Настоящее изобретение относится к композиции, содержащей один или более противомикробных гликолипидов и один или более стабилизаторов композиции, которые предпочтительно содержат один или более полисорбатов и/или один или более циклодекстринов, предпочтительно альфа-циклодекстринов. Настоящее изобретение также относится к способам получения композиций и их применению в продуктах питания, содержащих воду, напитках, косметических средствах, средствах по уходу по дому и косметических продуктах.
Бактерии и грибы приводит к тому, что продукты питания и напитки, косметические продукты и средства для ухода на домом, а также другие продукты портятся, что сокращает срок хранения или срок службы таких продуктов или товаров. Поэтому продукты питания и косметические продукт требует хорошей защиты от микробиологического загрязнения; и для некоторых средств по уходу за домом и медицинских продуктов желательна противомикробная эффективность. Многочисленные усилия были направлены на снижение вредного воздействия микробных загрязнителей на продукты питания и напитки, косметические средства, средства по уходу за домом и медицинские продукты.
Консерванты для продуктов питания такие как соль, сахар и уксус, используются в течение нескольких поколений и в то же время относительно безопасны в использовании, их консервирующий эффект ограничен как по продолжительности эффекта, так и по видам продуктов питания и напитков, для которых они могут быть использованы. Кроме того, на более высоких уровнях консерванты, такие как соль и уксус, могут влиять на вкус и влияние на здоровье продукта.
Обычно используемые консерванты для косметических средств и частично также в продуктах питания включают противомикробные средства, такие как соединения четвертичного аммония, спирты, хлорированные фенолы, парабены и соли парабенов, имидазолидинилмочевину, феноксиэтанол, п-гидроксибензоат, небольшие карбоновые кислоты, также как бензойная кислота, сорбиновую кислоту, салициловую кислоту, молочную кислоту, муравьиную кислоту, пропионовую кислоту или соответствующие соли. Также могут быть использованы формальдегид-высвободители и изотиазолиноны.
Однако эти вещества часто могут быть не толерантными или, например, в случае формальдегида, могут даже быть токсичными и даже канцерогенными, или они могут вызывать аллергию или непереносимость пищи. Кроме того, некоторые микроорганизмы, в частности среди дрожжей, вызывающих порчу, имеют адаптированную резистентность или толерантность к одному или более из обычно используемых консервантов.
Другим консервантом, используемым в продуктах питания и особенно напитках, является серная кислота, в то время как в мясных продуктах, например, колбасах, консервированном мясе и мясе, стабилизаторы, которые уменьшают активность воды, такие как нитриты и нитраты калия и/или натрия, часто добавляются. Также дым часто используется для консервирования мясных продуктов с нежелательным побочным эффектом образования полициклических ароматических углеводородов, которые обладают канцерогенными свойствами.
Таким образом, многие консерванты и консервирующие методы имеют нежелательные побочные эффекты, такие как токсичность, аллергенность, канцерогенность, иногда образование резистентности, и/или часто не принимаются потребителями, в то время как природная консервация является предпочтительнее консервации синтетическим или другими продуктами, имеющими негативное влияние на здоровье.
Соответственно, существует большая потребность в эффективных, относительно недорогих, нетоксичных, природно полученных консервирующих композициях, которые избегают упомянутых недостатков и способны снижать микробное загрязнение и сопутствующую порчу для широкого диапазона скоропортящихся продуктов питания, напитков, косметических средств и других потребительских товаров а также медицинских продуктов, но без существенного изменения вкуса, цвета, запаха или функции продукта.
Гликолипиды, полученные в результате культивации грибкового вида семейства Dacrymycetaceae, демонстрируют противомикробную эффективность, подходящую, чтобы действовать в качестве консервирующего и противомикробного средства. В WO 2012/167920 А1 описываются гликолипиды, обнаруженные и выделенные из штаммов Dacryopinax spathularia, и других грибковых штаммов, принадлежащих семейству Dacrymycetaceae. Эти гликолипиды проявляют сильную ингибирующую активность в отношении микроорганизмов, которые ответственны за порчу или разрушение перорально потребляемых продуктов (таких как продукты питания и напитки) или косметических композиций.
Эти гликолипиды являются очень хорошо растворимыми в воде при концентрациях даже более высоких, чем 10%, приводя к прозрачным растворам. Такие растворы стабильны и могут храниться в течение нескольких месяцев при комнатной температуре без изменений их внешнего вида, физико-химических свойств или противомикробной активности
Однако, в частности, при более высоких концентрациях в продуктах на основе воды, таких как напитки, изначально прозрачный раствор гликолипидов становится немного мутным или мутным в течение 1-2 недели. В некоторых эмульгированных мутных напитках эмульсия показывает признаки нарушения в течение 1-2 недель, и частично может наблюдаться осадок, а также отделенные жидкие фазы.
Таким образом, композиции гликолипидов в воде не всегда стабильны с течением времени при всех концентрациях, и не всегда имеется совместимость противомикробных гликолипидов с эмульсиями. Следовательно, существует потребность в улучшенных системах для получения композиции, позволяющих широкое применение противомикробных гликолипидов в продуктах на основе воды без проблем с совместимостью, как описано выше.
Задача настоящего изобретения состоит в обеспечении систем для получения композиции, которые проявляют противомикробные свойства, так что они могут применяться для консервации перорально потребляемых продуктов на основе воды, например, напитков, и которые имеют преимущества по сравнению с уровнем техники
Эта зада решается посредством объектов, изложенных в формуле изобретения.
Первым объектом настоящего изобретения является композиция, содержащая
(i) гликолипидный компонент, содержащий по меньшей мере один противомикробный гликолипид согласно общей формуле (I)
где
m равно от 3 до 5; предпочтительно 3 или 5;
n равно от 2 до 5; предпочтительно 3;
о равно 0 или 1; и
p равно от 3 до 17; предпочтительно p равно от 5 до 15; более предпочтительно 11 или 13;
при условии, что сумма m + n + o + p составляет не менее 14; и
R представляет собой карбогидратную составляющую, связанную через один из ее атомов углерода со связывающим кислородом;
или его сложный эфир, в форме открытой цепи и/или в форме лактона; и/или его физиологически приемлемая соль; и
(ii) компонент для образования композиции, содержащий по меньшей мере один стабилизатор композиции, предпочтительно один или более полисорбатов и/или один или более циклодекстринов, предпочтительно альфа-циклодекстрин;
где удельное массовое соотношение указанного компонент для образования композиции и указанного гликолипидного компонента находится в интервале от 100:1 до 1:2, на основе общей массы всех противомикробных гликолипидов согласно общей формуле (I) в композиции и на основе общей массы всех стабилизаторов композиции в композиции.
Настоящее изобретение относится к взаимодействию между противомикробными гликолипидами и компонентами для образования композиции, которые предпочтительно содержат один или более полисорбатов и/или один или более циклодекстринов, предпочтительно альфа-циклодекстрин, в качестве стабилизаторов композиции. В результате этого взаимодействия композиции (например, растворы или эмульсии) противомикробного гликолипида в применениях на основе воды неожиданно стабилизируются, и совместимость для широкого использования в применениях, таких как продукты питания, напитки, косметические средства, средства для ухода за домом и медицинские продукты, содержащие различные другие ингредиенты, улучшается, а микробиологическая ингибирующая активность сохраняется.
Чтобы лучше понять такие наблюдения и потенциальные взаимодействия со стабилизаторами композиции, смесь противомикробных гликолипидов добавляли в воду, а также выбранные прозрачные и мутные напитки, в которых несколько стабилизаторов композиции были предварительно растворены в разных концентрациях. Такие выбранные напитки ранее демонстрировали отсутствие совместимости, то есть демонстрировали повышенную мутность или нарушения их эмульсий в течение 1-2 недель после обработки смесью противомикробных гликолипидов. Однако большинство применяемых стабилизаторов композиции не оказывали никакого влияния на поведение выбранных прозрачных и мутных напитков или воды в сочетании со смесью противомикробных гликолипидов, то есть наблюдаемое увеличение мутности или нарушение эмульсий, соответственно, со временем не менялось.
Неожиданно было обнаружено, что циклодекстрины, особенно альфа-циклодекстрин, и полисорбаты значительно улучшают совместимость противомикробных гликолипидов с продуктами на основе воды. Добавление циклодекстринов и/или полисорбатов позволяет применять противомикробные гликолипиды даже в тех продуктах на основе воды, где совместимость показана ограниченной, например, из-за осадков, появления мутности или увеличения мутности в течение 2 недель после добавления противомикробных гликолипидов формулы I в выбранных прозрачных и мутных напитках.
Циклодекстрины и/или полисорбаты в сочетании с противомикробными гликолипидами предотвращают повышение мутности или образование мутности в прозрачных напитках и дополнительно предотвращают нарушение эмульсионной системы мутных напитков, тем самым гарантируя длительную совместимость в течение срока хранения продуктов на основе воды. Еще более удивительно, такие комбинации противомикробных гликолипидов и их смесей вместе с циклодекстринами и/или полисорбатами достаточно сохраняют противомикробную эффективность противомикробных гликолипидов при адекватных применяемых концентрациях. Таким образом, циклодекстрины и/или полисорбаты могут использоваться в качестве стабилизаторов композиций, позволяющих гораздо более широкое применение противомикробных гликолипидов и их смесей в продуктах на основе воды при сохранении их желаемой противомикробной эффективности.
Такие комбинации противомикробных гликолипидов и их смесей вместе с указанными стабилизаторами композиции, то есть циклодекстринами и полисорбатами, являются предпочтительными в продуктах на основе воды, которые являются стабильными прозрачными растворами или стабильными эмульсиями, соответственно, для которых необходим противомикробный агент для эффективности продукта. Такие противомикробные комбинации наиболее предпочтительны для консервации прозрачных или эмульгированных напитков против микробного разрушения.
Противомикробный гликолипид согласно общей формуле (I) (в целях настоящего изобретения также обозначается как "противомикробный гликолипид") может рассматриваться как состоящий из двух субъединиц: (а) линейная карбоновая кислота, определенная общей формулой (I) и индексами m, n, o и p, а также (b) карбогидратная составляющая R.
Предпочтительно, субъединица линейной карбоновой кислоты содержит по меньшей мере 20 атомов углерода, предпочтительно от 22 до 28 атомов углерода, более предпочтительно от 24 о 26 атомов углерода, в частности 26 атомов углерода.
Предпочтительно, карбогидратная составляющая R представляет собой трисахарид, который предпочтительно содержит одну или более ксилопиранозных составляющих и/или одну или более глюкопиранозных составляющих.
Предпочтительно, карбогидратная составляющая R представляет собой составляющую подформулы
где кольца А, В и С представляют собой моносахаридные составляющие, каждая, независимо друг от друга, с 5 или 6 кольцевыми членами, где одна или более из гидроксильных групп может быть ацилирована. Предпочтительно, кольца А и В представляют собой ксилопиранозные составляющие, и кольцо С представляет собой глюкопиранозную составляющую.
В особенно предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения, карбогидратная составляющая R имеет следующую структуру
где R3, R4, R5, R6 и R7 независимо друг от друга означают -Н или -C(=O)C1-C6-алкил; где предпочтительно по меньшей мере один из R3, R4, R5, R6 и R7 означает -C(=O)C1-C6-алкил, более предпочтительно -С(=O)C3-C6-алкил, наиболее предпочтительно -C(=O)изобутил; и/или где предпочтительно R6 и R7 означают -Н.
Противомикробный гликолипид согласно общей формуле (I) может присутствовать в форме сложного эфира т.е. может нести сложноэфирную функциональную группу -C(=O)-O-. Так же возможно, что противомикробный гликолипид согласно общей формуле (I) несет более чем одну сложноэфирную функциональную группу, например, 2 или 3 сложноэфирных функциональных групп.
Сложный эфир может представлять собой лактон, внутримолекулярно образованный между концевой группой карбоновой кислоты субъединицы линейной карбоновой кислоты и любой из гидроксильных групп субъединицы линейной карбоновой кислоты или субъединицы карбогидратной составляющей R.
Альтернативно или дополнительно, любая из гидроксильных групп субъединицы линейной карбоновой кислоты или субъединицы карбогидратной составляющей R может быть межмолекулярно ацилирована, т.е. эстерифицирована, карбоновой кислотой, предпочтительно алифатической карбоновой кислотой, более предпочтительно C3-C10-алкановой кислотой, особенно изовалериановой кислотой. В предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения, 1 или 2 или 3 из гидроксильных групп субъединицы линейной карбоновой кислоты или субъединицы карбогидратной составляющей R ацилированы, т.е. эстерифицированы, карбоновой кислотой, предпочтительно алифатической карбоновой кислотой, где карбоновые кислоты могут быть одинаковыми или различными, предпочтительно, независимо друг от друга, выбранными из C1-C10-алкановых кислот, где предпочтительно по меньшей мере одна из указанных карбоновых кислот представляет собой C3-C10-алкановую кислоту, особенно изовалериановую кислоту.
Предпочтительно, карбогидратная составляющая R несет по меньшей мере одну гидроксильную группу, эстерифицированную кислотой с 3 или более атомами углерода, особенно когда кислота представляет собой C3-C10-алкановую кислоту, особенно изовалериановую кислоту.
В особенно предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения, по меньшей мере один противомикробный гликолипид представляет собой гликолипид согласно общей формуле (II)
где
s равно 1 или 2;
t равно 6 или 7;
R1 означает -Н или -ОН;
R2 означает -Н или -C1-C6-алкил; предпочтительно -Н; и
R3, R4, R5, R6 и R7 независимо друг от друга означают -Н или -C(=O)C1-C6-алкил.
В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, по меньшей мере один из R3, R4, R5, R6 и R7 означает -C(=O)C1-C6-алкил, более предпочтительно -C(=O)C3-C6-алкил, наиболее предпочтительно -C(=O)изобутил.
В предпочтительный вариантах выполнения настоящего изобретения, R2, R6 и R7 означают -Н.
Предпочтительно, по меньшей мере один противомикробный гликолипид выбирают из соединений (II-А)-(II-D)
и их физиологически приемлемых солей.
Противомикробные гликолипиды, их физиологически приемлемые соли, и/или их сложные эфиры, предпочтительно обеспечиваются в форме экстракта из природного источника или получены из такого экстракта. Предпочтительно, источником экстракта является грибок, принадлежащий семейству Dacrymycetaceae, видам рода Dacryopinax, Ditiola, Guepiniopsis и/или Femsjonia, более предпочтительно Dacryopinax spathularia, Dacrymyces sp., Dacrymyces stillatus, Dacrymyces chrysocomus, Guepiniopsis buccina и/или Femsjonia luteo-alba (=Ditiola pezizaeformis). Особенно предпочтительными являются Dacryopinax spathularia штамм MUCL 53181, Dacryopinax spathularia штамм MUCL 53182, Ditiola radicata штамм MUCL 53180, Ditiola nuda штамм MUCL 53179, Dacrymyces chrysocomus штамм CBS280.84 и Femsjonia luteo-alba (= Ditiola pezizaeformis) штамм MUCL 53500.
Dacryopinax spathularia штамм MUCL 5318, как было обнаружено, относится к наилучшим штаммам в данное время для получения противомикробных гликолипидов и смесей двух или более противомикробных гликолипидов, особенно противомикробных гликолипидов, проявляющих наиболее сильную противомикробную активность против дрожжей и плесени.
Во всех случаях это означает, что либо только один противомикробный гликолипид (в по существу чистой форме или в виде прямого экстракта или далее обогащенного экстракта), либо смесь двух или более противомикробных гликолипидов (где смесь является предпочтительной) могут присутствовать, например, в экстракте или фармацевтической, нутрицевтической, косметической композиции, продукте питания или напитке согласно настоящему изобретению, или что он или они могут применяться согласно настоящему изобретению.
Типичные смеси противомикробных гликолипидов согласно настоящему изобретению скомпилированы в таблице ниже как предпочтительные варианты выполнения M1-M3, где отдельные противомикробные гликолипиды характеризуются их номинальной молекулярной массой (все значения в процентах по массе относительно общего количества противомикробных гликолипидов согласно общей формуле (I), которые содержатся в смеси):
Различия номинальной молекулярной массы по существу обусловлены различными ацильными заместителями. Конкретные гликолипиды, применяемые в примерах, относятся к варианту выполнения настоящего изобретения М3.
В наиболее предпочтительной гликолипидной смеси, гликолипиды, имеющие номинальная молекулярная масса ~1012 Да, характеризуются изовалерианатной (т.е. 3-метилбутаноатной) сложноэфирной составляющей на терминальном гликопиранозидном кольце. Различные положения 3-метилбутаноата и ацетата при гликопиранозидной единице возможны и равным образом предпочтительны:
В наиболее предпочтительной гликолипидной смеси, гликолипиды, имеющие номинальную молекулярную массу ~970 Да, характеризуются либо двумя ацетатными, либо одной изовалерианатной составляющими, присоединенными в виде сложных эфиров на трисахаридную составляющую, состоящую из двух ксилопиранозидных составляющих и одной гликопиранозидной составляющей (т.е. 3-метил бутаноат) сложноэфирной составляющей на терминальном гликопиранозидном кольце. Когда две ацетатные составляющие присутствуют, различные положения ацетильных составляющих в трисахаридной единице возможны и равным образом предпочтительны:
Подобным образом, различные положения 3-метилбутаноата при гликопиранозидной единице возможны и равным образом предпочтительны:
Удельное массовое соотношение указанного компонента для образования композиции, предпочтительно альфа-циклодекстрина, и указанного гликолипидного компонента находится в интервале от 100:1 до 1:2, предпочтительно от 10:1 до 1:1, более предпочтительно от 7.5:1 до 1.5:1, еще более предпочтительно от 6:1 до 2:1, еще более предпочтительно от 5:1 до 2.5:1, на основе общей массы всех противомикробных гликолипидов согласно общей формуле (I) в композиции и на основе общей массы всех стабилизаторов композиции в композиции.
Компонент для образования композиции композиция согласно настоящему изобретению содержит или состоит из стабилизатора композиции, предпочтительно альфа-циклодекстрина. Стабилизатор композиции (= усилитель композиции) улучшает совместимость гликолипидного компонента в продуктах потребления на основе воды. Таким образом, в целях описания настоящего изобретения термин "стабилизатор композиции" предпочтительно относится к «усилителю совместимости в составах на основе воды". Предпочтительно, "стабилизатор композиции" представляет собой "усилитель растворимости" или «усилитель диспергируемости". Предпочтительно, "стабилизатор композиции" стабилизирует гликолипидный компонент, чтобы он оставался в растворе или дисперсии, соответственно, т.е. предотвращает осаждение гликолипидного компонента или предотвращает композицию становиться мутной или непрозрачной, например, при хранении.
В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, компонент для образования композиции содержит или состоит из стабилизатора композиции, выбранного их циклодекстринов, предпочтительно альфа-циклодекстрина.
Циклодекстрины или циклические декстрины принадлежат хорошо известному семейству соединений, состоящих из молекул сахара, связанных вместе в кольцо. Циклодекстрины могут быть получены посредством ферментативного расщепления крахмала и, как правило, состоят из 5 или более α-D-гликопиранозидных единиц, связанных 1-4 гликозидно, как в амилозе. Следовательно, они иногда также упоминаются как циклоамилозы. Наиболее типичные циклодекстрины содержат ряд глюкозных мономеров в интервале от шести до восьми единиц в кольце, создавая коническую форму, т.е. α (альфа)-циклодекстрин (6-ти членная кольцевая молекула сахара), β (бета)-циклодекстрин (7-ми членная кольцевая молекула сахара) и γ (гамма)-циклодекстрин (8-ми членная кольцевая молекула сахара).
Альфа-циклодекстрин разрешен к применению в качестве растворимых пищевых волокон, а также применяется в качестве усилителя растворимости. Альфа-, бета- и гамма-циклодекстрин - все, как правило, признаны безопасными (GRAS) FDA. Циклодекстрины, как известно, в общем увеличивают растворимость и биодоступность гидрофобных, то есть плохо растворимых в воде, соединений, например, холестерина или небольших ароматических соединений. Однако повышение совместимости очень хорошо растворимых в воде, негидрофобных противомикробных гликолипидов в продуктах на основе воды согласно настоящему изобретению еще не было доступным для осведомления.
Предпочтительно, циклодекстрин согласно настоящему изобретению выбирают из альфа-циклодекстрина (CAS RN 10016-20-3), бета-циклодекстрина (CAS RN 7585-39-9), гидроксипропил-бета-циклодекстрина (128446-35-5) и метил-бета-циклодекстрина (CAS RN 128446-36-6); тогда как альфа-циклодекстрин, бета-циклодекстрин и метил-бета-циклодекстрин являются особенно предпочтительными. Наиболее предпочтительным является выбор альфа-циклодекстрина.
Было обнаружено, что весьма разветвленный циклический декстрин и гамма циклодекстрин (CAS RN 17465-86-0) обеспечивают менее выраженные благоприятные эффекты и следовательно являются менее предпочтительными.
Предпочтительно, удельное массовое соотношение указанного циклодекстрина, предпочтительно альфа-циклодекстрина, и указанного гликолипидного компонента находится в интервале от 20:1 до 1:1; более предпочтительно в интервале от 10:1 до 2.5:1; еще более предпочтительно от 7.5:1 до 2.5:1 или от 10:1 до 5:1; даже более предпочтительно или от 7.5:1 до 5:1, или от 5:1 до 2.5:1.
В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, компонент для образования композиции содержит или состоит из стабилизатора композиции, выбранного из полисорбатов.
Полисорбаты представляют собой класс масляных липидов, синтетически полученных из ПЭГ-илированного сорбитана (производная сорбита), эстерифицированного жирными кислотами. Типичные представители содержат Полисорбат 20 (полиоксиэтилен (20) сорбитан монолаурат), Полисорбат 40 (полиоксиэтилен (20) сорбитан монопальмитат), Полисорбат 60 (полиоксиэтилен (20) сорбитан моностеарат) и Полисорбат 80 (полиоксиэтилен (20) сорбитан моноолеат). Номер 20 поле части 'полиоксиэтилен' относится к общему числу оксиэтиленовых -(СН2СН2О)- групп, обнаруживаемых в молекуле. Номер после части 'полисорбат' относится к типу жирной кислоты, связанной с частью полиоксиэтиленсорбитан молекулы. Монолаурат обозначается посредством 20, монопальмитат обозначается посредством 40, моностеарат обозначается посредством 60, и моноолеат обозначается посредством 80.
Полисорбаты представляют собой эмульгирующие средства, применяемые в фармацевтических средствах и продуктах питания. Однако, усиление совместимости очень хорошо растворимых в воде противомикробных гликолипидов в продуктах на основе воды согласно настоящему изобретению еще не было известно общественности.
Предпочтительно, полисорбат согласно настоящему изобретению выбирают из группы, состоящей из полисорбата 20 (полиоксиэтилен-(20)-сорбитан монолаурат); полисорбата 21 (полиоксиэтилен-(4)-сорбитан монолаурат); полисорбата 40 (полиоксиэтилен-(20)-сорбитан монопальмитат); полисорбата 60 (полиоксиэтилен-(20)-сорбитан моностеарат); полисорбата 61 (полиоксиэтилен-(4)-сорбитан моностеарат); полисорбата 65 (полиоксиэтилен-(20)-сорбитантристеарат); полисорбата 80 (полиоксиэтилен-(20)-сорбитан моноолеат); полисорбата 81 (полиоксиэтилен-(5)-сорбитан моноолеат); полисорбата 85 (полиоксиэтилен-(20)-сорбитан трио лат); полисорбата 120 (полиоксиэтилен-(20)-сорбитан моноизостеарат); и смеси любых из указанных. Полисорбат 60 и полисорбат 80 являются предпочтительными.
Предпочтительно, удельное массовое соотношение указанного полисорбата и указанного гликолипидного компонента находится в интервале от 50:1 до 4:1; более предпочтительно в интервале от 20:1 до 8:1.
Композиция согласно настоящему изобретению может быть жидкой, полутвердой или твердой, например, порошок.
Композиция согласно настоящему изобретению может представлять собой предшественник напитка, особенно концентрат, сироп или порошок.
Помимо гликолипидного компонента композиция согласно настоящему изобретению может содержать дополнительный консервант. Предпочтительно, однако, гликолипидный компонент является единственным составляющим композиции, проявляющим противомикробные свойства.
Другим объектом настоящего изобретения является вещество, содержащее, в виде или внутри покрытия и/или в виде смеси, композицию согласно настоящему изобретению, как описано выше. Это вещество должно быть отлично от грибов, из которых соединение или противомикробные гликолипиды экстрагированы. Предпочтительно, вещество представляет собой косметическое средство, продукт питания, напиток, фармацевтическое средство, средство для ухода за домом, медицинское устройство, или активное вещество упаковки, особенно напиток, предшественник напитка, особенно концентрат, сироп или порошок, продукт питания или косметическое средство. В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, такое вещество содержит дополнительный консервант. В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, такое вещество не содержит дополнительный консервант.
Другим объектом настоящего изобретения является вещество согласно настоящему изобретению, как описано выше, которое получают после термической обработки.
Другим объектом настоящего изобретения является перорально потребляемый продукт на основе воды, содержащий композицию согласно настоящему изобретению, как описано выше. Все предпочтительные варианты выполнения настоящего изобретения, которые были описаны выше для композиции согласно настоящему изобретению также, аналогичным образом, применимы к перорально потребляемому продукту на основе воды согласно настоящему изобретению и не повторяются далее.
Предпочтительно, перорально потребляемый продукт на основе воды выбирают из косметических средств, продуктов питания, напитков и фармацевтических средств, особенно в форме порошка или жидкости.
В предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды представляет собой напиток, выбранный из газированных напитков, негазированных напитков, алкогольных напитков и безалкогольных напитков.
Предпочтительно, содержание гликолипидного компонента находится в интервале от 0.0005 до 1 мас. %; более предпочтительно от 0.0005 до 0.1 мас. %; еще более предпочтительно от 0.0005 до 0.05 мас. %; и наиболее предпочтительно от 0.0005 до 0.01 мас. %; на основе общей массы перорально потребляемого продукта на основе воды.
Предпочтительно, содержание компонента для образования композиции, который предпочтительно содержит или состоит из альфа-циклодекстрина, находится в интервале от 0.0012 до 5 мас. %; более предпочтительно от 0.0012 до 0.5 мас. %; еще более предпочтительно от 0.0012 до 0.25 мас. %; и наиболее предпочтительно от 0.0012 до 0.05 мас. %; на основе общей массы перорально потребляемого продукта на основе воды.
Предпочтительно
- содержание гликолипидного компонента находится в интервале от 0.0005 до 1 мас. %; более предпочтительно от 0.0005 до 0.1 мас. %; еще более предпочтительно от 0.001 до 0.1 мас. %; или от 0.0005 до 0.01 мас. %; даже более предпочтительно от 0.005 до 0.05 мас. %; на основе общей массы перорально потребляемого продукта на основе воды; и/или
- содержание компонента для образования композиции находится в интервале от 0.0005 до 1 мас. %; более предпочтительно в интервале от 0.001 до 0.1. мас. %;, еще более предпочтительно в интервале от 0.005 до 0.05 мас. %; даже более предпочтительно от 0.0012 до 0.5 мас. %;, или от 0.0012 до 0.25 мас. %;, или от 0.0025 до 0.5 мас. %; или от 0.0025 до 0.5 мас. %;, или от 0.0025 до 0.25 мас. %;, или от 0.005 до 0.5 мас. %; или от 0.0012 до 0.05 мас. %;, или от 0.0012 до 0.025 мас. %;, или от 0.0025 до 0.05 мас. %; или от 0.012 до 0.25 мас. %;, или от 0.012 до 0.12 мас. %;, или от 0.025 до 0.25 мас. %; на основе общей массы перорально потребляемого продукта на основе воды.
Предпочтительно
- содержание гликолипидного компонента находится в интервале от 3 до 100 ppmw (частей на миллион по массе); более предпочтительно в интервале от 3 до 25 ppmw, от 25 до 50 ppmw, или от 50 до 75 ppmw, или от 75 до 100 ppmw; даже более предпочтительно в интервале от 3 до 10 ppmw, или от 10 до 20 ppmw, или от 20 до 30 ppmw, или от 30 до 40 ppmw, или от 40 до 50 ppmw, или от 50 до 60 ppmw, или от 60 до 70 ppmw, или от 70 до 80 ppmw, или от 80 до 90 ppmw, или от 90 до 100 ppmw; на основе общей массы перорально потребляемого продукта на основе воды; и/или
- массовое соотношение компонента для образования композиции, предпочтительно содержащего или состоящего из альфа-циклодекстрина, и гликолипидного компонента находится в интервале от 20:1 до 1:1; более предпочтительно в интервале от 10:1 до 2.5:1; еще более предпочтительно от 7.5:1 до 2.5:1 или от 10:1 до 5:1; даже более предпочтительно или от 7.5:1 до 5:1, или от 5:1 до 2.5:1.
Предпочтительно, содержание гликолипидного компонента в перорально потребляемом продукте на основе воды зависит от природы перорально потребляемого продукта на основе воды. Было обнаружено, что следующие концентрации являются предпочтительными для следующих перорально потребляемых продуктов на основе воды:
- Прозрачные напитки (мутность 0-10 NTU9 нефелометрическая единица
мутности)): 3-25 мг/л
- Мутные напитки (мутность >10 NTU): 10-100 мг/л
- Соки и фруктовые напитки с содержанием фруктов >50%: 50-200 мг/л.
Предпочтительно, содержание компонента для образования композиции в перорально потребляемом продукте на основе воды также зависит от природы перорально потребляемого продукта на основе воды. Предпочтительно, его содержание является 5-10-ти кратным, по сравнению с гликолипидным компонентом (мас./об.), более предпочтительно 8-10-ти кратным, наиболее предпочтительно 10-и кратным. Было обнаружено, что следующие концентрации являются предпочтительными для следующих перорально потребляемых продуктов на основе воды:
- Прозрачные напитки (мутность 0-10 NTU): 10-200 мг/л
- Мутные напитки (мутность >10 NTU): 50-1000 мг/л
- Соки и фруктовые напитки с содержанием фруктов >50%: 250-2000 мг/л.
Предпочтительно, перорально потребляемый продукт на основе воды имеет значение рН в интервале 3.0±1.5, или 4.0±1.5, или 5.0±1.5, или 6.0±1.5.
В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, гликолипидный компонент содержит или состоит из противомикробного гликолипида согласно формуле (II-А) или его смеси, и компонент для образования композиции содержит или состоит из циклодекстрина, предпочтительно альфа-циклодекстрина, где концентрация гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 3 до 100 ppmw, относительно общей массы перорально потребляемого продукта на основе воды, и где удельное массовое соотношение компонента для образования композиции, предпочтительно альфа-циклодекстрина, и гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 2.5:1 до 5:1.
Другие предпочтительные варианты выполнения А1-А10 такого перорально потребляемого продукта на основе воды суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-циклодекстрин
Другие предпочтительные варианты выполнения В1-В10 такого перорально потребляемого продукта на основе воды суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-цикл о декстрин
Другие предпочтительные варианты выполнения С1-С10 такого перорально потребляемого продукта на основе воды суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-циклодекстрин
В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой прозрачный газированный безалкогольный напиток или прозрачную обогащенную воду. Предпочтительно, гликолипидный компонент содержит или состоит из противомикробного гликолипида согласно формуле (II-А) или его смеси, и компонент для образования композиции содержит или состоит из циклодекстрина, предпочтительно альфа-циклодекстрина, где концентрация гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 3 до 100 ppmw, относительно общей массы прозрачного газированного безалкогольного напитка или прозрачной обогащенной воды, и где удельное массовое соотношение компонента для образования композиции, предпочтительно альфа-циклодекстрина, и гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 2.5:1 до 5:1. Другие предпочтительные варианты выполнения D1-D9 таких газированных безалкогольных напитков или обогащенных вод суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-циклодекстрин
b-CD = бета-циклодекстрин
В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой мутный газированный безалкогольный напиток или мутную обогащенную воду. Предпочтительно, гликолипидный компонент содержит или состоит из противомикробного гликолипида согласно формуле (II-А) или его смеси, и компонент для образования композиции содержит или состоит из циклодекстрина, предпочтительно альфа-циклодекстрина, где концентрация гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 3 до 100 ppmw, относительно общей массы мутного газированного безалкогольного напитка или мутной обогащенной воды, и где удельное массовое соотношение компонента для образования композиции, предпочтительно альфа-циклодекстрина, и гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 2.5:1 до 5:1. Другие предпочтительные варианты выполнения Е1-Е8 таких газированных безалкогольных напитков или обогащенных вод суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-циклодекстрин
b-CD = бета-циклодекстрин
В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой прозрачный энергетический напиток или прозрачный спортивный напиток или прозрачный готовый для питья чай (RTD). Предпочтительно, гликолипидный компонент содержит или состоит из противомикробного гликолипида согласно формуле (II-А) или его смеси, и компонент для образования композиции содержит или состоит из циклодекстрина, предпочтительно альфа-циклодекстрина, где концентрация гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 3 до 100 ppmw, относительно общей массы прозрачного энергетического напитка или прозрачного спортивного напитка или прозрачного готового для питья чая, и где удельное массовое соотношение компонента для образования композиции, предпочтительно альфа-циклодекстрина, и гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 2.5:1 до 5:1. Другие предпочтительные варианты выполнения F1-F8 таких энергетических напитков или спортивных напитков или чая RTD суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-циклодекстрин
b-CD = бета-циклодекстрин
В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой мутный энергетический напиток или мутный спортивный напиток или мутный готовый для питья чай (RTD). Предпочтительно, гликолипидный компонент содержит или состоит из противомикробного гликолипида согласно формуле (П-А) или его смеси, и компонент для образования композиции содержит или состоит из циклодекстрина, предпочтительно альфа-циклодекстрина, где концентрация гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 3 о 100 ppmw, относительно общей массы мутного энергетического напитка или мутного спортивного напитка или мутного готового для питья чая, и где удельное массовое соотношение компонента для образования композиции» предпочтительно альфа-циклодекстрина, и гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 2.5:1 до 5:1. Другие предпочтительные варианты выполнения G1-G8 таких энергетических напитков или спортивных напитков или чая RTD суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-циклодекстрин
b-CD = бета-циклодекстрин
В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой прозрачный фруктовый напиток. Предпочтительно, гликолипидный компонент содержит или состоит из противомикробного гликолипида согласно формуле (II-А) или его смеси, и компонент для образования композиции содержит или состоит из циклодекстрина, предпочтительно альфа-циклодекстрина, где концентрация гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 3 до 100 ppmw, относительно общей массы прозрачного фруктового напитка, и где удельное массовое соотношение компонента для образования композиции, предпочтительно альфа-циклодекстрина, и гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 2.5:1 до 5:1. Другие предпочтительные варианты выполнения Н1-Н8 таких фруктовых напитков суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-циклодекстрин
b-CD = бета-циклодекстрин
В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой мутный фруктовый напиток. Предпочтительно, гликолипидный компонент содержит или состоит из противомикробного гликолипида согласно формуле (II-А) или его смеси, и компонент для образования композиции содержит или состоит из циклодекстрина, предпочтительно альфа-циклодекстрина, где концентрация гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 3 до 100 ppmw, относительно общей массы мутного фруктового напитка, и где удельное массовое соотношение компонента для образования композиции, предпочтительно альфа-циклодекстрина, и гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 2.5:1 до 5:1. Другие предпочтительные варианты выполнения I1-I8 таких фруктовых напитков суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-циклодекстрин
b-CD = бета-циклодекстрин
В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой фруктовый сок. Предпочтительно, гликолипидный компонент содержит или состоит из противомикробного гликолипида согласно формуле (II-А) или его смеси, и компонент для образования композиции содержит или состоит из циклодекстрина, предпочтительно альфа-циклодекстрина, где концентрация гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 3 до 100 ppmw, относительно общей массы фруктового сока, и где удельное массовое соотношение компонента для образования композиции, предпочтительно альфа-циклодекстрина, и гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 2.5:1 до 5:1. Другие предпочтительные варианты выполнения J1-J8 такого фруктового сока суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-циклодекстрин
b-CD = бета-циклодекстрин
В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой продукт для ухода за полостью рта. Предпочтительно, гликолипидный компонент содержит или состоит из противомикробного гликолипида согласно формуле (II-А) или его смеси, и компонент для образования композиции содержит или состоит из циклодекстрина, предпочтительно альфа-циклодекстрина, где концентрация гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 3 до 100 ppmw, относительно общей массы продукта для ухода за полостью рта, и где удельное массовое соотношение компонента для образования композиции, предпочтительно альфа-циклодекстрина, и гликолипидного компонента предпочтительно находится в интервале от 2.5:1 до 5:1. Другие предпочтительные варианты выполнения K1-K8 такого продукта для ухода за полостью рта суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
a-CD = альфа-циклодекстрин
b-CD = бета-циклодекстрин
В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой газированный безалкогольный напиток или обогащенную воду. Предпочтительные варианты выполнения L1-L6 таких газированных безалкогольных напитков или обогащенных вод суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
PS60 = полисорбат 60
PS80 = полисорбат 80
В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой энергетический напиток или спортивный напиток или готовый для питья чай (RTD). Предпочтительные варианты выполнения М1-М6 таких энергетических напитков или спортивных напитков или готовых для питья чаев суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
PS60 = полисорбат 60
PS80 = полисорбат 80
В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой фруктовый напиток. Предпочтительные варианты выполнения N1-N6 таких фруктовых напитков суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
PS60 = полисорбат 60
PS80 = полисорбат 80
В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, перорально потребляемый продукт на основе воды согласно настоящему изобретению представляет собой продукт для ухода за полостью рта. Предпочтительные варианты выполнения О1-О6 такого продукта для ухода за полостью рта суммированы в таблице ниже в описании настоящего изобретения:
(II-А) = противомикробный гликолипид согласно формуле (II-А) или его смесь
PS60 = полисорбат 60
PS80 = полисорбат 80
Другим объектом настоящего изобретения является применение композиции согласно настоящему изобретению, как описано выше, для консервации перорально потребляемого продукта на основе воды согласно настоящему изобретению, как описано выше. Предпочтительно, цель применения состоит в усилении стабильности к микроорганизмам, особенно, когда по меньшей мере один микроорганизм выбран из группы, состоящей из плесени, дрожжей и бактерий.
Предпочтительно, композиция согласно настоящему изобретению полезна и применяется в качестве консервирующей или противомикробной композиции для фармацевтического, медицинского устройства, контейнера для продукта питания, контейнера для напитка или особенно продукта питания, напитка, косметического средства или средства для ухода за домом.
В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, композиция согласно настоящему изобретению полезна и применяется в качества ингибирующего биопленку средства. Она может применяться как таковая посредством введения, или в способах, включающих введение одного или более противомикробных гликолипидов или композиции, содержащей их, на поверхности и материала, вступающие в контакт с поверхностями. Таким путем, можно избежать биопленки на различных материалах, включая медицинские устройства, зубы, контейнеры, продукты для ухода за домом, трубы или магистрали или другие проводящие или содержащие жидкость устройства и тому подобное.
Другим объектом настоящего изобретения является способ усиления микробиологической стабильности материала, включающий добавление к указанному материалу композиции согласно настоящему изобретению, как описано выше, где указанный материал предпочтительно выбирают из группы, состоящей из косметического средства, продукта питания, напитка, фармацевтического средства, средства для ухода за домом, медицинского устройства, и активное вещество упаковки, особенно напитка, или продукта питания, или косметического средства, более предпочтительно перорально потребляемого продукта на основе воды согласно настоящему изобретению, как описано выше.
Другим объектом настоящего изобретения является способ получения перорально потребляемого продукта на основе воды согласно настоящему изобретению, как описано выше, включающий стадию растворения композиции согласно настоящему изобретению, как описано выше, в воде или в водном составе.
Противомикробные гликолипиды или их смесь могут применяться в комбинации с циклодекстринами и/или полисорбатами, т.е. стабилизатором композиции, посредством раздельного смешивания обоих компонентов, противомикробных гликолипидов и одного или более стабилизаторов композиции, в продукте на основе воды, в ходе его получения или после этого. Альтернативно, противомикробные гликолипиды и стабилизатор(ы) композиции могут быть смешаны в виде уже готовой к применению комбинации, подлежащей применению в виде фиксированной комбинации в продуктах на основе воды.
Так как циклодекстрины, а также противомикробные гликолипиды или их смеси представляют собой твердые вещества, можно смешивать сухие порошки при различных соотношениях, поучая меси порошков, которые затем могут непосредственно применяться посредством растворения таких смесей порошков с продуктом на основе воды.
Высококонцентрированный раствор циклодекстринов в воде альтернативно возможен в виде среды для применения, в которой противомикробные гликолипиды или их смеси растворяют, также при определенных концентрациях. Такие растворы циклодекстринов и противомикробных гликолипидов могут быть непосредственно добавлены в продукты на основе воды в ходе их получения.
Так как полисорбаты представляют собой жидкие вещества, весьма концентрированный раствор в воде всегда предпочтителен, когда противомикробные гликолипиды или их смеси растворяют, также при определенных концентрациях. Такие растворы полисорбатов и противомикробных гликолипидов могут быть непосредственно добавлены в продукты на основе воды в ходе их получения.
Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение без ограничения его объема.
Примеры
Получение композиций
Смесь гликолипидов со следующим распределением по массе применяли:
* относительно мас. % всех гликолипидов в образце.
Общее содержание гликолипидов в образце составляло 95 мас. % по сухой массе.
Пример 1: Сток-композиции на основе воды альфа-циклодекстрина и смеси противомикробных гликолипидов
Альфа-циклодекстрин (a-CD) и смесь противомикробных гликолипидов согласно общей формуле (I) переместили в стеклянный сосуд в виде твердых веществ, так чтобы получить объем сток-композиции 3 мл, в относительных количествах, как изложено в таблице ниже:
Таким образом, для 3 мл сток-композиции например, 1-1, 30 мг альфа-циклодекстрина и 12 мг смеси противомикробных гликолипидов применяли. Затем, 3 мл деминерализованной воды добавили, так чтобы получить четыре сток-композиции с различными относительными концентрациями, как указано. Полученные сток-композиции интенсивно перемешивали с помощью магнитной мешалки при комнатной температуре в течение 30 мин. с получением композиций белого цвета с небольшой мутностью, готовых для применения.
Пример 2: Смеси твердых порошков альфа-циклодекстрина и смеси противомикробных гликолипидов
1 г порошка альфа-циклодекстрина переместили в два стеклянных контейнера, объемом 60 мл каждый. Затем, смесь противомикробных гликолипидов согласно общей формуле (I) (измельченную с размером сита 0.5 мм) добавили в количествах 1 г и 0.4 г, соответственно, так чтобы получить распределение по массе, как изложено в таблице ниже:
Стеклянный контейнер запаяли и непрерывно встряхивали в течение 10 мин. при комнатной температуре, получая оптически гомогенную смесь двух порошков.
Пример 3: Сток-композиции на основе воды полисорбата 80 и смеси противомикробных гликолипидов
4 г (4 мл) полисорбата 80 (PS80) переместили в три стеклянные контейнера, объемом 60 мл каждый, и смешали с 40 мл деминерализованной воды. Композиции интенсивно перемешивали с помощью магнитной мешалки при комнатной температуре в течение 30 мин. В три отдельные контейнеры 0.4 г, 1 г и 1.6 г смеси противомикробных гликолипидов согласно общей формуле (I) переместили и затем привели в три раствора полисорбата 80 каждый. Сток-композиции имели следующие концентрации:
Отдельные контейнеры промыли 2×3 мл деминерализованной воды, и эту промывочную воду также переместили в три объединенные растворы полисорбата 80 каждый. Объем каждой композиции довели до 50 мл посредством добавления воды. Три стеклянных контейнера запаяли, встряхнули и затем интенсивно перемешивали, применяя магнитную мешалку при самой высокой скорости, с получением готовой для применения прозрачной сток-композиции цвета слоновой кости.
Эксплуатационные характеристики композиций
Пример 4: Скрининг подходящих агентов, улучшающих композицию, применяемых в комбинации со смесью противомикробных гликолипидов
Что касается определения стабилизатора композиции, проводили скрининг, в котором добавки, обычно используемые в пищевых, косметических или медицинских применениях, объединялись со смесью противомикробных гликолипидов в составе на основе воды. Использовали довольно высокую концентрацию 1000 мг/л для агентов, улучшающих композицию, чтобы не пропустить потенциальные эффекты, тогда как смесь противомикробных гликолипидов применялась в обычно применяемых концентрациях, то есть 5, 10 и 25 мкг/мл.
В общем 36 добавок исследовали, как перечислено: Ксантан, Гуапрвая камедь, Пектин, Поливинилпирролидон, Глюкуронолактон, бета-Циклодекстрин, Сорбитан моностеарат, Пектин, Сорбитан монолаурат, Полисорбат 80, Гликохолат, миоинозит, Полиэтиленгликоль, Гуммиарабик, Смола плодоворожкового дерева, Агар, Альфа-Циклодекстрин, λ-Карраген, κ-Карраген, Конжаковая камедь, Камедь тары, Лецитин (из яиц), Лецитин (из соевых бобов), EDTA, Поливинипирролидон, Сахарозы ацетат изобутират (SAIB), Метилцеллюлоза, Гидроксипропилцеллюлоза, Глицериновый сложный эфир канифоли, Карбоксиметилцеллюлоза, Альгинат натрия, Трагакант, Полисорбат 20, Полисорбат 60, лизо-Лецитин.
Порции по около 50 мл каждая для двух напитков, "Gerolsteiner Orangenlimonade" (мутный апельсиновый лимонад, дегазированный; мутный напиток) и "REWE Apfelsaft" (прозрачный яблочный сок, стерильно отфильтрованный; прозрачный напиток), а также для 10 мМ цитратного буфера в воде (рН 3.0), смешали каждую с аликвотами смеси противомикробных гликолипидов и соответствующими добавками, чтобы установить для каждой индивидуально подвергаемой скринингу добавки три комбинации концентраций (1000 мкг/мл (за небольшим исключением, как указано ниже) добавки с 5, 10 м 25 мкг/мл смеси противомикробных гликолипидов, соответственно); параллельно контролировали три контроля без добавления смеси противомикробных гликолипидов и добавки.
Необходимые аликвоты смеси противомикробных гликолипидов переносили из водного сток-раствора, содержащего 1 мг/мл смеси противомикробных гликолипидов, в девять тестовых растворов, приготовленных для каждой добавки.
Необходимые аликвоты добавок переносили непосредственно в порции по 50 мл.
Для измерения мутности использовалось инфрасенсорное устройство AL250T-IR для измерения мутности от AQUALYTIC®. Ее измеряли в трех временных точках: день 0, 3, 7. Все тестовые образцы хранили и обрабатывали при комнатной температуре.
В таблице ниже приведен качественный обзор всех добавок, протестированных на эффект стабилизации композиции, при использовании смеси противомикробных гликолипидов в трех продуктах на водной основе, цитратном буфере рН3, апельсиновом лимонаде и яблочном соке. Кроме того, качественно описывается влияние добавок на MIC смеси противомикробных гликолипидов. Также влияние самой добавки на применяемые продукты на основе воды описывается независимо и во взаимозависимости со смесью противомикробных гликолипидов.
Обозначение: n = нейтральный, w = слабее, lw = немного слабее, sw = сильно слабее, dc = уменьшение совместимости, ic = увеличение совместимости, nd = не ясный или не определено, impr = улучшенный;
Так как применяемые добавки ксантан и пектин (как выделено в вышеуказанном списке), проявляли многообещающие эффекты стабилизации в этом начальном тестировании при довольно высоких концентрациях, тестирование повторялось и эффект наблюдался в течение более длительного периода времени, т.е. >=14 дней, при тех же условиях, как описано выше. Все эксперименты проводились и сообщались в двух экземплярах. Образцы сравнивали с контролем (без добавления противомикробного гликолипида или ксантана). Было показано, что эффект улучшения совместимости этих добавок со временем уменьшается, как показано для ксантана в таблице ниже:
*не наблюдалось более 14 дней после того, так как совместимость была нарушена уже через 14 дней.
Улучшение совместимости посредством ксантана и пектина было также исследовано при более низких концентрациях, т.е. 5, 10, 50, 100, 250, 500 и 750 мкг/мл. Для пектина требовалось по меньшей мере 500 мкг/мл, и для ксантана требовалось по меньшей мере 250 мкг/мл, чтобы наблюдать желаемый эффект в указанных продуктах на основе воды, как применяется в настоящей заявке.
На основании вышеприведенных экспериментальных данных можно сделать заключение, что ксантаны и пектин могут применяться для улучшения стабилизации смеси противомикробных гликолипидов в композициях продуктов на основе воды в течение ограниченного периода времени менее 7 дней. В случае, если стабильность требуется в течение более длительного периода времени, следует использовать другие добавки, в частности циклодекстрины и полисорбаты.
Пример 5: Применение комбинаций альфа-циклодекстрина и смеси противомикробных гликолипидов
Что касается подтверждения свойств как стабилизатора композиции альфа-циклодекстрина для использования смеси противомикробных гликолипидов в продуктах на основе воды, в частности напитков, комбинации обоих компонентов при разных концентрациях были исследованы в двух коммерчески доступных напитках, которые не имеют совместимости при использовании смеси противомикробных гликолипидов самой по себе т.е. в отсутствие альфа-циклодекстрина.
Порции по около 50 мл каждая для двух напитков, "Gerolsteiner Orangenlimonade" (мутный апельсиновый лимонад, дегазированный; мутный напиток) и "REWE Apfelsaft" (прозрачный яблочный сок, стерильно отфильтрованный; прозрачный напиток), смешали с аликвотами смеси противомикробных гликолипидов и альфа-циклодекстрина, чтобы установить указанные девять комбинаций концентраций (от 4-2 до 4-4 и от 4-6 до 4-11, соответственно); два контрольных решения без добавления смеси противомикробных гликолипидов и альфа-циклодекстрина исследовали параллельно (4-1 и 4-5, соответственно)
Необходимые аликвоты смеси противомикробных гликолипидов перенесли из водного сток-раствора, содержащего 1 мг/мл смеси противомикробных гликолипидов, в два напитка, "Gerolsteiner Orangenlimonade" и "REWE Apfelsaft", соответственно.
Необходимые аликвоты альфа-циклодекстрина перенесли из водного сток-раствора, содержащего 10 мг/мл альфа-циклодекстрин, в два напитка, "Gerolsteiner Orangenlimonade" и "REWE Apfelsaft", соответственно.
Для измерения мутности инфракрасное устройство для измерения мутности AL250T-IR от AQUALYTIC® применяли. Измеряли три временные точки: день 0, 3, 7. Все тестовые образцы хранили и обрабатывали при комнатной температуре.
а) Апельсиновый лимонад
Результаты измерений мутности суммированы в таблицах ниже:
nd = не определено
Результаты визуального контроля суммированы в таблицах ниже:
b) Яблочный сок
Результаты измерений мутности суммированы в таблицах ниже:
nd = не определено
Результаты визуального контроля суммированы в таблицах ниже:
На основании вышеприведенных экспериментальных данных можно сделать заключение, что 10 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в прозрачном напитке Яблочный сок может быть безопасно стабилизирован посредством объединения с 100 мкг/мл альфа-циклодекстрином, тогда как количества 10-25 мкг/мл альфа-циклодекстрина очевидно все еще не являются достаточными из-за наблюдаемого осаждения осаждение. Как продемонстрировано в Примере 9, чистый 10 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в прозрачном напитке Яблочный сок проявлял осаждение уже через 3 дня. Для 25 мкг/мл раствора смеси противомикробных гликолипидов в мутном напитке Апельсиновый лимонад безопасная стабилизация может быть достигнута посредством добавления 500 мкг/мл альфа-циклодекстрина, тогда как количества 100 мкг/мл альфа-циклодекстрина очевидно все еще не являются достаточными из-за наблюдаемого увеличения мутности и осаждения через 7 дней. Как продемонстрировано в Примере 9, чистый 25 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в мутном напитке Апельсиновый лимонад проявлял осаждение уже через 3 дня.
Пример 6: Зависимость от температуры применения комбинаций альфа-циклодекстрина и смеси противомикробных гликолипидов
Применяя аналогичный протокол, описанный в примере 5, температурная зависимость влияния на совместимость наблюдалась для альфа-циклодекстрина в комбинации со смесью противомикробных гликолипидов для прозрачного напитка яблочного сок. Однако для концентрации 10 мкг/мл смеси противомикробных гликолипидов три комбинации с альфа-циклодекстрином, 25 (6-1, 6-2, 6-9, 6-10, 6-17, 6-18), 75 (6-3, 6-4, 6-11, 6-12, 6-19, 6-20) и 100 мкг/мл (6-5, 6-6, 6-13, 6-14, 6-21, 6-22) и для концентрации 25 мкг/мл смеси противомикробных гликолипидов только 100 мкг/мл альфа-циклодекстрина (6-7, 6-8, 6-15, 6,-16, 6-23, 6-24) применяли все с двумя тестируемыми точками, соответственно. Помимо комнатной температуры, также 6°С и 40°С применяли; кроме того, период времени наблюдения был продлен до 14 дней, что дало следующие результаты:
На основании вышеприведенных экспериментальных данных можно сделать заключение, что улучшение совместимости путем добавления альфа-циклодекстрина зависит от температуры. Удивительно, но улучшение совместимости сильнее при более низкой температуре порядка 4°С > комнатная температура > 40°С; отсутствие совместимости 10 мкг/мл смеси противомикробных гликолипидов с яблочным соком можно успешно избежать посредством добавления только 75 мкг/мл при 4°С, тогда как при 40°С необходимо 100 мкг/мл. Это противоположно тому, что обычно ожидается, поскольку растворимость обычно увеличивается при более высокой температуре. Это подтверждает, что улучшение совместимости - это не простое повышение растворимости, а неожиданное обнаружение в противоположность нормальному ожиданию человека, прошедшего подготовку в данной области техники. Также улучшение совместимости, применяя альфа-циклодекстрин, длится > 28 дней с использованием 10 мкг/мл смеси противомикробных гликолипидов. Это существенно отличается от пектина и ксантана, как показано в эксперименте 4, где эффект улучшения совместимости исчезает уже через 7-14 дней.
Пример 7: Применение комбинаций бета-циклодекстрина и смеси противомикробных гликолипидов
Что касается подтверждения свойств улучшения совместимости бета-циклодекстрина для использования смеси противомикробных гликолипидов в продуктах на основе воды, в частности напитках, комбинации обоих компонентов при разных концентрациях были исследованы в двух коммерчески доступных напитках, которые не имеют совместимости с использованием смеси противомикробных гликолипидов самой по себе, т.е. в отсутствие бета-циклодекстрина.
Порции по около 50 мл каждая для двух напитков, "Gerolsteiner Orangenlimonade" (апельсиновый лимонад, дегазированный, мутный напиток) и "REWE Apfelsaft" (яблочный сок, стерильно отфильтрованный, прозрачный напиток), смешали с аликвотами смеси противомикробных гликолипидов и бета-циклодекстрина, применяя объемы, как указано в таблице ниже, чтобы установите десять комбинаций концентраций; два контрольных раствора без добавления смеси противомикробных гликолипидов и бета-циклодекстрина, параллельно исследовали.
Необходимые аликвоты смеси противомикробных гликолипидов перенесли из водного сток-раствора, содержащего 1 мг/мл смесь противомикробных гликолипидов, в два напитка, "Gerolsteiner Orangenlimonade" и "REWE Apfelsaft", соответственно.
Необходимые аликвоты альфа-циклодекстрина перенесли из водного сток-раствора, содержащего 10 мг/мл смеси альфа-циклодекстрина, в два напитка, "Gerolsteiner Orangenlimonade" и "REWE Apfelsaft", соответственно.
Для измерения мутности инфракрасное устройство для измерения мутности AL250T-IR от AQUALYTIC® применяли. Измеряли три временные точки: день 0, 3, 7. Все тестовые образцы хранили и обрабатывали при комнатной температуре.
а) Апельсиновый лимонад
Результаты измерений мутности суммированы в таблицах ниже:
Результаты визуального контроля суммированы в таблицах ниже:
b) Яблочный сок
Результаты измерений мутности суммированы в таблицах ниже:
Результаты визуального контроля суммированы в таблицах ниже:
nd = не определено
На основании вышеприведенных экспериментальных данных можно сделать заключение, что 10 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в прозрачном напитке Яблочный может быть вполне стабилизирован посредством объединения с 50 мкг/мл бета-циклодекстрина. Как продемонстрировано в Примере 7, чистый 10 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в прозрачном напитке Яблочный сок проявлял осаждение уже через 3 дня. Для 25 мкг/мл раствора смеси противомикробных гликолипидов в мутном напитке Апельсиновый лимонад приемлемая безопасная стабилизация может быть достигнута посредством добавления 50 мкг/мл бета-циклодекстрин. Как продемонстрировано в Примере 7, чистый 25 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в мутном напитке Апельсиновый лимонад проявлял осаждение уже через 3 дня.
Пример 8: Применение сток-растворов из Примера 3 в продуктах на основе воды
2×400 мл двух напитков, "Gerolsteiner Orangenlimonade" (апельсиновый лимонад, дегазированный, мутный напиток) и "Kastell Zitronensprudel" (лимонный лимонад, стерильно отфильтрованный, прозрачный напиток), каждым заполнили колбу Эрлонмейера, объемом 500 мл. Затем, определенный объем, как показано в таблице ниже, сток-раствора, как получено в Примере 3, переместили в напитки и перемешивали в течение 5 минут при комнатной температуре:
2×50 мл порцию четырех растворов в колбах Эрлонмейера переместили в прозрачные и стерильные полистирольные конические пробирки и запаяли для исследования стабильности и совместимости таких напитков при трех различных температурах (6/20/40°С) каждую, в результате получили четыре пробирки на температуру и напиток. Такие 24 пробирки хранили в течение семи дней и наблюдали на день 0, 3 и 7 путем измерения мутности, а также путем оптического контроля. Параллельно исследовали контрольный раствора без добавления каких-либо компонентов.
Результаты показаны в следующих таблицах; без добавок означает, что не было добавлено ни сток-раствора, ни полисорбата 80, ни смеси противомикробных гликолипидов.
а) Лимонный лимонад
Результаты измерений мутности при 6°С, 20°С и 40°С суммированы в таблицах ниже:
Результаты визуального контроля при 6°С, 20°С и 40°С суммированы в таблицах ниже:
b) Апельсиновый лимонад
Результаты измерений мутности при 6°С, 20°С и 40°С суммированы в таблицах ниже:
Результаты визуального контроля при 6°С, 20°С и 40°С суммированы в таблицах ниже:
* контроль означает, что ни полисороат 60, ни смесь противомикрооных гликолипидов не добавлены
На основании вышеприведенных экспериментальных данных можно сделать заключение, что 10 мкг/мл и 25 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в прозрачном напитке Лимонный лимонад может быть безопасно стабилизирован объединением с 100 мкг/мл Полисорбата 80; эта стабильность даже может быть подтверждена для трех различных температур хранения. Как продемонстрировано в Примере 7, чистый 10 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в прозрачном напитке Лимонный лимонад проявлял осаждение уже через 3 дня. Для 25 мкг/мл раствора смеси противомикробных гликолипидов в мутном напитке Апельсиновый лимонад безопасная стабилизация может быть достигнута посредством добавления 250 мкг/мл Полисорбата 80, тогда как количество 250 мкг/мл Полисорбата 80, объединенное с 100 мкг/мл смеси противомикробных гликолипидов, очевидным образом является недостаточным из-за наблюдаемого увеличения осаждения и уменьшенной мутности через 7 дней. Как продемонстрировано в Примере 7, чистый 25 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в мутном напитке Апельсиновый лимонад проявлял осаждение уже через 3 дня.
Пример 9: Эксперименты по совместимости смеси противомикробных гликолипидов без применения какого-либо стабилизатора композиции
Для сравнения применяли смесь противомикробных гликолипидов в отношении напитков, применяемых в Примерах 4-8, без применения какого-либо из стабилизаторов композиций, т.е. полисорбатов и циклодекстринов.
Порции по около 50 мл каждого из трех напитков, "Gerolsteiner Orangenlimonade" (апельсиновый лимонад, дегазированный, мутный напиток), "Kastell Zitronensprudel" (лимонный лимонад, стерильно отфильтрованный, прозрачный напиток), и "REWE Apfelsaft" (прозрачный яблочный сок, стерильно отфильтрованный, прозрачный напиток), смешали с аликвотами смеси противомикробных гликолипидов, так чтобы стабилизировать девять тестируемых растворов; три контрольных растворов без добавления смеси противомикробных гликолипидов, исследовали параллельно:
Подготовка тестового образца и экспериментальный процесс были идентичны описанным в примерах 4 и 5, и визуальное наблюдение выявило следующие результаты:
"REWE Apfelsaft" (яблочный сок, стерильно отфильтрованный):
"Gerolsteiner Orangenlimonade" (апельсиновый лимонад, дегазированный):
"Kastell Zitronensprudel" (лимонный лимонад, стерильно отфильтрованный):
На основании вышеприведенных экспериментальных данных можно сделать заключение, что совместимость смеси противомикробных гликолипидов, растворенных в прозрачном напитке Лимонный лимонад и Яблочный сок, как применяется в настоящей заявке, ограничена до концентрации 10 мкг/мл, тогда как при концентрации 25 мкг/мл осаждение может наблюдаться уже через 3 дня, становясь очевидным через 7 дней. Совместимость смеси противомикробных гликолипидов, растворенных в мутном напитке Апельсиновый лимонад, как применяется в настоящей заявке, ограничена даже более низкой концентрацией 5 мкг/мл, тогда как при концентрации 10 мкг/мл осаждение может наблюдаться уже через 3 дней. Если стабильность наблюдается через 7 дней, она остается стабильной даже после 14 дней.
Пример 10: Сравнение минимальных ингибирующих концентраций (MIC) смеси противомикробных гликолипидов самих по себе или в комбинации с стабилизаторами композиции
В таблице ниже перечислены значения MIC, определенные для смеси противомикробных гликолипидов самих по себе или в комбинации со стабилизаторами композиции для двух портящих организмов: Saccharomyces cerevisiae MUCL 53497 и Aspergillus niger ATCC 16404:
Объединения проводились с использованием различных концентраций стабилизатора композиции, как указано. Значения MIC определяли путем инокуляции 1×10Е5 КОЕ/мл соответствующего микроорганизма, последующей инкубации в среде SDB при 28°С в течение 48 часов и визуального исследования роста микробов. Самая низкая концентрация без заметного роста микробов рассматривалась как MIC. Все определения были сделаны в двух экземплярах.
На основании вышеприведенных экспериментальных данных можно сделать заключение, что смесь противомикробных гликолипидов сохраняет свою противомикробную эффективность, как продемонстрировано выше посредством значений MIC в отношении штаммов дрожжей и плесени, даже в комбинации с циклодекстринами и полисорбатами, как перечислено. Однако значение MIC зависит от концентрации применяемых циклодекстринов и полисорбатов, т.е. чем выше концентрации циклодекстринов и полисорбатов, тем выше измеряемые значения MIC. При превышении уровня концентрации 500 мкг/мл циклодекстринов или полисорбатов смесь противомикробных гликолипидов становится неэффективной.
Пример 11: Применение комбинаций метил-бета-циклодекстрина и смеси противомикробных гликолипидов
Что касается подтверждения свойств стабилизации композиции метил-бета-циклодекстрин для использования смесей противомикробных гликолипидов в продуктах на основе воды, в частности напитках, комбинации обоих компонентов при разных концентрациях были исследованы в двух коммерчески доступных напитках, которые не совместимы при использовании смеси противомикробных гликолипидов самой по себе, т.е. в отсутствие метил-бета-циклодекстрина.
Два напитка, "Gerolsteiner Orangenlimonade" (мутный апельсиновый лимонад, дегазированный; мутный напиток) и "REWE Apfelsaft" (прозрачный яблочный сок, стерильно отфильтрованный; прозрачный напиток), применяли, а также тестовые растворы, полученные, как описано для Примера 5, применяя сток-раствор 50 мг/мл метил-бета-циклодекстрина, а также 5 мг/мл сток-раствора смеси противомикробных гликолипидов, оба в стерильной воде, соответственно.
Для измерения мутности инфракрасное устройство для измерения мутности AL250T-IR от AQUALYTIC® применяли. Измеряли в пяти различных моментах времени: день 0, 3, 7, 14 и 28. Все тестовые образцы хранили и обрабатывали при комнатной температуре.
Результаты по совместимости для Апельсинового лимонада и Яблочного сока:
На основании вышеприведенных экспериментальных данных можно сделать заключение, что 10 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в прозрачном напитке Яблочный сок можно безопасно стабилизировать в течение 28 дней посредством объединения с 75 мкг/мл метил-бета-циклодекстрина, тогда как количества 50 мкг/мл метил-бета-циклодекстрина очевидно все еще не являются достаточными из-за наблюдаемого небольшого осаждение. Как продемонстрировано в Примере 9, чистый 10 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в прозрачном напитке Яблочный сок проявлял осаждение уже через 3 дня. Для 25 мкг/мл раствора смеси противомикробных гликолипидов в мутном напитке Апельсиновый лимонад безопасная стабилизация может быть достигнута в течение 28 дней после добавления 500 мкг/мл метил-бета-циклодекстрина, тогда как количества 250 мкг/мл метил-бета-циклодекстрина очевидно все еще не являются достаточными из-за наблюдаемого увеличения мутности и осаждения через 14 дней. Как продемонстрировано в Примере 9, чистый 25 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в мутном напитке Апельсиновый лимонад проявлял осаждение уже через 3 дня.
Пример 12: Применение комбинаций гидроксипропил-бета-циклодекстрина и смеси противомикробных гликолипидов
Что касается подтверждения свойств улучшения совместимости гидроксипропил-бета-циклаодекстрина для использования смеси противомикробных гликолипидов в продуктах на основе воды, в частности в напитках, комбинации обоих компонентов при разных концентрациях были исследованы в двух имеющихся в продаже напитках, которые не имеют совместимости, при использовании смеси противомикробных гликолипидов самой по себе, то есть в отсутствие гидроксипропил-бета-циклодекстрина.
Два напитка, "Gerolsteiner Orangenlimonade" (мутный апельсиновый лимонад, дегазированный; мутный напиток) и "REWE Apfelsaft" (прозрачный яблочный сок, стерильно отфильтрованный; прозрачный налиток), применяли, а также тестируемые растворы, полученный, как описано для Примера 5, применяя сток-раствор 50 мг/мл гидроксипропил-бета-циклодекстрина, а также 5 мг/мл сток-раствора смеси противомикробных гликолипидов, оба в стерильной воде, соответственно.
Для измерения мутности инфракрасное устройство для измерения мутности AL250T-IR от AQUALYTIC® применяли. Измерение проводили для пяти моментов времени: день 0, 3, 7, 14 и 28. Все тестовые образцы хранили и обрабатывали при комнатной температуре.
Результаты по совместимости для Апельсинового лимонада и Яблочного сока:
На основании вышеприведенных экспериментальных данных можно сделать заключение, что 10 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в прозрачном напитке Яблочный сок можно безопасно стабилизировать в течение 28 дней посредством объединения с 150 мкг/мл гидроксипропил-бета-циклодекстрина, тогда как количества 100 мкг/мл гидроксипропил-бета-циклодекстрина очевидно все еще не являются достаточными из-за наблюдаемого небольшого осаждения. Как продемонстрировано в Примере 9, чистый 10 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в прозрачном напитке Яблочный сок проявлял осаждение уже через 3 дня. Для 25 мкг/мл раствора смеси противомикробных гликолипидов в мутном напитке Апельсиновый лимонад безоапсная стабилизация может быть достигнута в течение 28 дней посредством добавления 1000 мкг/мл гидроксипропил-бета-циклодекстрина, тогда как количества 500 мкг/мл гидроксипропил-бета-циклодекстрина очевидно все еще не являются достаточными из-за наблюдаемого увеличения мутности и осаждения через 7 дней. Как продемонстрировано в Примере 9, чистый 25 мкг/мл раствор смеси противомикробных гликолипидов в мутном напитке Апельсиновый лимонад проявлял осаждение уже через 3 дня.
Пример 13: Тест на сохранение при заражении смеси противомикробных гликолипидов в комбинации со стабилизатором композиции в выбранных напитках
Случай 1: Volvic Juicy Sommerfrüchte (фруктовый напиток; 10% сока)
а) Начальные эксперименты показали, что добавление смеси противомикробных гликолипидов согласно настоящему изобретению (далее также обозначается как "AGL") в этот фруктовый напиток приводит к небольшим несовместимостям в отношении внешнего вида напитка.
Наблюдаемые эффекты несовместимости были далее увеличены, когда эксперимент повторили при 6°С (т.е. условия холодильника).
b) Однако, когда фруктовый напиток, содержащий 5 или 10 мкг/мл AGL, подвергали нагрузке путем добавления определенных микроорганизмов, портящих пищу, было показано, что протестированные концентрации AGL безопасно предотвращают порчу напитка. В композициях напитков не обнаружено жизнеспособных микроорганизмов после 28-дневного периода инокуляции при комнатной температуре.
Тест на сохранение при заражении провели следующим образом:
Напиток был испорчен смесью из трех дрожжей или трех плесеней. Дрожжевая смесь: Saccharomyces cerevisiae, Zygosaccharomyces rouxii, Zygosaccharomyces bailii. Смесь плесени: Aspergillus niger, Byssochlamys nivea, Penicillium roqueforti. Смесь гликолипидов добавляли к напитку в различных концентрациях, а затем ее инокулировали либо дрожжами, либо смесью плесени с концентрацией 100 колониеобразующих единиц (КОЕ) на мл для любой из смесей. Инкубацию проводили в течение 28 часов при комнатной температуре, используя стерильные центрифужные пробирки (50 мл), закрытые навинчивающейся крышкой и наполненные 40 мл напиток, в качестве сосуда. Пробирки регулярно проверяли визуально для оценки физической совместимости, а также роста микробов. Через 28 дней рост микробов определяли путем подсчета колоний на чашках с агаром, инкубированных в течение 72 ч со 100 мл каждого образца напитка.
с) Чтобы преодолеть ограниченную совместимость AGL в этом фруктовом напитке, определенные количества альфа-циклодекстрина (a-CD) в качестве стабилизатор композиции добавили, так чтобы получит композицию, проявляющую как физико-химическую, так и противомикробную стабильность.
Параметры тестирования приведены в таблице ниже. Тест на совместимость объединили с тестом на сохранение при заражении, как описано в предшествующем абзаце (часть b).
Несмотря на то, что контроль без консерванта был полностью испорчен дрожжами и плесенью через семь дней при комнатной температуре, микробная порча не была обнаружена в составах, содержащих AGL и a-CD, в течение всего периода испытания 28 дней. Подсчет колоний подтвердил, что в этих препаратах не наблюдалось роста микробов.
Совместимость (то есть отсутствие каких-либо визуальных различий между составами, содержащими AGL, и исходным напитком без AGL) была подтверждена в условиях холодильника (6°С) в течение 28 дней. Визуальной разницы с контролем не наблюдалось.
Таким образом, объединение AGL с a-CD в качестве стабилизатора композиции обеспечивает безопасную консервацию напитка от бактериальной порчи.
Случай 2: Schweppes lodian Tonic Water (газированный безалкогольный напиток)
а) Первоначальные эксперименты показали, что добавление AGL в этот газированный безалкогольный напиток приводит к небольшой несовместимости в отношении внешнего вида напитка. В частности, мутность напитка слегка возрастает с концентрацией AGL.
В условиях холодильника (6°С) совместимость оказалась хуже из-за образования частиц.
b) тест на сохранение при заражении (тот же метод и условия как для случая 1: Volvic Juicy Sommerfrüchte) показало, что все протестированные концентрации AGL (5, 10, 25 мкг/мл) безопасно предотвращали порчу напитка. Несмотря на то, что внешний вид изменился, как описано в разделе а), микробного роста не произошло. Без добавления AGL порча безалкогольного напитка произошла после инкубации в течение 14 дней при комнатной температуре.
c) Добавление a-CD в качестве стабилизатора композиции стабилизировало состав напитка и поддерживало противомикробную активность AGL. Это было подтверждено повторением теста на сохранение при заражении с использованием концентраций, как указано в следующей таблице.
Несмотря на то, что контроль без консерванта был полностью испорчен дрожжами и плесенью через 14 дней при комнатной температуре, микробный рост не был обнаружен в составах, содержащих AGL и a-CD, в течение всего периода испытания 28 дней. Подсчет колоний подтвердил, что в этих препаратах не наблюдалось роста микробов.
Совместимость (то есть отсутствие каких-либо визуальных различий между составами, содержащими AGL, и исходным напитком без AGL) была подтверждена в условиях холодильника (6°С) в течение 28 дней. Визуальной разницы с контролем не наблюдалось.
Таким образом, объединение AGL с a-CD в качестве стабилизатора композиции обеспечивает безопасную консервацию напитка от бактериальной порчи.
Случай 3: Прозрачный яблочный сок
а, b) Первоначальные эксперименты показали, что добавление 5 мкг/мл AGL (или более высоких концентраций) в прозрачный яблочный сок надежно защищало от роста микробов в тесте на сохранение при заражении, как было показано ранее (случай 1, раздел b). Однако добавление AGL к яблочному соку также провоцировало образование тонких отложений (при 5 мкг/мл AGL) или мутных частиц (при 5 и 10 мкг/мл AGL).
с) Добавление a-CD в качестве стабилизатора композиции стабилизировало композицию напитка и поддерживало противомикробную активность AGL. Это было подтверждено повторением теста на сохранение при заражении с использованием концентраций, как указано в следующей таблице.
Несмотря на то, что контроль без консерванта был полностью испорчен дрожжами и плесенью через 2 дня при комнатной температуре, микробный рост не был обнаружен в составах, содержащих AGL и a-CD, в течение всего периода испытания 28 дней. Подсчет колоний подтвердил, что в этих препаратах не наблюдалось роста микробов.
Совместимость (то есть отсутствие каких-либо визуальных различий между составами, содержащими AGL, и исходным напитком без AGL) была подтверждена в условиях холодильника (6°С) в течение 28 дней. Визуальной разницы с контролем не наблюдалось.
Таким образом, объединение AGL с a-CD в качестве стабилизатора композиции обеспечивает безопасную консервацию напитка от бактериальной порчи.
Сравнение альфа-циклодекстрина с полисорбатом 60:
Предпочтительные стабилизаторы композиции полисорбаты и циклодекстрины были далее исследованы в отношении их практического применения при применении в напитках, а также их надежности в использовании. Результаты собраны в следующей таблице:
* указывает на эффект при применении стабилизации смесей противомикробных гликолипидов в напитке при условии, что стабилизатор композиции совместим с напитком при применении без смесей противомикробных гликолипидов
** указывает, совместим ли стабилизатор композиции при применении с напитком без смесей противомикробных гликолипидов
Хотя полисорбаты демонстрируют хороший стабилизирующий эффект композиции продуктов на основе воды при консервации гликолипидами, полисорбаты имеют определенные недостатки в обращении и растворимости. Кроме того, надежность для использования в напитках ограничена из-за наблюдаемого ограничения совместимости. Следовательно, циклодекстрины, в частности альфа-циклодекстрин, представляются превосходными в качестве широко применяемого и надежного стабилизатора композиции для консервации продуктов на основе воды со смесями противомикробных гликолипидов.
Изобретение относится к перорально потребляемому продукту на основе воды, содержащему один или более противомикробных гликолипидов и один или более стабилизаторов композиции. Предложенный продукт содержит: (i) гликолипидный компонент, содержащий по меньшей мере один противомикробный гликолипид согласно общей формуле (II) 
,
и/или его физиологически приемлемую соль, и (ii) компонент для образования композиции, содержащий по меньшей мере один стабилизатор композиции, выбранный из группы альфа-циклодекстрина, бета-циклодекстрина, полисорбата 60 и полисорбата 80. Cодержание гликолипидов (II) составляет от 3 до 100 ч. на млн по массе от общей массы продукта. Удельное массовое соотношение общей массы всех стабилизаторов к общей массе всех противомикробных гликолипидов составляет от 20:1 до 2,5:1. При этом количество стабилизаторов в продукте не превышает 500 ч. на млн. Изобретение позволяет получать стабильный в течение длительного периода времени перорально потребляемый продукт на основе воды с высокой противомикробной активностью в отношении микроорганизмов, вызывающих порчу или разрушение указанного продукта, например газированных или негазированных напитков, алкогольных и безалкогольных напитков. 22 з.п. ф-лы, 61 табл., 13 пр.
1. Перорально потребляемый продукт на основе воды, эффективный против микроорганизмов, ответственных за порчу или разрушение перорально потребляемых продуктов, содержащий
(i) гликолипидный компонент, содержащий по меньшей мере один противомикробный гликолипид согласно общей формуле (II)
где
s равно 1 или 2;
t равно 6 или 7;
R1 означает -Н или -ОН;
R2 означает -Н или -C1-С6-алкил; и
R3, R4, R5, R6 и R7 независимо друг от друга означают -Н или -С(=O)С1-С6-алкил,
и/или его физиологически приемлемую соль; и
(ii) компонент для образования композиции, содержащий по меньшей мере один стабилизатор композиции, выбранный из группы альфа-циклодекстрина, бета-циклодекстрина, полисорбата 60 и полисорбата 80;
где содержание гликолипидов согласно общей формуле (II) находится в интервале от 3 до 100 ч. на млн по массе на основе общей массы перорально потребляемого продукта на основе воды и
где удельное массовое соотношение указанного компонента для образования композиции и указанного гликолипидного компонента находится в интервале от 20:1 до 2,5:1 на основе общей массы всех противомикробных гликолипидов согласно общей формуле (II) в перорально потребляемом продукте на основе воды и на основе общей массы всех стабилизаторов композиции в перорально потребляемом продукте на основе воды и где количество стабилизаторов композиции не превышает 500 ч. на млн в перорально потребляемом продукте на основе воды.
2. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, где удельное массовое соотношение указанного циклодекстрина и указанного гликолипидного компонента находится в интервале от 10:1 до 5:1.
3. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, где удельное массовое соотношение указанного циклодекстрина и указанного гликолипидного компонента находится в интервале от 5:1 до 2,5:1.
4. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, где по меньшей мере один из R3, R4, R5, R6 и R7 означает -С(=O)С1-С6-алкил.
5. Перорально потребляемый продукт по п. 1, где по меньшей мере один противомикробный гликолипид выбирают из соединений (II-А) - (II-D)
и их физиологически приемлемых солей и их смесей.
6. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 5, где по меньшей мере один противомикробный гликолипид представляет собой соединение (II-A) или его физиологически приемлемые соли.
7. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, где гликолипидный компонент содержит смесь более чем одного противомикробного гликолипида согласно общей формуле (I).
8. Перорально потребляемый продукт на основе воды по любому из пп. 1-7, где гликолипидный компонент содержит смесь более чем одного противомикробного гликолипида согласно общей формуле (II).
9. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 8, где гликолипидный компонент содержит смесь
- первого противомикробного гликолипида согласно общей формуле (II), имеющего номинальную молекулярную массу ~970 Да;
- второго противомикробного гликолипида согласно общей формуле (II), имеющего номинальную молекулярную массу ~1012 Да; и
- третьего противомикробного гликолипида согласно общей формуле (II), имеющего номинальную молекулярную массу ~1054 Да.
10. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 8, где
- относительное массовое содержание первого противомикробного гликолипида согласно общей формуле (II) находится в интервале от 30 до 50 мас. %,
- относительное массовое содержание второго противомикробного гликолипида согласно общей формуле (II) находится в интервале от 20 до 50 мас. %,
- относительное массовое содержание третьего противомикробного гликолипида согласно общей формуле (II) находится в интервале от 5 до 10 мас. %
относительно общей массы всех противомикробных гликолипидов, которые содержатся в гликолипидном компоненте.
11. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, который выбирают из газированных напитков, негазированных напитков, алкогольных напитков и безалкогольных напитков.
12. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, где содержание гликолипидного компонента находится в интервале от 0,0005 до 0,01 мас. % на основе общей массы перорально потребляемого продукта на основе воды.
13. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, где содержание компонента для образования композиции находится в интервале от 0,0012 до 0,05 мас. % на основе общей массы перорально потребляемого продукта на основе воды.
14. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, который имеет значение рН в интервале 3,0±1,5.
15. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, который имеет значение рН в интервале 4,0±1,5.
16. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, который имеет значение рН в интервале 5,0±1,5.
17. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, который имеет значение рН в интервале 6,0±1,5.
18. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, который имеет мутность в интервале от 0 до 10 NTU.
19. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, где содержание гликолипидного компонента находится в интервале от 3 до 25 мг/л.
20. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, где содержание компонента для образования композиции находится в интервале от 10 до 200 мг/л.
21. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, который имеет мутность более чем 10 NTU.
22. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, где содержание гликолипидного компонента находится в интервале от 10 до 100 мг/л.
23. Перорально потребляемый продукт на основе воды по п. 1, который выбирают из соков и фруктовых напитков с содержанием фруктов >50%.
| WO 2012167920 A1, 13.12.2012 | |||
| NISHIDA, F., et al | |||
| "Structure elucidation of glykenin glycosidic antibiotics from Basidiomycetes sp | |||
| V | |||
| High-performance liquid chromatographic separation of components of glykenin", Journal of Chromatography A, 1994, 664 (2), 195-202 | |||
| NISHIDA, F., et al | |||
| "Structure Elucidation of Glycosidic Antibiotics, Glykenins |
