СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ТИРЕОИДНОГО СТАТУСА ПЛЕМЕННЫХ КРОЛЬЧИХ-ПЕРВОКРОЛОК В ЭНДЕМИЧНЫХ ЗОНАХ ПУТЕМ КОМБИНИРОВАННОГО ПРИМЕНЕНИЯ ЙОДА И СЕЛЕНА Российский патент 2015 года по МПК A61K33/04 A61K33/18 

Изобретение относится к ветеринарии и биологии и может быть использовано для коррекции тиреоидного статуса, повышения продуктивных качеств и реализации генетического потенциала крольчих-первокролок, пребывающих на территории биогеохимических провинций, эндемичных по микронутриентам.

Известно кормовое средство для профилактики селеновой и йодной недостаточности у сельскохозяйственных животных и птиц [1], состоящее из стабилизированного крахмальным клейстером селенита натрия и кристаллического йода. Также известна комплексная кормовая микродобавка для кроликов [2], включающая в себя ряд микроэлементов, среди которых имеется йод и селен. Общим недостатком подобных кормовых добавок является их высокая стоимость и необходимость длительного применения, что при несоблюдении дозировки может привести к интоксикации. Кроме того, не учитывались индивидуальные особенности фармакокинетики препаратов йода и селена.

Наиболее близким к заявленному является способ повышения плодовитости и молочной продуктивности крольчих парентеральным введением селенсодержащих препаратов [3] (прототип), однако он не подразумевает компенсацию дефицита йода.

В промышленных и фермерских кролиководческих комплексах особенно остро стоит вопрос поддержания надлежащего уровня эндокринной и, как следствие, репродуктивной функции племенных крольчих первого окрола, увеличения численности крольчат в помете, снижения отхода молодняка в первые месяцы жизни и реализации их генетического потенциала. Исследования по изучению реактивности тканевых кластеров щитовидной железы крольчих на фоне комплексного применения препаратов йода и селена до настоящего времени не проводились.

Задача изобретения - коррекция тиреоидного статуса и повышение продуктивных качеств племенных крольчих первого окрола с помощью сочетанного применения препаратов йода и селена.

Технический результат достигается за счет того, что крольчихам за шесть-семь суток до случки внутримышечно вводят препараты «Е-селен» в дозе 0,04 мл/кг или «Селенолин^®» в дозе 0,008 мл/кг массы тела животного и непосредственно за сутки до случки с помощью шприца без иглы per os задается разведенный (1:1) в 5% растворе глюкозы йодполимерный препарат «Монклавит-1» в дозе 2,0 мл на голову.

С целью реализации задачи были сформированы контрольная и две опытные группы крольчих-аналогов в возрасте шести месяцев по пять голов в каждой (n=15).

Контрольная группа животных не подвергалась воздействию препаратов йода и селена. Крольчихам опытных групп за шесть-семь суток до планируемой случки внутримышечно вводили: I опытная группа - препарат «Е-селен» в дозе, 0,04 мл/кг; II опытная группа - препарат «Селенолин^®» в дозе 0,008 мл/кг массы тела животного. Препарат «Е-селен» является комплексом витамина E (токоферол ацетат) и неорганической формы селена, представленной селенитом натрия. «Селенолин^®» - лечебно-профилактический препарат, в отличие от «Е-селена» его основой является селеноорганическое соединение ДАФС-25 (диацетофенонилселенид). Непосредственно за сутки до случки крольчихам всех опытных групп с помощью шприца без иглы per os задавался разведенный (1:1) 5% раствором глюкозы йодполимерный препарат «Монклавит-1» в дозе 2,0 мл на голову.

Экспериментальная часть включала в себя комплекс цито-гистологических, морфометрических, морфобиохимических, химико-аналитических исследований и статистическую обработку полученного цифрового материала. Забор материала для исследований осуществляли у самок всех исследуемых групп, поствитально при убое с хозяйственной целью. Экспериментальная часть работы была выполнена в соответствии с протоколами «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» и законодательством Российской Федерации (Национальный стандарт ГОСТ Р 53434-2009).

Материалом исследования служила щитовидная железа, пробы стабилизированной крови и ее сыворотки от крольчих всех исследуемых групп.

Гистологические пробы подвергали тривиальным методам фиксации и окрашивания гематоксилин-эозином. Световую микроскопию осуществляли при помощи микроскопа Micros MSD 500 (Австрия), оснащенного цифровой камерой. Материал для цитоморфологических исследований фиксировали в 2,5% охлажденном растворе глютарового альдегида на фосфатном буфере (pH 7,4). После общепринятой подготовки и дегидратации, материал заключали в смесь эпон-аралдит и на ультратоме LKB V (Швеция) изготавливали срезы толщиной 0,07-0,08 мкм. Электронную микроскопию производили на микроскопе JEM-7А (Япония). Определение концентраций оТ₄, оТ₃ и ТТГ в сыворотке крови осуществляли методом твердофазного иммуноферментного анализа на спектрофотометре Multiscan Labsystems (Финляндия) с использованием стандартных наборов реагентов. Морфологические и биохимические исследования крови проводили на анализаторах Exigo 17 (Швеция) и Stat Fax 1904+ (США). Химико-аналитическое исследование количественного содержания селена в сыворотке крови осуществляли усовершенствованным флуориметрическим методом [4], на спектрофлуориметре SOLAR CM-2203 (Беларусь). Морфометрию гистоструктур щитовидной железы проводили при помощи лицензионной программы Тест Морфо - 4.0. Статистическую обработку данных результатов исследований осуществляли с применением пакета прикладных программ Statistica 8 и Microsoft Excel.

Щитовидная железа крольчих всех изучаемых групп имеет типичное строение, с поверхности покрыта капсулой, которая, отдавая соединительнотканные трабекулы, васкуляризированные сетью сосудов гемомикроциркуляторного русла (ГМЦР), делит ее паренхиму на дольки. Паренхима долек железы представлена структурно-функциональными единицами-фолликулами, выстланными одним слоем тироцитов.

Рисунок ткани щитовидной железы крольчих контрольной группы носит выраженный мозаичный характер. Фолликулы и тиреоидный эпителий вариативны как по форме, так и по размеру. Сосудистое русло инъецировано. Морфологические особенности структур железы позволяют говорить о наличии в ней двух типов кластеров: органотипичных нормофункциональных и с признаками гипофункции.

Морфофункциональная реактивность каждого морфотипа интерпретировалась раздельно, но с учетом морфологической общности тканей железы. Системный анализ цифрового массива данных позволил выявить функциональные потенции отдельно взятых кластеров.

В кластерах с органотипичной морфологией фолликулы овоидной формы (128,88±6,224 мкм) заполнены слоистым, бледно-розовым коллоидом отмечаются единичные резорбтивные вакуоли. Тироциты имеют низкопризматическую форму (16,28±0,335 мкм), цитоплазма слабооксифильна, ядра сферические (8,68±0,163 мкм), гипохромные, содержат одно или два ядрышка.

Структуры микрорайонов с морфологическими признаками гипофункции органа гетеротипичны. Фолликулы округлой формы (162,45±2,843 мкм), наполнены, коллоид слоистый, интенсивно окрашен в красно-розовые тона. Тироциты уплощенные (18,27±0,356 мкм), цитоплазма слабооксифильна, ядра веретеновидные (8,19±0,208 мкм), гиперхромные, границы клеток не просматриваются.

Рисунок ткани щитовидной железы крольчих I опытной группы носит мозаичный характер, однако менее явный в сравнении с контрольной группой. Кластеры с признаками гипофункции не выявляются. Фолликулы округло-овальной формы (61,35±3,213 мкм), заполнены бледно-розовым гомогенным коллоидом. Тироциты имеют низкопризматическую форму (16,35±0,585 мкм), цитоплазма слабооксифильна, ядра овоидной формы (10,39±0,275 мкм), базофильные с участками просветления, содержат одно, реже два ядрышка.

Рисунок ткани щитовидной железы крольчих II опытной группы - ячеистый, размерные градации фолликулов сглажены. Кластеры с признаками гипофункции равно, как и в I опытной группе, не обнаруживаются. Фолликулы округлой формы (87,38±2,481 мкм), частичного наполнения, коллоид зернистый, интенсивно розового цвета. Тироциты низкопризматические (15,38±0,593 мкм), цитоплазма выражено оксифильна, ядра округло-овальной формы (7,97±0,371 мкм), гиперхромные, структуры ядрышек не визуализируются.

По результатам гематологических и биохимических исследований крови всех групп животных отклонений от референсных значений нормы для кроликов не выявлено. Во всех опытных группах установлен стимулирующий гемопоэтический эффект, выразившийся в увеличении концентрации гемоглобина и количества эритроцитов на единицу объема крови, также выявлена активизация пластического обмена веществ в организме, характеризующаяся увеличением общего белка и альбумина.

Таблица 1 Сывороточные концентрации тиреоидных и тиреостимулирующего гормонов в контрольной и опытных группах Гормоны Контрольная группа I опытная группа II опытная группа ТТГ, мкМЕ/мл 0,32±0,005 0,14±0,005 0,13±0,005 оТ4, нмоль/л 15,73±0,218 53,39±1,065* 59,65±0,338* оТ3, нмоль/л 1,20±0,017 2,86±0,038* 2,35±0,054* Примечание: * - статистически достоверные отличия по сравнению с контрольной группой животных (р≤0,001)

Концентрации тиреоидных гормонов во всех опытных группах имеют ярко выраженную статистически достоверную потенцию к росту (табл.1), так, в I опытной группе концентрация оТ₄ возросла на 70%, а оТ₃ - на 58%, во II опытной группе - оТ₄ на 74%, а оТ₃ - на 49%, в сравнении с контрольной группой. Концентрации ТТГ значительно понижались: в I опытной группе на 44%, во II опытной группе на 41%, в сравнении с контрольной группой.

Таблица 2 Сравнительные количественные характеристики рождаемости, сохранности и интенсивности прироста живой массы крольчат Показатели Группы Контрольная группа I - опытная группа II - опытная группа Количество крольчат, полученных от 100 крольчих, (гол) 503 576* 634* Среднее количество крольчат в помете, (гол) 5,0 5,7 6,3 Увеличение количества крольчат в помете, % - 14,5 26,0 Падеж, (гол) 94 38 17 Количество крольчат к отбивке, (гол) 409 538* 617* Сохранность, % 81,3 93,4* 97,3* Живая масса крольчат к отбивке, (кг) 0,73±0,017 0,87±0,014 0,95±0,016 Живая масса крольчат в возрасте 3 мес, (кг) 2,86±0,044 3,33±0,030* 3,61±0,057* Примечание: * - статистически достоверные отличия по сравнению с контрольной группой животных (р≤0,001)

Экспериментально установлено, что при использовании схемы комбинированного применения препаратов микроэлементов (йода и селена) в щитовидной железе происходят функциональные и органические изменения, позволяющие реализовать тиреоидный гомеостаз и повысить продуктивные качества племенных крольчих первого окрола, что выражается в увеличении численности крольчат в помете, сохранности и активизации прироста их живой массы (табл.2).

Таким образом, для коррекции тиреоидного статуса племенных крольчих первого окрола и повышения их продуктивных возможностей необходимо за шесть-семь суток до случки внутримышечно ввести препарат «Е-селен» в дозе 0,04 мл/кг или «Селенолин^®» в дозе 0,008 мл/кг массы тела животного и непосредственно за сутки до случки с помощью шприца без иглы per os задать разведенный (1:1) в 5% растворе глюкозы йодполимерный препарат «Монклавит-1» в дозе 2,0 мл на голову.

Источники информации

1. Патент РФ №2164758, A23K 1/16, A23K 1/175, 2001.

2. Патент РФ №2159557, A23K 1/16, 2000.

3. Патент РФ №2445772, A01K 67/02, A61K 33/04, 2010.

4. Anipko V.V., Maryakhina V.S., Abramova L.L. Definition of selenium concentrations change in a blood after application of selenium preparations by fluorometric technique // «Topic problem of biophotonics» III international symposium, 16-22 July, 2011., St-Peterburg - Nizhniy Novgorod, Russia, 2011. P.77-78.

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ предусматривает внутримышечное введение крольчихам за шесть-семь суток до случки препарата «Е-селен» в дозе 0,04 мл/кг или «Селенолин^®» в дозе 0,008 мл/кг массы тела животного. Причем непосредственно за сутки до случки с помощью шприца без иглы per os задается разведенный (1:1) в 5% растворе глюкозы йодполимерный препарат «Монклавит-1» в дозе 2,0 мл на голову. При использовании схемы комбинированного применения препаратов микроэлементов (йода и селена) в щитовидной железе происходят функциональные и органические изменения, позволяющие реализовать тиреоидный гомеостаз и повысить продуктивные качества племенных крольчих первого окрола, что выражается в увеличении численности крольчат в помете, сохранности и активизации прироста их живой массы. 2 табл.

Способ коррекции тиреоидного статуса племенных крольчих-первокролок в эндемичных зонах путем комбинированного применения йода и селена, заключающийся в том, что крольчихам за шесть-семь суток до случки внутримышечно вводят препараты «Е-селен» в дозе 0,04 мл/кг или «Селенолин^®» в дозе 0,008 мл/кг массы тела животного, причем непосредственно за сутки до случки с помощью шприца без иглы per os задается разведенный (1:1) в 5% растворе глюкозы йодполимерный препарат «Монклавит-1» в дозе 2,0 мл на голову.