Способ прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов Российский патент 2022 года по МПК A61D19/00 G01N33/49 

Изобретение относится к физиологии и биотехнологии воспроизводства лошадей и может быть использовано при повышении эффективности получения свежеполученной спермы жеребцов в племенном, спортивном и продуктивном коневодстве.

Существуют действующие в России государственные стандарты, которые четко нормируют максимально допустимый уровень общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов [1-2]. По которым общая бактериальная контаминация свежеполученной спермы должна быть не более 5000 КОЕ/см³, если сперму планируют замораживать, то после размораживания общее количество бактерий не должно быть более 500 КОЕ/см³. Если общая бактериальная контаминация нативной спермы более 5000 КОЕ/см³, а после размораживания более 500 КОЕ/см³ то сперма считается не пригодной для дальнейшего использования в системе искусственного осеменения и должна выбраковываться.

Недостатками аналога является отсутствие возможности прогнозирования уровня общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов, что существенно увеличивает конечную цену спермодоз; отсутствие распределения ожидаемой контаминации спермы жеребцов на группы в зависимости от физиологических показателей общей бактериальной загрязненности спермы.

Известен метод прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов по иммуногенетическим показателям, так как он предусматривает прогнозирование общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов.

В патенте UA 117312 С2, опубл. 10.07.2018 представлен метод прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов по иммуногенетическим показателям, в котором для прогнозирования результативности криоконсервирования спермы у жеребцов определяют аллели полиморфной системы группы крови D, при этом для эффективного прогнозирования рекомендуется отбирать не менее 8 эякулятов от каждого жеребца [3].

Основным недостатком данного способа является не достаточная результативность, так как прогнозирование общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов осуществляется только по аллелям полиморфной системы группы крови D.

Из анализа существующего уровня техники, было выявлено, что технической проблемой в данной области низкая результативность прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов.

Техническим результатом настоящего изобретения является повышение эффективности прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов.

Для решения указанной проблемы и достижения заявленного технического результата в способе прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов, включающем отбор эякулятов от жеребцов с известными иммуногенетическими показателями, прогнозирование бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов осуществляют по иммуногенетическим аллелям системы группы крови А, определяя общую бактериальную контаминацию по количеству колониеобразующих единиц бактерий, при этом при обнаружении у жеребца а/-аллеля системы группы крови А, прогнозируют общую бактериальную контаминацию свежеполученной спермы до 2500 КОЕ/см³, при обнаружении у жеребца отсутствие аллелей системы группы крови А, прогнозируют общую бактериальную контаминацию свежеполученной спермы от 2500 до 3000 КОЕ/см³, при обнаружении у жеребца ad/-аллеля системы группы крови А, прогнозируют общую бактериальную контаминацию свежеполученной спермы более 3000 КОЕ/см³.

Предлагаемый способ позволяет повысить эффективность прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов по иммуногенетическим аллелям системы группы крови А.

Данный способ основан на определении у жеребцов аллелей системы группы крови А.

Способ прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов по иммуногенетическим аллелям системы группы крови А осуществляется следующим образом. Для получения общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы до 2500 КОЕ/см³ отбираются жеребцы с а/- аллелем системы группы крови А, для получения общей бактериальной контаминации свежеполученной снермы от 2500 до 3000 КОЕ/см³ приотбираются жеребцы с -/- отсутствием аллелей системы группы крови А, для получения общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы более 3000 КОЕ/см³ отбираются жеребцы с ad/- аллелем системы группы крови А.

Пример выполнения.

Было отобрано 1749 эякулятов жеребцов, которые были разделены на 4 группы в зависимости от наличия/отсутствия аллелей системы группы крови А. Иммуногенетическое определение наличия/отсутствия аллелей системы группы крови А определяется один раз в жизни жеребца, так как группы крови не меняются в течении жизни. Во всех эякулятах уровень коли-титра не превышал 0,1. Первая группа жеребцов была контрольной, в которой не определяли аллели системы группы крови А. Вторая, третья и четвертая группа были опытными. Во второй, третьей и четвертой группе в свежеполученной сперме определяли общую бактериальную контаминацию по количеству колониеобразующих единиц (КОЕ/см³) бактерий. Далее выполняли анализ влияния наличия/отсутствия аллелей системы группы крови А с общей бактериальной контаминацией свежеполученной спермы жеребцов по количеству колониеобразующих единиц (КОЕ/см³) бактерий.

Результативность прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов по иммуногенетическим аллелям системы группы крови А представлена в таблице.

Из данных таблицы видно, что в случае отбора свежеполученных эякулятов жеребцов у которых был ad/- аллель системы группы крови А общая бактериальная контаминация была более 3000 КОЕ/см³, что на 864,6 КОЕ/см³ (на 34,8%) больше (Р<0,001) от жеребцов с аллелем а/-; на 557,74 КОЕ/см³ (на 16,64%) больше (Р<0,01) от жеребцов с отсутствием -/- аллелей А системы; в 2,57 раза меньше (Р<0,001) от контрольной группы жеребцов у которой иммуногенетический профиль неизвестен. При отборе свежеполученных эякулятов жеребцов, у которых был а/- аллель системы группы крови А общая бактериальная контаминация была до 2500 КОЕ/см³. При отборе свежеполученных эякулятов жеребцов, у которых отсутствовали -/- аллели системы группы крови А общая бактериальная контаминация была от 2500 до 3000 КОЕ/см³.

Предложенный способ по сравнению с прототипом позволяет повысить результативность прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов за счет определения у них иммуногенетического профиля по аллелям системы группы крови А.

Источники информации

1. ГОСТ 23681-79 Сперма жеребцов неразбавленная свежеполученная. - Москва: Изд. стандартов, 1979. - 12 с.

2. ГОСТ 24168-80 Сперма жеребцов замороженная. - Москва: Изд. стандартов, 1979. - 15 с.

3. UA 117312 С2, A61D 19/02 (2018.01). 10.07.2018. Метод пругнозуваннязагальноïбактерiальноïконтамiнацiïсвiжоотриманоïспермижеребцiв за iмуногенетичними показниками.

Изобретение относится к физиологии и биотехнологии воспроизводства лошадей и может быть использовано в племенном, спортивном и продуктивном коневодстве. Способ прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов включает отбор эякулятов от жеребцов с известными иммуногенетическими показателями. Прогнозирование бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов осуществляют по иммуногенетическим аллелям системы группы крови А, определяя общую бактериальную контаминацию по количеству колониеобразующих единиц бактерий. При обнаружении у жеребца а/-аллеля системы группы крови А прогнозируют общую бактериальную контаминацию свежеполученной спермы до 2500 КОЕ/см³. При обнаружении у жеребца отсутствия аллелей системы группы крови А прогнозируют общую бактериальную контаминацию свежеполученной спермы от 2500 до 3000 КОЕ/см³. При обнаружении у жеребца ad/-аллеля системы группы крови А прогнозируют общую бактериальную контаминацию свежеполученной спермы более 3000 КОЕ/см³. Изобретение обеспечивает повышение эффективности прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов. 1 табл.

Способ прогнозирования общей бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов, включающий отбор эякулятов от жеребцов с известными иммуногенетическими показателями, отличающийся тем, что прогнозирование бактериальной контаминации свежеполученной спермы жеребцов осуществляют по иммуногенетическим аллелям системы группы крови А, определяя общую бактериальную контаминацию по количеству колониеобразующих единиц бактерий, при этом при обнаружении у жеребца а/-аллеля системы группы крови А прогнозируют общую бактериальную контаминацию свежеполученной спермы до 2500 КОЕ/см³, при обнаружении у жеребца отсутствия аллелей системы группы крови А прогнозируют общую бактериальную контаминацию свежеполученной спермы от 2500 до 3000 КОЕ/см³, при обнаружении у жеребца ad/-аллеля системы группы крови А прогнозируют общую бактериальную контаминацию свежеполученной спермы более 3000 КОЕ/см³.