Способ лечения и профилактики колибактериоза у цыплят-бройлеров Российский патент 2017 года по МПК A61K36/02 C12N1/12 A61P31/04 

Изобретение относится к ветеринарии и птицеводству, а именно к способу лечения и профилактики колибактериоза у цыплят-бройлеров.

Известен способ профилактики колибактериоза цыплят, заключающийся в пероральном введении из расчета 0,5 см³ на голову вакцинного препарата на основе антигена из штамма Е. coli «Б-5», где в качестве вакцинного препарата используют препарат с содержанием 1,0×10⁵-3×10⁵ микробных клеток штамма Е. coli «Б-5» в 1 см³ физиологического раствора, который вводят методом выпаивания при соотношении препарата к воде 1:15-25, при этом используют штамм Е. coli «Б-5», выращенный при 42°С (RU №2498817 - аналог).

Недостатком данного способа является то, что препарат не может обладать комплексным действием: пробиотическим, антимикробным, иммуномодулирующим и располагать целлюлозолитической активностью, что не может говорить о высокой эффективности предлагаемого препарата.

Известен способ скармливания суспензии хлореллы птицам (Суспензия хлореллы в рационе сельскохозяйственных животных. / Н.И. Богданов. - 2-е издание, исправленное и дополненное. - Волгоград, 2007 г. - 48 с.), согласно которому суспензию хлореллы в дозе 4-50 мл выпаивают сельскохозяйственной птице ежедневно в течение 30 суток.

Изобретение способствует повышению среднесуточных привесов на 50 г, сохранность составляет 96-97%, однако происходит одновременное снижение показателя конверсии корма.

Наиболее близким техническим решением к заявленному является технологический режим, в котором осуществляют выпаивание цыплятам-бройлерам суспензии хлореллы в качестве кормовой добавки (Интенсификация биотехнологии культивирования хлореллы с использованием наночастиц железа и оценка эффективности применения ее в бройлерном производстве и перепеловодстве / Мачнева Н.Л. автореферат дис.… кандидата биологических наук: 03.01.06 / Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия. Ульяновск, 2013. - 20 с.), согласно которому культивирование хлореллы со стартовой концентрацией хлореллы (32,4…34,3)×10⁴ клеток/мл проводили в культиваторе КВМ-05 в течение 48-ми часов в оптимальной питательной среде, с добавлением к ней наночастиц железа в концентрациях (0,00625…0,1 г/л) при температуре 28…30°С и круглосуточной освещенности 4700 люкс, проводили согласно методике (Ю.С. Григорьев, 2007), затем для проведения научных опытов на перепелах (III и IV группы) и цыплятах-бройлерах суспензию хлореллы выращивали в прозрачном стеклянном ферментере объемом 100 литров в культуральной среде Н.И. Богданова при перемешивании постоянным барботированием нестерильным воздухом при помощи воздушного компрессора производительностью 13…15 л/мин, далее через пять дней культивирования суспензия достигала оптимальной плотности, из ферментера отбирали необходимое количество культуры и замещали его объем свежеприготовленной культуральной средой. В ходе исследований было проведено 2 научных опыта и производственное испытание. Исследования проводились на перепелах и цыплятах-бройлерах.

Известная технология способствует повышению потенциала продуктивности цыплят-бройлеров, что подтверждается увеличением сохранности поголовья на фоне снижения потребления корма на 7,0%; увеличением коэффициента использования кальция и фосфора на 18,4 и 12,8%, а также живой массы на 5,6%, выхода готовой продукции на 0,6%. Однако недостатком данного способа является использование суспензии хлореллы, обеспечивающей повышение только зоотехнических показателей при выращивании птицы, при этом не наблюдается максимального терапевтического эффекта, которым обладает используемый штамм.

Новизна заявляемого способа лечения и профилактики колибактериоза у цыплят-бройлеров состоит в снижении титра условно-патогенной микрофлоры и повышении титра аборигенных микроорганизмов желудочно-кишечного тракта птицы, при одновременном повышении сохранности и прироста живой массы цыплят-бройлеров в результате использования концентрата водоросли хлореллы.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении научно-технической и патентной литературы по данной и смежной областям науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».

Эти отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявляемых технических решений критерию «новизна».

Предлагаемый способ осуществим с планктонным штаммом Chlorella vulgaris ИФРС-111, у которого ярко выражены бактерицидные свойства. Высокие бактерицидные свойства штамма сдерживают микрофлору от вспышки и не допускают количественного и качественного изменения бактериального фона даже при загущении клеток в десятки раз относительно исходной плотности. Клетки хлореллы остаются в таком же живом состоянии, как и в товарной суспензии. Антибиотические вещества, продуцируемые клетками хлореллы, не подавляют полезную микрофлору кишечника животных, а только патогенную, поэтому они не наносят никакого вреда организму в отличие от всех известных применяемых антибиотиков в животноводстве. Наличие высоких бактерицидных качеств у штамма хлореллы обеспечивает значительные сроки хранения получаемых продуктов при соблюдении обычных условий и не требует их консервации.

Концентрат хлореллы - это биологически натуральный продукт, полученный методом глубинного культивирования водоросли Chlorella vulgaris ИФР № С-111 в жидкой питательной среде с последующим отделением культуральной жидкости от биомассы клеток путем центрифугирования. Представляет собой жидкость темно-зеленого цвета с плотностью клеток не менее 500 млн/мл, что зависит от степени концентрирования.

Способ лечения и профилактики колибактериоза у цыплят-бройлеров осуществляют следующим образом.

Выращивание накопительной культуры штамма Chlorella vulgaris ИФР № С-111 в объеме 150 мл производилось в культиваторе КВ-05 в течение 24 часов с соблюдением норм культивирования. Для использования на цыплятах-бройлерах хлореллу выращивали в прозрачном стеклянном ферментере в питательной среде следующего состава (на 1 л водопроводной воды (SU 1751981, C12N 1/12, 10.02.1997)): аммиачная селитра - 1,0 г, суперфосфат 10%-ный раствор - 1,0 мл, хлористое железо 1%-ный раствор - 0,15 мл, азотнокислый кобальт - 1,0 мг, сернокислая медь - 1,0 мг; бактериальная суспензия - 40 мл. Представленные компоненты питательной среды в указанном соотношении оказывают благоприятные условия для нормального развития микрофлоры кишечника птицы. Объем ферментера составлял 100 л, температура 25-27°С. Круглосуточная освещенность составляла 900-1000 лк. В процессе культивирования суспензию перемешивали постоянным барботированием нестерильным воздухом при помощи воздушного компрессора, используемого для аквариумов. После достижения максимума титра клеток (40-50 млн/мл) суспензия подвергалась концентрированию путем центрифугирования в течение 10 мин, обороты ротора 3000 в минуту. Полученный концентрат микроводоросли хранили в закрытых емкостях при температуре 8-10°С и расходовали по мере необходимости.

Используемый биопродукт дают путем вольного спаивания цыплятам-бройлерам, больным колибактериозом, в течение 7-ми суток.

Для оценки оптимальной дозы использования концентрата хлореллы проведен научный эксперимент. Срок выпаивания семь суток. В качестве контроля использовали две группы: 1-я - не получала добавок и иных препаратов; 2-я - цыплята-бройлеры выпаивались суспензией хлореллы (титр клеток 10 млн/мл) путем вольного спаивания вместо воды. Также было сформировано 4 опытных группы птиц по 20 голов в каждой. Схема опыта представлена в таблице 1.

Пример 1. Данные о влиянии различных доз концентрата хлореллы на микробиоценоз кишечника цыплят-бройлеров представлены в таблице 2.

Из таблицы 2 видно, что использование концентрата хлореллы положительно повлияло на динамику микрофлоры химуса цыплят-бройлеров, больных колибактериозом, что особенно выражено в группе, где применяли его в дозе 1,5 мл на голову. Так, использование концентрата микроводоросли в течение семи суток в 3-й опытной группе способствовало не только повышению лакто- и бифидобактерий на 6,4 и 7,7%, но и снижению патогенной флоры, в частности, титр эшерихий снизился на 13,7%, сальмонеллы при посеве отсутствовали, а энтерококки снизились на 15,5%.

В группе, где применяли концентрат хлореллы в дозе 2,0 мл, изучаемые показатели были на уровне 3-й опытной группы, что экономически не целесообразно использовать. Применение концентрата хлореллы в 1-й и 2-й опытных группах оказало незначительные изменения, что наблюдалось также во 2-й контрольной группе, где птица получала с рационом суспензию хлореллы.

Так как было выявлено, что оптимальной дозой использования концентрата хлореллы является 1,5 мл на голову, провели научный эксперимент по выявлению срока ее выпаивания согласно таблице 3.

Пример 2. Данные о влиянии сроков выпаивания концентрата хлореллы на микробиоценоз кишечника цыплят-бройлеров представлены в таблице 3.

Данные таблицы 4 показывают, что в 1-й контрольной группе, где птица не получала биодобавок, с течением времени количество полезной микрофлоры снижалось, а условно-патогенной увеличивалось. Во 2-й контрольной группе, где птица ежедневно получала суспензию хлореллы, независимо от срока выпаивания, количество лакто- и бифидобактерий увеличилось незначительно, аналогичная тенденция наблюдалась и при анализе условно-патогенной культуры, титр которых уменьшился незначительно.

При выпаивании концентрата хлореллы в течение 3-х суток выявлено, что количество бифидо- и лактобактерий увеличилось по сравнению с исходным титром на 2,0 и 1,5% соответственно. Количество эшерихий, сальмонелл и энтерококков снизилось на 3,7; 19,5 и 14,7%. При выпойке в течение 7-ми суток количество бифидо- и лактобактерий увеличилось по сравнению с исходным титром на 12,9 и 13,2%, а эшерихий и энтерококков снизилось на 23,3 и 50,8%. Сальмонеллы отсутствовали. При даче концентрата хлореллы в течение 10-ти суток количество бифидо- и лактобактерий увеличилось по сравнению с исходным титром на 12,3 и 14,9%. При высеве химуса отсутствовал рост сальмонелл, а титр эшерихий и энтерококков снизился на 24,1 и 51,1%. При выпаивании концентратом хлореллы в течение 14-ти суток количество бифидо- и лактобактерий в 1-й опытной группе увеличилось на 13,1 и 8,6%. При высеве химуса отсутствовал рост сальмонелл, а титр эшерихий и энтерококков снизился на 22,0 и 51,2%.

В целом, учитывая то, что существенной разницы между выпаиванием концентрата в течение 7-ми, 10-ти и 14-ти суток не наблюдалось, наиболее оптимальным сроком является дача концентрата цыплятам-бройлерам, больным колибактериозом, в течение семи дней.

Пример 3. Влияние концентрата хлореллы (дозировка 1,5 мл на голову) и ее суспензии на живую массу цыплят-бройлеров, прирост, а также сохранность и поедаемость кормов в течение 7-ми суток (таблица 5).

Данные таблицы 5 показывают, что живая масса цыплят-бройлеров до эксперимента была равнозначна, при этом в конце опыта она значительно различалась. Так, в 1-й опытной группе, которая получала концентрат хлореллы в дозировке 1,5 мл на голову, живая масса составила 691,3 г, что выше по сравнению с контрольной на 4,1%, в то время как во 2-й контрольной группе живая масса составила 667,7 г, что выше, чем в контрольной, на 0,5%. В целом прирост массы цыплят-бройлеров в 1-й контрольной группе составил 212,1 г, в группе, получавшей суспензию хлореллы, - 216,0 г, что выше, чем в контроле, на 1,8%, а в группе, где птица получала концентрат хлореллы, - 242,0 г, что выше, чем в 1-й контрольной, на 14,1%.

При изучении жизнеспособности птицепоголовья выявлено, что в 1-й контрольной группе за период наблюдений пало 8 цыплят-бройлеров, что составило 40,0% от начального поголовья, а сохранность была соответственно 60,0%. Во 2-й контрольной группе, где птица получала суспензию хлореллы, пало 4-е головы, при этом сохранность составила 80,0%. Наилучшие результаты регистрировались в 1-й опытной группе, где птица получала концентрат хлореллы, в которой сохранность цыплят-бройлеров за период наблюдений составила 100,0%.

Результаты учета потребления цыплятами-бройлерами комбикормов показали, что за период исследований в 1-й контрольной группе было израсходовано наименьшее количество кормов и составило 453,2 г, в то время как во 2-й контрольной и 1-й опытной группах - 463,6 и 481,2 г соответственно. Однако при расчете затрат кормов на 1 кг прироста выявлено, что во 2-й контрольной и 1-й опытной группах они были ниже и составили 2,0 и 1,9 кг, что на 4,7 и 9,5% ниже, чем в 1-й контрольной группе, где птица не получала биопрепаратов.

Таким образом, результаты испытаний показали, что использование концентрата хлореллы согласно изобретению оказывает эффективное лечебное действие при лечении колибактериоза у цыплят-бройлеров путем снижения титра условно-патогенной микрофлоры и повышения полезной микрофлоры в желудочно-кишечном тракте цыплят-бройлеров, больных колибактериозом, с одновременным повышением сохранности и прироста живой массы птицы.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для лечения и профилактики колибактериоза у цыплят-бройлеров. Способ включает выращивание накопительной культуры штамма Chlorella vulgaris ИФР №С-111 в течение 24 часов в питательной среде с помощью культиватора при температуре окружающей среды 25-27°С, круглосуточном освещении 900-1000 люкс до достижения максимума титра клеток 40-50 млн/мл. Питательная среда включает на 1 л водопроводной воды 1 г аммиачной селитры; 1 г 10%-ного суперфосфата; 0,15 мл 1%-ного хлористого железа; 1 мг азотнокислого кобальта; 1 мг сернокислой меди; 40 мл бактериальной суспензии. Дальнейшее культивирование хлореллы проводят в прозрачном стеклянном ферментере объемом 100 л с перемешиванием культуры постоянным барботированием нестерильным воздухом при помощи воздушного компрессора до достижения максимума титра клеток. Затем полученную суспензию концентрируют путем центрифугирования в течение 10 минут с оборотом ротора 3000 в минуту. Затем полученный концентрат хлореллы вводят в рацион цыплятам-бройлерам в течение не более 7 суток в дозе 1,5 мл на голову. Заявленный способ позволяет снизить титр условно-патогенной микрофлоры и повысить титр аборигенных микроорганизмов желудочно-кишечного тракта птицы, повысить сохранность и прирост живой массы цыплят-бройлеров. 5 табл., 3 пр.

Способ лечения и профилактики колибактериоза у цыплят-бройлеров, включающий выращивание накопительной культуры водоросли штамма Chlorella vulgaris ИФР №С-111 в питательной среде с помощью культиватора, дальнейшее культивирование хлореллы в прозрачном стеклянном ферментере объемом 100 л с перемешиванием культуры постоянным барботированием нестерильным воздухом при помощи воздушного компрессора до достижения максимума титра клеток, дальнейшее выпаивание хлореллы цыплятам-бройлерам, отличающийся тем, что выращивание накопительной культуры штамма Chlorella vulgaris ИФР №С-111 осуществляют в течение 24 часов, далее хлореллу выращивают в питательной среде, включающей на 1 л водопроводной воды 1 г аммиачной селитры; 1 г 10%-ного суперфосфата; 0,15 мл 1%-ного хлористого железа; 1 мг азотнокислого кобальта; 1 мг сернокислой меди; 40 мл бактериальной суспензии, при температуре окружающей среды 25-27°С, круглосуточном освещении 900-1000 люкс до достижения максимума титра клеток 40-50 млн/мл, затем полученную суспензию концентрируют путем центрифугирования в течение 10 минут с оборотом ротора 3000 в минуту, затем полученный концентрат хлореллы вводят в рацион цыплятам-бройлерам в течение не более 7 суток в дозе 1,5 мл на голову.