ЧАСТИЦЫ С ПОКРЫТИЕМ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2023 года по МПК A61K9/51 A61K8/44 A61K8/85 A61K8/02 A61Q11/00 A61Q11/02 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА СМЕЖНУЮ ЗАЯВКУ

Настоящая заявка испрашивает преимущество на приоритет по предварительной заявке на патент США № 62/506,783, поданной 16 мая 2017 г.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к новым частицам с покрытием и их применению. Более конкретно, в определенных вариантах осуществления в настоящем изобретении обеспечены частицы с аминокислотным и/или полимерным покрытием или частицы, покрытые другими материалами, описанными в настоящем документе, для связывания или иного соединения с поверхностями полости рта для доставки активных веществ и/или для полезного воздействия на нее.

Для обеспечения частиц с покрытием путем нанесения материала покрытия на частицы субстрата в настоящем изобретении можно применять любые из множества частиц субстрата, полимеров или других материалов покрытия. В определенных вариантах осуществления частицы субстрата содержат материалы, имеющие карбоксильные группы на поверхности, которые можно применять для взаимодействия с аминогруппами на материалах покрытия/полимерах с образованием ковалентных связей. В других вариантах осуществления частицы с покрытием получают посредством адсорбции материалов покрытия на субстрате. Примеры приемлемых частиц субстрата включают частицы или наночастицы, образованные из сополимера молочной и гликолевой кислот (PLGA), полимолочной кислоты (PLA), полицианоакрилатов (PACA), полиакриловой кислоты, полиангидридов, полиамидов, полиортоэфиров, полиаргинатгликоля, полиэтиленгликоля, поливинилового спирта, полиизобутилцианоакрилата (PIBCA), полиэтиленоксида (PEO), поликапролактона (PCL), целлюлозы, крахмала, хитозана, каррагинана, альгинатов, ксантановой камеди, геллановой камеди, пектинов, комбинаций двух или более из них и т. п. К определенным коммерчески доступным частицам относятся капсулы ISP Captivates™ (поставляемые Ashland), Nanospheres 100 Acide Ascobique (поставляемые Biosil Technologies, Inc.) – метрические частицы, изготовленные из пористого полимера и биоадгезива, и т. п.

Частицы настоящего изобретения могут быть любого приемлемого размера. В определенных вариантах осуществления частицы субстрата настоящего изобретения имеют размер от около 1 мкм до около 750 нм, в том числе от около 1 мкм до около 100 нанометров, от около 50 мкм до около 10 нанометров и от около 200 нанометров до около 750 нанометров.

В соответствии с определенными вариантами осуществления частицы с покрытием содержат PLGA–частицы с покрытием.

Примеры приемлемых материалов и полимеров для применения в покрытии субстратов с образованием частиц с покрытием настоящего изобретения включают материалы, имеющие аминогруппу, такие как аминокислоты, в том числе, без ограничений, лейцин, валин, триптофан, метионин, аргинин, комбинации двух или более из них и т. п.; линейный полисахарид с аминогруппой или другие функциональные группы, которые обеспечивают активное взаимодействие между материалом наночастиц и поверхностями полости рта (поверхности слизистой оболочки или пленочное покрытие эмали/дентина). Как правило, к таким функциональным группам относятся функциональные группы, участвующие в ионных взаимодействиях и/или в образовании водородных связей. Поскольку поверхность зуба в целом заряжена отрицательно, положительно заряженные функциональные группы и соединения вступают в активное взаимодействие с поверхностью. К примерам таких материалов, без ограничений, относятся хитозан, ксантановая камедь, комбинации двух или более из них и т. п.; поливинилпирролидон (PVP) и его производные (например, полимеры Plasdone K29/32 и Plasdone S–630, предлагаемые Ashland, США), хлорид цетилпиридиния, хлоргексидин, сополимеры поливинил метилового эфира и малеинового ангидрида (PVM/MA) и изопропиловый, этиловый или бутиловый сложный эфир сополимеров PVM/MA, такие как Gantrez, например Gantrez S, S97, ES245, AN, MS, Gafquats, такие как Gafquats 440, 755N, HS–100 и HSi (катионные полимеры свободной формы) и другие поликватернии, такие как 7, 22 и 37, аллантоин, Aqualon, Blanose и Bondwell (натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы (CMC)), Wavemax (экстракт семян Linum Usitatissimum (льняное семя) (и) экстракт семян Salvia Hispanica (комбинация полисахаридов из льняного семени и семян чиа со свойствами биоадгезива), УФ–адгезивы или уретанметакрилаты, применяемые в стоматологических композитах (Genomer 4297, CQ, 4205, 4256), декстраны, декстрины (мальтодекстрин, целлодекстрин, икодекстрин, пиродекстрин и т. п.), хлориды полидиметилдиаммония (Merquat) и другие поликватернии (Lubrizol), такие как 5, 7SPR, 100, 550PR и S, поликватерний–6, поликватерний–10 с 1,5–2,2% азота, поликватерний–10 с 0,8–1,1% азота, тетрагидропиримидины (оксантел, морантел, карбантел, фебантел и пирантел), полистиролсульфоновая кислота (PSSA), метилметакрилат, диэтиламиноэтилметакрилат и их комбинации (например, Kollicoat Smart Seal 30D); дистеармоний/хлорид диэтония ПГ–диметикон (например, Silquat JR 4B); диметикон PEG–8 фосфат (например, Siliphos A 100); смеси из двух или более из перечисленного выше и т. п.; и композиции, описанные формулой I:

где

R₁ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, имеющую от 5 до 22 атомов углерода;

R₂ выбран из группы, состоящей из свободного основания и соответствующих солевых форм функциональных групп:

–NH₂;

причем указанные солевые производные имеют анион X^–, предпочтительно выбранный из группы, состоящей из ацетата, бензоата, безилата, бромида, хлорида, хлортеофиллината, цитрата, этансульфоната, фумарата, глюконата, гиппурата, йодида, фторида, лактата, лаурилсульфата, малата, лайата, мезилата, метилсульфата, напсилата, нитрата, октадеканоата, оксалата, памоата, фосфата, полигалактуроната, сукцината, сульфата, тартрата и тозилата;

n равно 0–4; и

R₃ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода.

Композиции формулы I могут иметь любую приемлемую линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, имеющую от 5 до 22 атомов углерода в отношении R₁. Примеры приемлемых линейных или разветвленных, насыщенных или ненасыщенных алифатических групп, имеющих от 5 до 22 атомов углерода, включают линейные или разветвленные C₅–C₂₂ алкильные группы, такие как пентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил, ундецил, додецил вплоть до докозанила и т. п.; а также С₅–С₂₂ линейные или разветвленные алкиленовые группы, например от миристолила до доксангексаиала и т. п.

В определенных вариантах осуществления R₁ представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую углеродную цепь, содержащую от 5 до 22 атомов углерода, включая, например, пентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил, ундецил, додецил вплоть до доказонила. В определенных вариантах осуществления R₁ представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую углеродную цепь, содержащую от 7 до 18 атомов углерода, включая, например, гептил, октил, нонил, децил, ундецил, додецил, тридецил, тетрадецил, пентадецил, гексадецил, гептадецил и октадецил. В некоторых других вариантах осуществления R₁ представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую углеродную цепь, содержащую от 9 до 14 атомов углерода, включая, например, децил, ундецил, додецил вплоть до тетрадецила. В определенных вариантах осуществления R₁ представляет собой ундецильную группу. В определенных вариантах осуществления R₁ представляет собой гептильную группу. В определенных вариантах осуществления R₁ представляет собой гептадецильную группу.

В определенных вариантах осуществления R₁ представляет собой линейную или разветвленную алкенильную группу, имеющую углеродную цепь, содержащую от 5 до 22 атомов углерода, включая, например, 9–гексадеценил, 9–октадеценил, 11–деценил, 9,12–октадекандиенил, 9,12,15–октадекатриенил, 6,9,12–октадекатриенил, 9–эйкозенил, 5,8,11,14–эйкозатетраенил, 13–докозенил и 4,7,10,13,16,19–докозагексаенил. В определенных других вариантах осуществления R₁ представляет собой линейную или разветвленную алкенильную группу, имеющую углеродную цепь, содержащую от 16 до 20 атомов углерода, включая, например, 9–гексадеценил, 9–октадеценил, 11–деценил, 9,12–октадекандиенил, 9,12,15–октадекатриенил и 6,9,12–октадекатриенил.

В определенных вариантах осуществления R₁ представляет собой разветвленную алкильную группу, имеющую углеродную цепь, содержащую от 5 до 22 атомов углерода, включая, например, 2–децилдодеканил, 2–нонилтридеканил, 2–октилтетрадеканил, 2–гептилпентадеканил, 2–гексилгексадеканил, 2–пентилгептадеканил, 21–метикозанил, 18–этиликозанил, 16–пропилнадецил и 14–бутилоктадецил.

Композиции формулы I могут содержать группу R₂, которая представляет собой аминогруппу в форме свободного основания (–NH₂) или ее соль, либо гуанидиниловую функциональную группу в форме свободного основания (–NH(CNH)NH₂) или ее соль. Примеры приемлемых аминовых и гуанидиниловых солей включают соли таких групп, имеющие анион (X–), выбранный из группы, состоящей из ацетата, бензоата, безилата, бромида, хлорида, хлортеофиллината, цитрата, этансульфоната, фумарата, глюконата, гиппурата, йодида, фторида, лактата, лаурилсульфата, малата, лайата, мезилата, метилсульфата, напситата, нитрата, октадеканоата, оксалата, памоата, фосфата, полигалактуроната, сукцината, сульфата, тартрата и тозилата. В определенных вариантах осуществления композиция настоящего изобретения имеет группу R₂, которая представляет собой аминогруппу в форме свободного основания (–NH₂). В определенных других вариантах осуществления композиция настоящего изобретения имеет группу R₂, которая представляет собой гуанидинильную группу в форме свободного основания (–NH(CNH)NH₂). В определенных вариантах осуществления композиция настоящего изобретения имеет группу R₂, которая представляет собой соль амина, имеющую анион, выбранный из группы, состоящей из ацетата, бензоата, безилата, бромида, хлорида, хлортеофиллината, цитрата, этансульфоната, фумарата, глюконата, гиппурата, йодида, фторида, лактата, лаурилсульфата, малата, лайата, мезилата, метилсульфата, напситата, нитрата, октадеканоата, оксалата, памоата, фосфата, полигалактуроната, сукцината, сульфата, тартрата и тозилата. В определенных других вариантах соль амина R₂ имеет анион, выбранный из группы, состоящей из ацетата, бензоата, бромида, хлорида, цитрата, фумарата, глюконата, йодида, фторида, лактата, малата, нитрата, оксалата, фосфата, сульфата, а в определенных других вариантах осуществления – анион, выбранный из группы, состоящей из бромида, хлорида, йодида, фторида, оксалата и фосфата. Кроме того, в определенных вариантах осуществления композиция настоящего изобретения имеет группу R₂, которая представляет собой соль гуанидинила, имеющую анион, выбранный из группы, состоящей из ацетата, бензоата, безилата, бромида, хлорида, хлортеофиллината, цитрата, этансульфоната, фумарата, глюконата, гиппурата, йодида, фторида, лактата, лаурилсульфата, малата, лайата, мезилата, метилсульфата, напситата, нитрата, октадеканоата, оксалата, памоата, фосфата, полигалактуроната, сукцината, сульфата, тартрата и тозилата. В определенных других вариантах соль гуанадинила R₂ имеет анион, выбранный из группы, состоящей из ацетата, бензоата, бромида, хлорида, цитрата, фумарата, глюконата, йодида, фторида, лактата, малата, нитрата, оксалата, фосфата, сульфата, а в определенных других вариантах осуществления – анион, выбранный из группы, состоящей из бромида, хлорида, йодида, фторида, оксалата и фосфата.

Композиции формулы I могут иметь любую приемлемую линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода в отношении R₃. Примеры приемлемых линейных или разветвленных, насыщенных или ненасыщенных алифатических групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, включают линейные или разветвленные C₁–C₆ алкильные группы, такие как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор–бутил, трет–бутил, пентил, трет–пентил, неопентил, изопентил, гексил, изогексил, неогексил; а также линейные или разветвленные алкенильные группы С₂–С₆, такие как винил, аллил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил и т. п. В определенных вариантах осуществления R₃ представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую углеродную цепь, содержащую от 1 до 4 атомов углерода, включая, например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, втор–бутил, изобутил и трет–бутил. В определенных других вариантах осуществления R₃ представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую углеродную цепь, содержащую от 1 до 3 атомов углерода, включая, например, метил, этил, пропил и изопропил. В определенных вариантах осуществления R₃ представляет собой этильную группу.

В определенных вариантах осуществления R₃ представляет собой линейную или разветвленную алкенильную группу, имеющую углеродную цепь, содержащую от 2 до 6 атомов углерода, включая, например, винил, аллил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил и т. п., а также их смесь. В определенных других вариантах осуществления R₃ представляет собой линейную или разветвленную алкиленовую группу, имеющую углеродную цепь, содержащую от 2 до 4 атомов углерода, включая, например, винил, аллил, пропенил и бутенил.

В соединениях формулы I n может составлять от нуля до четырех. В определенных вариантах осуществления n составляет от 1 до 4, в определенных вариантах осуществления – от 2 до 4, в определенных вариантах осуществления – от 3 до 4. В определенных отдельных вариантах осуществления n равно 0. В определенных других вариантах осуществления n равно 1, в других вариантах осуществления n равно 2, в других вариантах n равно 3, а в других вариантах n равно 4.

Согласно определенным вариантам осуществления изобретения соединения формулы I являются соединениями, в которых R₂ представляет собой гуанидинильную функциональную группу в форме свободного основания (–NH(CNH)NH₂) или ее соль; n равно 3 или 4, предпочтительно 3; R₃ представляет собой алифатическую группу, имеющую углеродную цепь из около 2 атомов углерода, например этильную группу; и R₁ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, включая, например, алкильную группу, имеющую от 9 до 16 атомов углерода, включая от около 10 до около 16 атомов углерода, от около 10 до около 15 атомов углерода, от около 10 до около 14 атомов углерода, от около 10 до около 13 атомов углерода, от около 11 до около 14 атомов углерода, от около 11 до около 15 атомов углерода, от около 11 до около 16 атомов углерода и около 11 и/или около 13 атомов углерода.

В определенных других вариантах осуществления соединения формулы I являются соединениями, в которых R₂ представляет собой гуанидинильную функциональную группу в форме свободного основания (–NH(CNH)NH₂) или ее соль; n равно 3; R₁ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, включая, например, алкильную группу, имеющую около 11 атомов углерода; и R₃ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, включая, например, алкильную группу, имеющую длину углеродной цепи от около 1 до 11 атомов углерода, включая от около 2 до около 10 атомов углерода, от около 2 до около 9 атомов углерода, от около 2 до около 8 атомов углерода, от около 3 до около 11 атомов углерода, от около 3 до около 10 атомов углерода, от около 3 до около 9 атомов углерода, от около 3 до около 8 атомов углерода и около 2, около 6 и/или около 8 атомов углерода.

В определенных других вариантах осуществления соединения формулы I являются соединениями, в которых R₂ представляет собой гуанидинильную функциональную группу в форме свободного основания (–NH(CNH)NH₂) или ее соль; n равно 3; R₁ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, включая, например, алкильную группу, имеющую около 7 атомов углерода; и R₃ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, включая, например, алкильную группу, имеющую длину углеродной цепи от около 7 до 16 атомов углерода, в том числе от около 7 до около 15 атомов углерода, от около 7 до около 14 атомов углерода, от около 7 до около 13 атомов углерода, от около 7 до около 12 атомов углерода, от около 7 до около 11 атомов углерода и около 7 и/или около 11 атомов углерода.

В определенных других вариантах осуществления соединения формулы I являются соединениями, в которых R₂ представляет собой аминогруппу в форме свободного основания (–NH₂) или ее соль; и n равно 1, 3 или 4. Примеры таких соединений включают соединения, в которых n равно 3; R₁ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, включая, например, алкильную группу, имеющую около 7 атомов углерода; и R₃ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, включая, например, алкильную группу, имеющую длину углеродной цепи от около 1 до 11 атомов углерода, включая от около 2 до около 10 атомов углерода, от около 2 до около 9 атомов углерода, от около 2 до около 8 атомов углерода, от около 3 до около 11 атомов углерода, от около 3 до около 10 атомов углерода, от около 3 до около 9 атомов углерода, от около 3 до около 8 атомов углерода и около 8 и/или около 11 атомов углерода. Другие примеры включают композиции, в которых n равно 3; R₁ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, включая, например, алкильную группу, имеющую около 11 атомов углерода; и R₃ представляет собой линейную или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, включая, например, алкильную группу, имеющую длину углеродной цепи от около 1 до 11 атомов углерода, в том числе от около 1 до около 10 атомов углерода, от около 1 до около 9 атомов углерода, от около 1 до около 8 атомов углерода, от около 1 до около 7 атомов углерода, от около 1 до около 6 атомов углерода, от около 2 до около 11 атомов углерода, от около 2 до около 10 атомов углерода, от около 2 до около 9 атомов углерода, от около 2 до около 8 атомов углерода, от около 2 до около 7 атомов углерода, от около 2 до около 6 атомов углерода и около 2 и/или около 6 атомов углерода.

Одним примером соединения формулы I настоящего изобретения является [амино ({[4–додеканамидо–4–(этилкарбамоил)бутил]амино})метилиден]аммоний (соединение 9), как показано ниже.

Как показано в приведенной выше формуле, соединение 9 представляет собой соединение формулы I, в котором R₁ представляет собой ундецильную группу, R₂ представляет собой гуанидинильную группу в форме свободного основания, R₃ представляет собой этильную группу, а n равно 3.

Другие примеры соединений настоящего изобретения включают, без ограничений, соединения, описываемые следующими формулами.

Соединение 5

Соединение 8

Соединение 11

Соединение 6

Соединение 12

Соединение 7

Соединение 10

Соединение 13

Соединение 4

Соединение 3

Соединение 1

Соединение 2

Соединение 14

Соединение 15

Соединение 16

Соединение 17

Соединение 18

Соединение 19

Соединение 20

Соединение 21

Соединение 22

Соединение 23

Соединение 24

Соединение 25

Соединение 26

Соединение 31

К другим примерам приемлемых материалов для применения в качестве покрытия в настоящем документе относятся фосфолипидные поверхностно–активные соединения, такие как хлоридфосфат кокамидопропил ПГ–димония; хлоридфосфат миристамидопропил ПГ–димония; хлоридфосфат лаурамидопропил ПГ–димония и их смеси. В определенных вариантах осуществления фосфолипидное поверхностно–активное вещество выбрано из группы, состоящей из хлоридфосфата кокамидопропил ПГ–димония; хлоридфосфата миристамидопропил ПГ–димония и их смесей. В определенных вариантах осуществления фосфолипидным поверхностно–активным веществом является хлоридфосфат миристамидопропил ПГ–димония. Множество таких материалов продает компания Croda под торговым названием Arlasilk™.

В определенных вариантах осуществления частицы настоящего изобретения могут содержать любой из множества активных материалов для обеспечения полезного для здоровья эффекта. К примерам приемлемых активных веществ относятся активные вещества для применения в полости рта, в том числе, без ограничений, любое из множества активных веществ для обеспечения полезных воздействий, таких как очистка рта, в том числе удаление остатков, противомикробных воздействий, в том числе противоналетных, противогингивитных, и уменьшение неприятного запаха, разрушение биопленки, предотвращение бактериальной адгезии, модификация структуры микробного сообщества ротовой полости, модификация метаболического профиля микробов ротовой полости, антивирусная активность, противовоспалительные свойства, обеспечение баланса pH, отбеливание зубов, предотвращение образования пятен, борьба с чувствительностью, борьба с кариесом, укрепление эмали, освежение дыхания, улучшение состояния гидратации/сухости полости рта, восстановление и предотвращение эрозии, доставка и удержание активного вещества, улучшение органолептических свойств, изменения вкусовых ощущений, снижения боли, заживление ран и т. п.

В определенных вариантах осуществления составы настоящего изобретения содержат эфирные масла. Эфирные масла представляют собой летучие ароматические масла, которые могут быть синтетическими или могут быть получены из растений путем дистилляции, экспрессии или экстракции и которые обычно обладают запахом или вкусом растения, из которого они получены. Используемые эфирные масла могут обеспечивать антисептическую активность. Некоторые из данных эфирных масел действуют также в качестве ароматизирующих агентов. Используемые эфирные масла включают, без ограничений, цитрусовые, тимол, ментол, метилсалицилат (винтергриновое масло), эвкалиптол, карвакрол, камфару, анетол, карвон, эвгенол, изоэвгенол, лимонен, озимен, н–дециловый спирт, цитронель, а–сальпинеол, метилацетат, цитронеллила ацетат, метилэвгенол, цинеол, линалоол, этиллиналаол, сафрол, ванилин, масло кудрявой мяты, масло перечной мяты, лимонное масло, апельсиновое масло, шалфейное масло, розмариновое масло, коричное масло, масло душистого перца, масло листьев лавра, масло кедровых листьев, гераниол, вербенон, анисовое масло, масло плодов лавра, бензальдегид, масло бергамота, горький миндаль, хлортимол, коричный альдегид, цитронелловое масло, гвоздичное масло, каменноугольную смолу, эвкалиптовое масло, гваякол, производные трополона, такие как хинокитиол, лавандовое масло, горчичное масло, фенол, фенилсалицилат, сосновое масло, масло из сосновой иглы, сассафрасовое масло, масло лаванды широколистной, стиракс, масло тимьяна, толуанский бальзам, терпентинное масло, масло гвоздики и их комбинации.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления настоящее изобретение содержит одно или более биоактивных эфирных масел, выбранных из группы, состоящей из ментола, тимола, эвкалиптола и метилсалицилата. В определенных предпочтительных вариантах осуществления изобретение содержит ментол и по меньшей мере одно другое эфирное масло, выбранное из тимола, эвкалиптола и метилсалицилата. В определенных предпочтительных вариантах осуществления изобретение содержит ментол и эвкалиптол, ментол, эвкалиптол и тимол, или ментол, эвкалиптол, тимол и метилсалицилат. Тимол [(CH₃)₂CHC₆H₃(CH₃)OH, также известный как изопропил–м–крезол], слаборастворим в воде, но растворим в спирте, и его присутствие в композиции является одной из причин включения спирта в традиционные поступающие в продажу ополаскиватели для полости рта с высоким содержанием спирта. Метилсалицилат [C₆H₄OHCOOCH₃, также известный как винтергриновое масло] помимо выполнения противомикробной функции также обеспечивает и приятный запах. Эвкалиптол (C₁₀H₁₈O, также известный как цинеол) представляет собой простой эфир терпенового ряда и обеспечивает холодящий пряный вкус. При желании в определенных составах эвкалиптол можно применять вместо тимола в той же дозировке. Ментол (CH₃C₆H₉(C₃H₇)OH), также известный как гексагидротимол), тоже слаборастворим в спирте и довольно летуч. Помимо антисептических свойств ментол обеспечивает холодящее покалывающее ощущение.

Другие приемлемые противомикробные агенты включают галогенированные дифениловые простые эфиры, 2′,4,4′–трихлор–2–гидрокси–дифениловый эфир (триклозан), 2,2′–дигидрокси–5,5′–дибром–дифениловый эфир, галогенированные салициланилиды, 4′,5–дибромсалициланилид, 3,4′,5–трихлорсалициланилид, 3,4′,5–трибромсалициланилид, 2,3,3′,5–тетрахлорсалициланилид, 3,3′,5–тетрахлорсалициланилид, 3,5–дибром–3′–трифторметилсалициланилид, 5–н–октаноил–3′–трифторметилсалициланилид, 3,5–дибром–4′–трифторметилсалициланилид, 3,5–дибром–3′–трифторметилсалициланилид (флурофен), сложные эфиры бензойной кислоты, метил–п–гидроксибензойный сложный эфир, этил–п–гидроксибензойный сложный эфир, пропил–п–гидроксибензойный сложный эфир, бутил–п–гидроксибензойный сложный эфир, галогенированные карбанилиды, 3,4,4′–трихлоркарбанилид, 3–трифторметил–4,4′–дихлоркарбанилид,

3,3′,4–трихлоркарбанилид, фенольные соединения (в том числе фенол и его гомологи, моно– и полиалкильные и ароматические галогенсодержащие (например, F, Cl, Br, I) фенолы, резорцинол и катехол и их производные и бисфенольные соединения), 2–метилфенол, 3–метилфенол, 4–метилфенол, 4–этилфенол, 2,4–диметилфенол, 2,5–диметилфенол, 3,4–диметилфенол, 2,6–диметилфенол, 4–н–пропилфенол, 4–н–бутилфенол, 4–н–амилфенол, 4–трет–амилфенол, 4–н–гексилфенол, 4–н–гептилфенол, 2–метокси–4–(2–пропенил)фенол (евгенол), моно– и полиалкил и –аралкилгалогенфенолы, метил–п–хлорфенол, этил–п–хлорфенол, н–пропил–п–хлорфенол, н–бутил–п–хлорфенол, н–амил–п–хлорфенол, втор–амил–п–хлорфенол, н–гексил–п–хлорфенол, циклогексил–п–хлорфенол, н–гептил–п–хлорфенол, н–октил–п–хлорфенол, о–хлорфенол, метил–о–хлорфенол, этил–о–хлорфенол, н–пропил–о–хлорфенол, н–бутил–о–хлорфенол, н–амил–о–хлорфенол, трет–амил–о–хлорфенол, н–гексил–о–хлорфенол, н–гептил–о–хлорфенол, п–хлорфенол, о–бензил–п–хлорфенол, о–бензил–м–метил–п–хлорфенол, о–бензил–м, м–диметил–o–п–хлорфенол, о–фенилэтил–п–хлорфенол, о–фенилэтил–м–метил–п–хлорфенол, 3–метил–п–хлорфенол, 3,5–диметил–п–хлорфенол, 6–этил–3–метил–п–хлорфенол, 6–н–пропил–3–метил–п–хлорфенол, 6–изо–пропил–3–метил–п–хлорфенол, 2–этил–3,5–диметил–п–хлорфенол, 6–втор–бутил–3–метил–п–хлорфенол, 2–изо–пропил–3,5–диметил–п–хлорфенол, 6–диэтилметил–3–метил–п–хлорфенол, 6–изо–пропил–2–этил–3–метил–п–хлорфенол, 2–втор–амил–3,5–диметил–п–хлорфенол, 2–диэтилметил–3,5–диметил–п–хлорфенол, 6–втор–октил–3–метил–п–хлорфенол, п–бромфенол, метил–п–бромфенол, этил–п–бромфенол, н–пропил–п–бромфенол, н–бутил–п–бромфенол, н–амил–п–бромфенол, втор–амил–п–бромфенол, н–гексил–п–бромфенол, циклогексил–п–бромфенол, о–бромфенол, трет–амил–о–бромфенол, н–гексил–о–бромфенол, н–пропил–м, м–диметил–о–бромфенол, 2–фенилфенол, 4–хлор, 2–метилфенол, 4–хлор–3–метилфенол, 4–хлор–3,5–диметилфенол, 2,4–дихлор–3,5–диметилфенол, 3,4,5,6–тетрабром–2–метилфенол, 5–метил–2–пентилфенол, 4–изопропил–3–метилфенол, 5–хлор–2–гидроксидифенилметан, резонцинол и его производные, резорцинол, метилрезорцинол, этилрезорцинол, н–пропилрезорцинол, н–бутилрезорцинол, н–амилрезорцинол, н–гексилрезорцинол, н–гептилрезорцинол, н–октилрезорцинол, н–нонилрезорцинол, фенилрезорцинол, бензилрезорцинол, фенилэтилрезорцинол, фенилпропилрезорцинол, п–хлорбензилрезорцинол, 5–хлор–2,4–дигидроксифенилметан, 4′–хлор–2,4–дигидроксифенилметан, 5–бром–2,4–дигидроксифенилметан, 4′–бром–2,4–дигидроксифенилметан, бисфенольные соединения, бисфенол A, 2,2′–метилен–бис(4–хлорфенол), 2,2′–метилен–бис(3,4,6–трихлорфенол)(гексахлорофен), 2,2′–метилен–бис(4–хлор–6–бромфенол), бис(2–гидрокси–3,5–дихлофенил)сульфид, бис(2–гидрокси–5–хлорбензил)сульфид, метокси–1,2–пропандиол, орто–метоксикоричный альдегид, метил–3–гидроксибутаноат, комбинации двух или более из них и т. п.

Другие противомикробные агенты включают, без ограничений: гексетидин; соединения жирных кислот, такие как капроновая кислота, каприловая кислота, каприновая кислота, лауриловая кислота, миристиновая кислота, миристоленовая кислота, пальмитиновая кислота, пальмитоленовая кислота, стеариновая кислота, олеиновая кислота, элаидиновая кислота, линолевая кислота, линоленовая кислота, линолелаидная кислота, арахидоновая кислота, витамин Е, ацетат витамина Е, апигенин и их смеси; длинноцепочечные жирные спирты, такие как описанные в патентной публикации США № 20110123462 Mordas et al., включенной в данный документ в полном объеме путем ссылки (примеры которых включают, без ограничений, 1–децен–3–ол; цис–4–децен–1–ол, транс–2–децен–1–ол, цис–2–нонен–1–ол, цис–4–деценаль, транс–2–деценаль, цис–7–деценаль, цис–5–октен–1–ол, транс–2–октен–1–ол, 1–октен–3–ол, цис–3–нонен–1–ол, транс–2–нонен–1–ол, цис–6–нонен–1–ол, 9–децен–1–ол, транс–2–ундецен–1–ол, транс–2–додецен–1–ол, транс–2–октеналь, транс–2–ноненаль, 6–ноненаль, цис–2–деценаль, транс–2–ундеценаль, транс–2–додеценаль, цис–3–октен–1–ол, 3–октен–2–ол, 10–ундецен–1–ол, транс–2–тридецен–1–ол, их стереоизомеры и их смеси); циклические сесквитерпеновые спирты, такие как фарнезол; N′–алкил L–аргинин алкиловый эфир (например, этиловый эфир лауроиларгинина) и соли, такие как описанные в патенте США № 5,874,068, Engelman et al., включенном в данный документ в полном объеме путем ссылки; композиции производных аминокислот, как описано в публикации патента США № 20160145203, Gambogi, et al., в настоящем документе, включенной в настоящий документ в полном объеме путем ссылки; противомикробные пептиды, такие как ретроциклин (RC101), протегрин–1 (PG1) или KSL–W; и поверхностно–активные вещества, включая катионные поверхностно–активные вещества, такие как хлорид цетилпиридиния, хлоргексидин и их смеси. Кроме того, могут быть включены противомикробные экстракты определенных растений или фруктов, в том числе проантоцианидины (PAC), обнаруженные в клюкве, такие как флаван–3–олы (и их полимеры), процианидины (и их полимеры), терпены (и их полимеры), гидроксибензойные кислоты, гидроксикоричные кислоты, антоцианидины (и их полимеры), флавонолы (и их полимеры) и другие цианидины и пеонидины. Кроме того, используют масла, например мятное масло и масло шалфея.

Другие приемлемые активные вещества включают источники фторид–ионов, такие как фторид натрия, монофторфосфат натрия, фторид олова и фториды аминов (обеспечивая, например, около 1–5000 ч/млн фторид–ионов, необязательно около 200–1150 ч/млн фторид–ионов); нефторидные агенты для укрепления зубов, такие как карбонат кальция, фосфат альфатрикальция или фосфорилолигосахариды кальция, агенты, предупреждающие образование зубного камня, такие как водорастворимые пирофосфатные соли, предпочтительно пирофосфаты щелочных металлов, полиакрилаты и сополимеры малеинового ангидрида или кислоты и метилвинилового простого эфира (например, Gantrez), как описано, например, в патенте США № 4,627,977, Gaffar et al.; а также, например, полиаминопропансульфоновую кислоту (AMPS), тригидрат цитрата цинка, полипептиды (такие как полиаспарагиновая и полиглутаминовая кислоты) и смеси двух или более из них; агенты, предупреждающие образование зубного камня, такие как водорастворимые пирофосфатные соли, предпочтительно пирофосфаты щелочных металлов; хелатирующие агенты, такие как винная кислота и ее фармацевтически приемлемые соли, лимонная кислота и цитраты щелочных металлов и их смеси; агенты для десенсибилизации зубов, которые снижают чувствительность зубов, в том числе соли калия, такие как нитрат калия и хлорид калия, и соли стронция, такие как хлорид стронция и ацетат стронция; агенты для отбеливания зубов и витамины, такие как витамин A; а также пигменты и красители, такие как неорганические белые пигменты, неорганические цветные пигменты, перламутровые агенты, порошковые наполнители и т. п., а также тальк, слюда, карбонат магния, карбонат кальция, силикат магния, силикат алюминия–магния, диоксид кремния, диоксид титана, оксид цинка, красный оксид железа, коричневый оксид железа, желтый оксид железа, черный оксид железа, ферроцианид железа–аммония, темно–фиолетовый краситель, ультрамарин, нейлоновый порошок, полиэтиленовый порошок, метакрилатный порошок, порошок полистирола, порошок шелка, кристаллическая целлюлоза, крахмал, титансодержащая слюда, титансодержащий оксид железа, оксихлорид висмута и смеси двух или более из них.

Ферменты представляют собой другой тип активного вещества, которое можно применять в настоящих композициях. Используемые ферменты включают относящиеся к категории протеаз, литических ферментов, ингибиторов матрицы зубного налета и оксидаз: протеазы включают папаин, пепсин, трипсин, фицин, бромелин; литические ферменты клеточной стенки включают лизоцим; ингибиторы матрицы зубного налета включают декстраназы, мутаназы; и оксидазы включают глюкозооксидазу, лактатоксидазу, галактозооксидазу, оксидазу мочевой кислоты, пероксидазы, в том числе пероксидазу хрена, миелопероксидазу, лактопероксидазу, хлорпероксидазу. Оксидазы также обладают отбеливающей/очищающей активностью в дополнение к противомикробным свойствам.

Ингредиенты, метаболизируемые бактериями полости рта с оказанием полезного воздействия на полость рта, могут также быть включены в эти материалы, в том числе аргинин, моногидрохлорид аргинина и инулиноподобные фруктаны, мальтодекстрин, фруктоолигосахариды и галактоолигосахариды. Кроме того, изобретение можно применять для доставки пробиотических штаммов бактерий, в том числе определенных видов лактобацилл и бифидобактерий, видов Saccharomyces, стрептококков, энтерококков и комменсальных Escherichia coli.

Изобретение можно также применять для доставки фармацевтически активных веществ для лечения заболеваний полости рта или симптомов заболеваний, которые возникают в полости рта или ротовой части глотки, таких как анестетики, антибиотики, противогрибковые, противовирусные и противовоспалительные композиции.

СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ

Можно применять любые приемлемые средства для получения частиц с покрытием настоящего изобретения. В определенных вариантах осуществления способы включают взаимодействие материалов покрытия/полимеров с материалами субстрата в условиях, достаточных для ковалентного связывания материалов/полимеров с поверхностью материалов субстрата. В других вариантах осуществления способы включают адсорбцию материала покрытия на субстрате. Ниже приведены примеры общих способов получения PLGA–частиц с покрытием в качестве не имеющих ограничительного характера примеров настоящего изобретения. В таком способе вместо PLGA можно также применять другие частицы субстрата настоящего изобретения.

Поверхностное связывание

PLGA–частицы содержат на поверхности карбоксильные группы, которые могут быть применены для взаимодействия с аминогруппами биологических соединений с образованием ковалентных связей. Приведенный ниже протокол связывания служит в качестве общих указаний для получения PLGA–частиц, связанных с биомолекулами (материалы покрытия).

1. Посредством встряхивания приготовить суспензию PLGA–частиц в 50 мM буфера MES (pH 5,2) (компания, код продукта). При необходимости обработать ультразвуком.

2. Приготовить раствор 200 мг/мл гидрохлорида EDC N–(3–диметиламинопропил)–N’–этилкарбодиимида (Sigma Aldrich № кат. E1769) в 50 мкл 50 мM буфера MES (pH 5,2); Применять немедленно.

3. Добавить раствор EDC к суспензии микросфер.

4. Осторожно перемешивать переворачиванием.

5. Добавить биомолекулу в количестве, эквивалентном 200–500 мкг. Осторожно перемешивать переворачиванием или однократным встряхиванием.

6. Инкубировать в течение 2–4 часов при комнатной температуре при осторожном перемешивании.

7. Центрифугировать смесь в течение 10 минут при подходящем значении g. Примечание. Реально используемые значения g, необходимые для формирования плотного осадка, зависят от размера частиц. Сохранить полученную надосадочную жидкость для определения количества связанной биомолекулы.

8. Полученный осадок микросфер повторно суспендировать в 10 мM буфере Tris, содержащем 0,05% BSA (pH 8,0).

9. Повторить стадии 7–8 и объединить надосадочные жидкости для применения в расчете количества связанной биомолекулы.

10. Конъюгат микросфер хранить при 4 °C в буфере Tris для хранения.

EDC применяли для синтеза пептидов; поперечной сшивки белков с нуклеиновыми кислотами; и получения иммуноконъюгатов в качестве примеров. EDC по существу применяют в качестве активирующего агента карбоксильных групп при связывании амидов с первичными аминами. Кроме того, он будет реагировать с фосфатными группами.

Адсорбция

1. Приготовить суспензию 50 мг PLGA–частиц в 1 мл воды для получения смеси PLGA–частиц в концентрации 5 мас.%.

2. Добавить смесь PLGA–частиц в эквиваленте 2,5 мг PLGA–частиц (то есть 50 мкл) к 500 мкл технологического раствора, осторожно перемешивать переворачиванием в течение 30 минут при комнатной температуре.

3. Центрифугировать при 1500 g в течение 20 минут.

СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ

Заявители установили, что частицы с покрытием настоящего изобретения могут быть применены для введения активных веществ или для предотвращения, лечения или обеспечения полезного воздействия на поверхности полости рта. В частности, частицы можно вводить в полость рта для прикрепления на одной или более ее поверхностей для введения активных веществ и/или обеспечения полезного воздействия на полость рта.

Частицы настоящего изобретения могут содержать любой из множества активных материалов для обеспечения полезного воздействия на полость рта. В соответствии с определенными вариантами осуществления способы настоящего изобретения включают введение частицы с покрытием настоящего изобретения в полость рта для обеспечения одного или более полезных воздействий, выбранных из группы, состоящей из: разрушения биопленки на поверхности полости рта, ослабления бактериальной адгезии на поверхности полости рта, удаления биопленки с поверхности, ингибирования действия зубного налета и образования зубного налета, снижения воспаления десен, набухания и покраснения десен, уменьшения кровоточивости и предупреждения гингивита.

В соответствии со способами настоящего изобретения в контакт может входить любая приемлемая поверхность полости рта, включая одну или более поверхностей, выбранных из группы, состоящей из поверхностей одного или более зубов, поверхностей десен, комбинаций двух или более из них и т. п. В определенных предпочтительных вариантах осуществления частицы с покрытием применяют для контактирования с поверхностью зуба.

В каждом из вышеуказанных способов композиция по заявленному способу может быть нанесена на поверхность, подлежащую контактированию, посредством любого из множества способов. В определенных вариантах осуществления пользователь вводит композицию в полость рта и наносит на поверхность в виде жидкости для полоскания или промывания рта. В определенных вариантах осуществления композицию вводят в полость рта и наносят на поверхность в виде зубной пасты на изделии для чистки зубов, например на зубной щетке. Композиции настоящего изобретения могут быть дополнительно введены через рот и нанесены на поверхность в виде жевательной резинки, пастилки для рассасывания, растворяемой пластинки или т. п.

Кроме того, стадия контакта способов настоящего изобретения может включать контактирование поверхности с композицией в течение любого приемлемого промежутка времени. В определенных вариантах осуществления стадия контакта включает контактирование поверхности в течение менее тридцати секунд. В определенных вариантах осуществления стадия контакта включает контактирование поверхности с композицией в течение тридцати секунд или более, например в течение около тридцати секунд, в течение около сорока секунд, в течение около одной минуты или в течение более одной минуты.

АНАЛИЗЫ

Заявители разработали новые методики анализа для определения способности материалов с покрытием фиксироваться на поверхностях полости рта, в частности на гидроксиапатитовых поверхностях (поверхности зуба). В соответствии с определенными вариантами осуществления анализ включает покрытие частиц гидроксиапатита (HAP) слюной, смешивание покрытых слюной HAP с покрытыми полимером PLGA–частицами, подлежащими исследованию, и инкубирование, промывание полученных HAP с исследуемыми PLGA–частицами с покрытием для удаления свободных PLGA–частиц с исследуемым полимером и сбора элюента, и измерение собранного элюента для определения интенсивности флуоресценции. Опираясь на эти способы, можно применять флуоресценцию элюента для определения количества приклеенных к HAP и смытых частиц с покрытием. В частности, методики анализа связывания частиц обеспечивают оценку взаимодействия, которое происходит между покрытыми полимером PLGA–частицами и покрытыми слюной HAP, например связывания полимера с пленкой, а также степени аффинности (слабая, сильная или нет взаимодействия), с которой реагенты связываются друг с другом.

Ниже приведен пример процедуры в соответствии с одним вариантом осуществления с использованием PLGA–частиц.

Процедура флуоресцентного анализа связывания PLGA–частиц

1. Взвесить x мг частиц HAP (достаточно для 10 мг на лунку образца, например для 10 лунок образца – 100 мг HAP).

2. К частицам добавить искусственную слюну в концентрации 100 мкл на 10 мг и инкубировать в течение 15 минут при 37 °C.

3. Перенести суспензию частицы HAP/слюна на фильтровальный планшет 3,0 мкм посредством добавления 100 мкл к суспензии в каждой соответствующей лунке. Следует применять одноканальную пипетку и взмучивать суспензию до отбора пробы пипеткой.

4. Отделить слюну из лунок фильтровального планшета посредством фильтрования под вакуумом. Следует использовать клейкую ленту для покрытия лунок, поскольку вакуум недостаточно глубокий для удаления всей жидкости без такой ленты. ПРИМЕЧАНИЕ. Может потребоваться несколько циклов покрытия планшета лентой, ее удаления и повторного покрытия.

5. Добавить покрытые полимером частицы в каждую лунку и инкубировать при 37 °C в течение 10 минут при встряхивании (избегать слишком продолжительного инкубирования).

6. Удалить обрабатывающую жидкость посредством повторения стадии 4. ПРИМЕЧАНИЕ. Собрать элюент.

7. Смыть любые слабо связанные покрытые полимером флуоресцентные PLGA–частицы с частиц HAP с использованием 200 мкл воды. ПРИМЕЧАНИЕ. Собрать элюент.

8. Повторить стадию 7 до исчезновения флуоресценции. ПРИМЕЧАНИЕ. После каждого повтора собрать элюент. Следить за получаемым продуктом и регистрировать цвет (после всех трех промывок конечный элюент должен представлять собой прозрачный раствор).

9. Добавить все элюенты со стадий 6–8 в 96–луночный непрозрачный планшет или планшет с черным дном.

10. Измерить флуоресценцию на непрозрачном или черном 96–луночном планшете. Возбуждение/испускание: 460/500 нм.

Ниже приведен другой вариант осуществления.

Флуоресцентный анализ адсорбции PLGA–частиц

Процедура

1. Взвесить x мг частиц HAP (х=достаточное для 10 мг на лунку образца, например для 10 лунок образца будет отвешено 100 мг HAP).

2. К частицам добавить искусственную слюну в концентрации 100 мкл на 10 мг и инкубировать в течение от 30 минут до 24 часов при 37 °C при постоянном встряхивании.

3. После инкубирования перенести суспензию частицы HAP/слюна на фильтровальный планшет 3,0 мкм, добавив 100 мкл к суспензии в каждой соответствующей лунке. Следует применять одноканальную пипетку и взмучивать суспензию до отбора пробы пипеткой.

4. Отделить слюну из лунок фильтровального планшета посредством фильтрования под вакуумом. Следует применять алюминиевую фольгу для покрытия лунок, поскольку вакуум недостаточно глубокий для удаления всей жидкости без такой фольги. ПРИМЕЧАНИЕ. Может потребоваться несколько циклов покрытия планшета фольгой, ее удаления и повторного покрытия.

5. Адсорбция

i. Приготовить суспензию 50 мг PLGA–частиц в 1 мл воды для получения смеси PLGA–частиц в концентрации 5 мас.%.

ii. Добавить смесь PLGA–частиц в эквиваленте 2,5 мг PLGA–частиц (то есть 50 мкл) к 500 мкл технологического раствора, осторожно перемешивать переворачиванием в течение 30 минут при комнатной температуре.

iii. Центрифугировать при 1500 g в течение 20 минут.

6. Осторожно удалить надосадочную жидкость пипеткой, не взмучивая образованный осадок.

7. После отделения осадка добавить в пробирку ХХ мкл деионизированной воды. Повторно встряхиванием суспендировать осадок в воде при перемешивании. (XX=120 мкл, помноженное на число лунок в каждой методике). Полученный раствор будет применен для измерения суммарной флуоресценции в данной методике.

8. Добавить покрытые полимером частицы в каждую лунку и инкубировать при 37 °C в течение 10 минут при встряхивании (избегать слишком продолжительного инкубирования).

9. Удалить обрабатывающую жидкость посредством повторения стадии 4. ПРИМЕЧАНИЕ. Собрать элюент.

10. Смыть любые слабо связанные покрытые полимером флуоресцентные PLGA–частицы с частиц HAP с использованием 100 мкл деионизированной воды. ПРИМЕЧАНИЕ. Собрать элюент.

11. Повторить стадию 10 до исчезновения флуоресценции. ПРИМЕЧАНИЕ. После каждого повтора собрать элюент. Следить за получаемым продуктом и регистрировать цвет (после всех трех промывок конечный элюент должен представлять собой прозрачный раствор).

12. Добавить 75 мкл каждого элюента и раствор для суммарной флуоресценции после стадий 7–11 в 96–луночный непрозрачный планшет или планшет с черным дном.

13. Измерить интенсивность флуоресценции с помощью Tecan infinite M200 в непрозрачном 96–луночном планшете или в планшете с черным прозрачным дном. Возбуждение/испускание: 460/500 нм, усиление: 50.

Примечание.

Для 13871–10 инкубация частиц HAP в искусственной слюне (стадия 2) составляла 24 часа.

Для 13871–12 инкубация частиц HAP в искусственной слюне (стадия 2) составляла 2 часа.

ПРИМЕРЫ

Пример 1

Заявители приготовили несколько частиц с покрытием в соответствии с процедурой поверхностного связывания настоящего изобретения, описанной в настоящем документе. Как показано в таблицах 1–2, заявители образовали покрытие PLGA–частиц из лейцина, валина, триптофана, метионина и аргинина с хитозаном и ксантановой камедью, с поливинилпирролидоном (Plasdone K29/32), гидрохлоридом этиллаурилальгината (LAE) и с несколькими соединениями формулы I. Такие частицы с покрытием впоследствии анализировали в соответствии с процедурой флуоресцентного анализа связывания PLGA–частиц, описанной в настоящем документе, и результаты приведены ниже в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Контроль LAE HLA HMP PSSA элюат 1 44004 53131 51145 46139 45424 элюат 2 44258 55917 55056 47294 46104 смыв 1 44989 54437 48126 46326 46941 смыв 2 19323 19844 29424 16783 22667 смыв 3 6163 9800 12342 6276 7785 смыв 4 4102 6124 8299 3732 3111

Таблица 2

Контр. H20 HLA 17 18 31 Лейцин Валин Трип– тофан Метио– нин Аргинин K29 Хитозан Железо Ксантановая камедь 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 элюат 1 40179 40940 46331 45981 47077 44022 43637 42969 43874 43544 42235 41487 37783 38275 элюат 2 41602 39325 44069 не элюат не элюат 43775 39421 41819 42047 43597 42833 41400 не элюат 40309 смыв 1 33717 40128 40072 не элюат не элюат 36404 37812 38450 38765 42145 38568 42579 не элюат 42501 смыв 2 10541 20092 16709 не элюат не элюат 15709 19342 17180 15714 17362 15563 32460 не элюат 35681 смыв 3 3023 8046 5902 50511 51951 5150 4276 4255 3525 4069 4930 26204 42823 6160 смыв 4 1490 4353 3129 33023 36129 2540 2594 2047 1858 2129 2494 19569 26957 24156 смыв 5 1329 2945 1734 19396 17702 1612 1795 1338 1292 1448 1519 12608 9313 33728

Результаты в таблицах отражают степень связывания для каждой покрытой полимером PLGA–частицы с покрытыми слюной HAP. Среди полимеров, обеспечивающих особенно прочное связывание, были хитозан и ксантановая камедь. Прочное связывание наблюдалось для LAE, HLA и соединений 17, 18 и 31. Умеренное связывание регистрировали для всех аминокислот и PVP. PSSA проявила слабое связывание, а молекулами, не показавшими никакого взаимодействия, были железо и HMP.

Пример 2

Заявители приготовили и провели испытания нескольких частиц с покрытием в соответствии с флуоресцентным анализом адсорбции PLGA–частиц настоящего изобретения, который описан в настоящем документе, с использованием материалов, перечисленных в таблицах. Как это отражено в таблицах, заявители наносили на частицы покрытие из хлорида дистеармония/диэтония ПГ диметикона (Silquat J2 4B), хитозана (Chitosan LMW), поликватерния–10 (Ucare JR 30 M, Ucare LR–400), хлоридфосфат миристаамидопропил ПГ–димония (Arlaskil PTM–LQ–AP), фосфата диметикона PEG–8 (Siliphos A–100) и метилметакрилата (MMA) и диаэтиламиноэтилметакрилата (DEAEMA) (Kollicoat Smart Seal 30D).

Расчет

Для расчета применяли исходные данные, полученные с помощью устройства для регистрации флуоресценции. Рассчитывали среднее результатов суммарной флуоресценции для каждой технологии для получения средней интенсивности суммарной флуоресценции. Данные для собранных элюентов и смывов нормировали на среднюю суммарную флуоресценцию соответствующих повторно суспендированных PLGA–частиц и методик. Такую величину рассчитывали для каждой лунки образца для всех смывов, обработанных на основе различных методик. Для нормирования применяли следующую формулу:

(Исходное значение флуоресценции элюента в смыве лунки образца той или иной методики/средняя интенсивность суммарной флуоресценции для такой методики) * 100

Для каждой стадии смыва соответствующей методики рассчитывали среднее и стандартное отклонение. На построенном графике приведены значения нормированной интенсивности флуоресценции для каждой технологии, а планки погрешностей отражают стандартное отклонение нормированных данных.

Таблица 3

Суммарная флуоресценция 1% Silquat JR–4B Вода 0,25% Chitosan LMW 0,25% Ucare JR 30 M 0,25% Ucare LR 400 Arlasilk PTM–LQ–AP Siliphos A 100 Kollicoat Smart Seal 30D 1 4603 4255 4664 2405 3535 4647 4357 7020 2 4936 4746 5116 4789 3281 4877 4547 7662 Средн. значение 4769,5 4500,5 4890 3597 3408 4762 4452 7341

Таблица 4

Исходные данные 1% Silquat JR–4B Вода 0,25% Chitosin LMW 0,25% Ucare JR 30 M 0,25% Ucare LR 400 Arlasilk PTM–LQ–AP Siliphos A 100 Kollicoat Smart Seal 30D Элюат для обработки 1251 2523 2855 8 90 943 3231 29 1277 2498 2876 8 87 1002 3293 35 1303 2676 2928 5 38 1049 2974 30 Смыв 1 363 1513 1724 4 217 654 1893 5 364 1551 1888 4 203 496 1819 5 361 1562 2055 3 93 531 1856 6 Смыв 2 61 181 176 4 118 170 216 3 49 154 210 1 127 55 130 3 47 143 156 2 68 195 101 2 Смыв 3 43 114 128 2 93 88 32 1 30 145 83 3 81 32 29 2 32 147 83 3 29 67 27 1

Таблица 5

Суммарная флуоресценция

1% PQ6 0,5% PQ6 0,25% PQ6 0,25% Ucare LR400 0,125% Ucare LR400 Вода 0,25% Ucare JR 400 0,125% Ucare JR 400 1% Kollicoat smartseal 30 D 0,5% Kollicoat smartseal 30 D 0,25% Kollicoat smartseal 30 D 1 3258 3617 3837 3967 2966 3805 2091 3850 6352 8996 7048 2 3653 3545 3867 4072 3047 3885 2217 3829 6502 8339 7140 Средн. 3455,5 3581 3852 4019,5 3006,5 3845 2154 3839,5 6427 8667,5 7094

Таблица 6

Исходные данные

1% PQ6 0,5% PQ6 0,25% PQ6 0,25% Ucare LR400 0,125% Ucare LR400 Вода 0,25% Ucare JR 400 0,125% Ucare JR 400 1% Kollicoat smartseal 30 D 0,5% Kollicoat smartseal 30 D 0,25% Kollicoat smartseal 30 D Отходы 1688 1411 1308 866 200 2680 260 1315 4 4 23 1699 1266 1123 748 272 2515 420 1357 3 3 19 1748 1128 1183 757 345 2663 372 1334 3 6 19 Смыв 1 844 652 768 1111 58 1495 101 1543 2 2 10 901 889 910 1211 62 1403 153 1718 2 1 21 918 808 953 1063 81 1521 130 1536 3 2 21 Смыв 2 163 199 287 430 3 102 2 263 1 2 9 155 214 346 481 4 147 2 323 2 1 6 135 245 354 509 3 126 2 416 1 1 10 Смыв 3 56 83 129 284 3 38 2 174 1 1 5 56 111 199 329 3 41 1 180 2 2 4 67 121 172 344 4 43 1 211 2 1 9

Результаты в таблицах отражают степень аффинности для каждой методики покрытия полимером PLGA–частиц к покрытым слюной HAP. К полимерам, которые демонстрировали связывание от очень прочного до прочного (0–10% и 10–25% флуоресценции в элюатах смыва), относились поликватерний–10 (например, UCare LR 400, UCare JR 30, UCare JR 400), сополимер, включающий метилметакрилат (MMA) и диэтиламиноэтилметакрилат (DEAEMA) (например, Kollicoat Smart seal 30 D). К полимерам, для которых наблюдали умеренное связывание (25–40% флуоресценции в элюатах смыва), относятся поликватерний–6 (например, Tilamar Quat 640), хлоридфосфат миристамидопропил ПГ–димония (например, Arlasilk PTM), силиконы (например, хлорид дистеармония/диэтония ПГ диметикон, Silquat J2 4B). К молекулам, которые демонстрировали от слабого связывания до полного отсутствия связывания (40%< флуоресценции в элюатах смыва), относится вода, низкомолекулярный хитозан, анионные молекулы (например, Siliphos A 100).

Расчет удерживания. Процент удерживания рассчитывали с предположительной суммарной процентной долей, равной 100%. Процент для нормированных элюатов после обработки и смывов впоследствии вычитали из 100% суммарной флуоресценции для измерения степени аффинности (процент удерживания) для каждой методики покрытия полимером PLGA–частиц к покрытым слюной HAP.

Результаты в таблицах отражают степень аффинности для каждой методики покрытия полимером PLGA–частиц к покрытым слюной HAP. К полимерам, которые демонстрировали удерживание от очень прочного до прочного (90–100% и 75–90%), относились поликватерний–10 (например, UCare LR 400, UCare JR 30, UCare JR 400), сополимер, включающий метилметакрилат (MMA) и диэтиламиноэтилметакрилат (DEAEMA) (например, Kollicoat Smart seal 30 D). Полимеры, среди которых наблюдали умеренное связывание (60–75%), включают поликватерний–6 (например, Tilamar Quat 640), миристамидопропил хлоридфосфат ПГ–димония (например, Arlasilk PTM), силиконы (например, хлорид дистеармония/диэтония ПГ диметикон, Silquat J2 4B). К молекулам, которые демонстрировали от слабого связывания от до полного отсутствия связывания (40–60% и 40%>), относится вода, низкомолекулярный хитозан, анионные молекулы (например, Siliphos A 100). Такое взаимодействие также наглядно представлено на фотографиях соответствующих лунок с помощью насыщенности желто–зеленого цвета.

Группа изобретений относится к новым частицам с покрытием и их применению. Предложены частица с покрытием, которая связывается с, прикрепляется или соединяется c поверхностью полости рта, и ее применение. Частица содержит субстрат, который представляет собой частицу или наночастицу, полученную из сополимера молочной и гликолевой кислот (PLGA), и покрытие, ковалентно связанное с субстратом, которое представляет собой гидрохлорида этиллауриларгинат. Частица дополнительно может содержать активный ингредиент. Введение в полость рта частицы с покрытием обеспечивает полезное воздействие на полость рта. 3 н. и 1 з.п. ф-лы, 6 табл., 2 пр.

1. Частица с покрытием, которая связывается с, прикрепляется или соединяется c поверхностью полости рта, содержащая:

(а) субстрат, который представляет собой частицу или наночастицу, полученную из сополимера молочной и гликолевой кислот (PLGA), и

(b) покрытие, ковалентно связанное с субстратом, которое представляет собой гидрохлорида этиллауриларгинат.

2. Частица по п. 1, дополнительно содержащая активный ингредиент.

3. Способ обеспечения полезного воздействия на полость рта, включающий введение в указанную полость рта частицы с покрытием по п. 1.

4. Способ обеспечения полезного воздействия на полость рта, включающий введение в указанную полость рта частицы с покрытием по п. 2.