СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ ПРЕЭКЛАМПСИИ НА ФОНЕ ХРОНИЧЕСКОЙ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ У БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН Российский патент 2024 года по МПК A61B5/02 G01N33/48 G01N33/50 

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и может быть использовано для диагностики степени тяжести преэклампсии на фоне хронической артериальной гипертензией у беременных женщин в сроки гестации 24 - 40 недель.

Преэклампсия (ПЭ) - это осложнение беременности, родов и послеродового периода, характеризующееся повышением после 20-й недели беременности систолического артериального давления (САД) ≥140 мм рт. ст. и/или диастолического артериального давления (ДАД) ≥90 мм рт. ст. независимо от уровня артериального давления (АД) в анамнезе в сочетании с протеинурией или хотя бы одним другим параметром, свидетельствующим о присоединении полиорганной недостаточности (код по МКБ Х О11, О14). Преэклампсия - одно из самых тяжелых осложнений в акушерстве, характеризующиеся высокими показателями материнской и перинатальной заболеваемости и смертности [Преэклампсия: руководство / под ред. Г.Т. Сухих, Л.Е. Мурашко. - М.: ГЕОТАР-медиа, 2010. - 576 с.]. Во время беременности 25-30% гипертензивных расстройств связаны с хронической артериальной гипертензией. Присоединение преэклампсии (ПЭ) осложняет около 20% беременностей у женщин с хронической артериальной гипертензией и связано с повышенной материнской и перинатальной заболеваемостью, по сравнению с изолированной ПЭ ПЭ [Maternal Perinatal Characteristics in Patients with Severe Preeclampsia: A Case-Control Nested Cohort Study / I. Aracil Moreno, P. Rodríguez-Benitez, M. Ruiz-Minaya [et al.] // Int. J. Environ. Res. Public Health. - 2021. - Vol. 18, № 22. - P. 11783. https://doi.org/10.3390/ ijerph182211783].

В клинических рекомендациях «Преэклампсия. Эклампсия. Отеки, протеинурия и гипертензивные расстройства во время беременности, в родах и послеродовом периоде» от 2021 года, впервые предложено выделять ПЭ на фоне хронической артериальной гипертензии (ХАГ) с умеренными и тяжелыми клиническими проявлениями [Преэклампсия. Эклампсия. Отеки, протеинурия и гипертензивные расстройства во время беременности, в родах и послеродовом периоде: клинические рекомендации / З.С. Ходжаева, Р.Г. Шмаков, Г.М. Савельева и др. - М., 2021. - 79 с.]. В настоящее время в клинической практике используется классификация гипертензивных расстройств при беременности, в соответствии с которой выделяется:

1. Преэклампсия умеренная (код по МКБ Х О14.0) и тяжелая преэклампсия (код по МКБ ХО 14.1),

2. Преэклапсия на фоне хронической артериальной гипертензии (ХАГ) (код по МКБ Х О 11).

Согласно действующим клиническим рекомендациям преэклампсия на фоне ХАГ делится по тяжести течения на умеренную и тяжелую. Критерии диагностики умеренной преэклампсии на фоне ХАГ: повышение после 20-й недели беременности САД ≥140 мм рт. ст. и/или ДАД ≥90 мм рт. ст. независимо от уровня АД в анамнезе в сочетании с протеинурией ≥0,3 г в сутки или ≥ 0,3 г/л в 2-х порциях мочи, взятых с интервалом в 6 часов. Критерии диагностики тяжелой преэклампсии на фоне ХАГ: повышение после 20-й недели беременности САД ≥160 мм рт. ст. и/или ДАД ≥110 мм рт. ст. независимо от уровня АД в анамнезе в сочетании с протеинурией ≥5 г в сутки или ≥ 3 г/л в 2-х порциях мочи, взятых с интервалом в 6 час, или хотя бы одним другим параметром, свидетельствующим о присоединении полиорганной недостаточности [Преэклампсия. Эклампсия. Отеки, протеинурия и гипертензивные расстройства во время беременности, в родах и послеродовом периоде: клинические рекомендации / З.С. Ходжаева, Р.Г. Шмаков, Г.М. Савельева и др. - М., 2021. - 79 с.]. Трудности диагностики степени тяжести преэклампсии, развившейся у женщин с ХАГ, могут возникнуть в связи с волнообразным течением ХАГ и ее обострением в конце беременности [Шехтман М.М. Руководство по экстрагенитальной патологии у беременных. - М.: Триада-Х, 1999. - 814 с.]. Степень тяжести преэклампсии определяет тактику ведения беременности. При наличии тяжелой преэклампсии необходимо своевременно решать вопрос о родоразрешении, так как прерывание беременности является единственным этиотропным методом лечения данного осложнения беременности. В то же время при умеренной преэклампсии выбирается выжидательная тактика ведения пациентки с пролонгированием беременности.

Таким образом, разработка способа диагностики степени тяжести преэклампсии на фоне ХАГ у беременных с хронической артериальной гипертензией позволит оптимизировать тактику ведения беременности, срок родоразрешения, тем самым будет способствовать снижению перинатальной заболеваемости и смертности.

Диагностика степени тяжести преэклампсии по общепринятым клинико-лабораторным критериям продолжительна по времени, так как кроме уровня артериального давления, необходимо определить уровень суточной протеинурии или протеинурию в двух порциях мочи, взятых с интервалом в 6 часов [Преэклампсия. Эклампсия. Отеки, протеинурия и гипертензивные расстройства во время беременности, в родах и послеродовом периоде: клинические рекомендации / З.С. Ходжаева, Р.Г. Шмаков, Г.М. Савельева и др. - М., 2021. - 79 с.]. Известен способ морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии путем иммуногистохимического исследования базальной децидуальной оболочки плаценты с определением индекса экспрессии маркера транскрипции (TFAM) митохондриальной ДНК в клетках цитотрофобласта. При индексе экспрессии маркера транскрипции (TFAM) митохондриальной ДНК от 0,32 до 0,4 у.е. диагностируют умеренно выраженную преэклампсию, а при индексе экспрессии TFAM равном или менее 0,31 у.е. - тяжелую [Патент № 2682251 Российская Федерация. Способ морфологической диагностики степени тяжести преэклампсии / Кулида Л.В., Перетятко Л.П., Рокотянская Е.А., Панова И.А., Малышкина А.И., Майсина А.И. // Изобретения.Полезные модели.- 2019. - № 8].

Способ имеет следующие недостатки:

1 Отсутствуют сведения о применении способа у беременных с хронической артериальной гипертензии, что ограничивает применение данного способа у данной категории пациентов.

2. Выполнение исследования после родоразрешения позволяет лишь верифицировать диагноз на морфологическом уровне и не позволяет скорректировать тактику ведения беременности и своевременно начать лечебные мероприятия.

3. Не известна точность способа.

Известен способ определения степени тяжести преэклампсии, сущность которого заключается в определении с помощью метода проточной цитофлуориметрии относительного содержания CD16+ моноцитов в периферической крови беременных. При относительном содержании CD16+ моноцитов больше или равно 73,5%, верифицируют тяжелую преэклампсию, если меньше - умеренную. [Патент № 2712228 Российская Федерация. Способ определения степени тяжести преэклампсии по относительному содержанию CD16+ моноцитов в периферической крови беременных / Красный А.М., Ломов Н.А., Кан Н.Е., Борис Д.А., Садекова А.А., Эмирасланов Э.Ю. // Изобретения. Полезные модели.- 2020. - № 3].

Способ имеет следующие недостатки:

1. Отсутствуют сведения о применении способа у беременных с хронической артериальной гипертензии, что ограничивает применение данного способа у данной категории пациентов.

2. В способе используется дорогостоящее оборудование и реактивы;

3. Оборудование, использованное в способе, не входит в стандарты оснащения клинико-диагностических лабораторий стационаров акушерских клиник.

Известен способ оценки тяжести преэклампсии у беременных [Патент № 2250468 Российская Федерация. Способ оценки тяжести преэклампсии у беременных / Левченко В.Г. Зорин Н.А. Зорина Р.М. // Изобретения. Полезные модели. - 2005. - № 11]. Сущность изобретения состоит в том, что в сыворотке крови беременных женщин определяют содержание циркулирующего иммунного комплекса основного белка миелина с иммуноглобулином класса G в сроки беременности после 20 недели и его значения менее 0,1 мкг/мл свидетельствуют о неосложненной беременности, уровень от 0,1 до 0,2 мкг/мл - о преэклампсии легкой степени, уровень от 0,2 до 0,5 мкг/мл - о преэклампсии тяжелой степени.

Недостатками способа:

1. Отсутствуют сведения о применении способа у беременных с хронической артериальной гипертензии, что ограничивает применение способа у данной категории пациентов.

2. Способ не учитывает современные диагностические критерии, на основании которых определяется степень тяжести преэклампсии: в настоящее время в клинической практике используется классификация гипертензивных расстройств при беременности, в соответствии с которой выделяется преэклампсия средней тяжести и тяжелая преэклампсия, преэклапсия средней тяжести и тяжелая преэклампсия с хронической артериальной гипертензии [Преэклампсия. Эклампсия. Отеки, протеинурия и гипертензивные расстройства во время беременности, в родах и послеродовом периоде: клинические рекомендации / З.С. Ходжаева, Р.Г. Шмаков, Г.М. Савельева и др. - М., 2021. - 79 с.].

Наиболее близким к заявляемому способу является способ диагностики тяжелой преэклампсии [Патент № 2587781 Российская Федерация. Способ диагностики тяжелой преэклампсии / Панова И.А., Кудряшова А.В., Хлипунова Д.А., Рокотянская Е.А. // Изобретения. Полезные модели.- 2016. - № 17]. Способ включает иммунологическое исследование периферической венозной в 22-37 недель беременности. Определяют показатель относительного содержания CD62L+ клеток в популяции нейтрофилов и при его значении, равном или менее 57%, диагностируют тяжелую преэклампсию.

Способ имеет недостатки:

1. В способе используется дорогостоящее оборудование и реактивы;

2. Оборудование, использованное в способе, не входит в стандарты оснащения клинико-диагностических лабораторий стационаров акушерских клиник.

3. Более низкая точность способа (85,2%) по сравнению с заявляемым.

Техническим результатом заявляемого способа является повышение точности и расширение арсенала средств диагностики степени тяжести преэклампсии на фоне ХАГ у беременных женщин.

Заявляемый технический результат достигается тем, что у беременных женщин с преэклампсией (ПЭ), возникшей на фоне хронической артериальной гипертензии (ХАГ), в сроке гестации 24 - 40 недель до начала терапии определяют уровень систолического артериального давления, отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови, уровень тромбоспондина-1 и уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов с последующим вычислением диагностического индекса D по формуле:

D=23,9911-0,066xA₁-8,9376xA₂-0,0097xA₃-0,0654xA₄

Где:

A₁ -уровень систолического артериального давления (мм рт.ст.);

A₂ - отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови (усл. ед.);

A₃ - уровень тромбоспондина -1 (нг/мл);

A₄ - уровень активности креатинкиназы (ЕД/л);

23,9911 - constanta.

При D более 0 диагностируют умеренную ПЭ на фоне ХАГ, при D менее 0 диагностируют тяжелую ПЭ на фоне ХАГ у беременных женщин c точностью 88,4%.

Способ осуществляется следующим образом:

1.У беременной женщины с преэклампсией на фоне ХАГ в сроке гестации 24 - 40 недель при поступлении в стационар до начала терапии проводят измерение артериального давления (АД) сфигмоманометром в положении сидя, рука должна находиться на столе на уровне сердца. Нижний край манжеты должен быть на 2 см выше локтевого сгиба. АД измеряют в состоянии покоя после 5 минутного отдыха.

2. Из кубитальной вены забирают 4 мл периферической венозной крови в пластиковую пробирку Vacutainer с ЭДТА (для выполнения клинического анализа крови) и 4 мл периферической венозной крови в одноразовую вакуумную пробирку Vacutainer с антикоагулянтом цитратом натрия 3,2% (для определения уровня тромбоспондина-1 и уровня активности креатинкиназы).

3. Показатель отношения абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови рассчитывают по стандартной методике путем деления абсолютного количества нейтрофилов на абсолютное количество лимфоцитов на основе результатов клинического анализа крови и выражают в условных единицах. Абсолютное количество лейкоцитов и нейтрофилов определяют на гематологическом анализаторе экспертного класса ADVIA 2120i Siemens Healthcare Diagnostics Inc Tarrytown, NY, USA, используя 135 мкл образцов цельной венозной крови.

4. Для получения лизата тромбоцитов венозную кровь из вакуумной пробирки с 3,2%-ным раствором цитрата натрия центрифугируют при 300 g в течение 5 минут и получают богатую тромбоцитами плазму (БТП). Для получения лизата богатой тромбоцитами плазмы [Патент № 2739515 Российская Федерация. Способ приготовления лизата тромбоцитов с высоким содержанием факторов роста / Боровкова Н.В., Макаров М.С., Сторожева М.В., Пономарев И.Н. // Изобретения. Полезные модели. - 2020. - № 36], стандартизированной до 400х10³ (клеток /мкл), богатую тромбоцитами плазму центрифугируют при 400 g в течение 10 минут. Затем удаляют верхний слой супернатанта и ресуспендируют осадок. Если концентрация тромбоцитов в плазме выше 400х10³ (клеток/мкл), то до нужной концентрации доводят бедной тромбоцитами плазмой. Полученные образцы замораживают при температуре минус 70°С. После размораживания образцы лизатов тромбоцитов центрифугируют при 3000 g в течение 20 минут для удаления всех клеточных фрагментов и определяют уровень тромбоспондина-1 и уровень активности креатинкиназы.

5. Определение уровня активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов выполняют на автоматическом биохимическом анализаторе AU 480 фирмы Beckman Coulter с использованием реактивов той же фирмы, время проведения исследования 30 минут, результат выражают в (ЕД/л).

6. Определение уровня тромбоспондина-1 в лизатах тромбоцитов проводят иммуноферментным методом на автоматическом анализаторе «EL-808» (США) с использованием реактивов фирмы «R&D Systems» (США), согласно методике к набору. Длительность исследования 4 часа 30 минут, результат выражают в нг/мл.

На основании математической обработки полученных данных методом дискриминантного анализа определяют прогностический индекс D по формуле:

D= 23,9911 - 0,066 x A₁ - 8,9376 x A₂ - 0,0097 x A₃ - 0,0654 x A₄

Где:

A₁ -уровень систолического артериального давления (мм рт.ст.);

A₂ - отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови (усл. ед.);

A₃ - уровень тромбоспондина -1 в лизатах тромбоцитов (нг/мл);

A₄ - уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов (ЕД/л);

23,9911 - constanta.

Если D более 0 - диагностируют умеренную ПЭ на фоне ХАГ, если D менее 0 диагностируют тяжелую ПЭ на фоне ХАГ у беременных женщин.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается способ диагностики тяжести ПЭ на фоне ХАГ у беременных в сроке гестации 24 - 40 недель по определению уровня систолического артериального давления, отношения абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови, уровня тромбоспондина-1 и уровня активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов.

Известно, что тромбоциты, в дополнение к их роли в системе гемостаза, участвуют в широком спектре реакций иммунитета. Известно, что значение NLR выше у пациенток с преэклампсией, особенно при тяжелом ее течении [Predictive role ofneutrophil-to-lymphocyte ratio inpreeclampsia: ameta-analysis including 3982patients / Q. Kang, W. Li, N. Yu [et al.] // Pregnancy Hypertens. 2020. - Vol. 20. - P. 111-118.https://doi.org/10.1016/j.preghy.2020.03.009.

Креатинкиназа (КК) относится к ферментам класса фосфотрансфераз, осуществляет обратимый перенос фосфатного остатка между АТФ и креатином с образованием АДФ и креатинфосфата. Продукт этой реакции креатинфосфат играет важную роль в процессах метаболизма. Известно, что повышенные уровни креатинкиназы в крови связаны с явлениями цитолиза и повышаются при инфарктах миокарда, повреждении мышц, физических нагрузках. Повышенные уровни КК в сыворотке крови усиливают прессорные реакции, обеспечивая сокращение сосудов, противодействуя действию оксида азота (NO) и способствуя задержке натрия в почках.[ Brewster L.M., Karamat F.A., van Montfrans G.A. Creatine Kinase and Blood Pressure : A Systematic Review // Med. Sci. (Basel). - 2019. - Vol. 7, № 4. - P. 58. doi: 10.3390/medsci7040058].

Тромбоспондин-1 (TSP-1) - естественный ингибитор ангиогенеза [Normal ranges of angiogenesis regulatory proteins in human platelets / J.E. Peterson, D. Zurakowski, J.E. Jr. Italiano [et al.] // Am. J. Hematol. - 2010. - Vol. 85, № 7. - P. 487-493. doi: 10.1002/ajh.21732]. Известно, что TSP-1 ограничивает действие NO из-за его взаимодействия с CD47 даже при очень низких концентрациях в плазме [Krishna S.M., Golledge J. The role of thrombospondin-1 in cardiovascular health and pathology //Int. J. Cardiol. - 2013. - Vol. 168, № 2. - P. 692-706. doi:10.1016/j.ijcard.2013.04.139]. TSP-1 также участвует в процессе агрегации тромбоцитов и адгезии к эндотелиальным клеткам, его низкие уровни определяются при восстановлении функции эндотелия [Increased plasma cathepsin S and trombospondin-1 in patients with acute ST-segment elevation myocardial infarction / R. Befekadu, K. Christiansen, A. Larsson, M. Grenegrd // Cardiol. J. - 2019. - Vol. 26, № 4. - P. 385-393. doi: 10.5603/CJ.a2018.0030]. Кроме того известно, что гиперактивность тромбоцитов с индуктором агрегации АДФ прямо коррелирует с концентрацией TSP-1 в плазме [Platelet hyperaggregability in patients with atrial fibrillation. Evidence of a background proinflammatory milieu / N.E. Procter, J. Ball, D.T. Ngo [et al.] // Herz. - 2016. - Vol. 41, № 1. - P. 57-62. doi: 10.1007/s00059-015-4335-y].

Отличительными признаками способа являются:

в сроке гестации 24 - 40 недель до начала терапии определяют уровень систолического артериального давления, отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови, уровнень тромбоспондина -1 и уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов с последующим вычислением диагностического индекса D по формуле:

D = 23,9911 - 0,066 x A₁ - 8,9376 x A₂ - 0,0097 x A₃ - 0,0654 x A₄

Где:

A₁ -уровень систолического артериального давления (мм рт.ст.);

A₂ - отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови (усл.ед.);

A₃ - уровень тромбоспондина -1 в лизатах тромбоцитов (нг/мл);

A₄ - уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов (ЕД/л);

23,9911 - constanta.

При значении D более 0 диагностируют умеренную ПЭ на фоне ХАГ, при D менее 0 диагностируют тяжелую ПЭ на фоне ХАГ.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами:

Пример 1. Беременная Н., 27 лет, беременность 24 недели, поступила в акушерский стационар с жалобами на повышение артериального давления. Страдает хронической артериальной гипертензией в течение 5 лет. Настоящая беременность первая. В первой половине беременности артериальное давление в пределах 130/90 - 150/95 мм.рт.ст. Получала гипотензивную терапию. Артериальное давление в течение последнего месяца нестабильное, 140/80 - 155/100 мм рт. ст. Две недели назад появились отеки голеней. От госпитализации отказывалась. При поступлении пульс 85 ударов в минуту, артериальное давление 155/100 мм.рт.ст., отеки голеней и передней брюшной стенки, в однократной порции мочи - протеинурия 1,32 г/л. Выставлен предварительный диагноз: Беременность 33 недели. Преэклампсия на фоне ХАГ.

При поступлении в стационар до начала терапии согласно заявленному способу были определены следующие показатели: уровень систолического артериального давления, который составил 155 мм рт.ст., отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови - 0,73 усл.ед., уровень тромбоспондина-1 в лизатах тромбоцитов - 554,274 нг/мл, уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов - 61,6 ЕД/л.

Рассчитан диагностический индекс D:

D = 23,9911 - 0,066 x 155 - 8,9376 x 0,73 - 0,0097 x 554,274 -0,0654 x 61,6 = -2,17, то есть D меньше 0, что указывает на тяжелую ПЭ на фоне ХАГ.

При дальнейшем обследовании суточная протеинурия составила 5,0 г/л, что соответствует тяжелой ПЭ.

Диагноз подтвердился.

Пример 2. Беременная Ж., 30 лет, беременность 39 недель, доставлена бригадой скорой помощи в родильный дом с повышением артериального давления до 150/90 мм рт. ст. Беременность вторая, в анамнезе преждевременные роды в сроке 33 недели. При первой беременности преэклампсия с 30 недель. Страдает хронической артериальной гипертензией в течение 3 лет. Во время беременности артериальное давление в пределах 130/90-140/90 мм рт. ст. При поступлении пульс 80 ударов в минуту, артериальное давление 150/90 мм рт. ст., в однократной порции мочи - протеинурия 0,3 г/л. Отеки голеней, передней брюшной стенки. Выставлен предварительный диагноз: Беременность 30 недель. Преэклампсия на фоне ХАГ.

При поступлении в стационар до начала терапии согласно заявленному способу были определены следующие показатели: уровень систолического артериального давления, который составил 165 мм рт.ст., отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови - 0,09 усл.ед., уровень тромбоспондина-1 в лизатах тромбоцитов - 492,688 нг/мл, уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов - 75,6 ЕД/л.

Рассчитан диагностический индекс D:

D = 23,9911 - 0,066 x 165 - 8,9376 x 0,09 - 0,0097 x 492,688 -0,0654 x 75,6 = 2,57, то есть D больше 0, что указывает на наличие умеренной преэклампсии на фоне ХАГ.

При дальнейшем обследовании суточная протеинурия составила 0,99 г/л, что соответствует умеренной ПЭ.

Диагноз подтвердился.

Указанным способом обследовано 34 женщины с преэклампсией на фоне ХАГ. Данные исследования приведены в таблице 1.

Таблица 1.

Показатель Количество обследованных Всего женщин 34 Истинноположительный результат 17 Ложноположительный результат 1 Истинноотрицательный результат 13 Ложноотрицательный результат 3 Итого:
точность заявляемого способа - 88,4%
чувствительность заявляемого способа - 85%
специфичность заявляемого способа - 92,8%

Преимущества заявляемого способа:

1. Высокая точность, чувствительность и специфичность способа;

2. Способ не требует специальной подготовки пациентки;

3. Исследование количества нейтрофилов и лимфоцитов входит в стандарт обследования женщин с данной патологией и не требуют дополнительного забора крови для выполнения данного способа.

4. Способ обеспечивает персонифицированный подход к ведению беременных женщин с преэклампсией на фоне ХАГ, своевременно решить вопрос о родоразрешении или пролонгировании беременности в соответствие с тяжестью ПЭ, что снизит риск перинатальной патологии для матери и ребенка.

D=23,9911-0,066xA₁-8,9376xA₂-0,0097xA₃-0,0654xA₄

Где:

A₁ -уровень систолического артериального давления (мм рт.ст.);

A₂ - отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови (усл. ед.);

A₃ - уровень тромбоспондина -1 (нг/мл);

A₄ - уровень активности креатинкиназы (ЕД/л);

23,9911 - constanta

При D более 0 диагностируют умеренную ПЭ на фоне ХАГ, при D менее 0 диагностируют тяжелую ПЭ на фоне ХАГ у беременных женщин c точностью 88,4%.

Способ осуществляется следующим образом:

1. У беременной женщины с преэклампсией на фоне ХАГ в сроке гестации 24 - 40 недель при поступлении в стационар до начала терапии проводят измерение артериального давления (АД) сфигмоманометром в положении сидя, рука должна находиться на столе на уровне сердца. Нижний край манжеты должен быть на 2 см выше локтевого сгиба. АД измеряют в состоянии покоя после 5 минутного отдыха.

2. Из кубитальной вены забирают 4 мл периферической венозной крови в пластиковую пробирку Vacutainer с ЭДТА (для выполнения клинического анализа крови) и 4 мл периферической венозной крови в одноразовую вакуумную пробирку Vacutainer с антикоагулянтом цитратом натрия 3,2% (для определения уровня тромбоспондина-1 и уровня активности креатинкиназы).

3. Показатель отношения абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови рассчитывают по стандартной методике путем деления абсолютного количества нейтрофилов на абсолютное количество лимфоцитов на основе результатов клинического анализа крови и

анализаторе «EL-808» (США) с использованием реактивов фирмы «R&D Systems» (США), согласно методике к набору. Длительность исследования 4 часа 30 минут, результат выражают в нг/мл.

На основании математической обработки полученных данных методом дискриминантного анализа определяют прогностический индекс D по формуле:

D= 23,9911 - 0,066 x A₁ - 8,9376 x A₂ - 0,0097 x A₃ - 0,0654 x A₄

Где:

A₁ -уровень систолического артериального давления (мм рт.ст.);

A₂ - отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови (усл. ед.);

A₃ - уровень тромбоспондина -1 в лизатах тромбоцитов (нг/мл);

A₄ - уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов (ЕД/л);

23,9911 - constanta

Если D более 0 - диагностируют умеренную ПЭ на фоне ХАГ, если D менее 0 диагностируют тяжелую ПЭ на фоне ХАГ у беременных женщин.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается способ диагностики тяжести ПЭ на фоне ХАГ у беременных в сроке гестации 24 - 40 недель по определению уровня систолического артериального давления, отношения абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови, уровня тромбоспондина-1 и уровня активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов.

Известно, что тромбоциты, в дополнение к их роли в системе гемостаза, участвуют в широком спектре реакций иммунитета. Известно, что значение NLR выше у пациенток с преэклампсией, особенно при тяжелом ее течении [Predictive role ofneutrophil-to-lymphocyte ratio].

10.5603/CJ.a2018.0030]. Кроме того известно, что гиперактивность тромбоцитов с индуктором агрегации АДФ прямо коррелирует с концентрацией TSP-1 в плазме [Platelet hyperaggregability in patients with atrial fibrillation. Evidence of a background proinflammatory milieu / N.E. Procter, J. Ball, D.T. Ngo [et al.] // Herz. - 2016. - Vol. 41, № 1. - P. 57-62. doi: 10.1007/s00059-015-4335-y].

Отличительными признаками способа являются:

в сроке гестации 24 - 40 недель до начала терапии определяют уровень систолического артериального давления, отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови, уровень тромбоспондина -1 и уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов с последующим вычислением диагностического индекса D по формуле:

D = 23,9911 - 0,066 x A₁ - 8,9376 x A₂ - 0,0097 x A₃ - 0,0654 x A₄

Где:

A₁ -уровень систолического артериального давления (мм рт.ст.);

A₂ - отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови (усл.ед.);

A₃ - уровень тромбоспондина -1 в лизатах тромбоцитов (нг/мл);

A₄ - уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов (ЕД/л);

23,9911 - constanta

При значении D более 0 диагностируют умеренную ПЭ на фоне ХАГ, при D менее 0 диагностируют тяжелую ПЭ на фоне ХАГ.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами:

Пример 1. Беременная Н., 27 лет, беременность 24 недели, поступила в акушерский стационар с жалобами на повышение артериального давления. Страдает хронической артериальной гипертензией в течение 5 лет. Настоящая беременность первая. В первой половине беременности артериальное давление в пределах 130/90 -

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и представляет собой способ диагностики степени тяжести преэклампсии (ПЭ) на фоне хронической артериальной гипертензией (ХАГ) у беременных женщин в сроки гестации 24-40 недель включающий определение до начала терапии уровня систолического артериального давления (А₁), отношения абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови (А₂), уровня тромбоспондина -1 (А3) и уровня активности креатинкиназы (А4) в лизатах тромбоцитов с последующим вычислением диагностического индекса D по формуле: D=23,9911-0,066xA₁-8,9376xA₂ -0,0097xA₃-0,0654xA₄

При значении D более 0 диагностируют умеренную ПЭ на фоне ХАГ, при D менее 0 диагностируют тяжелую ПЭ на фоне ХАГ c точностью 88,4%.

Способ обеспечивает персонифицированный подход к ведению беременных женщин с ПЭ на фоне ХАГ, позволит оптимизировать тактику ведения беременности и своевременно решить вопрос о родоразрешении, что снизит риск перинатальной патологии для матери и ребенка.

Способ диагностики степени тяжести преэклампсии (ПЭ) на фоне хронической артериальной гипертензии (ХАГ) у беременных женщин путем исследования периферической венозной крови, отличающийся тем, что в сроке гестации 24-40 недель до начала терапии определяют уровень систолического артериального давления, отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови, уровень тромбоспондина -1 и уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов с последующим вычислением диагностического индекса D по формуле:

D=23,9911-0,066xA₁-8,9376 x A₂ -0,0097 x A₃ 0,0654 x A₄

Где:

A₁ - уровень систолического артериального давления (мм рт.ст.);

A₂ - отношение абсолютного числа нейтрофилов к абсолютному числу лимфоцитов (NLR) в периферической венозной крови (усл. ед.);

A₃ - уровень тромбоспондина -1 в лизатах тромбоцитов (нг/мл);

A₄ - уровень активности креатинкиназы в лизатах тромбоцитов (ЕД/л); 23,9911 - constanta

При значении D более 0 диагностируют умеренную ПЭ на фоне ХАГ, при D менее 0 диагностируют тяжелую ПЭ на фоне ХАГ.