КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ИНАКТИВАЦИИ ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ БАКТЕРИЙ И БАКТЕРИАЛЬНЫХ СПОР И СПОСОБЫ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 2023 года по МПК A23L3/34 A23L3/3463 A23L3/3472 A23L3/3508 A23L33/105 A23L2/44 

Перекрестная ссылка на родственную заявку

Настоящая заявка испрашивает приоритет предварительной заявки США №62/695867, поданной 10 июля 2019 года, и ее преимущества. Содержание данной заявки включено в настоящую заявку посредством ссылки.

Уровень техники

Грамположительные бактерии представляют собой потенциальную угрозу, поскольку они ассоциированы с заболеваниями человека и порчей пищевых продуктов. Определенные роды грамположительных бактерий, такие как Bacillus и Clostridium, способны формировать высокоустойчивые покоящиеся структуры, которые называются спорами. Уникальные характеристики спор делают их потенциально единственными контаминантами, которые выживают и растут в определенных пищевых продуктах, прошедших промышленную обработку, например, в пастеризованных пищевых продуктах. Например, споры Alicyclobacillus spp являются единственными организмами, которые выживают при пастеризации фруктовых соков и которые способны к росту в среде таких соков с кислым pH. Грамположительные бактерии не только вызывают порчу продуктов питания, но также могут быть патогенными для людей. Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, а также спорообразующие микроорганизмы, Bacillus cereus и Clostridium botulinum, представляют существенную угрозу для пищевой промышленности.

Описание

Авторы настоящего изобретения обнаружили, что определенная композиция, полученная из смолы, полученной из видов растения Copaifera, способна не только контролировать грамположительные бактерии в целом, но также, к удивлению, контролировать рост спор таких бактерий. Более того, в отличие от смол, полученных из видов Copaifera, которые являются непригодными к применению в производстве пищевой продукции, поскольку придают пищевым продуктам горький вкус, предложенные здесь композиции можно применять, например, для контроля грамположительных бактерий, в том числе спорообразующих грамположительных бактерий, без придания подобного вкуса. Настоящая композиция, ее производство и применение более подробно описаны ниже.

Было обнаружено, что композиция, заявленная в настоящем документе, убивает грамположительные бактерии, ассоциированные с порчей пищевых продуктов, в том числе грамположительные патогены, такие как Listeria monocytogenes, Bacillus cereus и метициллин-резистентный Staphylococcus aureus (MRSA). Также было обнаружено, что композиция убивает грамположительные бактерии в виде спор. Спорообразующие бактерии создают особые проблемы для пищевой промышленности. Существует явная ассоциация между передающимися через почву спорообразующими бактериями и контаминацией пищевых продуктов. Такие спорообразующие микроорганизмы принадлежат как к строго анаэробным (“клостридии”), так и к аэробным (род Bacillus и близкие к нему роды) филогенетическим группам микроорганизмов. Предложено несколько причин для объяснения того, почему спорообразующие микроорганизмы стали проблемой в пищевой промышленности, и большинство объяснений связаны с некоторыми общими характеристиками спор: их повсеместное присутствие в почве; их резистентность к тепловому воздействию во время общих промышленных процессов, таких как пастеризация; адгезионные характеристики определенных спор, упрощающие их прикрепление к обрабатывающему оборудованию; и/или их способность к прорастанию и росту в благоприятных условиях.

Координированные характеристики спор и вегетативных клеток у определенных передающихся через почву видов делают их потенциально единственными контаминантами, которые выживают и растут в определенных пищевых продуктах, прошедших промышленную обработку. Некоторые из них начали вызывать беспокойство только недавно, что могло произойти в результате увеличения толерантности, адаптации или резистентности спор либо вегетативных клеток определенных спорообразующих видов к условиям или обработкам, которые, как предполагалось ранее, должны были либо остановить рост (низкие температуры или низкие значения pH), либо инактивировать весь живой материал (ультравысокотемпературная обработка, УВТ (UHT) и коммерческая стерилизация).

Спорообразующие бактерии вызывают две разновидности проблем в пищевой промышленности. Во-первых, они могут являться пищевыми патогенами, как, например Bacillus cereus и Clostridium botulinum. Во-вторых, даже если подобные спорообразующие бактерии не являются патогенами сами по себе, они могут вызывать уменьшение срока годности и порчу пищевого продукта. На микробную порчу пищевого продукта обычно указывают изменения текстуры или развитие посторонних привкусов. Показательным примером являются споры Alicyclobacillus, рода вредоносных бактерий, которые вызывают контаминацию соков и других питьевых продуктов, не поддающихся с легкостью контаминации другими микроорганизмами по причине высокого содержания кислоты. На протяжении пяти десятилетий с тех пор, как в 1967 году был выделен первый вид Alicyclobacillus, бактерии Alicyclobacillus стали существенным поводом для беспокойства в мировой промышленности по производству соков и напитков. Данные спорообразующие бактерии могут выживать при коммерчески применяемых процессах пастеризации, а также могут прорастать в кислой среде. К настоящему времени данная разновидность бактерий была выделена из множества разновидностей соков и питьевых продуктов, а также практически из всех сегментов линий производства соков и напитков. На сегодняшний день потребность в безопасных и высококачественных соках и питьевых продуктах продолжает быстро увеличиваться по всему миру. При этом, особенно в условиях развития производителей соков и напитков, контаминация бактериями Alicyclobacillus стала существенным поводом для беспокойства и сложной задачей. Порча фруктового сока бактериями Alicyclobacillus характеризуется отчетливым посторонним привкусом лекарства или антисептика, причиной которого является гваякол, побочный продукт метаболизма данной бактерии.

В пищевом сырье могут появляться как патогенные, так и вызывающие порчу бактерии, однако тепловая обработка обычно приводит к резкому снижению бактериальных нагрузок. По окончании обработки большинство пищевых продуктов подвергается риску повторной контаминации перед упаковкой, распространением и конечным потреблением, когда пищевые продукты могут подвергаться воздействию патогенов в помещениях пищевого производства. Что касается холодоустойчивых патогенов, преимущественно различных видов Listeria и Bacillus cereus, таковые могут расти на пищевом продукте в процессе его распространения и хранения вплоть до конечного потребления. Чем больше подобных патогенов растет на пищевом продукте, тем выше риск инфицирования среди потребителей данного пищевого продукта. Это вызывает особое беспокойство касательно мясных изделий, готовых к употреблению, и молочной продукции, поскольку потребитель не нагревает эти пищевые продукты и не подвергает их повторной обработке перед употреблением. К таких случаях наиболее вероятный риск исходит от видов Listeria, которые хорошо растут при охлаждении.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения, предложена композиция, содержащая (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен (БКФ), причем отношение указанных кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты, копаловой кислоты и 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, если таковая присутствует, взятых вместе, к указанному бета-кариофиллену, если бета-кариофиллен присутствует, составляет по меньшей мере 1:1 по массе. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция содержит 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция по существу не содержит БКФ.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты, копаловой кислоты и 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, если таковая присутствует, взятых вместе, к бета-кариофиллену составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1, по меньшей мере 2,5:1, по меньшей мере 2,6:1, по меньшей мере 2,7:1, по меньшей мере 2,8:1, по меньшей мере 2,9:1 либо по меньшей мере 3,0:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты, копаловой кислоты и 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, если таковая присутствует, взятых вместе, к бета-кариофиллену составляет не более чем 100:1 по массе. Согласно некоторым вариантам реализации, отношение указанных кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты, копаловой кислоты и 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, если таковая присутствует, взятых вместе, к указанному бета-кариофиллену составляет не более чем 90:1, не более чем 80:1, не более чем 70:1, не более чем 60:1, не более чем 50:1, не более чем 40:1 не более чем 30:1, не более чем 20:1, не более чем 10:1, не более чем 9:1, не более чем 8:1, не более чем 7:1, не более чем 6:1, не более чем 5:1, не более чем 4:1 либо не более чем 3:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, 7-альфа-ацетоксихардвиковая кислота составляет по меньшей мере 7% масс.от количества 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе. Согласно некоторым вариантам реализации, 7-альфа-ацетоксихардвиковая кислота составляет по меньшей мере 10% масс.от количества 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе.

Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus.

Согласно некоторым вариантам реализации, композиция по существу не содержит гексан и дихлорметан.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения, также предложен способ получения композиции, указанной выше, причем композиция обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно концентрации 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, в смоле копайбы, полученной из Copaifera; причем способ включает экстрагирование смолы, полученной из Copaifera, смесью воды и этанола и сбор верхней фракции, полученной в результате экстракции, с получением указанной композиции. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus.

Согласно некоторым вариантам реализации, указанная смола копайбы получена из Copaifera officinalis.

Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1:1 по массе. Согласно некоторым вариантам реализации, отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1, по меньшей мере 2,5:1, по меньшей мере 2,6:1, по меньшей мере 2,7:1, по меньшей мере 2,8:1, по меньшей мере 2,9:1 либо по меньшей мере 3:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение этанола к воде в смеси составляет не более чем 4:1, не более чем 3,9:1, не более чем 3,8:1, не более чем 3,7:1, не более чем 3,6:1, не более чем 3,5:1, не более чем 3,4:1, не более чем 3,3:1, не более чем 3,2:1 либо не более чем 3,1:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, смесь этанола и воды содержит NaOH в концентрации от 0,01 до 0,125 моль/л. Согласно некоторым вариантам реализации, концентрация NaOH составляет по меньшей мере 0,02 моль/л, по меньшей мере 0,03 моль/л, по меньшей мере 0,04 моль/л, по меньшей мере 0,05 моль/л, по меньшей мере 0,06 моль/л, по меньшей мере 0,07 моль/л, по меньшей мере 0,08 моль/л, по меньшей мере 0,09 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л либо по меньшей мере 1,2 моль/л.

Согласно некоторым вариантам реализации, смесь этанола и воды содержит HCl в концентрации от 0,01 до 0,25 моль/л. Согласно некоторым вариантам реализации, концентрация HCl составляет по меньшей мере 0,1 моль/л, по меньшей мере 0,2 моль/л, по меньшей мере 0,3 моль/л, по меньшей мере 0,4 моль/л, по меньшей мере 0,5 моль/л, по меньшей мере 0,6 моль/л, по меньшей мере 0,7 моль/л, по меньшей мере 0,8 моль/л, по меньшей мере 0,9 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л, по меньшей мере 1,2 моль/л либо по меньшей мере 0,125 моль/л.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3,5:1, по меньшей мере 4:1, по меньшей мере 4,5:1, по меньшей мере 5:1, по меньшей мере 5,5:1 либо по меньшей мере 6:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, способ дополнительно включает удаление по меньшей мере некоторой части воды и этанола из собранной верхней фракции.

Согласно некоторым вариантам реализации, верхняя фракция содержит кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1:1 по массе. Согласно некоторым вариантам реализации, отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1 либо по меньшей мере 2,5:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, способ дополнительно включает хроматографическое отделение остаточного БКФ от дитерпенов, присутствующих в верхней фракции, и сбор дитерпенов.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения, также предложен способ получения композиции, которая является активной в отношении спор Alicyclobacillus и обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно концентрации БКФ в смоле копайбы, полученной из Copaifera, причем способ включает экстрагирование смолы, полученной из Copaifera, смесью воды и этанола и сбор верхней фракции, полученной в результате экстракции. В данном контексте термин “активный в отношении спор Alicyclobacillus” означает, что при добавлении композиции в концентрации 5 мкг/мл к образцу яблочного сока, который обладает мутностью не более чем 1 нефелометрическая единица мутности (NTU), при измерении в соответствии со стандартом 180.1 Агентства по охране окружающей среды (АООС) (опубликован в августе 1993 года), и содержит 10⁴ спор Alicyclobacillus на мл, при дальнейшем поддержании температуры 37°C композиция предотвращает повторный рост Alicyclobacillus на протяжении по меньшей мере четырех дней, что определяется путем измерения оптической плотности при 600 нм.

Согласно некоторым вариантам реализации, указанная смола копайбы получена из Copaifera officinalis.

Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1:1 по массе. Согласно некоторым вариантам реализации, отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1, по меньшей мере 2,5:1, по меньшей мере 2,6:1, по меньшей мере 2,7:1, по меньшей мере 2,8:1, по меньшей мере 2,9:1 либо по меньшей мере 3:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение этанола к воде в смеси составляет не более чем 4:1, не более чем 3,9:1, не более чем 3,8:1, не более чем 3,7:1, не более чем 3,6:1, не более чем 3,5:1, не более чем 3,4:1, не более чем 3,3:1, не более чем 3,2:1 либо не более чем 3,1:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, смесь этанола и воды содержит NaOH в концентрации от 0,01 до 0,125 моль/л. Согласно некоторым вариантам реализации, концентрация NaOH составляет по меньшей мере 0,02 моль/л, по меньшей мере 0,03 моль/л, по меньшей мере 0,04 моль/л, по меньшей мере 0,05 моль/л, по меньшей мере 0,06 моль/л, по меньшей мере 0,07 моль/л, по меньшей мере 0,08 моль/л, по меньшей мере 0,09 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л либо по меньшей мере 1,2 моль/л.

Согласно некоторым вариантам реализации, смесь этанола и воды содержит HCl в концентрации от 0,01 до 0,25 моль/л. Согласно некоторым вариантам реализации, концентрация HCl составляет по меньшей мере 0,1 моль/л, по меньшей мере 0,2 моль/л, по меньшей мере 0,3 моль/л, по меньшей мере 0,4 моль/л, по меньшей мере 0,5 моль/л, по меньшей мере 0,6 моль/л, по меньшей мере 0,7 моль/л, по меньшей мере 0,8 моль/л, по меньшей мере 0,9 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л, по меньшей мере 1,2 моль/л либо по меньшей мере 0,125 моль/л.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3,5:1, по меньшей мере 4:1, по меньшей мере 4,5:1, по меньшей мере 5:1, по меньшей мере 5,5:1 либо по меньшей мере 6:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, способ дополнительно включает удаление по меньшей мере некоторой части воды и этанола из собранной верхней фракции.

Согласно некоторым вариантам реализации, верхняя фракция содержит кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1:1 по массе. Согласно некоторым вариантам реализации, отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1 либо по меньшей мере 2,5:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, способ дополнительно включает хроматографическое отделение остаточного БКФ от дитерпенов, присутствующих в верхней фракции, и сбор дитерпенов.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения, также предложена композиция, полученная путем экстракции согласно настоящему описанию, т.е. способом, включающим экстрагирование смолы, полученной из Copaifera, смесью воды и этанола и сбор верхней фракции, полученной в результате экстракции. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно БКФ в смоле копайбы, полученной из Copaifera. Согласно некоторым вариантам реализации, указанная смола копайбы получена из Copaifera officinalis.

Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1:1 по массе. Согласно некоторым вариантам реализации, отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1, по меньшей мере 2,5:1, по меньшей мере 2,6:1, по меньшей мере 2,7:1, по меньшей мере 2,8:1, по меньшей мере 2,9:1 либо по меньшей мере 3:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение этанола к воде в смеси составляет не более чем 4:1, не более чем 3,9:1, не более чем 3,8:1, не более чем 3,7:1, не более чем 3,6:1, не более чем 3,5:1, не более чем 3,4:1, не более чем 3,3:1, не более чем 3,2:1 либо не более чем 3,1:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, смесь этанола и воды содержит NaOH в концентрации от 0,01 до 0,125 моль/л. Согласно некоторым вариантам реализации, концентрация NaOH составляет по меньшей мере 0,02 моль/л, по меньшей мере 0,03 моль/л, по меньшей мере 0,04 моль/л, по меньшей мере 0,05 моль/л, по меньшей мере 0,06 моль/л, по меньшей мере 0,07 моль/л, по меньшей мере 0,08 моль/л, по меньшей мере 0,09 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л либо по меньшей мере 1,2 моль/л.

Согласно некоторым вариантам реализации, смесь этанола и воды содержит HCl в концентрации от 0,01 до 0,25 моль/л. Согласно некоторым вариантам реализации, концентрация HCl составляет по меньшей мере 0,1 моль/л, по меньшей мере 0,2 моль/л, по меньшей мере 0,3 моль/л, по меньшей мере 0,4 моль/л, по меньшей мере 0,5 моль/л, по меньшей мере 0,6 моль/л, по меньшей мере 0,7 моль/л, по меньшей мере 0,8 моль/л, по меньшей мере 0,9 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л, по меньшей мере 1,2 моль/л либо по меньшей мере 0,125 моль/л.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3,5:1, по меньшей мере 4:1, по меньшей мере 4,5:1, по меньшей мере 5:1, по меньшей мере 5,5:1 либо по меньшей мере 6:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, способ дополнительно включает удаление по меньшей мере некоторой части воды и этанола из собранной верхней фракции.

Согласно некоторым вариантам реализации, верхняя фракция содержит кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1:1 по массе. Согласно некоторым вариантам реализации, отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1 либо по меньшей мере 2,5:1 по массе.

Согласно некоторым вариантам реализации, способ дополнительно включает хроматографическое отделение остаточного БКФ от дитерпенов, присутствующих в верхней фракции, и сбор дитерпенов.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения, также предложен способ, причем способ включает добавление к напитку композиции, содержащей (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту и копаловую кислоту, и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен, согласно настоящему описанию. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 4 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 3 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 2 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 1 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, способ предназначен для усиления эффективности пастеризации напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно концентрации БКФ в смоле копайбы, полученной из Copaifera. Согласно некоторым вариантам реализации, указанная смола копайбы получена из Copaifera officinalis. Согласно некоторым вариантам реализации, отношение 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к бета-кариофиллену, если бета-кариофиллен присутствует, составляет по меньшей мере 1:1 по массе. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиции дают возможность контактировать с напитком на протяжении по меньшей мере двух дней, по меньшей мере трех дней, по меньшей мере четырех дней либо по меньшей мере пяти дней. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку перед пастеризацией. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку после пастеризации. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является кислым. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток обладает значением pH в диапазоне от 3 до 6. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является фруктовым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является яблочным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является виноградным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является персиковым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является арбузным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является осветленным апельсиновым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является композицией, описанной выше. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция была получена способом, описанным в настоящем документе выше.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения, также предложен способ, включающий добавление к напитку композиции, которая была получена путем экстрагирования смолы Copaifera смесью воды и этанола и сбора верхней фракции, полученной в результате экстракции, с получением указанной композиции. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 4 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность данного напитка составляет не более чем 3 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 2 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 1 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, способ предназначен для усиления эффективности пастеризации напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, способ предназначен для контроля роста грамположительных бактерий, в том числе спор грамположительных бактерий, в напитке. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно концентрации БКФ в смоле копайбы, полученной из Copaifera. Согласно некоторым вариантам реализации, указанная смола копайбы получена из Copaifera officinalis. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция содержит (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен. Согласно некоторым вариантам реализации, отношение 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к бета-кариофиллену, если бета-кариофиллен присутствует, составляет по меньшей мере 1:1 по массе. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиции дают возможность контактировать с напитком на протяжении по меньшей мере двух дней, по меньшей мере трех дней, по меньшей мере четырех дней либо по меньшей мере пяти дней. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку перед пастеризацией. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку после пастеризации. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является кислым. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является фруктовым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является яблочным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является виноградным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является персиковым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является арбузным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является осветленным апельсиновым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является композицией, описанной выше. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция была получена способом, описанным в настоящем документе выше.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения, также предложен напиток в контейнере, причем напиток содержит композицию, содержащую (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен, согласно настоящему описанию. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является прозрачным напитком. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 4 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 3 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 2 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 1 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция присутствует в напитке в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является кислым. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является фруктовым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является яблочным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является виноградным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является персиковым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является арбузным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является осветленным апельсиновым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является композицией, описанной выше. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция была получена способом, описанным в настоящем документе выше.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения, также предложен напиток в контейнере, причем напиток содержит композицию, которая была получена путем экстрагирования смолы Copaifera смесью воды и этанола и сбора верхней фракции, полученной в результате экстракции, с получением указанной композиции. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является прозрачным напитком. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 4 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 3 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность данного напитка составляет не более чем 2 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 1 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция содержит (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен, согласно настоящему описанию. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция присутствует в напитке в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является кислым. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является фруктовым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является яблочным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является виноградным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является персиковым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является арбузным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является осветленным апельсиновым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является композицией, описанной выше. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция была получена способом, описанным в настоящем документе выше.

Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения, также предложен способ контроля роста грамположительных бактерий, в том числе спор грамположительных бактерий, в напитке, включающий добавление к напитку композиции, содержащей (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен, согласно настоящему описанию. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является прозрачным напитком. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 4 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 3 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 2 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, мутность напитка составляет не более чем 1 NTU. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка. Согласно некоторым вариантам реализации, композиции дают возможность контактировать с напитком на протяжении по меньшей мере двух дней, по меньшей мере трех дней, по меньшей мере четырех дней либо по меньшей мере пяти дней. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку перед пастеризацией. Согласно некоторым вариантам реализации, композицию добавляют к напитку после пастеризации. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является кислым. Согласно некоторым вариантам реализации, напиток является фруктовым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является яблочным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является виноградным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является персиковым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является арбузным соком. Согласно некоторым вариантам реализации, фруктовый сок является осветленным апельсиновым соком. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция является композицией, описанной выше. Согласно некоторым вариантам реализации, композиция была получена способом, описанным в настоящем документе выше.

Краткое описание чертежей

Варианты реализации настоящего изобретения станут более понятны в совокупности с фигурами, на которых:

На фигуре 1A показаны профили элюирования при высокоэффективной жидкостной хроматографии, ВЭЖХ (HPLC) для необработанной смолы копайбы и верхнего экстракта, полученного из него; на фигуре 1B показаны профили элюирования при ВЭЖХ для верхнего и нижнего экстрактов, полученных из необработанной смолы копайбы;

На фигуре 2 показан профиль элюирования при ВЭЖХ для экстракта, полученного из смолы копайбы;

На фигуре 3 показаны профили элюирования при ВЭЖХ для экстракта, полученного из смолы копайбы при повышающихся значениях pH;

На фигуре 4 показаны профили элюирования при ВЭЖХ для экстракта, полученного из смолы копайбы при снижающихся значениях pH;

На фигуре 5 показаны профили элюирования при ВЭЖХ для экстракта, полученного из смолы копайбы, с семью основными пиками, помеченными как 1-7;

На фигуре 6 показанa масс-спектрометрия материала, соответствующего пику 3 на фигуре 5;

На фигуре 7 показанa масс-спектрометрия материала, соответствующего пику 3 на фигуре 5 после метилирования;

На фигуре 8 показанa масс-спектрометрия некоторого материала, соответствующего пику 4 на фигуре 5 после метилирования;

На фигуре 9 показанa масс-спектрометрия некоторого материала, соответствующего пику 4 на фигуре 5 после метилирования;

На фигуре 10 показанa масс-спектрометрия материала, соответствующего пику 6 на фигуре 5 после метилирования;

На фигуре 11 показанa масс-спектрометрия материала, соответствующего пику 7 на фигуре 5 после метилирования;

На фигуре 12 показанa масс-спектрометрия материала, соответствующего пику 7 на фигуре 5 после метилирования;

На фигуре 13 показано влияние фракции 1 на рост четырех спорообразующих бактериальных штаммов, что определяется путем измерения оптической плотности при 600 нм;

На фигуре 14 показано влияние фракции 1 на споры Alicyclobacillus acidoterrestris в коммерческом яблочном соке, что определяется путем измерения оптической плотности при 600 нм;

На фигуре 15 показано влияние фракции 1 на на штамм DP-L861 Listeria monocytogenes в среде Brain Heart Infusion, что определяется путем измерения оптической плотности при 600 нм; и

На фигуре 16 показаны профили элюирования при ВЭЖХ для верхних экстрактов, полученных из различных источников необработанной смолы копайбы.

Подробное обсуждение

Как уже отмечалось, согласно одному варианту реализации настоящего изобретения, предложен способ получения композиции, которая является активной в отношении спор Alicyclobacillus и обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена относительно смолы копайбы, полученной из Copaifera. Способ включает экстрагирование смолы, полученной из Copaifera, смесью воды и этанола. Как правило, смесь этанола и воды будет содержать от 50% до 80% этанола по массе, и на объем смолы Copaifera будет использовано от одного до десяти объемов смеси. Пример такой экстракции представлен ниже. Когда фазам предоставляют достаточно времени, чтобы разделиться (обычно около 20 минут), в результате образуются две фракции: верхняя фракция и нижняя фракция. Обнаружено, что верхняя фракция, иногда называемая в настоящем документе “фракция 1”, убивает грамположительные бактерии, включая бактериальные патогены, ассоциированные с пищевыми продуктами, такие как Listeria monocytogenes, Bacillus cereus и метициллин-резистентный Staphylococcus aureus, а также убивает бактерии в виде спор.

Анализ фракции 1, подробно представленный ниже, свидетельствует о том, что она содержит пять различных антибактериальных дитерпеновых соединений: 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту и копаловую кислоту. Это позволяет предположить, что возможность развития у какой-либо бактерии резистентности против фракции 1 чрезвычайно низкая. Дополнительно было обнажено, что фракция 1 является устойчивой к нагреванию и остается активной после термообработки при 121°C на протяжении 15 минут.

Благодаря этой устойчивости к нагреванию, рассматриваемые композиции можно добавлять к фруктовым сокам и другим прозрачным напиткам перед пастеризацией с целью избежать прорастания спор, выживших в условиях пастеризации, хотя и добавление после пастеризации также возможно. Обнаружено, что вмешивание композиции в напиток способствует эффективности композиции, и ожидается, что при ее применении в промышленном масштабе будут задействованы подходящие средства перемешивания - либо в случае добавления композиции к напитку непрерывным образом, например, по мере того как напиток проходит по трубопроводу, либо в случае порционного добавления композиции. Часто, когда напитки получают в промышленном масштабе, концентрат напитка вмешивают в воду, иногда с дополнительными ингредиентами, и после этого подвергают пастеризации. Композицию, согласно вариантам реализации настоящего изобретения, можно добавлять к напитку на протяжении этой фазы вмешивания, так чтобы композиция вмешивалась в напиток; в данном случае добавление композиции на этом этапе представляет собой добавление композиции к напитку, а полученная смесь представляет собой напиток, к которому добавили композицию. Также следует принимать во внимание, что композицию можно добавить к большому количеству напитка, например, в чан, содержащий несколько сотен или даже тысяч литров напитка, либо ее можно добавить в индивидуальные контейнеры, содержащие напиток, например, в бутылку, картонную упаковку или другую упаковку, содержащую, например, 2000, 1000, 500, 330 или 250 мл напитка.

В данном случае, когда упоминается прозрачный напиток, это означает, что (a) мутность напитка составляет не более чем 3 нефелометрические единицы мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года, содержание которого полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки. Наряду с осветленными фруктовыми соками, таким как осветленный яблочный сок, осветленный виноградный сок, осветленный персиковый сок, осветленный арбузный сок, прозрачные напитки включают, например, холодные чаи, соответствующие данному критерию мутности, и подслащенные напитки, которые в настоящее время представлены на рынке в Израиле как “фруктовая вода”. Эти напитки в целом являются кислыми и содержат сахар, например, фруктозу, которая может служить питательным веществом для бактерий. Таким образом, пример подобного напитка содержит 94% воды, фруктозу, ароматизаторы, цитрат натрия и пищевые кислоты, такие как фосфорная кислота и лимонная кислота.

Следующие далее примеры представляют собой иллюстрацию вариантов реализации настоящего изобретения.

Пример 1: жидкость-жидкостная экстракция масла из Copaifera officinalis

Смолы копайбы или копайские бальзамы (также иногда называемые копайскими маслами) получают путем сбора сока из стволов деревьев, принадлежащих к роду Copaifera. Данные смолы обладают характерным запахом смолы и ароматным, горьким, острым вкусом. Фармакологические исследования продемонстрировали, что смолы копайбы обладают противомикробной активностью. Данные смолы состоят преимущественно из сесквитерпенов, придающих свой характерный запах и вкус, и дитерпенов, обладающих противомикробной активностью. Определенный сесквитерпен, бета-кариофиллен, является наиболее часто встречающейся молекулой в составе смол копайбы, составляя приблизительно 40 процентов от смол по массе. В настоящих примерах применялась смола, полученная из Copaifera officinalis, выращенной в северной Бразилии, в штатах Акри (AC), Амазонас (AM), Пара (PA) и Рондония (RO).

75% этанол в воде смешали с необработанной смолой копайбы, полученной из Copaifera officinalis, в соотношении 5:1 этанол/вода к смоле копайбы по массе на 20 минут.Полученной смеси предоставили возможность отстояться, пока не сформировались две отчетливые фазы; обычно было достаточно временного промежутка от двух до двенадцати часов. Нижняя фаза имела желтый цвет, близкий к цвету необработанного копайского масла, а верхняя фаза (называемая в дальнейшем “фракция 1”) была прозрачной и бесцветной. Как будет пояснено ниже, относительно необработанной смолы, фракция 1 обогащена дитерпенами и содержит относительно малые количества сесквитерпенов. Удаление этанола и воды из фракции 1 указало на то, что на каждый использованный грамм необработанной смолы извлекли около 250 мг материала.

Аналогичные результаты получили при проведении масштабно расширенной процедуры: 1000 г смолы Copaifera officinalis экстрагировали при помощи 5 литров 75% этанола в воде путем смешивания жидкостей на протяжении 30 минут, а затем предоставили им возможность отстояться на протяжении нескольких часов, чтобы достичь разделения фаз. Удаление растворителей из верхней фазы позволило получить 25 г материала.

Аналогичные результаты получили в случае применения смолы копайбы, полученной из других источников Copaifera.

Пример 2:

Каждый из образцов необработанной смолы копайбы, фракции 1 и нижней фракции (10 мг/мл) подвергли обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии, ОФ-ВЭЖХ (RP-HPLC) с применением системы Dionex UltiMate 3000 (компания Thermo Scientific) на колонке Luna Phenomenex C-18 (4,6 x 250 мм). Образцы растворили в 90% ацетонитриле в воде с 1% фосфорной кислотой и вводили при скорости потока 1 мл/мин. Температура колонки составляла 22°C, а детектирование осуществлялось при 210 нм. Конечные условия, примененные для аналитической ВЭЖХ, были следующими:

Время % 90% ацетонитрила в воде
с 1% фосфорной кислотой % воды 0 100 0 20 минут 90 10 70 минут 90 10

Результаты, представленные на фигуре 1, показали, что, относительно необработанной смолы и относительно нижней фракции, фракция 1 была обогащена материалами, которые элюировали в первые 20 минут, и обеднена материалами, которые элюировали после этого. На данной фигуре и на всех остальных фигурах, на которых показаны профили элюирования, числа по осям обозначают время в минутах.

Профиль элюирования для материала, полученного при проведении масштабно расширенной экстракции, описанной выше, был практически таким же, что показано на фигуре 2.

На фигуре 16 показан профиль элюирования при ВЭЖХ для верхних фаз, полученных при таких же условиях экстракции и при таких же условиях ВЭЖХ, как те, что применялись в случае с Copaifera officinalis, но экстрагированных из смолы других видов Copaifera.

Пример 3: влияние значения pH

Обнаружено, что увеличение значения pH экстракционной смеси путем добавления NaOH, вплоть до концентрации NaOH 0,125 моль/л, способствовало увеличению выхода фракции 1, в то время как профиль элюирования при ОФ-ВЭЖХ сохранялся аналогичным при условиях, описанных в примере 2, как показано на фигуре 3.

Уменьшение значения pH экстракционной смеси путем добавления HCl, вплоть до концентрации HCl 0,25 моль/л, также способствовало увеличению выхода фракции 1 и значительно уменьшило присутствие в ней бета-кариофиллена, как показано в профиле элюирования при ОФ-ВЭЖХ, полученном при условиях, описанных в примере 2, как показано на фигуре 4.

Пример 4: Идентификация главных компонентов фракции 1

Семь главных компонентов фракции 1 (см. фигуру 5) были идентифицированы следующим образом:

Прежде всего, из фракции 1 собрали некоторое количество каждого компонента при помощи полупрепаративной ОФ-ВЭЖХ с применением системы Dionex UltiMate 3000 и колонки Luna Phenomenex C-18 (10 x 250 мм). Каждый образец растворили в 90% ацетонитриле в воде с 0,05% муравьиной кислотой и вводили при скорости потока 5 мл/мин. Температура колонки составляла 22°C, а детектирование осуществлялось при 210 нм. Конечные условия, примененные для полупрепаративной ВЭЖХ, были следующими:

Время % 90% ацетонитрила в воде
с 0,05% муравьиной кислотой % воды 0 100 0 20 минут 90 10 70 минут 90 10

Затем каждую собранную фракцию очистили при помощи ОФ-ВЭЖХ, как описано в примере 2. Эти семь фракций исследовали на предмет активности в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris, как описано ниже. Соединения в составе четырех наиболее активных из этих фракций идентифицировали с применением масс-спектрометрии и ядерного магнитного резонанса (ЯМР) следующим образом:

Пик 3: Выделенное соединение подвергли масс-спектрометрии, МС (MS), которая показала основной компонент с отношением массы к заряду (масса/заряд), равным 397,15 [M+Na]⁺(см. фигуру 6). Согласно точной массе, 374,22 г/моль, спрогнозировали следующую молекулярную формулу: C₂₂H₃₀O₆.

После метилирования данного соединения с применением триметилсилилдиазометана (ТМС-диазометан, процедура описана Hashimoto и соавт., Chem. Pharm. Bull. 1981, 29, 1475-1478), данное метилированное соединение подвергли газовой хроматографии-МС (ГХ-МС). Анализ картины фрагментации при МС/МС показал минорный пик со значением масса/заряд, равным 388,22 (соответствующий метилированной молекуле) и дочерний пик со значением масса/заряд, равным 346,21 (см. фигуру 7).

Анализ ¹H - ¹³C и двухмерная ядерная магнитно-резонансная спектроскопия (2D-ЯМР) данной свободной кислоты (см. приведенную ниже таблицу, которая представляет результаты ¹³C-ЯМР) привели к определению структуры молекулы. Обнаружено, что выделенное вещество является 7-α-ацетоксихардвиковой кислотой.

Пик 4:

Материал в этой фракции метилировали с применением ТМС-диазометана. Анализ метилированного материала методом ГХ-МС (условия, указанные ниже, применимы к данному примеру и к другим примерам в настоящем описании) показал, что данный изолированный пик ВЭЖХ фактически содержит два соединения. Первый пик на ГХ-МС хроматограмме (время удержания составляет 26,9 минут) обладал следующей картиной фрагментации: масса/заряд 332, 273, 237, 205, 177, 96 (см. фигуру 8); картина фрагментации соответствует метиловому эфиру кролехиновой кислоты. Второй пик детектировался на 27,1 минуты и продемонстрировал следующую картину фрагментации: масса/заряд 330, 283, 235, 203, 139, 96 (см. фигуру 9). Посредством сопоставления со спектрами в базе данных Национального института стандартов и технологий данное соединение идентифицировали как метил хардвикат, метиловый эфир хардвиковой кислоты. Дополнительно, согласно точным массам двух соответствующих метиловых эфиров, 332,2346 г/моль и 330,2189 г/моль, спрогнозированные молекулярные формулы данных метилированных соединений были соответственно C₂₁H₃₂O₃ и C₂₁H₃₀O₃. Спрогнозированные структуры данных свободных кислот подтвердили при помощи ¹H, ¹³C и 2D-ЯМР, см. непосредственно следующую таблицу, которая предоставляет данные для смеси кролехиновой кислоты и хардвиковой кислоты в приблизительном молярном соотношении 3:7.

Положение ¹³C ЯМР
δ_с (м.д.) ¹H ЯМР
δ_H (м.д.) Положение ¹³C ЯМР
δ_с (м.д.) ¹H ЯМР
δ_H (м.д.) 1 17,6 1,30-182 12 18,33 2,12-2,27
2,27-2,37 2 27,64 2,12-2,27
2,27-2,37 13 125,73 3 140,31 6,85 14 111,14 6,26 4 141,36 15 142,88 7,35 5 37,75 16 138,54 7,20 6 35,96 2,43, 1,17 17 16,18 0,84 7 27,42 130-1,82 18 170,80 8 36,40 1,30-1,82 19 20,6 1,26 9 38,96 20 18,44 0,76 10 46,82 1,30-1,82 Растворитель (CDCl₃) 77,16 7,26 11 38,76 1,30-1,82

Таким образом, выделенная фракция, соответствующая пику 4, содержит смесь кролехиновой кислоты и хардвиковой кислоты в соотношении приблизительно 1:2, соответственно.

Газовый хроматограф: Agilent GC 7890B, впускное отверстие для образцов ГХ (источник подачи - пробоотборник PAL, объем пробы 1 микролитр), начальная температура термостата 50°C, время удержания 3 минуты, повышение 10°C в минуту до 280°C, время удержания 10 минут, повышение 20°C в минуту до 300°C, время удержания 7 минут, режим впускного отверстия SS - с делением потока, газ-носитель - гелий, температура нагревателя 250°C, коэффициент деления потока 10:1, разделенный поток 10 мл в минуту, температура передаточной линии 280°C, Agilent DB-Sms DuraGuard 30 м x 250 микрометров x 0,25 микрометра (+10 м защитная колонка), поток 1 мл в минуту.

Масс-спектрометрия: спектрометр Agilent 7200 Q-TOF, режим ионизации - электронная ионизация, ЭИ (EI), температура источника 230°C, энергия ЭИ 70 электрон-вольт (эВ), температура квадруполя 150°C, задержка на выход растворителя 5 минут, диапазон масс 40-700 атомных единиц массы (а.е.м.), частота сбора данных 5 спектров в секунду, порог 100 импульсов счета.

Пик 6:

Фракцию, соответствующую пику 6, метилировали с применением ТМС-диазометана. Анализ метилированного соединения методом ГХ-МС позволил получить картину фрагментации при МС, которая демонстрировала молекулярный ион со значением масса/заряд, равным 318, что соответствовало формуле C₂₁H₃₄O₂ (см. фигуру 10). Анализ ¹H - ¹³C и спектры 2D-ЯМР (см. таблицу ниже) данного неметилированного соединения и сопоставление их со значениями, указанными в литературных источниках (Pacheco, Molecules 2009, 14(3), сс.1245 1262; Salah, J. Agr. & Food Chem. 2003, 51(26), сс.7607-7610) указали на то, что выделенное соединение является колавеновой кислотой.

Положение ¹H ЯМР
δ_H (м.д.) ¹³C ЯМР
δ_с (м.д.) ¹³C ЯМР
δс (м.д.), Ref^{(2) 13}C ЯМР
δс (м.д.), Ref⁽³⁾ Растворитель CDCl₃ CDCl₃ CDCl₃ CDCl₃ 1 18,45 17,3 18,7 2 27,59 27,5 27,3 3 5,19 (t) 120,55 120,5 120,8 4 144,61 144,5 144,8 5 38,91 38,3 38,6 6 36,4 36,4 37,2 7 27,02 26,9 27,8 8 36,4 36,4 36,7 9 38,33 38,4 39,2 10 46,62 46,6 46,9 11 35,03 35,0 35,3 12 36,91 36,9 36,7 13 / 164,4 164,9 14 5,7 (s) / 114,9 115,1 15 / 172,0 171,9 16 2,17 (s) 19,57 19,5 19,8 17 0,81 (s) 16,1 15,9 16,3 18 1,59 (s) 18,14 18,3 18,3 19 1,00 (s) 20,08 20,0 20,3 20 0,73 (s) 18,43 17,9 18,6

Пик 7:

Фракцию, соответствующую пику 7, метилировали с применением ТМС-диазометана. Анализ метилированного соединения методом ГХ-МС позволил получить картину фрагментации при МС, которая демонстрировала молекулярный ион со значением масса/заряд, равным 318,25 (см. фигуру 11), что позволило предположить молекулярную формулу C₂₁H₃₄O₂. Посредством сопоставления полученной картины фрагментации с данными Национального института стандартов и технологий (НИСТ) определили, что она соответствует метилу копалата, метиловому эфиру копаловой кислоты. Данный результат подтвердили при помощи жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Данная картина фрагментации показала основной пик со значением масса/заряд, равным 607, что соответствует депротонированному димеру копаловой кислоты (см. фигуру 12).

Пример 5: Сопоставление относительных количеств компонентов в необработанной смоле копайбы и фракции 1

При помощи аналитической ОФ-ВЭЖХ, описанной выше, с применением программного обеспечения Chromeleon 7.0 (компания Thermo Fisher Scientific) с целью вычисления площадей под кривой для полученных пиков, обнаружили следующие относительные количества каждой из пяти кислот, перечисленных здесь выше, и бета-кариофиллена; тем не менее следует принимать во внимание, что данные числа представляют собой только приблизительное значение относительных количеств этих шести компонентов:

Соединение % в необработанной копайской олеосмоле % во фракции 1 7-α-ацетоксихардвиковая кислота 1,02 3,65 Хардвиковая кислота+кролехиновая кислота 2,79 6,03 Колавеновая кислота 4,14 6,89 копаловая кислота 9,07 15,51 бета-кариофиллен 33,94 12,58

Следует принимать во внимание, что, с учетом настоящего раскрытия изобретения, ОФ-ВЭЖХ можно применять для определения пригодности данного образца смолы Copaifera для экстракции с целью получения композиции согласно настоящему описанию.

Пример 6: исследование фракций, собранных в примере 4

Фракции, собранные в примере 4, а также фракцию 1 и низин, консервирующий агент, повсеместно применяемый в настоящее время в промышленности, исследовали на предмет активности путем инкубации с Alicyclobacillus acidoterrestris (номер в каталоге JCM 21547, коллекция культур IAM №15086) в яблочном соке на протяжении промежутков времени, указанных в приведенной ниже таблице. Минимальную ингибирующую концентрацию, МИК (MIC) определили путем измерения оптической плотности при 600 нм и путем подсчета колониеобразующих единиц, КОЕ (CFU) следующим образом: после четырех дней инкубации при температуре 37°C для образцов сока провели серийное разведение с шагом увеличения в 10 раз (10-кратно, 100-кратно, 1000-кратно и т.д.) и высеяли их на картофельно-декстрозный агар, КДА (PDA). Планшеты инкубировали при 45°C на протяжении по меньшей мере 48 часов, а затем колонии подсчитали, чтобы определить КОЕ/мл. Найденные значения МИК указаны в данной таблице.

Образец МИК (мкг/мл) в 100% яблочном соке
2 дня инкубации МИК (мкг/мл) в 100% яблочном соке
3 дня инкубации МИК (мкг/мл) в 100% яблочном соке
5 дней инкубации МИК (мкг/мл) в 100% яблочном соке
7 дней инкубации Фракция 1 1,25 1,25 1,25 1,25 1 5 5 5 5 2 Нет активности Нет активности Нет активности Нет активности 3 2,5 5 5 5 4 1,25 1,25 1,25 1,25 5 5 5 5 5 6 1,25 1,25 1,25 1,25 7 1,25 1,25 1,25 1,25 Низин 10 10 Нет активности Нет активности

Пример 7

Фракцию 1 испытывали в отношении четырех спорообразующих бактериальных штаммов: Bacillus cereus, Bacillus lichenformis, Bacillus megaterium и Bacillus subtilis (PY79). Споры данных штаммов (10⁴ спор/мл) инициировали к оживлению путем инокуляции их в бульон Луриа-Бертани, ЛБ (LB) при 37°C. По прошествии одного часа добавили фракцию 1 в концентрации, равной 5 мкг фракции 1 на мл бульона. Поглощение при оптической плотности 600 нм (ОП600) свидетельствует о росте. Из фигуры 13 явствует, что, в сопоставлении с необработанными спорами (контроль), обработанные споры были убиты фракцией 1, на что указывает уменьшение ОП600.

Пример 8

Фракцию 1 испытывали в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris (JCM 21547) в коммерческом яблочном соке. Сок дополнили фракцией 1 в концентрации 5 мкг/мл, контаминировали путем добавления 10⁴ спор/мл и инкубировали при 37°C. Фракция 1 блокировала прорастание спор Alicyclobacillus acidoterrestris, на что указывало измерение ОП600 по прошествии семи дней, см. фигуру 14.

Для сравнения, неаобработанная смола копайбы, из которой получили фракцию 1, достиг аналогичного уровня активности только в концентрации 20 микрограмм/мл.

Фракции, показанные на фигуре 16, исследовали аналогичным образом, и все они проявили активность в отношении Alicyclobacillus acidoterrestris.

Фракцию 1 также исследовали на предмет активности в Alicyclobacillus acidoterrestris в других прозрачных напитках, и она оказалась активной.

Пример 9

Фракцию 1 испытывали в отношении штамма DP-L861 Listeria monocytogenes в среде Brain Heart Infusion при 4°C. Культуру развели до достижения значения ОП600, равного 0,05, обработали фракцией 1 в концентрации 15 мкг/мл и инкубировали при 4°C на протяжении 7 дней. Фракция 1 блокировала рост Listeria monocytogenes при температуре охлаждения, что определяется путем ОП600, см. фигуру 15.

Таким образом, согласно изобретательскому замыслу 1, предложена композиция, содержащая (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен (БКФ), причем отношение указанных кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты, копаловой кислоты и 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, если таковая присутствует, взятых вместе, к указанному бета-кариофиллену, если бета-кариофиллен присутствует, составляет по меньшей мере 1:1 по массе.

Изобретательский замысел 2. Композиция по изобретательскому замыслу 1, которая содержит 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту.

Изобретательский замысел 3. Композиция по изобретательскому замыслу 1 или 2, которая по существу не содержит БКФ.

Изобретательский замысел 4. Композиция по любому из изобретательских замыслов 1-3, отличающаяся тем, что отношение кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты, копаловой кислоты и 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, если таковая присутствует, взятых вместе, к бета-кариофиллену составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1, по меньшей мере 2,5:1, по меньшей мере 2,6:1, по меньшей мере 2,7:1, по меньшей мере 2,8:1, по меньшей мере 2,9:1 либо по меньшей мере 3,0:1 по массе.

Изобретательский замысел 5. Композиция по любому из изобретательских замыслов 1-4, отличающаяся тем, что отношение кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты, копаловой кислоты и 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, если таковая присутствует, взятых вместе, к бета-кариофиллену составляет не более чем 100:1 по массе.

Изобретательский замысел 6. Композиция по изобретательскому замыслу 5, отличающаяся тем, что отношение указанных кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты, копаловой кислоты и 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, если таковая присутствует, взятых вместе, к указанному бета-кариофиллену составляет не более чем 90:1, не более чем 80:1, не более чем 70:1, не более чем 60:1, не более чем 50:1, не более чем 40:1 не более чем 30:1, не более чем 20:1, не более чем 10:1, не более чем 9:1, не более чем 8:1, не более чем 7:1, не более чем 6:1, не более чем 5:1, не более чем 4:1 либо не более чем 3:1 по массе.

Изобретательский замысел 7. Композиция по любому из изобретательских замыслов 1-6, отличающаяся тем, что 7-альфа-ацетоксихардвиковая кислота составляет по меньшей мере 7% масс.от количества 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе.

Изобретательский замысел 8. Композиция по изобретательскому замыслу 7, отличающаяся тем, что 7-альфа-ацетоксихардвиковая кислота составляет по меньшей мере 10% масс.от количества 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе.

Изобретательский замысел 9. Композиция по любому из изобретательских замыслов 1-8, отличающаяся тем, что композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus.

Изобретательский замысел 10. Композиция по любому из изобретательских замыслов 1-9, отличающаяся тем, что композиция по существу не содержит гексан и дихлорметан.

Согласно изобретательскому замыслу 11, также предложен способ получения композиции по любому из изобретательских замыслов 1-10, причем композиция обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно концентрации 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, в смоле копайбы, полученной из Copaifera; причем способ включает экстрагирование смолы, полученной из Copaifera, смесью воды и этанола и сбор верхней фракции, полученной в результате экстракции, с получением указанной композиции.

Изобретательский замысел 12. Способ по изобретательскому замыслу 11, характеризующийся тем, что композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus.

Изобретательский замысел 13. Способ по изобретательскому замыслу 11 или 12, характеризующийся тем, что указанная смола копайбы получена из Copaifera officinalis.

Изобретательский замысел 14. Способ по любому из изобретательских замыслов 11-13, характеризующийся тем, что композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris.

Изобретательский замысел 15. Способ по любому из изобретательских замыслов 11-14, характеризующийся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1:1 по массе.

Изобретательский замысел 16. Способ по изобретательскому замыслу 15, характеризующийся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1, по меньшей мере 2,5:1, по меньшей мере 2,6:1, по меньшей мере 2,7:1, по меньшей мере 2,8:1, по меньшей мере 2,9:1 либо по меньшей мере 3:1 по массе.

Изобретательский замысел 17. Способ по любому из изобретательских замыслов 11-16, характеризующийся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет не более чем 4:1, не более чем 3,9:1, не более чем 3,8:1, не более чем 3,7:1, не более чем 3,6:1, не более чем 3,5:1, не более чем 3,4:1, не более чем 3,3:1, не более чем 3,2:1 либо не более чем 3,1:1 по массе.

Изобретательский замысел 18. Способ по любому из изобретательских замыслов 11-17, характеризующийся тем, что смесь этанола и воды содержит NaOH в концентрации от 0,01 до 0,125 моль/л.

Изобретательский замысел 19. Способ по изобретательскому замыслу 18, характеризующийся тем, что концентрация NaOH составляет по меньшей мере 0,02 моль/л, по меньшей мере 0,03 моль/л, по меньшей мере 0,04 моль/л, по меньшей мере 0,05 моль/л, по меньшей мере 0,06 моль/л, по меньшей мере 0,07 моль/л, по меньшей мере 0,08 моль/л, по меньшей мере 0,09 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л либо по меньшей мере 1,2 моль/л.

Изобретательский замысел 20. Способ по любому из изобретательских замыслов 11-17, характеризующийся тем, что смесь этанола и воды содержит HCl в концентрации от 0,01 до 0,25 моль/л.

Изобретательский замысел 21. Способ по изобретательскому замыслу 20, характеризующийся тем, что концентрация HCl составляет по меньшей мере 0,1 моль/л, по меньшей мере 0,2 моль/л, по меньшей мере 0,3 моль/л, по меньшей мере 0,4 моль/л, по меньшей мере 0,5 моль/л, по меньшей мере 0,6 моль/л, по меньшей мере 0,7 моль/л, по меньшей мере 0,8 моль/л, по меньшей мере 0,9 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л, по меньшей мере 1,2 моль/л либо по меньшей мере 0,125 моль/л.

Изобретательский замысел 22. Способ по любому из изобретательских замыслов 11-21, характеризующийся тем, что отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3:1 по массе.

Изобретательский замысел 23. Способ по изобретательскому замыслу 23, характеризующийся тем, что отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3,5:1, по меньшей мере 4:1, по меньшей мере 4,5:1, по меньшей мере 5:1, по меньшей мере 5,5:1 либо по меньшей мере 6:1 по массе.

Изобретательский замысел 24. Способ по любому из изобретательских замыслов 11-23, характеризующийся тем, что способ дополнительно включает удаление по меньшей мере некоторой части воды и этанола из собранной верхней фракции.

Изобретательский замысел 25. Способ по любому из изобретательских замыслов 11-24, характеризующийся тем, что верхняя фракция содержит кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1:1 по массе.

Изобретательский замысел 26. Способ по изобретательскому замыслу 25, характеризующийся тем, что отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1 либо по меньшей мере 2,5:1 по массе.

Изобретательский замысел 27. Способ по любому из изобретательских замыслов 11-26, характеризующийся тем, что способ дополнительно включает хроматографическое отделение остаточного БКФ от дитерпенов, присутствующих в верхней фракции, и сбор дитерпенов.

Согласно изобретательскому замыслу 28, также предложен способ получения композиции, которая является активной в отношении спор Alicyclobacillus и обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно концентрации БКФ в смоле копайбы, полученной из Copaifera, причем способ включает экстрагирование смолы, полученной из Copaifera, смесью воды и этанола и сбор верхней фракции, полученной в результате экстракции. В данном контексте термин “активный в отношении спор Alicyclobacillus” означает, что при добавлении композиции в концентрации 5 мкг/мл к образцу яблочного сока, который обладает мутностью не более чем 1 нефелометрическая единица мутности (NTU), при измерении в соответствии со стандартом 180.1 АООС (опубликован в августе 1993 года), и содержит 10⁴ спор Alicyclobacillus на мл, при дальнейшем поддержании температуры 37°C композиция предотвращает повторный рост Alicyclobacillus на протяжении по меньшей мере четырех дней, что определяется путем измерения оптической плотности при 600 нм.

Изобретательский замысел 29. Способ по изобретательскому замыслу 28, характеризующийся тем, что указанная смола копайбы получена из Copaifera officinalis.

Изобретательский замысел 30. Способ по изобретательскому замыслу 28 или 29, характеризующийся тем, что композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris.

Изобретательский замысел 31. Способ по любому из изобретательских замыслов 28-30, характеризующийся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1:1 по массе.

Изобретательский замысел 32. Способ по изобретательскому замыслу 31, характеризующийся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1:1, по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1, по меньшей мере 2,5:1, по меньшей мере 2,6:1, по меньшей мере 2,7:1, по меньшей мере 2,8:1, по меньшей мере 2,9:1 либо по меньшей мере 3:1 по массе.

Изобретательский замысел 33. Способ по любому из изобретательских замыслов 28-32, характеризующийся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет не более чем 4:1, не более чем 3,9:1, не более чем 3,8:1, не более чем 3,7:1, не более чем 3,6:1, не более чем 3,5:1, не более чем 3,4:1, не более чем 3,3:1, не более чем 3,2:1 либо не более чем 3,1:1 по массе.

Изобретательский замысел 34. Способ по любому из изобретательских замыслов 28-33, характеризующийся тем, что смесь этанола и воды содержит NaOH в концентрации от 0,01 до 0,125 моль/л.

Изобретательский замысел 35. Способ по изобретательскому замыслу 34, характеризующийся тем, что концентрация NaOH составляет по меньшей мере 0,02 моль/л, по меньшей мере 0,03 моль/л, по меньшей мере 0,04 моль/л, по меньшей мере 0,05 моль/л, по меньшей мере 0,06 моль/л, по меньшей мере 0,07 моль/л, по меньшей мере 0,08 моль/л, по меньшей мере 0,09 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л либо по меньшей мере 1,2 моль/л.

Изобретательский замысел 36. Способ по любому из изобретательских замыслов 28-33, характеризующийся тем, что смесь этанола и воды содержит HCl в концентрации от 0,01 до 0,25 моль/л.

Изобретательский замысел 37. Способ по изобретательскому замыслу 36, характеризующийся тем, что концентрация HCl составляет по меньшей мере 0,1 моль/л, по меньшей мере 0,2 моль/л, по меньшей мере 0,3 моль/л, по меньшей мере 0,4 моль/л, по меньшей мере 0,5 моль/л, по меньшей мере 0,6 моль/л, по меньшей мере 0,7 моль/л, по меньшей мере 0,8 моль/л, по меньшей мере 0,9 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л, по меньшей мере 1,2 моль/л либо по меньшей мере 0,125 моль/л.

Изобретательский замысел 38. Способ по любому из изобретательских замыслов 28-37, характеризующийся тем, что отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3:1 по массе.

Изобретательский замысел 39. Способ по изобретательскому замыслу 38, характеризующийся тем, что отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3,5:1, по меньшей мере 4:1, по меньшей мере 4,5:1, по меньшей мере 5:1, по меньшей мере 5,5:1 либо по меньшей мере 6:1 по массе.

Изобретательский замысел 40. Способ по любому из изобретательских замыслов 28-39, характеризующийся тем, что способ дополнительно включает удаление по меньшей мере некоторой части воды и этанола из собранной верхней фракции.

Изобретательский замысел 41. Способ по любому из изобретательских замыслов 28-40, характеризующийся тем, что верхняя фракция содержит кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1:1 по массе.

Изобретательский замысел 42. Способ по изобретательскому замыслу 41, характеризующийся тем, что отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1 либо по меньшей мере 2,5:1 по массе.

Изобретательский замысел 43. Способ по любому из изобретательских замыслов 28-42, характеризующийся тем, что способ дополнительно включает хроматографическое отделение остаточного БКФ от дитерпенов, присутствующих в верхней фракции, и сбор дитерпенов.

Согласно изобретательскому замыслу 44, также предложена композиция, полученная путем экстракции согласно настоящему описанию, т.е. способом, включающим экстрагирование смолы, полученной из Copaifera, смесью воды и этанола и сбор верхней фракции, полученной в результате экстракции.

Изобретательский замысел 45. Композиция по изобретательскому замыслу 44, отличающаяся тем, композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus.

Изобретательский замысел 46. Композиция по изобретательскому замыслу 44 или 45, отличающаяся тем, что композиция обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно БКФ в смоле копайбы, полученной из Copaifera.

Изобретательский замысел 47. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-46, отличающаяся тем, что указанная смола копайбы получена из Copaifera officinalis.

Изобретательский замысел 48. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-47, отличающаяся тем, что композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris.

Изобретательский замысел 49. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-48, отличающаяся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1:1 по массе.

Изобретательский замысел 50. Композиция по изобретательскому замыслу 49, отличающаяся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1, по меньшей мере 2,5:1, по меньшей мере 2,6:1, по меньшей мере 2,7:1, по меньшей мере 2,8:1, по меньшей мере 2,9:1 либо по меньшей мере 3:1 по массе.

Изобретательский замысел 51. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-50, отличающаяся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет не более чем 4:1, не более чем 3,9:1, не более чем 3,8:1, не более чем 3,7:1, не более чем 3,6:1, не более чем 3,5:1, не более чем 3,4:1, не более чем 3,3:1, не более чем 3,2:1 либо не более чем 3,1:1 по массе.

Изобретательский замысел 52. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-51, отличающаяся тем, что смесь этанола и воды содержит NaOH в концентрации от 0,01 до 0,125 моль/л.

Изобретательский замысел 53. Композиция по изобретательскому замыслу 52, отличающаяся тем, что концентрация NaOH составляет по меньшей мере 0,02 моль/л, по меньшей мере 0,03 моль/л, по меньшей мере 0,04 моль/л, по меньшей мере 0,05 моль/л, по меньшей мере 0,06 моль/л, по меньшей мере 0,07 моль/л, по меньшей мере 0,08 моль/л, по меньшей мере 0,09 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л либо по меньшей мере 1,2 моль/л.

Изобретательский замысел 54. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-51, отличающаяся тем, что смесь этанола и воды содержит HCl в концентрации от 0,01 до 0,25 моль/л.

Изобретательский замысел 55. Композиция по изобретательскому замыслу 54, отличающаяся тем, что концентрация HCl составляет по меньшей мере 0,1 моль/л, по меньшей мере 0,2 моль/л, по меньшей мере 0,3 моль/л, по меньшей мере 0,4 моль/л, по меньшей мере 0,5 моль/л, по меньшей мере 0,6 моль/л, по меньшей мере 0,7 моль/л, по меньшей мере 0,8 моль/л, по меньшей мере 0,9 моль/л, по меньшей мере 1,0 моль/л, по меньшей мере 1,1 моль/л, по меньшей мере 1,2 моль/л либо по меньшей мере 0,125 моль/л.

Изобретательский замысел 56. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-55, отличающаяся тем, что отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3:1 по массе.

Изобретательский замысел 57. Композиция по изобретательскому замыслу 56, отличающаяся тем, что отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3,5:1, по меньшей мере 4:1, по меньшей мере 4,5:1, по меньшей мере 5:1, по меньшей мере 5,5:1 либо по меньшей мере 6:1 по массе.

Изобретательский замысел 58. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-57, отличающаяся тем, что способ дополнительно включает удаление по меньшей мере некоторой части воды и этанола из собранной верхней фракции.

Изобретательский замысел 59. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-58, отличающаяся тем, что верхняя фракция содержит кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1:1 по массе.

Изобретательский замысел 60. Композиция по изобретательскому замыслу 59, отличающаяся тем, что отношение указанных 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1 либо по меньшей мере 2,5:1 по массе.

Изобретательский замысел 61. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-60, отличающаяся тем, что способ дополнительно включает хроматографическое отделение остаточного БКФ от дитерпенов, присутствующих в верхней фракции, и сбор дитерпенов.

Изобретательский замысел 61.1. Композиция по любому из изобретательских замыслов 44-60 отличающаяся тем, что композиция по существу не содержит гексан и дихлорметан.

Согласно изобретательскому замыслу 62, также предложен способ, при этом способ включает добавление к напитку композиции, содержащей (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен.

Изобретательский замысел 63. Способ по изобретательскому замыслу 62, характеризующийся тем, что композиция является композицией, указанной в любом из изобретательских замыслов 1-10 или 44-61.1.

Изобретательский замысел 64. Способ по изобретательскому замыслу 62 или 63, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года.

Изобретательский замысел 65. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-64, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 4 NTU.

Изобретательский замысел 66. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-65, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 3 NTU.

Изобретательский замысел 67. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-66, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 2 NTU.

Изобретательский замысел 68. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-67, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 1 NTU.

Изобретательский замысел 69. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-68, характеризующийся тем, что способ предназначен для усиления эффективности пастеризации напитка.

Изобретательский замысел 70. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-69, характеризующийся тем, что композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus.

Изобретательский замысел 71. Способ по изобретательскому замыслу 70, характеризующийся тем, что композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris.

Изобретательский замысел 72. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-71, характеризующийся тем, что композиция обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно концентрации БКФ в смоле копайбы, полученной из Copaifera.

Изобретательский замысел 73. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-72, характеризующийся тем, что указанная смола копайбы получена из Copaifera officinalis.

Изобретательский замысел 74. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-73, характеризующийся тем, что отношение 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к бета-кариофиллену, если бета-кариофиллен присутствует, составляет по меньшей мере 1:1 по массе.

Изобретательский замысел 75. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-74, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 76. Способ по изобретательскому замыслу 75, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 77. Способ по изобретательскому замыслу 76, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 78. Способ по изобретательскому замыслу 77, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 79. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-78, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 80. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-79, характеризующийся тем, что композиции дают возможность контактировать с напитком на протяжении по меньшей мере двух дней, по меньшей мере трех дней, по меньшей мере четырех дней либо по меньшей мере пяти дней.

Изобретательский замысел 81. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-80, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку перед пастеризацией.

Изобретательский замысел 82. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-80, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку после пастеризации.

Изобретательский замысел 83. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-82, характеризующийся тем, что напиток является кислым.

Изобретательский замысел 84. Способ по изобретательскому замыслу 83, характеризующийся тем, что напиток обладает значением pH в диапазоне от 3 до 6.

Изобретательский замысел 85. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-84, характеризующийся тем, что напиток является фруктовым соком.

Изобретательский замысел 86. Способ по изобретательскому замыслу 85, характеризующийся тем, что фруктовый сок является яблочным соком.

Изобретательский замысел 87. Способ по изобретательскому замыслу 85, характеризующийся тем, что фруктовый сок является виноградным соком.

Изобретательский замысел 88. Способ по изобретательскому замыслу 85, отличающийся тем, фруктовый сок является персиковым соком.

Изобретательский замысел 89. Способ по изобретательскому замыслу 85, характеризующийся тем, что фруктовый сок является арбузным соком.

Изобретательский замысел 90. Способ по изобретательскому замыслу 85, характеризующийся тем, что фруктовый сок является осветленным апельсиновым соком.

Изобретательский замысел 91. Способ по любому из изобретательских замыслов 62-90, характеризующийся тем, что композиция была получена способом, описанным в любом из изобретательских замыслов 11-43.

Согласно изобретательскому замыслу 92, также предложен способ, включающий добавление к напитку композиции, которая была получена путем экстрагирования смолы Copaifera смесью воды и этанола и сбора верхней фракции, полученной в результате экстракции, с получением указанной композиции.

Изобретательский замысел 93. Способ по изобретательскому замыслу 92, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года.

Изобретательский замысел 94. Способ по изобретательскому замыслу 93, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 4 NTU.

Изобретательский замысел 95. Способ по изобретательскому замыслу 94, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 3 NTU.

Изобретательский замысел 96. Способ по изобретательскому замыслу 95, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 2 NTU.

Изобретательский замысел 97. Способ по изобретательскому замыслу 96, характеризующийся тем, что мутность данного напитка составляет не более чем 1 NTU.

Изобретательский замысел 98. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-97, характеризующийся тем, что способ предназначен для усиления эффективности пастеризации напитка.

Изобретательский замысел 99. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-97, характеризующийся тем, что способ предназначен для контроля роста грамположительных бактерий, в том числе спор грамположительных бактерий, в напитке.

Изобретательский замысел 100. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-99, характеризующийся тем, что композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris.

Изобретательский замысел 101. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-100, характеризующийся тем, что композиция обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно концентрации БКФ в смоле копайбы, полученной из Copaifera.

Изобретательский замысел 102. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-101, характеризующийся тем, что указанная смола копайбы получена из Copaisera officinalis.

Изобретательский замысел 103. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-102, характеризующийся тем, что композиция содержит (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен.

Изобретательский замысел 104. Способ по изобретательскому замыслу 103, характеризующийся тем, что отношение 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты (если таковая присутствует), кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, к бета-кариофиллену, если бета-кариофиллен присутствует, составляет по меньшей мере 1:1 по массе.

Изобретательский замысел 105. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-104, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 106. Способ по изобретательскому замыслу 105, отличающийся тем, композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 107. Способ по изобретательскому замыслу 106, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 108. Способ по изобретательскому замыслу 107, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 109. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-108, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 110. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-109, характеризующийся тем, что композиции дают возможность контактировать с напитком на протяжении по меньшей мере двух дней, по меньшей мере трех дней, по меньшей мере четырех дней либо по меньшей мере пяти дней.

Изобретательский замысел 111. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-110, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку перед пастеризацией.

Изобретательский замысел 112. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-110, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку после пастеризации.

Изобретательский замысел 113. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-112, характеризующийся тем, что напиток является кислым.

Изобретательский замысел 114. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-113, характеризующийся тем, что напиток является фруктовым соком.

Изобретательский замысел 115. Способ по изобретательскому замыслу 114, характеризующийся тем, что фруктовый сок является яблочным соком.

Изобретательский замысел 116. Способ по изобретательскому замыслу 114, характеризующийся тем, что фруктовый сок является виноградным соком.

Изобретательский замысел 117. Способ по изобретательскому замыслу 114, характеризующийся тем, что фруктовый сок является персиковым соком.

Изобретательский замысел 118. Способ по изобретательскому замыслу 114, отличающийся тем, фруктовый сок является арбузным соком.

Изобретательский замысел 119. Способ по изобретательскому замыслу 114, характеризующийся тем, что фруктовый сок является осветленным апельсиновым соком.

Изобретательский замысел 120. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-119, характеризующийся тем, что композиция является композицией по любому из изобретательских замыслов 1-10 или 44-61.1.

Изобретательский замысел 121. Способ по любому из изобретательских замыслов 92-120, характеризующийся тем, что композиция была получена одним из способов, причем это способ по любому из изобретательских замыслов 11-43.

Согласно изобретательскому замыслу 122, также предложен напиток в контейнере, причем напиток содержит композицию, содержащую (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен, согласно любому из изобретательских замыслов 1-10 или 44-61.1.

Изобретательский замысел 122.1. Напиток по изобретательскому замыслу 122, характеризующийся тем, что композиция содержит 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту.

Изобретательский замысел 123. Напиток по изобретательскому замыслу 122 или 122.1 характеризующийся тем, что напиток является прозрачным напитком.

Изобретательский замысел 124. Напиток по любому из изобретательских замыслов 122-123, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года.

Изобретательский замысел 125. Напиток по изобретательскому замыслу 124, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 4 NTU.

Изобретательский замысел 126. Напиток по изобретательскому замыслу 125, характеризующийся тем, что мутность данного напитка составляет не более чем 3 NTU.

Изобретательский замысел 127. Напиток по изобретательскому замыслу 126, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 2 NTU.

Изобретательский замысел 128. Напиток по изобретательскому замыслу 127, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 1 NTU.

Изобретательский замысел 129. Напиток по любому из изобретательских замыслов 122-128, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 130. Напиток по изобретательскому замыслу 129, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 131. Напиток по изобретательскому замыслу 130, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 132. Напиток по изобретательскому замыслу 131, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 133. Напиток по любому из изобретательских замыслов 122-132, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 134. Напиток по любому из изобретательских замыслов 122-133, характеризующийся тем, что напиток является кислым.

Изобретательский замысел 134.1. Напиток по любому из изобретательских замыслов 122-134, характеризующийся тем, что напиток является фруктовым соком.

Изобретательский замысел 135. Напиток по изобретательскому замыслу 134.1, характеризующийся тем, что фруктовый сок является яблочным соком.

Изобретательский замысел 136. Напиток по изобретательскому замыслу 134.1, характеризующийся тем, что фруктовый сок является виноградным соком.

Изобретательский замысел 136,1. Напиток по изобретательскому замыслу 134.1, характеризующийся тем, что фруктовый сок является персиковым соком.

Изобретательский замысел 137. Напиток по изобретательскому замыслу 134.1, характеризующийся тем, что фруктовый сок является арбузным соком.

Изобретательский замысел 138, Напиток по изобретательскому замыслу 134.1, характеризующийся тем, что фруктовый сок является осветленным апельсиновым соком.

Изобретательский замысел 139. Напиток по любому из изобретательских замыслов 122-138, характеризующийся тем, что композиция является композицией согласно любому из изобретательских замыслов 1-10 или 44-61.1.

Изобретательский замысел 140. Напиток по любому из изобретательских замыслов 122-139, характеризующийся тем, что композиция была получена одним из способов, причем это способ по любому из изобретательских замыслов 11-43.

Согласно изобретательскому замыслу 141, также предложен напиток в контейнере, причем напиток содержит композицию, которая была получена путем экстрагирования смолы Copaifera смесью воды и этанола и сбора верхней фракции, полученной в результате экстракции, с получением указанной композиции.

Изобретательский замысел 142. Напиток согласно изобретательскому замыслу 141, характеризующийся тем, что композиция содержит (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен.

Изобретательский замысел 143. Напиток согласно изобретательскому замыслу 141 или 142, характеризующийся тем, что композиция содержит 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту.

Изобретательский замысел 143.1. Напиток согласно любому из изобретательских замыслов 141-143, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года.

Изобретательский замысел 143.2. Напиток по изобретательскому замыслу 143.1, мутность которого составляет не более чем 4 NTU.

Изобретательский замысел 143,3. Напиток по изобретательскому замыслу 143.2, мутность которого составляет не более чем 3 NTU.

Изобретательский замысел 143.4. Напиток по изобретательскому замыслу 143.3, мутность которого составляет не более чем 2 NTU.

Изобретательский замысел 143.5. Напиток по изобретательскому замыслу 143.4, мутность которого составляет не более чем 1 NTU.

Изобретательский замысел 144. Напиток согласно любому из изобретательских замыслов 141-143.5, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 145. Напиток согласно изобретательскому замыслу 144, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 146. Напиток согласно изобретательскому замыслу 145, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 147. Напиток согласно изобретательскому замыслу 146, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке в концентрации по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 148. Напиток согласно любому из изобретательских замыслов 141-147, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 149. Напиток согласно любому из изобретательских замыслов 141-148, характеризующийся тем, что напиток является кислым.

Изобретательский замысел 150. Напиток согласно любому из изобретательских замыслов 141-149, характеризующийся тем, что напиток является фруктовым соком.

Изобретательский замысел 151. Напиток согласно изобретательскому замыслу 150, характеризующийся тем, что фруктовый сок является яблочным соком.

Изобретательский замысел 152. Напиток согласно изобретательскому замыслу 150, характеризующийся тем, что фруктовый сок является виноградным соком.

Изобретательский замысел 153. Напиток согласно изобретательскому замыслу 150, характеризующийся тем, что фруктовый сок является персиковым соком.

Изобретательский замысел 154. Напиток согласно изобретательскому замыслу 150, характеризующийся тем, что фруктовый сок является арбузным соком.

Изобретательский замысел 155. Напиток согласно изобретательскому замыслу 150, характеризующийся тем, что фруктовый сок является осветленным апельсиновым соком.

Изобретательский замысел 156. Напиток по любому из изобретательских замыслов 141-155, характеризующийся тем, что композиция является композицией согласно любому из изобретательских замыслов 1-10 или 44-61.1.

Изобретательский замысел 157. Напиток по любому из изобретательских замыслов 141-156, характеризующийся тем, что композиция была получена одним из способов, причем это способ по любому из изобретательских замыслов 11-43.

Согласно изобретательскому замыслу 158, также предложен способ контроля роста грамположительных бактерий, в том числе спор грамположительных бактерий, в напитке, включающий добавление к напитку композиции, содержащей (a) кролехиновую кислоту, хардвиковую кислоту, колавеновую кислоту, копаловую кислоту и, необязательно, 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту, и, (b) необязательно, бета-кариофиллен.

Изобретательский замысел 159. Способ по изобретательскому замыслу 158, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 160. Способ по изобретательскому замыслу 159, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 161. Способ по изобретательскому замыслу 160, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 162. Способ по изобретательскому замыслу 161, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 163. Способ по любому из изобретательских замыслов 158-162, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

Изобретательский замысел 164. Способ по любому из изобретательских замыслов 158-163, характеризующийся тем, что композиции дают возможность контактировать с напитком на протяжении по меньшей мере двух дней, по меньшей мере трех дней, по меньшей мере четырех дней либо по меньшей мере пяти дней.

Изобретательский замысел 165. Способ по любому из изобретательских замыслов 158-164, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку перед пастеризацией.

Изобретательский замысел 166. Способ по любому из изобретательских замыслов 158-164, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку после пастеризации.

Изобретательский замысел 167. Способ по любому из изобретательских замыслов 158-166, характеризующийся тем, что напиток является кислым.

Изобретательский замысел 168. Способ по любому из изобретательских замыслов 158-167, характеризующийся тем, что напиток является фруктовым соком.

Изобретательский замысел 169. Способ по изобретательскому замыслу 168, характеризующийся тем, что фруктовый сок является яблочным соком.

Изобретательский замысел 170. Способ по изобретательскому замыслу 168, характеризующийся тем, что фруктовый сок является виноградным соком.

Изобретательский замысел 171. Способ по изобретательскому замыслу 168, характеризующийся тем, что фруктовый сок является персиковым соком.

Изобретательский замысел 172. Способ по изобретательскому замыслу 168, характеризующийся тем, что фруктовый сок является арбузным соком.

Изобретательский замысел 173. Способ по изобретательскому замыслу 168, характеризующийся тем, что фруктовый сок является осветленным апельсиновым соком.

Изобретательский замысел 173.1. Напиток согласно любому из изобретательских замыслов 158-173, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года.

Изобретательский замысел 173.2. Напиток по изобретательскому замыслу 173.1, мутность которого составляет не более чем 4 NTU.

Изобретательский замысел 173.3. Напиток по изобретательскому замыслу 173.2, мутность которого составляет не более чем 3 NTU.

Изобретательский замысел 173.4. Напиток по изобретательскому замыслу 173.3, мутность которого составляет не более чем 2 NTU.

Изобретательский замысел 173.5. Напиток по изобретательскому замыслу 173.4, мутность которого составляет не более чем 1 NTU.

Изобретательский замысел 174. Способ по любому из изобретательских замыслов 158-173.5, характеризующийся тем, что композиция является композицией согласно любому из изобретательских замыслов 1-10 или 44-61.1.

Изобретательский замысел 175. Способ по любому из изобретательских замыслов 158-174, характеризующийся тем, что композиция была получена способом по любому из изобретательских замыслов 11-43.

Группа изобретений относится к пищевой промышленности и может быть использована для контроля грамположительных бактерий, в том числе спорообразующих грамположительных бактерий, в пищевых продуктах. Композиция для контроля роста грамположительных бактерий, включая споры грамположительных бактерий, в напитке, содержит: (a) смесь кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты и (b) бета-кариофиллен (БКФ), причем отношение указанной смеси кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты к указанному бета-кариофиллену составляет по меньшей мере 1,1:1 по массе. При этом композиция по существу не содержит гексан и дихлорметан. Предложены также способ усиления эффективности пастеризации напитка, включающий добавление к напитку указанной композиции, напиток в контейнере, содержащий указанную композицию, и способ контроля роста грамположительных бактерий, включая споры грамположительных бактерий, в напитке, включающий добавление к напитку указанной композиции. Обеспечивается контроль грамположительных бактерий, в том числе спорообразующих, в напитке без придания ему горького вкуса. 4 н. и 37 з.п. ф-лы, 16 ил., 9 пр.

1. Композиция для контроля роста грамположительных бактерий, включая споры грамположительных бактерий, в напитке, содержащая (a) смесь кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты и (b) бета-кариофиллен (БКФ, BCP), причем отношение указанной смеси кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты к указанному бета-кариофиллену составляет по меньшей мере 1,1:1 по массе, и при этом указанная композиция по существу не содержит гексан и дихлорметан.

2. Композиция по п. 1, характеризующаяся тем, что смесь кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты дополнительно содержит 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту.

3. Композиция по п. 1 или 2, характеризующаяся тем, что отношение указанной смеси кислот к бета-кариофиллену составляет (i) по меньшей мере 1,3:1 по массе и/или (ii) не более чем 100:1 по массе.

4. Способ усиления эффективности пастеризации напитка, причем способ включает добавление к указанному напитку композиции по любому из пп. 1-3 в количестве по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка.

5. Способ по п. 4, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), не более чем 4 NTU, не более чем 3 NTU, не более чем 2 NTU или не более чем 1 NTU, при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года.

6. Способ по любому из пп. 4 или 5, характеризующийся тем, что композицию добавляют в напиток в концентрации по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка.

7. Способ по любому из пп. 4-6, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку в концентрации по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка или по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка и/или не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

8. Способ по любому из пп. 4-7, характеризующийся тем, что композиции дают возможность контактировать с напитком на протяжении по меньшей мере двух дней, по меньшей мере трех дней, по меньшей мере четырех дней или по меньшей мере пяти дней.

9. Способ по любому из пп. 4-8, характеризующийся тем, что напиток обладает значением pH в диапазоне от 3 до 6.

10. Способ по любому из пп. 4-9, характеризующийся тем, что напиток представляет собой фруктовый сок, необязательно выбранный из группы, состоящей из яблочного сока, виноградного сока, персикового сока, арбузного сока и осветленного апельсинового сока.

11. Способ по любому из пп. 4-10, дополнительно включающий, перед указанным добавлением, экстракцию смолы Copaifera смесью воды и этанола и сбор верхней фракции, полученной в результате экстракции, с получением указанной композиции.

12. Способ по п. 11, характеризующийся тем, что указанную смолу получают из Copaifera officinalis.

13. Способ по п. 11 или 12, характеризующийся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет (a) по меньшей мере 1:1, по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1, по меньшей мере 2,5:1, по меньшей мере 2,6:1, по меньшей мере 2,7:1, по меньшей мере 2,8:1, по меньшей мере 2,9:1 или по меньшей мере 3:1 по массе и/или (b) не более чем 4:1, не более чем 3,9:1, не более чем 3,8:1, не более чем 3,7:1, не более чем 3,6:1, не более чем 3,5:1, не более чем 3,4:1, не более чем 3,3:1, не более чем 3,2:1 или не более чем 3,1:1 по массе.

14. Способ по любому из пп. 11-13, характеризующийся тем, что смесь этанола и воды содержит (a) NaOH в концентрации от 0,01 до 0,125 моль/л или (b) HCl в концентрации от 0,01 до 0,25 моль/л.

15. Способ по любому из пп. 11-14, характеризующийся тем, что отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3:1, по меньшей мере 3,5:1, по меньшей мере 4:1, по меньшей мере 4,5:1, по меньшей мере 5:1, по меньшей мере 5,5:1 или по меньшей мере 6:1 по массе.

16. Способ по любому из пп. 11-15, характеризующийся тем, что способ дополнительно включает удаление по меньшей мере некоторой части воды и этанола из собранной верхней фракции.

17. Способ по любому из пп. 11-16, характеризующийся тем, что верхняя фракция содержит смесь кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, и отношение указанной смеси кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1:1, по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1 или по меньшей мере 2,5:1 по массе.

18. Способ по п. 17, характеризующийся тем, что указанная смесь смеси кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты дополнительно содержит 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту.

19. Способ по любому из пп. 11-18, характеризующийся тем, что композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus и обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно концентрации БКФ в смоле копайбы, полученной из Copaifera.

20. Способ по любому из пп. 11-18, характеризующийся тем, что композиция обладает уменьшенной концентрацией бета-кариофиллена (БКФ) относительно концентрации 7-альфа-ацетоксихардвиковой кислоты, кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты, взятых вместе, относительно смолы копайбы, полученной из Copaifera.

21. Способ по п. 19 или 20, характеризующийся тем, что (a) смолу копайбы получают из Copaifera officinalis и/или (b) композиция является активной в отношении спор Alicyclobacillus acidoterrestris.

22. Способ по любому из пп. 11-21, характеризующийся тем, что отношение этанола к воде в смеси составляет (a) по меньшей мере 1:1, по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1, по меньшей мере 2,5:1, по меньшей мере 2,6:1, по меньшей мере 2,7:1, по меньшей мере 2,8:1, по меньшей мере 2,9:1 или по меньшей мере 3:1 по массе и/или (b) не более чем 4:1, не более чем 3,9:1, не более чем 3,8:1, не более чем 3,7:1, не более чем 3,6:1, не более чем 3,5:1, не более чем 3,4:1, не более чем 3,3:1, не более чем 3,2:1 или не более чем 3,1:1 по массе.

23. Способ по любому из пп. 11-21, характеризующийся тем, что смесь этанола и воды содержит (a) NaOH в концентрации от 0,01 до 0,125 моль/л или (b) HCl в концентрации от 0,01 до 0,25 моль/л.

24. Способ по любому из пп. 11-23, характеризующийся тем, что отношение смеси этанола и воды к смоле копайбы составляет по меньшей мере 3:1, по меньшей мере 3,5:1, по меньшей мере 4:1, по меньшей мере 4,5:1, по меньшей мере 5:1, по меньшей мере 5,5:1 или по меньшей мере 6:1 по массе.

25. Способ по любому из пп. 11-24, характеризующийся тем, что способ дополнительно включает удаление по меньшей мере некоторой части воды и этанола из собранной верхней фракции.

26. Способ по любому из пп. 11-25, характеризующийся тем, что верхняя фракция содержит смесь кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты и бета-кариофиллен (БКФ), и отношение указанной смеси кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 1:1, по меньшей мере 1,1:1, по меньшей мере 1,2:1, по меньшей мере 1,3:1, по меньшей мере 1,4:1, по меньшей мере 1,5:1, по меньшей мере 1,6:1, по меньшей мере 1,7:1, по меньшей мере 1,8:1, по меньшей мере 1,9:1, по меньшей мере 2:1, по меньшей мере 2,1:1, по меньшей мере 2,2:1, по меньшей мере 2,3:1, по меньшей мере 2,4:1 или по меньшей мере 2,5:1 по массе.

27. Способ по п. 26, характеризующийся тем, что смесь кролехиновой кислоты, хардвиковой кислоты, колавеновой кислоты и копаловой кислоты дополнительно содержит 7-альфа-ацетоксихардвиковую кислоту.

28. Способ по любому из пп. 26, 27, характеризующийся тем, что отношение указанной смеси кислот к указанному БКФ в указанной верхней фракции составляет по меньшей мере 2,1:1.

29. Напиток в контейнере, причем напиток содержит композицию по любому из пп. 1-3.

30. Напиток по п. 29, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), не более чем 4 NTU, не более чем 3 NTU, не более чем 2 NTU или не более чем 1 NTU, при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года.

31. Напиток по любому из пп. 29, 30, характеризующийся тем, что композиция присутствует в напитке (a) в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка, по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка, по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка или по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка и/или (b) в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

32. Напиток по любому из пп. 29-31, характеризующийся тем, что напиток является кислым и/или представляет собой фруктовый сок, необязательно выбранный из группы, состоящей из яблочного сока, виноградного сока, персикового сока, арбузного сока и осветленного апельсинового сока.

33. Напиток по любому из пп. 29-32, характеризующийся тем, что композиция представляет собой композицию по п. 2.

34. Напиток в контейнере по любому из пп. 29-32, характеризующийся тем, что композиция представляет собой композицию по п. 3.

35. Способ контроля роста грамположительных бактерий, включая споры грамположительных бактерий, в напитке, включающий добавление к напитку композиции по любому из пп. 1-3.

36. Способ по п. 35, характеризующийся тем, что композицию добавляют к напитку (a) в концентрации по меньшей мере 1,25 микрограмм композиции на мл напитка, по меньшей мере 2,5 микрограмм композиции на мл напитка, по меньшей мере 3,75 микрограмм композиции на мл напитка или по меньшей мере 5,0 микрограмм композиции на мл напитка и/или (b) в концентрации не более чем 5,0 микрограмм композиции на мл напитка.

37. Способ по любому из пп. 35, 36, характеризующийся тем, что композиции дают возможность контактировать с напитком на протяжении по меньшей мере двух дней, по меньшей мере трех дней, по меньшей мере четырех дней или по меньшей мере пяти дней.

38. Способ по любому из пп. 35-37, характеризующийся тем, что напиток является кислым и/или представляет собой фруктовый сок, необязательно выбранный из группы, состоящей из яблочного сока, виноградного сока, персикового сока, арбузного сока и осветленного апельсинового сока.

39. Способ по любому из пп. 35-38, характеризующийся тем, что мутность напитка составляет не более чем 5 нефелометрических единиц мутности (NTU), не более чем 4 NTU, не более чем 3 NTU, не более чем 2 NTU или не более чем 1 NTU, при измерении в соответствии со способом №180.1 Агентства по охране окружающей среды США, опубликованным в августе 1993 года.

40. Способ по любому из пп. 35-39, характеризующийся тем, что композиция представляет собой композицию по п. 2.

41. Способ по любому из пп. 35-39, характеризующийся тем, что композиция представляет собой композицию по п. 3.