СРЕДСТВО ДЛЯ МЕСТНОГО ПРИМЕНЕНИЯ В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПОЛОСТИ РТА Российский патент 2018 года по МПК A61K31/191 A61K35/644 A61P1/02 

Известны способы извлечения комплекса активных веществ из продуктов пчеловодства методом обработки водными и спиртовыми растворами (патенты RU 2303988, 2007; RU 93025550, 1995; RU 2182485, 2002). Однако данные способы получения предусматривают термическую обработку, приводящую к разрушению и изменению свойств основных компонентов; при использовании в качестве органического растворителя спирта этилового возникают ограничения в применении полученного экстракта: он не может использоваться на слизистых оболочках ротовой полости при лечении лиц, чувствительных к алкоголю, или при лечении детей.

Аналогами представленного изобретения являются прополисная мазь на оливковом масле «Олеум прополис» (Румыния), мазь «Пропоцеум» (Россия) с 10%-ным экстрактом прополиса на водно-эмульсионной основе; прополисное масло №1 (Россия) - смесь из 2 частей прополиса и 10 частей оливкового масла; прополисное масло №2 (Россия) - экстракт прополиса в несоленом сливочном масле; масляный раствор прополиса «Прополенгиант» (Румыния), применяемый как противовоспалительное и обезболивающее средство при заболеваниях верхних дыхательных путей. Известен также "Способ получения средства для лечения болезней пародонта" (патент RU 2092166, 1997), «Способ получения масла прополиса» (патент RU 2143914, 2000), сущность данных способов получения продукта заключается в экстракции прополиса при нагревании подсолнечным маслом при температуре 80°C в течение 2 ч (аналог 1) и при температуре 100-105°C в течение 50-70 минут двукратно (аналог 2).

Наиболее близким прототипом заявленного средства может быть рассмотрено средство для лечения болезней пародонта (патент RU 2092166, опубл. 10.10.1977). Сущность способа получения данного средства заключается в двукратном экстрагировании прополиса маслом растительным при температуре 100-105°C в течение 50-70 мин, смешивании объединенных вытяжек с расплавлением воском пчелиным в соотношении 25-30:70:75 мас. % в течение 45-60 мин при нагревании.

Приведенные выше аналоги предлагаемому изобретению в процессе получения подвергаются длительному термическому воздействию, что приводит к снижению качества получаемого продукта, так как нагретый прополис, соприкасаясь с открытым воздухом, окисляется и теряет часть своих активных веществ, в это время из него интенсивно улетучиваются эфирные и бальзамические вещества.

Для повышения лечебных и целебных свойств экстракта прополиса необходимо проводить экстракцию прополиса при достаточно щадящих оптимальных температурах и технологических режимах с тем, чтобы максимально сохранить все активные компоненты и свойства прополиса в конечном продукте.

Аналогом изобретения является гель "Витадент" (патент RU 2203647, 2003), содержащий кислоту янтарную, необходимую для восстановления пораженной слизистой оболочки полости рта и лечении заболеваний пародонта. Однако данное средство не обладает ярко выраженной антиоксидантной активностью.

Известно средство в форме суппозиториев (патент RU 2014142511, 2014; RU 2013156579/15, 2013), содержащее кислоту янтарную в сочетании с экстрактом прополиса. Средство оказывает неселективное антимикробное действие в отношении грамположительных, грамотрицательных бактерий и дрожжеподобных грибов; проявляет ярко выраженный мембранопротекторный и антиоксидантный эффект [Симонян Е.В. соавт. // Южно-Уральский медицинский журнал / Научно-практический рецензируемый журнал, №1, 2014].

Предлагаемое средство обладает высокими антиоксидантными свойствами за счет активных лекарственных компонентов. В состав средства не входят компоненты, запрещенные к применению в средствах, предназначенных для контакта со слизистыми. Активные компоненты данной лекарственной формы применяются в качестве лекарственных средств или входят в состав различных лекарственных форм, однако композиция, имеющая заявленное сочетание компонентов и заявляемую форму, ранее не была известна.

В современной медицинской практике широко применяются извлечения, содержащие биологически активные вещества (БАВ) липофильной природы, сбалансированные по концентрации и действующей доле отдельных БАВ, как правило, обеспечивающих синергизм действия или поддерживающих антиоксиданты в восстановленной форме. При их производстве используются как растительные (льняное, подсолнечное, кукурузное) масла (патенты RU 2092166, 1997; RU 2143914, 2000), так и твердые жиры. Государственный регистр лекарственных средств России в числе препаратов, разрешенных к применению в стране, содержит масляный экстракт белены, масляный экстракт облепихи, шиповника, а также концентрат облепихи.

Известно, что с раздроблением лекарственного вещества увеличивается его свободная поверхность, приходящая в соприкосновение с тканями и жидкостями организма; чем больше поверхность вещества, тем больше возможность взаимодействия между ними. Таким образом, при применении лекарственного средств в виде суспензии в значительной степени ускоряется его терапевтическое действие.

Более 25% всех биологически активных компонентов прополиса приходится на флавоноиды, механизм действия которых заключается во влиянии на транспорт АТФазы, фосфодиэстеразы циклических нуклеотидов, в ингибировании гиалуронидазы, фосфолипазы А2, циклооксигеназы, гипоксигеназы, гистидиндекарбоксигеназы и др. Поэтому флаваноиды оказывают многостороннее фармакологическое действие, влияют на иммунные, секреторные, выделительные процессы, обладают капилляроукрепляющей, противовоспалительной, противовирусной, антиагрегативной и антиоксидантной активностью [Афанасьев И.Б., 1988; Костюк В.А., 2007]. В этом отношении масляные экстракты прополиса являются перспективными источниками природных антиоксидантов.

Янтарная кислота (ГОСТ 6341-75) является регулятором энергетического обмена, процесс окисления которой в цикле Кребса позволяет сохранить энергосинтезирующую функцию митохондрий в условиях гипоксии. Действие янтарной кислоты направлено на коррекцию энергетического и пластического обмена, защиту клеточных структур от перекисного и свободно-радикального окисления. Обладает антиоксидантным, цитопротекторным, антитоксическим и иммуномодулирующим действием. Хорошо переносится, нетоксична, не имеет побочных эффектов.

Данное изобретение направлено на получение средства, содержащего масляный экстракт прополиса и кислоту янтарную. Указанная задача решается тем, что в способе получения, предусматривающем замораживание прополиса при температуре -10°C, измельчение прополиса, экстракцию его растительным маслом и отделение масляного экстракта от твердой фазы, измельчение кислоты янтарной и введение ее в масляный экстракт; в качестве экстрагента используют масло подсолнечное рафинированное (ГОСТ 14083-68), а экстракцию проводят при комнатной температуре в течение 5 суток при массовом соотношении прополиса к экстрагенту 1:9, и введение кислоты янтарной в готовый масляный экстракт прополиса в массовом соотношении 0,5:99,5.

Предлагаемый способ отличается от существующих тем, что помимо антиоксидантов природного происхождения в лекарственное средство вводится кислота янтарная, обладающая ярко выраженными антиоксидантными свойствами, т.о. потенцируется их действие.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Прополис-сырец пчелиный охлаждают в морозильнике до -10°C в течение 5 часов, при этой температуре прополис становится хрупким и в центрифуге измельчают его до очень мелкого порошкообразного состояния до размеров фракций 0,05-0,1 мм. К 100 г измельченного прополиса добавляют 900 г масла подсолнечного рафинированного и проводят экстракцию в течение 5 суток при комнатной температуре при плотно закрытой крышке, при помешивании всей массы (чтобы не испарялись эфирные и бальзамические вещества). Затем отделяют готовую массу от твердой фазы путем фильтрования через два слоя марли или через мелкое из нержавеющей стали ситечко. Масляный экстракт после завершения процесса экстрагирования выдерживают в течение 24 часов при температуре 10°C для осаждения балластных веществ, отстоявшуюся настойку сливают с осадка и фильтруют. Кислоту янтарную измельчают в ступке с помощью песта, и вводят 0,5 г кислоты янтарной в 99,5 г масляного экстракта прополиса по типу суспензии. Разливают в плотно закрывающуюся посуду, желательно, непрозрачную. Хранят полученный продукт в темном прохладном месте.

Полученный продукт представляет собой вязкую непрозрачную жидкость желтоватого цвета со специфическим запахом, характерным для прополиса, с горьковатым вкусом.

Для решения вышеуказанной задачи были исследованы технологические и фармакологические характеристики лекарственной формы: влияние времени экстрагирования на содержание флавоноидов в пересчете на кверцетин, определение антиоксидантной активности полученного средства.

Экстракт прополиса стандартизируют по содержанию флавоноидов (ТУ ГОСТ 28886-90), поэтому было проведено изучение флавоноидного состава средства методом хроматографии в тонком слое сорбента (метод ТСХ). Предварительно были проведены качественные реакции на флавоноиды, для этого 5 г средства помещали в мерную колбу объемом 25 мл, добавляли 10 мл спирта этилового 96%, интенсивно встряхивали в течение 10 мин, доводили тем же растворителем до метки, фильтровали. Фильтрат дает положительную цианиновую пробу (проба Cinoda), реакцию со спиртовым раствором алюминия хлорида, что свидетельствует о наличии флавоноидов.

Для определения качественного состава флавоноидов использовали метод тонкослойной хроматографии, хроматографирование проводили на пластинках «Сорбфил», сорбент - силикагель СТХ-1А, в системе растворителей (№1) хлороформ : ацетон : ледяная уксусная кислота (8:2:2); и в системе растворителей (№2) этилацетат : ледяная уксусная кислота : вода (7:3:1), объем наносимых проб составлял 1 мкл; параллельно наносили спиртовые растворы флавоноидов. Хроматограммы детектировали 2% спиртовым раствором алюминия хлорида. Было обнаружено, что в данном средстве содержится кверцетин, Rf=0,88 (система №1) и Rf=0,93 (система №2).

Количественное определении суммы флавоноидов в пересчете на кверцетин проводили спектрофотометрическим методом со спиртовым раствором алюминия хлорида [Симонян соав., 2012]. Установлено, что максимальное содержание флавоноидов в пересчете на кверцетин достигается при экстрагирования прополиса длительностью 5 суток (120 часов).

Способность антиоксидантов нейтрализовать пероксид водорода оценивали по реакции с растворами молибдатов, с которыми перекись водорода взаимодействует с образованием иона пероксомолибдата, при этом образуется окрашенный комплекс с максимумом поглощения при 410 нм (метод М.А. Королюка). При добавлении в инкубационную систему вещества, способного нейтрализовать Н₂О₂, оптическая плотность раствора снижается пропорционально активности исследуемого вещества. Определение проводили по методике: в опытную пробирку отмеряли 2 мл свежеприготовленного 0,03% раствора перекиси водорода, 100 мкл выделенной суспензии нейтрофилов (в концентрации 5×10⁹ клеток/1 мл) и раствор исследуемых веществ. В пробирку сравнения вместо раствора лекарственного средства прибавляли в том же объеме воду очищенную. В контрольный раствор отмеряли 2,1 мл воды очищенной и 100 мкл суспензии нейтрофилов. В качестве холостой пробы использовали раствор, состоящий из 2 мл 0,03% раствора пероксида водорода и 0,2 мл воды очищенной. Подготовленные таким образом растворы инкубировали при 37°C в течение 10 минут, а затем в каждую пробирку добавляли по 1 мл 4% раствора аммония молибдата. Интенсивность окраски измеряли при длине волны 410 нм против контрольной пробы.

Величину противоперекисной активности рассчитывали по формуле:

где А1 - оптическая плотность в холостом опыте;

А2 - оптическая плотность исследуемого раствора.

Вышеописанное средство обладает ярко выраженным антиоксидантным действием и может быть рекомендовано для коррекции процессов свободнорадикального окисления.

Изобретение относится к медицине, в частности к фармации, и касается средства, которое может быть использовано для коррекции процессов свободнорадикального окисления в профилактике и комплексном лечении заболеваний пародонта. Предлагаемое средство для местного применения в комплексной терапии заболеваний полости рта содержит измельченную янтарную кислоту, введенную в масляный экстракт прополиса по типу суспензии в массовом соотношении 0,5:99,5; при этом масляный экстракт прополиса приготовлен путем экстракции замороженного при температуре -10°С и измельченного до порошкообразного состояния с размером фракций 0,05-0,1 мм прополиса-сырца маслом подсолнечным рафинированным при комнатной температуре в течение 5 суток при соотношении прополиса к экстрагенту 1:9. Средство обладает ярко выраженным антиоксидантным действием, не содержит спирт и раздражающие вещества, поэтому может использоваться для нанесения на слизистые оболочки ротовой полости при лечении лиц, чувствительных к алкоголю или при лечении детей. 2 табл.

Средство для местного применения в комплексной терапии заболеваний полости рта, обладающее антиоксидантным действием, отличающееся тем, что содержит измельченную янтарную кислоту, введенную в масляный экстракт прополиса по типу суспензии в массовом соотношении 0,5:99,5; при этом масляный экстракт прополиса приготовлен путем экстракции замороженного при температуре -10°С и измельченного до порошкообразного состояния с размером фракций 0,05-0,1 мм прополиса-сырца маслом подсолнечным рафинированным при комнатной температуре в течение 5 суток при соотношении прополиса к экстрагенту 1:9.