общих симптомов отмечаются головная боль, миалгия, тошнота, субфебрильная температура, раздражительность, нарушение сна 70% 1%

Таблица 4 Результаты лечения пациенток 3-й группы Показатели ВК, n=10 До лечения После лечения Язвочки с желтоватым налетом, заживающие через 2-3 недели. В случаях присоединения вторичной инфекции язвы увеличиваются в размерах и существуют более продолжительное время 100% 20-22% В области поражения отмечается зуд, жжение, болезненность. Может иметь место увеличение регионарных лимфатических узлов 60% 7,5% Из общих симптомов отмечаются головная боль, миалгия, тошнота, субфебрильная температура, раздражительность, нарушение сна 60% 4%

Проведено клиническое испытание для ректальных суппозиториев, включающих в качестве активных компонентов комплекс иммуноглобулинов, интерферон, алоэ и цинк у больных вирусным гепатитом.

Лечение Кипферон Форте получали в опытной группе 18 взрослых больных (8 - с гепатитом В, 5 - с гепатитом С и 5 - с хроническим вирусным гепатитом С (ХВГС)). Другие 16 больных (7 - с гепатитом В, 4 - с гепатитом С и 5 - с ХВГС) составили группу сравнения (контроля), они не получали никаких противовирусных и иммуномодулирующих препаратов.

Кипферон Форте назначался пациентам опытной группы ежедневно 2 раза в день. При этом больные гепатитом получали препарат Кипферон Форте из расчета дозы по 1 млн ME в сутки в два приема ежедневно с 12-часовым интервалом в течение 10 дней. Далее 3 раза в неделю через день по 1 млн ME в сутки в два приема с 12-часовым интервалом - в течение 1 месяца.

Исследования показали, что у больных гепатитом В при лечении Кипферон Форте отмечалась более быстрая обратная динамика клинических симптомов, чем у больных группы контроля: симптомы интоксикации (вялость, снижение аппетита) исчезли на 2-3 дня раньше, чем у больных группы контроля; желтушность кожных покровов и склер исчезла к 10-12 дню от начала лечения, в то время как у больных группы сравнения - к 20 дню, нормализация размеров печени происходила соответственно на 15-18 день; уровень общего билирубина по окончании лечения Кипферон Форте почти нормализовался, составляя 21% от исходного, а в группе контроля в эти же сроки составлял 44% от начального. Повышенные показатели щелочной фосфатазы снижались быстрее у больных на Кипферон Форте, по сравнению с больными на базисной терапии.

В опытной группе нормализация биохимических показателей в группе леченых Кипферон Форте достоверно опережала таковую в контрольной группе. Более быстрым было падение активности аминотрансфераз. Так, в группе больных после окончания терапии Кипферон Форте активность АлАТ составила 20% от исходной, а в группе сравнения - 34% от исходной. Такая же динамика была характерна для АсАТ. Достоверным оказалось различие в темпе нормализации уровня щелочной фосфатазы. По окончании терапии Кипферон Форте уровень ЩФ составил 35% от исходного, а в группе контроля - 55% от исходного.

У больных хроническим гепатитом С (ХВГС) через месяц по окончании лечения Кипферон Форте активность АлАТ снизилась до 75+3 ед./л от исходных 98+5 ед./л, в то время как у больных группы сравнения таковая практически не изменилась по сравнению с исходной, равной 95±10 ед./л.

Таким образом, при гепатите В под влиянием Кипферон Форте быстрее исчезают симптомы болезни и нормализуются показатели билирубина и ферментов, по сравнению с таковыми в контрольной группе. При гепатите С средство Кипферон Форте способствует более быстрой нормализации биохимических показателей (АлАТ, АсАТ, щелочная фосфатаза, билирубин), по сравнению таковыми у пациентов, не получавших Кипферон Форте. При хроническом гепатите С (ХВГС) лечение Кипферон Форте приводит к уменьшению активности процесса, что выражается в снижении повышенного уровня аминотрансфераз, и способствует подавлению репликации вируса гепатита С, что подтверждается падением титров РНК HCV у больных.

Исследования препарата, выбранного в качестве ближайшего аналога, не выявляли эффективности, показанной при лечении заявляемым препаратом Кипферон Форте.

Представленные данные открывают перспективу применения препарата Кипферон Форте для лечения острых и особенно хронических вирусных гепатитов. При этом, благодаря отсутствию побочных явлений, Кипферон Форте может быть использован как в виде монотерапии, так и в сочетании с другими противовирусными препаратами, в первую очередь, с рекомбинантными интерферонами.

Также в ходе контролируемых клинических испытаний показано, что данный препарат эффективен при гнойно-септических осложнениях основного заболевания у травматологических и общехирургических больных; сепсисе; ожогах; системных васкулитах; тромбоцитопенической пурпуре у детей и агаммагло-булинемии.

Проведенные исследования подтверждают синергидный эффект комплекса иммуноглобулинов, интерферона, алоэ и цинка у больных разнообразными вирусными заболеваниями.

Таким образом, вышеуказанные клинические данные объективно демонстрируют эффективность лечения путем введения заявленной фармацевтической композиции в виде суппозиториев препарата Кипферон Форте, включающей в качестве активных компонентов комплекс иммуноглобулинов, интерферона и цинка, или комплекса иммуноглобулинов, интерферона, цинка и алоэ, обеспечивающих синергидный эффект в виде ускорения элиминации возбудителя и стойкого сохранения полученного лечебного эффекта. Фармакологическое комплексное действие препарата: иммуномодулирующее; иммуностимулирующее; противовирусное: антибактери-альное; противовоспалительное.

Выраженное лечебное действие препарата Кипферон Форте основано не только на его способности повышать эффективность иммунных реакций, но и, преимущественно, на его способности непосредственно ингибировать развитие вируса в инфицированных клетках, поскольку защищает клетки человека в культуре in vitro от цитопатогенного действия вируса. Высокая клиническая эффективность, обусловленная синергизмом действия комплекса иммуноглобулинов, интерферона, цинка и алоэ, на оптимизированной суппозиторной основе, пролонгированное действие, отсутствие побочных эффектов и рецидивов, а также комплаентность местной терапии заявленной фармацевтической композиции в виде суппозиториев, в каждом конкретном случае, свидетельствуют о том, что заявленная фармкомпозиция является новым перспективным средством.

Сочетание в рецептуре «Кипферон Форте» комплексного иммуномодулирующего препарата (КИП), интерферона, биологически активного соединения цинка в выбранной и экспериментально подтвержденной дозировке, в совокупности с целесообразно подобранным комплексом вспомогательных веществ, которая может быть модифицирована добавлением алоэ, позволит значительно усилить (потенциировать) фармакологическое действие препарата, создать на данном этапе принципиально новое лекарство, не имеющие аналогов на мировом и российском рынке, значительно расширить спектр нозологических форм (единиц номенклатуры и классификации болезней), улучшить качество и эффективность оказываемой медицинской помощи и возможности здравоохранения в целом, а также найти новые технологические решения по совершенствованию лекарственных средств.

Благодаря этому представляется реальным медицинское применение препарата Кипферон Форте в следующих случаях:

- при острых респираторных вирусных инфекциях (ОРВИ), пневмониях (бактериальных, вирусных, хламидийных) и хронических бронхитах;

- при гриппе и других острых респираторных вирусных заболеваниях, в том числе осложненных бактериальной инфекцией;

- при острых вирусных (ротавирусных) и бактериальных (сальмонеллез, дизентерия, колиинфекция) кишечных инфекциях (ОКИ), в том числе с проявлениями дисбактериоза кишечника различной выраженности;

- при инфекционно-воспалительных заболеваниях урогениталыюго тракта (в том числе хламидиоз, генитальный герпес, цитомегаловирусная инфекция, уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез, папилломавирусная инфекция, бактериальный вагиноз. рецидивирующий вагинальный кандидоз. микоплазмоз, эрозия шейки матки, цервицит, вульвовагинит, уретрит, баланит, баланопостит);

- для снижения риска возникновения и повышения эффективности лечения хронического простатита, аденомы простаты, умеренно выраженных функциональных нарушений в мочевыделительной системе (на фоне доброкачественной гиперплазии предстательной железы);

- при острых и хронических вирусных гепатитах В, С, Д, в том числе в терапии хронических вирусных гепатитов в период выраженной активности заболевания;

- в качестве биогенного стимулятора в комплексной терапии хронических заболеваний: язвенная болезнь желудка и 12-перстной кишки; хронический бронхит и пневмония; аднексит и эндометрит; трофические язвы.

Упомянутая в тексте нормативная литература.

1. МУК 4.1/1.2588-96 «Методы контроля медицинских иммунобиологиических препаратов, вводимых людям».

2. ФС 42-3874-99 "Физико-химические, химические, физические и иммунохимические методы контроля медицинских иммунобиологических препаратов".

Группа изобретений относится к области фармакологии и касается лекарственного препарата комплексного действия, который содержит в качестве активных компонентов комплекс иммуноглобулинов классов G, М, А, интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный, цинка глюконат, а также вспомогательные компоненты: тизоль, буферный раствор, пчелиный воск, полисорбат и твердый жир в виде гомогенизированной суппозиторной массы, дополнительно содержит алоэ экстракт сухой с размером частиц менее 250 мкм в количестве от 0,04 г до 0,17 г на один суппозиторий. Способ производства лекарственного препарата включает стадии: готовят жировую основу, в которую входят пчелиный воск в виде твердого вещества от белого до желто-бурого цвета, полисорбат и твердый жир, после чего вводят цинка глюконат и перемешивают, а также готовят смесь активных субстанций, для чего смешивают между собой буферный раствор с комплексом иммуноглобулинов классов G, М, А и интерфероном, добавляют к ним массу Тизоля и перемешивают до образования однородного раствора, а затем вводят последний в жировую основу, доведенную до температуры 38°С, и перемешивают до образования гомогенной суппозиторной массы указанного выше состава. Группа изобретений обеспечивает повышение фармакологической активности препарата и расширение спектра действия лекарственного препарата, получаемого заявляемым способом. 2 н. и 14 з.п. ф-лы, 4 табл.

1. Лекарственный препарат комплексного действия, содержащий в качестве активных компонентов комплекс иммуноглобулинов классов G, М, А, интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный, цинка глюконат, а также вспомогательные компоненты: тизоль, буферный раствор, пчелиный воск, полисорбат и твердый жир в виде гомогенизированной суппозиторной массы при следующем содержании компонентов на один суппозиторий:
Комплекс иммуноглобулинов классов G, М, А 0,14-0,60 г Интерферон альфа-2b человеческий   рекомбинантный 150000-3000000 ME Цинка глюконат моногидрат 0,04-0,17 г Тизоль 0,03-0,14 г Натрия гидрофосфата додекагидрат 0,03-0,16 мг Натрия дигидрофосфата дигидрат 0,01-0,05 мг Натрия хлорид 0,07-0,30 мг Вода очищенная 0,01-0,04 г Пчелиный воск 0,03-0,14 г Полисорбат 0,02-0,09 г Твердый жир до массы суппозитория от 1,0 до 4,0 г

2. Препарат по п.1, отличающийся тем, что он содержит алоэ экстракт сухой с размером частиц менее 250 мкм в количестве от 0,04 г до 0,17 г на один суппозиторий.

3. Препарат по любому из пп.1, 2, отличающийся тем, что он содержит иммуноглобулиновый комплексный препарат, включающий иммуноглобулины классов G, М, А, выделенные из плазмы или сыворотки крови человека, проверенной на отсутствие антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 типов, вирусу гепатита С и поверхностного антигена вируса гепатита В.

4. Препарат по п.3, отличающийся тем, что комплекс иммуноглобулинов содержит IgG - 50-70%, IgM - 15-25%, IgA - 15-25%.

5. Препарат по любому из пп.1, 2, 4, отличающийся тем, что он содержит интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный в количестве от 150000 ME до 3000000 ME в одном суппозитории, представляющий собой белок, синтезированный штаммом Escherichia coli SX50, в генетический аппарат которого встроен ген человеческого лейкоцитарного альфа-2 интерферона.

6. Препарат по любому из пп.1, 2, 4, отличающийся тем, что он содержит Тизоль. представляющий собой аквакомплекс титана глицеросольвата, в состав которого входят полипептиды и полисахариды, имеющий рН в пределах 4,0-5,5 и относительную вязкость 1,95-2,10.

7. Препарат по любому из пп.1, 2, 4, отличающийся тем, что он содержит полисорбат, представляющий собой неионное поверхностно-активное вещество.

8. Препарат по любому из пп.1, 2, 4, отличающийся тем, что он содержит твердый жир, имеющий число омыления 210-260 мг КОН/г, гидроксильное число не более 55 мг КОН/г, йодное число не более 3, кислотное число не больше 0,5, пероксидное число не более 3.

9. Препарат по любому из пп.1, 2, 4, отличающийся тем, что он содержит буферный водный раствор натрия хлорида, натрия гидрофосфата додекагидрата и натрия дигидрофосфата дигидрата, и имеющий рН в пределах 5,0-7,0, с микробиологической чистотой, Ед/мл, не более 100.

10. Препарат по любому из пп.1, 2, 4, отличающийся тем, что суппозитории выполнены конусообразной или цилиндрической формы с заостренным концом.

11. Способ производства препарата комплексного действия по одному из пп.1-10, при котором готовят жировую основу в виде смеси, в которую входят пчелиный воск в виде твердого вещества от белого до желто-бурого цвета, полисорбат в виде маслянистой жидкости лимонного цвета и твердый жир в виде белой или почти белой восковой хрупкой массы с температурой плавления от 30°С до 45°С, для чего помещают эти компоненты в бак из нержавеющей стали для автоклавирования и стерилизации в течение 15 мин при температуре 121±1°С, после чего при включенной мешалке вводят в расплавленную основу цинка глюконат и перемешивают жировую основу до образования однородной системы, а также готовят смесь рабочих растворов активных субстанций, для чего смешивают между собой предварительно подготовленный буферный раствор с комплексом иммуноглобулинов классов G, М, А и интерфероном, добавляют к ним гелеобразную массу Тизоля и перемешивают до образования однородного раствора смеси активных субстанций, а затем вводят последний в жировую основу, доведенную до температуры 38°С, и тщательно перемешивают до образования гомогенной суппозиторной массы.

12. Способ по п.11, отличающийся тем, что непосредственно после введения цинка глюконата в расплавленную основу вводят и перемешивают алоэ экстракт сухой с размером частиц менее 250 мкм.

13. Способ по любому из пп.11, 12, отличающийся тем, что жировую основу после стерилизации перемещают в термостат и хранят при температуре 57±2°C в течение суток

14. Способ по любому из пп.11, 12, отличающийся тем, что после получения гомогенной суппозиторной массы ведут процесс дозированного розлива суппозиториев в индивидуальные упаковки при непрерывном перемешивании суппозиторной массы, постепенно снижая скорость вращения мешалки со 180 об/мин до 120 об/мин в начале розлива, затем 130-120 об/мин в середине процесса и 130-100 об/мин к концу розлива, при этом температуру разливаемой суппозиторной массы поддерживают на уровне 38±1°С, а полученные суппозитории в течение 15-25 минут охлаждают при температуре (10-20)±2°С.

15. Способ по п.14, отличающийся тем, что в процессе дозирования получают суппозитории массой от 1,0 г до 4,0 г при следующем содержании компонентов на один суппозиторий:
Комплекс иммуноглобулинов классов G, М, А 0,14-0,60 г Интерферон альфа-2b человеческий   рекомбинантный 150000-3000000 МE Цинка глюконат моногидрат 0,04-0,17 г Тизоль 0,03-0,14 г. Натрия гидрофосфата додекагидрат 0,03-0,16 мг Натрия дигидрофосфата дигидрат 0,01-0,05 мг Натрия хлорид 0,07-0,30 мг Вода очищенная 0,01-0,04 г Пчелиный воск 0,03-0,14 г Полисорбат 0,02-0,09 г Твердый жир до массы суппозитория от 1,0 до 4,0 г

16. Способ по п.15, отличающийся тем, что получают суппозитории с содержанием алоэ экстракта сухого в количестве от 0,04 г до 0,17 г на один суппозиторий.