Способ моделирования синдрома Ашермана на крысах Российский патент 2023 года по МПК G09B23/28 A61B17/42 

Изобретение относится к экспериментальной хирургии. Предложен способ моделирования синдрома Ашермана, отличающийся тем, что выскабливается и удаляется весь эндометрий маточных рогов. Операция проводится следующим образом: вскрытие маточных рогов вдоль по всей длине, от воронок до непарной части матки (в которой имплантации не происходит), проводится кюретаж всего эндометрия, затем выполняется гемостаз, и последующее ушивание разреза обвивным швом (также обладающим гемостатическими свойствами). Модель используется для изучения методов лечения синдрома Ашермана, позволяя полностью исключить фертильность при достаточно глубоком и тщательном кюретаже.

Синдром Ашермана, или внутриматочные синехии - это патологическое состояние, характеризующееся образованием спаек и выростов эндометрия с его склерозом и фиброзом. Заболевание известно также как синдром Фритча, травматическая атрофия эндометрия или склероз эндометрия. Предлагаемая модель соотносится с тяжелой степенью синдрома Ашермана: сращения плотные, состоят из склерозированной соединительной ткани, заполняют более 75% полости матки, блокируют устья маточных труб, дно матки.

Актуальность: синдром Ашермана возникает у женщин всех рас с одинаковой частотой. После выскабливания полости матки у родивших женщин риск возникновения заболевания составляет 25%. Неразвивающаяся, или замершая беременность, чаще приводит к возникновению данной патологии и составляет до 30% случаев.

В связи с широкой распространенностью и недостаточной эффективностью лечения синдрома Ашермана в последние годы предлагались новые методы лечения этого синдрома, включая клеточную терапию (патент RU 2725006 С2). Из литературных источников известны следующие способы моделирования ВМС у лабораторных животных:

• «химический», когда в полость рогов матки с помощью шприца вводят различные повреждающие химические агенты, разрушающие эндометрий

[1-5];

• «физический», когда с помощью жесткого предмета (металлическая игла, кюретка, шпатель) проводят выскабливание внутренней поверхности рогов матки [6-9];

• «инфекционный», когда в полость рогов матки вводят липополисахариды (ЛПС) клеточной стенки бактерий, что приводит к локальному воспалительному процессу и повреждению эндометрия [10].

Согласно литературным данным, все способы оказывают стабильное повреждение эндометрия, приводят к формированию внутриматочных спаек, что приводит к значительному снижению репродуктивной функции у животных.

Однако эндометрий склонен быстро и, главное, полноценно регенерировать, причем даже наличие сформировавшихся спаек в большинстве случаев не приводит к бесплодию, так что создать полноценную модель ВМС у экспериментальных животных крайне трудно, бесплодия добиться удается только у части животных. У всех прочих животных (от 30 до 60% в зависимости от метода) рождается меньше детенышей (чаще всего от 2 до 10). Поэтому в последние годы имеется устойчивая тенденция к созданию сочетанных многокомпонентных способов моделирования ВМС. Например, сочетания механического выскабливания с введением ЛПС [11].

Для решения данной проблемы нами предложена чисто механическая модель синдрома Ашермана, включающая хирургическое удаление всего эндометрия маточных рогов, отличающаяся тем, что в маточных рогах просто не остается ни одного участка здорового эндометрия, для чего проводят вскрытие маточных рогов вдоль по всей длине, от воронок до непарной части матки (в которой имплантации не происходит), кюретаж всего эндометрия, гемостаз, и последующее ушивание разреза обвивным швом.

Предложенная модель синдрома Ашермана позволяет полностью исключить фертильность при достаточно глубоком и тщательном кюретаже, и соответственно точно оценивать лечебный эффект препаратов и методов для лечения данного синдрома.

Предложенная модель синдрома Ашермана у крыс характеризуется повреждением эндометрия, снижением эндометриальных желез, развитием фиброза и формированием фиброзных спаек, что характерно для клинической картины данного заболевания у людей. Полученная модель синдрома Ашермана у крыс является состоятельной, так как в отличие от прочих разновидностей, дававших при проверке восстановление фертильности почти у трети прооперированных в сроки от четырех месяцев после операции обеспечивается стопроцентное бесплодие пожизненно. Краткий протокол:

Используются половозрелые самки крыс линии Wistar (возраст 4-6 мес.) Нанесение травмы эндометрия выполняли под общим наркозом:

• Премедикация:

Атропин 10 мкг/кг

Димедрол 10 мг/кг

Дроперидол 100 мкг/кг

• Собственно, наркоз:

Золетил 7,5 мг/кг

Рометар 0,05-0,1 мл/кг

После наркотизации, нанесения офтальмогеля на роговицу и обработки передней брюшной стенки (сбривание волос, обработка антисептиком) (Фигура 1, 2) - на передней брюшной стенке производилось послойное рассечение кожи, ПЖК, белой линии живота (лапаротомия). Длина разреза - 5 см. (Фигура 3, 4).

При помощи электрокоагулятора обеспечивался гемостаз поверхностных сосудов. Края раны, укрытые стерильными салфеткам, разведены в стороны ранорасширителем (Фигура 5, 6).

Далее произведен осмотр брюшной и тазовой полостей. Петли кишок не раздуты, перистальтика активна, серозная оболочка не изменена. Мочевой пузырь расположен по средней линии, кпереди от матки. Матка расположена по средней линии, правильной формы, патологические образования не обнаружены. Правый маточный рог - форма не изменена, диаметр равен 4 мм. Правый яичник - без особенностей. Левый маточный рог имеет правильную форму, диаметр - 4 мм. Левый яичник - без патологии (Фигура 7, 8).

В рану выводились поочередно рога матки. При помощи скальпеля и микрохирургических ножниц, отступив на 3 мм от тела матки, рога вскрывались продольным разрезом, не доходя 3 мм до яйцевода. Микрокюреткой производилось выскабливание эндометрия по всей длине рога. Обеспечение гемостаза (Фигура 9, 10).

Во вскрытые рога матки устанавливались по 2 силиконовых катетера диаметром 2 мм: катетер №1 с многочисленными отверстиями для выполнения функции дренажа, катетер №2 - сплошной, служащий для несмыкания роговой полости в начальный репаративный период для предотвращения ее зарастания. После введения катетеров рога ушивались обвивным швом при помощи атравматического материала 7.0 Prolene на колющей игле (Фигура 11, 12, 13).

Далее произведено орошение брюшной и тазовой полостей теплым физиологическим раствором (0,9% NaCl). Излишки раствора удалялись при помощи стерильных салфеток.

На передней брюшной стенке выполнялись контрапертуры, через которые выводились катетеры «наружу» (Фигура 14, 15, 16).

Края раны у базального отдела рогов матки фиксировали к брюшине передней брюшной стенки при помощи узловых швов атравматическим материалом 7.0 Prolene на колющей игле - формирование трубчатой стомы.

Контроль гемостаза. Катетеры дополнительно были фиксированы одиночным швом к передней брюшной стенке (Фигура 17, 18, 19).

С целью профилактики послеоперационных инфекционных осложнений внутрибрюшинно вводили антибиотик широкого спектра (Цефтриаксон 10 мг/кг). Контроль гемостаза. Послойное ушивание лапаротомной раны узловым швом. После прекращения отхождения отделяемого дренажные катетеры №1 удаляется, а выведенные через контрапертуру катетеры №2 обрезаются до длины примерно 2-3 сантиметра снаружи брюшной полости, сворачиваются и укладываются во временный подкожные карманы, также ушиваемый поверх катетеров, для предотвращения контаминации. Обработка послеоперационной раны метрогиловым гелем во избежание погрызов швов. Катетеры удаляются спустя трое суток после операции.

Наблюдение в течение 12 месяцев после операции продемонстрировало полное отсутствие фертильности.

КОММЕНТАРИИ:

Фигуры 1 и 2. Обработка передней брюшной стенки.

Фигуры 3,4. Послойное рассечение тканей ПБС.

Фигуры 5, 6. Ревизия брюшной полости.

Фигуры 7, 8. Продольное рассечение рогов матки.

Фигуры 9, 10. Выскабливание эндометрия микрокюреткой.

Фигуры 11-13. Введение в просвет рогов силиконовых катетеров.

Фигуры 14-16. Формирование контрапертуры на передней брюшной стенке.

Фигуры 17-21. Формирование стом.

Фигура 22. Наложение кожного шва.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине и гинекологии. Вскрывают маточные рога вдоль по всей длине, от воронок до непарной части матки. Проводят кюретаж всего эндометрия, затем выполняют гемостаз. Во вскрытые рога матки устанавливают по 2 силиконовых катетера диаметром 2 мм: катетер N1 - дренажный катетер с отверстиями, катетер N2 - сплошной, служащий для несмыкания и предотвращения зарастания полости рога. После введения катетеров разрез рогов ушивают обвивным швом, при этом после прекращения отхождения отделяемого дренажные катетеры N1 удаляют, а выведенные через контрапертуру катетеры N2 обрезают так, чтобы снаружи брюшной полости оставалось 2-3 см, через 3 суток после операции катетеры N2 удаляют. Способ позволяет полностью исключить фертильность при достаточно глубоком и тщательном кюретаже, и соответственно точно оценивать лечебный эффект препаратов и методов для лечения данного синдрома. 22 ил.

Способ моделирования синдрома Ашермана на крысах, отличающийся тем, что вскрывают маточные рога вдоль по всей длине, от воронок до непарной части матки, проводят кюретаж всего эндометрия, затем выполняют гемостаз, во вскрытые рога матки устанавливают по 2 силиконовых катетера диаметром 2 мм: катетер N1 - дренажный катетер с отверстиями, катетер N2 - сплошной, служащий для несмыкания и предотвращения зарастания полости рога, после введения катетеров разрез рогов ушивают обвивным швом, при этом после прекращения отхождения отделяемого дренажные катетеры N1 удаляют, а выведенные через контрапертуру катетеры N2 обрезают так, чтобы снаружи брюшной полости оставалось 2-3 см, через 3 суток после операции катетеры N2 удаляют.