СПОСОБ ОТБОРА И ПОДГОТОВКИ ПРОБ ШЕРСТИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ НА ЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ Российский патент 2017 года по МПК G01N33/48 G01N33/50 

Описание патента на изобретение RU2607751C2

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано при отборе и подготовке проб биосубстратов для получения достоверных данных об особенностях метаболизма химических элементов в организме животных.

Покров служит одним из объективных показателей приспособленности животного к условиям среды. Он изменяется в пределах генотипа не только в зависимости от природно-климатической зоны, но и от уровня кормления и содержания. В этой связи неинвазивные методики взятия и оценки химического состава шерсти позволяют разрабатывать индивидуальные программы профилактики и коррекции элементозов.

Шерсть как биосубстрат не требует специального оборудования для хранения и транспортировки, может хранится практически неограниченное время, не теряя своей информационной ценности. При этом следует учесть, что при исследовании шерсти на макро- и микроэлементный состав их концентрация выше, чем в физиологических жидкостях, традиционно используемых для клинических и биохимических анализов, что позволяет существенно расширить набор химических элементов, доступных для аналитического определения.

Между тем при использовании шерсти следует учитывать, что этот субстрат животного как правило сильно загрязнен, это искажает результат исследования и не дает возможности объективной оценки минерального обмена в организме.

В ветеринарии до настоящего времени не существует унифицированной комплексной методики отбора и подготовки проб шерсти животных для исследований на элементный состав. Не определены оптимальные места и размеры участка на теле животного для отбора образцов шерсти.

Известен способ отбора племенных каракульских овец серой окраски, характеризующейся тем, что у ягнят при рождении и 30-дневном возрасте берут образцы шерсти с 1 см2 кожи на крестце и холке с последующим определением степени пигментированности волосков методом ЭПР спектрометрии [1]. Однако данный способ не показывает накопления макро- и микроэлементов в шерсти и возможность взятия образцов с холки для определения элементозов скота. Исследования проведены на ягнятах 30-дневного возраста, сильно отличающихся шерстью по структуре (ость, пух, переходный) и длине с шерстью крупного рогатого скота, недостаточной площадью для взятия образцов, так как у крупного рогатого скота масса шерсти, выстриженной с 1 см2 поверхности кожи на холке, составляет - 0,08 г, что недостаточно для определения макро- и микроэлементов стандартными методами атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии.

Известен способ диагностики хронических микроэлементозов сельскохозяйственных копытных животных, характеризующийся отбором образцов шерсти путем настрига ее с кисти хвоста [2], основными недостатками которого являются:

- невозможность взятия образца шерсти из-за купирования хвоста или утраты его вследствие механической травмы;

- сильного загрязнения шерсти кисти хвоста, что не позволяет отобрать пригодный для анализа образец;

- неполный состав химических элементов (7 элементов), для которых выполнены исследования.

Наиболее близким техническим решением к заявленному при подготовке пробы шерсти к анализу является способ отмывки в моющих средах [3].

Цель нашего изобретения - разработка способа отбора и пробоподготовки шерсти крупного рогатого скота к исследованию на элементный состав.

Способ осуществляется следующим образом:

1. Отбор образца шерсти по массе не менее 2 г, согласно стандартным требованиям при методах исследования на элементный состав, обеспечивающим достижение необходимой точности [4, 6], осуществляется путем настрига его с верхней части холки животного.

2. При пробоподготовке образец волос погружается в лабораторный стакан объемом 200 мл с электрохимически активированной дезинфицирующей католитной водой с температурой от +40 до +60С° на 2-3 часа.

Техническая подготовка ЭХА воды предусматривает применение активатора типа PTV-A (ИВА-1), производимого в России (сертификат соответствия №РОССLТ.АЯ 46.А14995). Водопроводная вода с исходными характеристиками поступает в активатор и на выходе после установленного времени католитная (щелочная) принимает требуемое значение (3,4).

3. Затем воду сливают, а лабораторный стакан с образцом помещают под проточную воду с большим напором и проводят отмывание волос до исчезновения видимых загрязнений, разбивая их стеклянной палочкой.

4. По истечении указанного времени воду сливают, пробу заливают 40% этиловым спиртом и вновь помещают на 60 минут в ультразвуковую ванну с рабочей частотой 35 кГц.

5. Спирт сливают, пробу заливают бидистилированной водой и снова подвергают очистке в ультразвуковой ванне в течение 60 минут.

6. Пробу высушивают в сушильном шкафу при +40С° и исследуют на макро- и микроэлементный состав.

В связи с тем, что в настоящее время не существует унифицированной методики взятия образцов шерсти для изучения элементного статуса по основным химическим элементам, нами проведены исследования шерсти из различных частей тела животного:

- затылочная часть головы;

- корень хвоста с верхней стороны;

- середина последнего ребра;

- передняя часть грудной области;

- верхняя часть холки (впервые в практике взятия проб);

- кисть хвоста.

Данные места взятия проб оценивались по диапазону варьирования элементов, отклонению от средней по всем элементам, удобству и возможности отбора, загрязненности.

При оценке удобства отбора образцов наиболее доступными являются места у корня хвоста с верхней стороны и верхней части холки, так как при фиксации животного в станках данные места всегда доступны.

Для оценки загрязненности шерсти произведен отбор образцов с участка 5×5 см у 120 голов крупного рогатого скота герефордекой и казахской белоголовой пород. После этого нами определялась степень загрязнения пробы путем вычисления разницы массы шерсти до и после пробоподготовки (табл. 1).

Данные табл. 1 показывают, что наиболее «чистой» является шерсть с верхней части холки и передней части грудной области, самой загрязненной частью является кисть хвоста.

Для определения содержания макро- и микроэлементов в биосубстрате мытую шерсть от физиологически здоровых животных в количестве 120 образцов (различные половозрастные группы и время года) исследовали в лаборатории АНО «Центра биотической медицины» г. Москва (регистрационный номер в государственном реестре - Росс.RU 0001. 513118 от 29 мая 2003; Registration Certificate of ISO 9001: 2000, Number 4017-5.04.06) по 25 химическим элементам. Точность определяемых параметров достигалась путем использования методов атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии (АЭС-ИСП и МС-ИСП) на оборудовании Elan 9000 (Perkin Elmer, США) и Optima 2000 V (Perkin Elmer, США), обеспечивающих достижение точности 109-1012 по 25 химическим элементам (Са, Cu, Fe, Li, Mg, Mn, Ni, As, Cr, K, Na, P, Zn, I, V, Co, Se, Al, B, Cd, Pb, Hg, Sn, Si, Sr) [5].

Масс-спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой (ИСП-МС) является современным методом определения малых (мкг/кг) и сверхмалых (нг/кг и менее) концентраций элементов, а также их изотопного состава в различных объектах. Метод позволяет проводить определение практически всех элементов периодической системы в одной пробе за время около минуты. Он основан на использовании индуктивно-связанной плазмы в качестве источника ионов и масс-спектрометра для их разделения и детектирования [4].

Результаты анализа шерсти на содержание макро- и микроэлементов представлены в табл. 2.

При исследовании учитывалось отклонение содержания изучаемых элементов отдельно взятой пробы шерсти от среднего показателя всех зон его отбора, для выявления места отбора, которое наиболее соответствует общему элементному статусу всего организма животного.

Анализ полученных в исследовании данных показал, что по 22 (K, Са, Mg, Na, Р, Zn, Fe, Cu, Mn, I, Se, Cr, Co, Si, B, Li, V, Al, Sr, Pb, Sn, Hg) из 25 исследованных макро- и микроэлементов, влияющих на биологические процессы обмена веществ, наиболее близкими к средней величине, при недостоверной разнице, характеризовались пробы шерсти с верхней части холки, следовательно, ее можно использовать в качестве маркера для взятия и определения элементного статуса животного (табл. 2, 3).

Таким образом, на основании изучения элементного статуса средних показателей проб шерсти, по удобству и возможности отбора, загрязненности шерсти наиболее приемлемым для анализа является предлагаемое место отбора образца с верхней части холки.

При отборе образцов шерсти в производственных условиях существует проблема с выбором оптимальной площади участка настрига шерсти, с которого гарантированно дает необходимую для исследований навеску образца. Проблема обусловлена еще и тем, что чрезмерно большой по площади участок, выстриженный на холке животного, негативным образом отражается на защитной и терморегуляционной функции, которую выполняет шерстяной покров животного.

С целью определения площади участка для отбора образца нами проведено исследование на крупном рогатом скоте (n=120).

Источники информации

1. Патент на изобретение KZ №23604 Способ отбора племенных каракульских овец серой окраски / Бейбеков Е., Омбаев A.M., Ескара М.А., Алибаев П., Саденов А., Алибаев П., Саденов А., Абуов Г., Бойбеков М.Е.: Опубликовано 15.10.2010 г.

2. Патент на изобретение РФ №2477483 Способ диагностики хронических микроэлементозов сельскохозяйственных копытных животных / С.Ф. Тютиков, В.В. Ермаков: опубликовано 10.03.2013.

3. Патент на изобретение РФ №2451926. Способ подготовки проб волос крупного рогатого скота к исследованию на макро- и микроэлементный состав / Ю.К. Коваленок: опубликовано 27.05.2012 - прототип.

4. МУК 4.1.1483-03 Определение содержания химических элементов в диагностируемых биосубстратах, препаратах и биологически активных добавках методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной аргоновой плазмой.

5. Http://www.fgu-radiovetlab.ru/preimuschestva-metoda-atomno-emissionnoy-spektrometrii-s-induktivno-svyazannoy-plazmoy.html

6. Мирошников С.А. и др. Закономерность формирования элементного состава биосубстратов человека как основа технологии и коррекции элементозов. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН, №4, 2014. - С. 1-11.

Похожие патенты RU2607751C2

название год авторы номер документа
СПОСОБ ОТБОРА И ПРОБОПОДГОТОВКИ ПРОБ ШЕРСТИ ГРЫЗУНОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОЭЛЕМЕНТНОГО СОСТАВА 2020
  • Степанова Марина Вячеславовна
  • Остапенко Владимир Алексеевич
  • Тимаков Александр Викторович
  • Тимакова Татьяна Константиновна
RU2750749C1
СПОСОБ ОТБОРА ПРОБ ВОЛОС ЛОШАДЕЙ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ НА ЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ 2017
  • Калашников Валерий Васильевич
  • Зайцев Александр Михайлович
  • Атрощенко Михаил Михайлович
  • Калинкова Лилия Владимировна
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Завьялов Олег Александрович
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Рогачев Борис Георгиевич
RU2675584C1
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЭЛЕМЕНТОЗОВ МОЛОДНЯКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПО ЭЛЕМЕНТНОМУ СОСТАВУ ШЕРСТИ 2015
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Харламов Анатолий Васильевич
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Завьялов Олег Александрович
  • Дускаев Галимжан Калиханович
  • Рогачев Борис Георгиевич
  • Курилкина Марина Яковлевна
RU2622719C2
СПОСОБ ОТБОРА БЫЧКОВ МЯСНЫХ ПОРОД С ВЫСОКИМ ПОТЕНЦИАЛОМ ВЕСОВОГО РОСТА ПО ЭЛЕМЕНТНОМУ СОСТАВУ ШЕРСТИ 2019
  • Харламов Анатолий Васильевич
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Завьялов Олег Александрович
  • Дускаев Галимжан Калиханович
  • Рогачев Борис Георгиевич
RU2722045C1
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ СПОСОБНОСТИ КОРОВ МЯСНЫХ ПОРОД 2018
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Харламов Анатолий Васильевич
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Завьялов Олег Александрович
  • Рогачев Борис Георгиевич
  • Дускаев Галимжан Калиханович
RU2689678C1
СПОСОБ ОТБОРА ОБРАЗЦОВ ШЕРСТИ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭЛЕМЕНТНОГО СТАТУСА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В РАЗЛИЧНЫЕ ВРЕМЕННЫЕ ПЕРИОДЫ 2015
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Харламов Анатолий Васильевич
  • Завьялов Олег Александрович
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Рогачев Борис Георгиевич
  • Дускаев Галимжан Калиханович
  • Курилкина Марина Яковлевна
RU2611755C1
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКИХ МИКРОЭЛЕМЕНТОЗОВ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ КОПЫТНЫХ ЖИВОТНЫХ 2012
  • Тютиков Сергей Федорович
  • Ермаков Вадим Викторович
RU2477483C1
Способ прогнозирования пуховой продуктивности коз оренбургской породы по элементному составу шерсти 2021
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Завьялов Олег Александрович
  • Харламов Анатолий Васильевич
  • Петров Николай Иванович
  • Дускаев Галимжан Калиханович
  • Рахматуллин Шамиль Гафиуллович
RU2779832C1
СПОСОБ ОТБОРА БЫЧКОВ С ВЫСОКИМ ПОТЕНЦИАЛОМ РОСТА ПО ЭЛЕМЕНТНОМУ СОСТАВУ ШЕРСТИ 2017
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Завьялов Олег Александрович
  • Харламов Анатолий Васильевич
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Рогачев Борис Георгиевич
  • Дускаев Галимжан Калиханович
  • Маркова Ирина Викторовна
  • Ушаков Александр Сергеевич
RU2668335C1
СПОСОБ ОТБОРА БЫЧКОВ С ВЫСОКОЙ ИНТЕНСИВНОСТЬЮ РОСТА ПО УРОВНЮ ТОКСИЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ В ШЕРСТИ 2020
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Харламов Анатолий Васильевич
  • Фролов Алексей Николаевич
  • Завьялов Олег Александрович
  • Дускаев Галимжан Калиханович
  • Рахматуллин Шамиль Гафиуллович
RU2747469C1

Реферат патента 2017 года СПОСОБ ОТБОРА И ПОДГОТОВКИ ПРОБ ШЕРСТИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ НА ЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано при отборе проб биоматериала для получения достоверных данных по содержанию макро- и микроэлементов шерсти крупного рогатого скота. Способ отбора и подготовки проб шерсти включает настриг требуемого образца по массе не менее 2 г с верхней части холки животного с участка кожи размером 5×5 см. Полученную пробу шерсти замачивают в электрохимически дезинфицирующей активированной католитной воде с температурой от +40 до +60°С в течение 2-3 часов. Далее промывают проточной водой с большим напором до исчезновения видимых загрязнений. Очищают в ультразвуковых ваннах с рабочей частотой колебания 35 кГц, используя последовательно моющие среды: 40%-ный этиловый спирт, бидистиллированную воду по 60 мин в каждой среде. По окончании пробу высушивают в сушильном шкафу при +40°С. Обеспечивается удобство взятия образца шерсти с менее загрязненного участка кожи. 1 з.п. ф-лы, 3 табл.

Формула изобретения RU 2 607 751 C2

1. Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав, включающий настриг требуемого образца по массе не менее 2 г с верхней части холки животного с участка кожи размером 5×5 см, подготовку проб шерсти, включающую ее замачивание в электрохимически дезинфицирующей активированной католитной воде с температурой от +40 до +60°С в течение 2-3 часов с последующим промыванием проточной водой с большим напором до исчезновения видимых загрязнений и последующую очистку в ультразвуковых ваннах с рабочей частотой колебания 35 кГц, используя последовательно моющие среды: 40%-ный этиловый спирт, бидистиллированную воду по 60 мин в каждой среде, по окончании пробу высушивают в сушильном шкафу при +40°С.

2. Cпособ по п. 1, отличающийся тем, что точность определяемых параметров образца шерсти по элементному статусу животного достигается путем использования методов атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии, обеспечивающих достижение точности 109-1012 по 25 химическим элементам.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2017 года RU2607751C2

СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ПРОБ ВОЛОС КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА К ИССЛЕДОВАНИЮ НА МАКРО- И МИКРОЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ 2010
  • Ковалёнок Юрий Казимирович
  • Курдеко Александр Павлович
  • Богомольцев Александр Валерьевич
  • Совейко Евгения Игоревна
RU2451926C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ ЭЛЕМЕНТНОГО СТАТУСА ПТИЦЫ ПО ПЕРУ 2011
  • Нестеров Дмитрий Васильевич
  • Мирошников Сергей Александрович
  • Сипайлова Ольга Юрьевна
  • Лебедев Святослав Валерьевич
  • Бирюков Александр Александрович
  • Русакова Елена Анатольевна
  • Суханова Ольга Николаевна
  • Кван Ольга Вилориевна
  • Рахматуллин Шамиль Гафиуллович
RU2478956C1
KZ 23604 B, 15.12.2010
RU 2011139264 A, 10.04.2013
СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ГРУПП РИСКА ЛИЦ, СКЛОННЫХ К АГРЕССИВНЫМ ВИДАМ ПОВЕДЕНИЯ 2013
  • Черемушникова Ирина Ивановна
  • Нотова Светлана Викторовна
  • Давыдова Наталья Олеговна
  • Мирошников Сергей Владимирович
RU2521336C1
US 6008897 А, 28.12.1999.

RU 2 607 751 C2

Авторы

Мирошников Сергей Александрович

Харламов Анатолий Васильевич

Фролов Алексей Николаевич

Завьялов Олег Александрович

Мирошников Александр Михайлович

Дускаев Галимжан Калиханович

Даты

2017-01-10Публикация

2014-11-11Подача