Способ дифференциальной диагностики хронического псевдотуморозного панкреатита и рака поджелудочной железы Российский патент 2024 года по МПК A61B5/00 G01N1/30 

Изобретение относится к медицине, в частности, к хирургии, онкологии, клинической лабораторной диагностике, патоморфологии и может применяться в дифференциальной диагностике продолженного роста рака поджелудочной железы у больных с объемным образованием в поджелудочной железе после резекционно-дренирующей операции по поводу хронического псевдотуморозного панкреатита.

Известен способ дифференциальной диагностики хронического псевдотуморозного панкреатита и рака поджелудочной железы с использованием клинико-инструментальных и лабораторных методов исследования, таких как определение уровня онкомаркера СА 19-9, выполнение компьютерной томографии органов брюшной полости, использование эндоскопической ультрасонографии (ЭУС) с тонкоигольной аспирационной биопсией (ТИАБ) и последующим прижизненным патоморфологическим исследованием. [Le Cosquer G, Maulat С, Bournet В, Cordelier P, Buscail E, Buscail L. Pancreatic Cancer in Chronic Pancreatitis: Pathogenesis and Diagnostic Approach. Cancers (Basel). 2023 Jan 26;15(3):761.; Кубышкин B.A. Рак поджелудочной железы / B.A. Кубышкин, B.A. Вишневский. M.: ИД Медпрактика. М., 2003 386 с.].

Недостатками этих способов являются недостаточная чувствительность и специфичность современных методов визуализации. Результаты визуализации, клиническая картина, факторы риска и лабораторные данные совпадают у пациентов с воспалительными процессами поджелудочной железы и у пациентов с новообразованиями поджелудочной железы.

Ближайшим к заявляемому является способ прижизненного патоморфологического исследования биоптата ткани поджелудочной железы, полученного при выполнении эндоскопической ультрасонографии. Под контролем эндоскопического ультразвука при помощи иглы 22G выполняется трехкратный забор ткани из массообразующей зоны поджелудочной железы с последующим цитологическим и гистологическим исследованием. При наличии злокачественных клеток больному устанавливается диагноз рак поджелудочной железы, при отсутствии данных за злокачественный рост устанавливается диагноз хронического псевдотуморозного панкреатита [Hassan G.M., Laporte L., Paquin S.C., Menard С, Sahai A.V., Masse В., Trottier H. Endoscopic Ultrasound Guided Fine Needle Aspiration versus Endoscopic Ultrasound Guided Fine Needle Biopsy for Pancreatic Cancer Diagnosis: A Systematic Review and Meta-Analysis. Diagnostics. 2022;12:2951. 10.3390/diagnostics12122951].

Недостатком способа, выбранного в качестве прототипа, является то, что он недостаточно чувствителен и специфичен. Имеются данные, что частота ложноотрицательных результатов биопсии при подозрении на рак поджелудочной железы достигает 60%, поскольку позволяет получить только цитологический образец с небольшим количеством гистологических структур, что не позволяет провести полный анализ ткани для диагностики. Отсутствие злокачественных клеток при патоморфологическом исследовании может объясняться тем, что забор ткани производился из перитуморозной зоны, зоны некроза опухоли. Особую сложность представляет собой диагностика злокачественного процесса, развившегося на фоне хронического псевдотуморозного панкреатита. У пациентов с хроническим псевдотуморозным панкреатитом более чем в 16 раз увеличивается вероятность развития аденокарциномы протоков поджелудочной железы, особенно, в течение первых двух лет после постановки диагноза хронический панкреатит, с общей частотой до 5%.

Задачей настоящего изобретения является повышение точности диагностики продолженного роста рака поджелудочной железы у больных, перенесших резекционно-дренирующую операцию по поводу хронического псевдотумарозного панкреатита.

Технический результат поставленной задачи достигается тем, что в способе дифференциальной диагностики хронического псевдотуморозного панкреатита и рака поджелудочной железы путем цитологического и гистологического исследования биоптата тканей, сок поджелудочной железы пациентов, перенесших резекционно-дренирующие операции, помещают в матригель с последующим выявлением опухолевых клеток и при росте опухолевых клеток в матригеле диагностируют рак поджелудочной железы.

Хронический панкреатит является потенциальным фактором риска возникновения рака поджелудочной железы. Это заболевание характеризуется хроническим воспалительным процессом паренхимы поджелудочной железы, что в конечном итоге приводит к необратимому фиброзу, экзокринной и эндокринной недостаточности поджелудочной железы.

Хронический панкреатит сопровождается снижением регуляции генов, подавляющих опухоль, таких как p16, ТР53 и SMAD4 соответственно, наряду с повышением уровня онкогенного KRAS, TNF-α и NF-kB, что, в свою очередь, приводит к повреждению протоковых клеток поджелудочной железы. Панкреатический сок богат белками, секретируемыми из протока поджелудочной железы, где возникает рак поджелудочной железы, и, таким образом, он является ближайшим источником для исследования изменений, связанных с опухолью.

Способ осуществляется следующим образом. В предоперационном периоде на этапе диагностики больному с объемным образованием в поджелудочной железе выполняют тонкоигольную аспирационную биопсию образования под контролем эндоскопической ультрасонографии. При отсутствии данных за злокачественный рост в прижизненном патоморфологическом исследовании больному устанавливают диагноз хронического псевдотуморозного панкреатита с последующей подготовкой к хирургическому вмешательству в объеме резекционно-дренирующая операция на поджелудочной железе. Во время хирургического вмешательства под контролем ультразвукового датчика интраоперационно находят панкреатический проток с последующей пункцией его иглой калибра 20, выполняют забор панкреатического сока. Для получения сфероида из сока поджелудочной железы применяют метод культивирования на низкоадгезивных поверхностях с использованием 96-луночных планшетов Ultra-Low Attachment Surface (Corning, США) полной питательной среды. В качестве биоматрикса используют Матригель (Matrigel™ Basement Membrane Matrix, BD, США) для проведения исследования. Сфероиды культивируют 21 день в CO2-инкубаторе при 37°С, во влажной атмосфере с 5% уровнем CO2. Визуализация эксплантов осуществляется с использованием световой микроскопии. Через три недели после хирургического вмешательства по поводу хронического псевдотуморозного панкреатита больному выполняется компьютерная томография брюшной полости с внутривенным контрастированием. При наличии инфильтрата в области хирургического вмешательства и при положительном росте опухолевых клеток из сока поджелудочной железы в матригеле больному выполняется второй этап хирургического вмешательства, заключающийся в панкреатодуоденальной резекции с выполнением лимфодиссекции по онкологическим стандартам.

Пример. Больной В., 58 л. госпитализирован в Мариинскую больницу Санкт-Петербурга в 2021 г. с диагнозом хронический псевдотуморозный панкреатит с поражением головки поджелудочной железы. Больному было выполнено хирургическое вмешательство в объеме резекция головки поджелудочной железы, рассечение главного панкреатического протока и наложение позадиободочного панкреатопанкреатикоэнтероанастомоза на петле кишки, выключенной по Ру. При срочном гистологическом исследовании и в окончательном прижизненном патоморфологическом исследовании данных за злокачественный рост в удаленном материале не было получено. Выполнена диагностика заявляемым способом. При световой микроскопии спустя 18 дней был отмечен рост клеток схожих по строению с протоковой аденокарциномой. Больному выполнено МСКТ органов брюшной полости с внутривенным контрастированием, на котором в месте резекции головки поджелудочной железы выявлен инфильтрат неправильной формы с нечеткими контурами 25*15 мм, накапливающий контрастный препарат. Больному выполнен второй этап хирургического вмешательства в виде панкреатодуоденальной резекции. В окончательном прижизненном патоморфологическом исследовании выявлен рост протоковой аденокарциномы.

Заявляемый способ является информативным и высоко воспроизводимым в определении продолженного роста злокачественного процесса в поджелудочной железе на фоне хронического псевдотуморозного панкреатита. Он позволяет эффективно диагностировать продолженный рост злокачественной опухоли на фоне хронического панкреатита и в ранние сроки предупредить метастазирование в другие органы, расширяя показания к радикальному хирургическому вмешательству.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, патологической анатомии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики рака поджелудочной железы у больных с объемным образованием в поджелудочной железе после резекционно-дренирующей операции по поводу хронического псевдотуморозного панкреатита. Для этого во время выполнения резекционно-дренирующей операции выполняют забор панкреатического сока, который помещают в Матригель для культивирования. В случае роста опухолевых клеток в Матригеле диагностируют рак поджелудочной железы. Изобретение позволяет эффективно диагностировать продолженный рост злокачественной опухоли на фоне хронического псевдотуморозного панкреатита, предупредить в ранние сроки метастазирование в другие органы, расширяя показания к радикальному хирургическому вмешательству. 1 пр.

Способ дифференциальной диагностики хронического псевдотуморозного панкреатита и рака поджелудочной железы путем цитологического и гистологического исследования биоптата тканей, отличающийся тем, что сок поджелудочной железы пациентов, перенесших резекционно-дренирующие операции, помещают в матригель с последующим выявлением опухолевых клеток и при росте опухолевых клеток в матригеле диагностируют рак поджелудочной железы.