АТТЕНУИРОВАННЫЕ ШТАММЫ РЕОВИРУСА ПТИЦ 94826 C140 И 96139 C140 Российский патент 2024 года по МПК A61K39/15 C12N7/04 

ДАННЫЕ О ПРОДОЛЖАЮЩЕЙ ЗАЯВКЕ

Настоящая заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке на патент США с регистрационным №62/942426, поданной 2 декабря 2019 г., которая включена в данный документ посредством ссылки.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Реовирусы птиц связаны с некоторыми заболеваниями сельскохозяйственной птицы, включающими синдром мальабсорбции и синдром карликовости (RSS), хотя их роль как первичных патогенов в этих клинических синдромах неясна. С другой стороны, достаточно очевидна связь реовирусов птиц с клиническими случаями вирусных артрита/теносиновита, поскольку реовирусы были выделены из сухожилий пораженных птиц. Контроль вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами, можно осуществлять путем вакцинации племенных бройлеров комбинацией живых и/или инактивированных вакцин, при которой материнский иммунитет передается потомству для ранней защиты от заражения в полевых условиях. В отношении бройлеров живые аттенуированные вакцины доступны для применения в день вылупления и для применения in ovo. Существующие коммерческие вакцинные штаммы (S1133, 1733, 2408 и 2177, среди прочих) были выделены в 1960-1970-х гг. и не обеспечивают защиты от циркулирующих в настоящее время реовирусов, изоляты которых были получены от особей с подтвержденными случаями вирусных артрита/теносиновита. Таким образом, существует потребность в выделении и получении характеристик циркулирующих в настоящее время реовирусов птиц, а также в разработке эффективных вакцин.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение включает выделенный реовирус птиц, где выделенный реовирус птиц представляет собой штамм реовируса птиц 94826 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077, или его потомство или производное, где его потомство или производное характеризуются по сути такими же биологическими и серологическими характеристиками, что и штамм реовируса птиц 94826 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077.

Настоящее изобретение включает выделенный реовирус птиц, где выделенный реовирус птиц представляет собой штамм реовируса птиц 96139 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078, или его потомство или производное, где его потомство или производное характеризуются по сути такими же биологическими и серологическими характеристиками, что и штамм реовируса птиц 96139 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078.

В некоторых аспектах настоящее изобретение включает препарат главного вирусного посевного материала на основе реовируса птиц, как описано в данном документе.

В некоторых аспектах выделенный реовирус птиц является лиофилизированным, высушенным путем сублимационной сушки, замороженным или представлен в виде шипучей таблетки.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает композицию, содержащую выделенный реовирус птиц, как описано в данном документе. В некоторых аспектах композиция содержит адъювант. В некоторых аспектах композиция содержит фармацевтически приемлемый носитель. В некоторых аспектах композиция составлена для интраназального, внутриглазного, перорального, чресслизистого, внутримышечного, подкожного введения или введения in ovo. В некоторых аспектах композиция составлена для опрыскивания или распыления в виде аэрозоля.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает вакцину, содержащую выделенный реовирус птиц, как описано в данном документе, или композицию, как описано в данном документе. В некоторых аспектах вакцина снижает восприимчивость птицы из отряда Galliformes к вирусным артриту/теносиновиту, индуцируемым реовирусами. В некоторых аспектах вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 1/генотипа 5. В некоторых аспектах вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 2/генотипа 1.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает вакцину для птиц из отряда Galliformes, содержащую количество штамма реовируса птиц 94826 С140, депонированного в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077, или его потомства или производного, достаточное для защиты птиц от вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами, и фармацевтически приемлемый носитель. В некоторых аспектах вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 1/генотипа 5.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает вакцину для птиц из отряда Galliformes, содержащую количество штамма реовируса птиц, представляющего собой штамм реовируса птиц 96139 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078, или его потомства или производного, достаточное для защиты птиц от вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами, и фармацевтически приемлемый носитель. В некоторых аспектах вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 2/генотипа 1.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает шипучую таблетку, содержащую реовирус птиц, композицию или вакцину, как описано в данном документе.

Настоящее изобретение включает способ снижения восприимчивости птицы из отряда Galliformes к вирусным артриту/теносиновиту, индуцируемым реовирусами, при этом способ включает введение птице реовируса птиц, композиции или вакцины, как описано в данном документе.

Настоящее изобретение включает способ защиты птицы из отряда Galliformes от вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами, при этом способ включает введение птице реовируса птиц, композиции или вакцины, как описано в данном документе.

В некоторых аспектах способов, описанных в данном документе, вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляет собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 1/генотипа 5. В некоторых аспектах вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 2/генотипа 1. В некоторых аспектах способов, описанных в данном документе, введение является интраназальным, внутриглазным, пероральным, чресслизистым, внутримышечным или подкожным. В некоторых аспектах способов, описанных в данном документе, введение включает введение in ovo. В некоторых аспектах способов, описанных в данном документе, реовирус птиц, композицию или вакцину вводят с помощью аэрозоля. В некоторых аспектах способов, описанных в данном документе, реовирус птиц, композицию или вакцину вводят с помощью питьевой воды. В некоторых аспектах птица представляет собой курицу или индейку. В некоторых аспектах способов, описанных в данном документе, введение осуществляют племенной самке птицы или самцу птицы.

Настоящее изобретение включает выработку антител к реовирусам у сельскохозяйственной птицы, при этом способ включает введение птице выделенного реовируса птиц, композиции или вакцины, как описано в данном документе. В некоторых аспектах птица представляет собой курицу или индейку.

Настоящее изобретение включает диагностический набор, содержащий выделенный реовирус птиц, как описано в данном документе.

Настоящее изобретение включает способ выявления воздействия на птицу реовируса птиц, при этом способ включает определение того, что образец антисыворотки, полученный от птицы, характеризуется специфическим связыванием с реовирусом птиц, как описано в данном документе. В некоторых аспектах птица представляет собой курицу или индейку.

Настоящее изобретение включает гипериммунную сыворотку крови против реовируса птиц, как описано в данном документе.

Настоящее изобретение включает антитело, которое связывается с реовирусом птиц, как описано в данном документе, и не связывается со штаммами реовируса птиц S1133, 1733, 2408 и/или 2177. В некоторых аспектах антитело представляет собой моноклональное антитело.

Вышеприведенное краткое описание настоящего изобретения не предназначено для описания каждого раскрытого варианта осуществления или каждого варианта реализации настоящего изобретения. В описании, которое следует далее, приводятся более конкретные иллюстративные варианты осуществления. В нескольких местах в настоящей заявке представлено руководство в виде списка примеров, каковые примеры можно применять в различных комбинациях. В каждом случае изложенный список служит только в качестве типичной группы и не должен толковаться как исключающий список.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

В настоящем изобретении представлены два аттенуированных штамма реовируса птиц, представляющие собой штамм реовируса птиц 94826 С140 и штамм реовируса птиц 96139 С140, а также их потомство и производные. Эти аттенуированные штаммы реовирусов являются безопасными и эффективными при введении птицам в виде составов на основе живых вирусов для предупреждения инфекций, вызываемых реовирусами птиц, и снижения частоты возникновения и тяжести вирусных артрита и/или теносиновита, индуцируемых реовирусами.

В одном аспекте настоящее изобретение включает штамм реовируса птиц 94826 С140 и его потомство и производные. Штамм реовируса птиц 94826 С140 представляет собой подвергнутый аттенуации штамм 94826 реовируса птиц, полученный путем стосорокакратного пассирования штамма 94826 реовируса птиц на куриных эмбрионах. Штамм реовируса птиц 94816 представляет собой реовирус группы 1/генотипа 5, ассоциированный с вирусными артритом и теносиновитом у сельскохозяйственной птицы. Штамм реовируса птиц 94816 более подробно описан в международной заявке № PCT/US 2015/013449 (WO 2015/116778) и заявке на патент США №15/223623, которые включены в данный документ посредством ссылки в всей своей полноте. Штамм аттенуированного реовируса птиц 94826 С140 также является реовирусом птиц группы 1/генотипа 5. Штамм аттенуированного реовируса птиц 94826 С140 был депонирован в Американской коллекции типовых культур (АТСС^®), 10801 Университетский бульвар, Манассас, Вирджиния 20110-2209, США, под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077 13 августа 2019 г. Это депонирование осуществлялось в соответствии с Будапештским договором о международном признании депонирования микроорганизмов для целей патентной процедуры. Аттенуированный реовирус птиц 94826 С140 также представлен в архиве с рег. № PDRC: 121116 в хранилище вирусов Центра диагностики и исследований в области птицеводства (PDRC) Университета Джорджии, расположенного по адресу 953 Колледж-Стейшн-Роуд, Атенс, Джорджия, 20602. Безопасность и эффективность штамма реовируса птиц 94826 С140 в виде живой вакцины на основе аттенуированного реовируса более подробно описаны в примере 3.

В другом аспекте настоящее изобретение включает штамм реовируса птиц 96139 С140 и его потомство и производные. Штамм реовируса птиц 96139 С140 представляет собой подвергнутый аттенуации штамм 96139 реовируса птиц, полученный путем стосорокакратного пассирования штамма 96139 реовируса птиц на куриных эмбрионах. Штамм реовируса птиц 96139 представляет собой реовирус группы 2/генотипа 1, ассоциированный с вирусными артритом и теносиновитом у сельскохозяйственной птицы. Штамм реовируса птиц 96139 более подробно описан в международной заявке № PCT/US 2015/013449 (WO 2015/116778) и заявке на патент США №15/223623, которые включены в данный документ посредством ссылки в всей своей полноте. Штамм реовируса птиц 96139 был депонирован в АТСС^® под регистрационным номером патентного депонирования РТА-125688 7 марта 2019 г. Аттенуированный реовирус птиц 96139 С140 также является реовирусом птиц группы 2/генотипа 1. Аттенуированный реовирус птиц 96139 С140 был депонирован в Американской коллекции типовых культур (АТСС^®), 10801 Университетский бульвар, Манассас, Вирджиния 20110-2209, США, под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078 13 августа 2019 г. Это депонирование осуществлялось в соответствии с Будапештским договором о международном признании депонирования микроорганизмов для целей патентной процедуры. Аттенуированный реовирус птиц 9619 С140 также представлен в архиве с рег. № PDRC: 119812 в хранилище вирусов Центра диагностики и исследований в области птицеводства (PDRC) Университета Джорджии, расположенного по адресу 953 Колледж-Стейшн-Роуд, Атенс, Джорджия, 20602. Безопасность и эффективность штамма реовируса птиц 96139 С140 в виде живой вакцины на основе аттенуированного реовируса более подробно описаны в примере 3.

Как более подробно описано в международной заявке № PCT/US 2015/013449 (WO 2015/116778) и заявке на патент США №15/223623, штаммы реовирусов птиц 94826 и 96139 представляют собой две генетически и серологически различные группы реовирусов птиц, которые были выделены у животных при клинических случаях теносиновита. Генетический анализ их белков сигма-С у реовирусов птиц выявил новые генотипы, которые не связаны с существующими в настоящее время вакцинными штаммами реовирусов птиц.

Реовирусы птиц, наряду с реовирусами млекопитающих, относятся к роду Orthoreovirus семейства Reoviridae. Эти вирусы содержат геном из 10 сегментов dsRNA, заключенный в двойной икосаэдральный капсид без оболочки размером приблизительно 80 нм. Сегменты генома на основании их электрофоретической подвижности могут быть разделены на три больших (L1, L2, L3), три средних (M1, М2, М3) и четыре маленьких (S1, S2, S3, S4) сегмента, которые кодируют соответственно белки λ1, λ2, λ3, μ1, μ2, μNS, σ3, σ1, σ2, σNS. Белок σ2 представляет собой белок внешнего капсида, который несет специфические для группы нейтрализующие эпитопы. Он также связывает двухцепочечную РНК и был определен как цинк-содержащий металлопротеин. Белок сигма-С, минорный белок внешнего капсида, который кодируется сегментом σ1, представляет собой мишень для получения молекулярных характеристик реовирусов птиц и отвечает за прикрепление к клетке, а также за индукцию типоспецифических нейтрализующих антител. Вирион реовирусов птиц включает капсид, сердцевину и нуклеопротеиновый комплекс. Капсид вируса не имеет оболочки. Капсид/нуклеокапсид является изометрическим с икосаэдральной симметрией и имеет диаметр приблизительно 80-82 нм. Капсидная оболочка вирионов состоит из двух слоев. Обычно присутствуют все оболочки, или же внешняя оболочка часто утрачивается в процессе получения препарата. Капсиды выглядят круглыми. В структуре поверхности капсида выявляется регулярная схема с отличительными особенностями. Расположение капсомеров четко видимо. Проекции поверхности отсутствуют. Кор, или внутренний капсид, имеет диаметр приблизительно 60 нм. Препараты вирусов содержат один компонент частицы. Сердцевина имеет сферическую форму и состоит из генома, представленного dsRNA, с диаметром приблизительно 49 нм. Концы нитей выступают почти до поверхности капсида.

Настоящее изобретение включает препараты главного вирусного посевного материала, полученные из штамма реовируса птиц 94826 С140 (депонирован в АТСС^® под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077 13 августа 2019 г.) или штамма реовируса птиц 96139 С140 (депонирован в АТСС^® под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078 13 августа 2019 г.). Препарат главного вирусного посевного материала по настоящему изобретению можно получать и тестировать в соответствии со статьей 9 Свода федеральных нормативных актов (CFR), представленной в разделе 113.332 (Вакцина против теносиновита).

В настоящее изобретение также включены выделенное потомство и выделенные производные штамма реовируса птиц 94826 С140 (депонирован в АТСС^® под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077 13 августа 2019 г. ) и штамма реовируса птиц 96139 С140 (депонирован в АТСС^® под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078 13 августа 2019 г.) с эквивалентными или сходными биологическими, серологическими и/или генетическими характеристиками. Как используется в данном документе, серологические, биологические и генетические характеристики могут включать одну или несколько характеристик, описание которых содержится в данных, приведенных в примерах, включенных в данный документ. Более конкретно, штаммы-потомки или производные штаммов, представляющие собой РТА-126077 или РТА-1260789495, могут сохранять особенно благоприятные защитные свойства, относящиеся к настоящему изобретению, как более подробно описано в примерах, включенных в данный документ.

Реовирус птиц по настоящему изобретению можно размножать посредством общепринятых способов, включающих без ограничения любой из способов, описанных в разделе "Примеры", включенном в данный документ. Вкратце, субстрат, способный поддерживать репликацию реовируса птиц, инокулируют реовирусом птиц по настоящему изобретению, который размножают до репликации вируса до необходимого инфекционного титра или массового содержания антигена. После этого собирают материал, содержащий реовирус. Подходящие субстраты могут включать яйца с развивающимися эмбрионами, первичные культуры клеток (птиц), такие как, например, клетки печени куриных эмбрионов, фибробласты куриных эмбрионов или клетки почек кур, линии клеток млекопитающих, такие как, например, линия клеток VERO или линия клеток BGM-70, или линии клеток птиц, такие как, например, QT-35, QM-7 или LMH.

Настоящее изобретение включает композиции и вакцины, содержащие один или несколько выделенных вирусов, описанных в данном документе. Вакцинные препараты по настоящему изобретению можно получать и тестировать в соответствии со статьей 9 Свода федеральных нормативных актов (CFR), представленной в разделе 113.332 (Вакцина против теносиновита).

В некоторых вариантах осуществления вирус является живым. В некоторых вариантах осуществления изобретения вирус является инактивированным или убитым. В некоторых вариантах осуществления вирус или композиция или вакцина на его основе могут быть лиофилизированы. В некоторых вариантах осуществления вирус или композиция или вакцина на его основе могут быть заморожены. В некоторых вариантах осуществления вирус или композиция или вакцина на его основе могут быть высушены путем сублимационной сушки.

В некоторых вариантах осуществления вирус или композиция или вакцина на его основе могут быть составлены в виде шипучей таблетки. Такие шипучие таблетки могут быть, например, упакованы в легкие алюминиевые блистеры. Таблетку можно растворять в воде и вводить, например, перорально, назально или посредством распыляемого аэрозоля, при этом капли проникают в организм через слизистые оболочки птиц.

Такие композиции и вакцину можно вводить в качестве активного компонента для иммунизации птицы, чтобы вызвать иммунный ответ на реовирус птиц группы 1 и/или группы 2 и/или индуцировать иммунитет против такого реовируса птиц. Иммунитет может включать индукцию повышенного уровня защиты в популяции птиц после вакцинации по сравнению с невакцинированной группой. Иммунный ответ может обеспечивать или не обеспечивать защитный иммунитет. Иммунный ответ может, например, включать одно или несколько из клеточно-опосредованного иммунного ответа, который включает выработку лимфоцитов в ответ на воздействие антигена, и/или гуморального иммунного ответа, который включает выработку плазматических лимфоцитов (В-клеток) в ответ на воздействие антигена с последующей выработкой антител. Иммунизация может приводить к уменьшению выраженности, подавлению или предупреждению одного или нескольких симптомов вирусного артрита (VA)/теносиновита, ассоциированных с реовирусами птиц. Такие симптомы могут включать одно или несколько из снижения массы тела, уменьшения производства яиц, смертности, макроскопических поражений (в том числе, без ограничения, отека сухожилия, теносиновита, разрыва сухожилия и гидроперикарда) и гистологических изменений (в том числе, без ограничения, лимфоцитарного теносиновита, лимфоцитарного эпикардита и лимфоцитарного миокардита).

Композиция или вакцина по настоящему изобретению могут также содержать одно или несколько соединений с адъювантной активностью. Подходящие для этой цели соединения и композиции включают гидроксид алюминия, фосфат алюминия, оксид алюминия, растительные масла, животные жиры, эмульсии типа "масло в воде" или "вода в масле" на основе, например, минерального масла, такого как Bayol F™ или Marcol 52™, полного адъюванта Фрейнда, неполного адъюванта Фрейнда или растительного масла, такого как ацетат витамина Е, и сапонины.

Композиция или вакцина по настоящему изобретению может содержать один или несколько подходящих фармацевтически приемлемых носителей или разбавителей. Иммуногенная композиция или вакцина по настоящему изобретению также может содержать один или несколько стабилизаторов. Можно применять любой подходящий стабилизатор, в том числе углеводы, такие как сорбит, маннит, крахмал, сахароза, декстрин или глюкоза; белки, такие как альбумин или казеин; и буферы, такие как фосфат щелочного металла и т.п. Стабилизатор является особенно предпочтительным, если сухой вакцинный препарат получают путем лиофилизации.

Композиция или вакцина по настоящему изобретению может дополнительно содержать один или несколько иммуногенов, полученных из других патогенов, вызывающих инфекцию у сельскохозяйственной птицы. Такие иммуногены могут быть получены, например, из вируса болезни Марека (MDV), вируса инфекционного бронхита (IBV), вируса болезни Ньюкасла (NDV), вируса синдрома снижения яйценоскости (EDS), вируса ринотрахеита индеек (TRTV), поксвируса, реовируса, парвовируса кур и вируса нефрита птиц (в том числе без ограничения ANV-1 и ANV-2).

Композицию или вакцину можно вводить посредством любого подходящего известного способа инокуляции сельскохозяйственной птицы, в том числе назально, офтальмически, путем инъекции, с питьевой водой, с кормом, путем контакта, in ovo, в материнский организм, путем респираторной ингаляции и т.п. Иммуногенную композицию или вакцину можно вводить посредством методик массового введения, как например путем помещения вакцины в питьевую воду или путем опрыскивания или распыления в виде аэрозоля. При ведении путем инъекции иммуногенную композицию или вакцину можно вводить парентерально. Парентеральное введение включает, например, введение путем внутривенной, подкожной, внутримышечной или внутрибрюшинной инъекции.

В некоторых вариантах осуществления живую вакцину можно вводить в дозе не менее 10² титрационных единиц (где титрационные единицы определены в статье 9 раздела 113.332 Свода федеральных нормативных актов) на птицу, а вакцина может содержать антигенный эквивалент 10⁴-10¹⁰ TCID₅₀ на птицу (где TCID является сокращением от инфекционной дозы в тканевой культуре).

В некоторых вариантах осуществления живую вакцину можно вводить в дозе от приблизительно 10^1,5 до приблизительно 10⁷ TCID или EID (инфекционная доза для эмбриона).

В некоторых аспектах вакцина может содержать антигенный эквивалент приблизительно 10^1,5 TCID₅₀ на птицу, приблизительно 10² TCID₅₀ на птицу, приблизительно 10³ TCID₅₀ на птицу, приблизительно 10⁴ TCID₅₀ на птицу, приблизительно 10⁵ TCID₅₀ на птицу, приблизительно 10⁶ TCID₅₀ на птицу, приблизительно 10⁷ TCID₅₀ на птицу, приблизительно 10⁸ TCID₅₀ на птицу, приблизительно 10⁹ TCID₅₀ на птицу, приблизительно 10¹⁰ TCID₅₀ на птицу или любого их диапазона.

Композиции и вакцины по настоящему изобретению могут являться по сути чистыми. Как используется в данном документе, "по сути чистый" будет обозначать материал, по существу не содержащий каких-либо сходных макромолекул или других биологических частиц, которые обычно обнаруживаются вместе с ним в природе.

Композиции и вакцины по настоящему изобретению можно вводить птицам любого из множества видов птиц, восприимчивых к инфекции, вызываемой реовирусами птиц, в том числе без ограничения сельскохозяйственной птице, птицам из отряда Galliformes и экзотическим видам птиц. Птицы из отряда Galliformes включают без ограничения кур, индеек, тетеревов, перепелов и фазанов. Как используется в данном документе, сельскохозяйственная птица включает одомашненных птиц, которых содержат с целью сбора их яиц или забоя для получения мяса и/или перьев. Наиболее типичными являются представители надотряда Galloanserae (домашняя птица), в частности отряда Galliformes (который включает, например, кур, перепелов, индеек и тетеревов), и семейства Anatidae (в отряде Anseriformes), общеизвестного как "водоплавающие птицы" (включающего, например, уток, гусей и лебедей). Сельскохозяйственная птица может также включать других птиц, забой которых осуществляют ради их мяса, таких как голуби и горлицы, или птиц, которые рассматриваются как дичь, таких как фазаны. Куры включают без ограничения самок птиц, самцов птиц, бройлеров, цыплят для жарения, несушек, племенных птиц, потомство племенных самок птиц и несушек. Используемый в данном документе термин "восприимчивый к" означает возможность или факт пагубной реакции на упоминаемый микроорганизм по сравнению с невосприимчивыми особями или группами и/или одно или несколько патологических состояний, свидетельствующих о наличии инфекции, вызванной реовирусом птиц.

Вакцину по настоящему изобретению можно вводить сельскохозяйственной птице до или после вылупления. Сельскохозяйственная птица может получать вакцину в различном возрасте. Например, бройлеров можно вакцинировать in ovo в возрасте одного дня или в возрасте 2-3 недель. Поголовье несушек, или репродуктивное поголовье, можно вакцинировать, например, в возрасте приблизительно 6-12 недель и вторично вакцинировать в возрасте приблизительно 16-20 недель. Такое поголовье несушек, или репродуктивное поголовье, можно вакцинировать в возрасте приблизительно 6, приблизительно 7, приблизительно 8, приблизительно 9, приблизительно 10, приблизительно 11 или приблизительно 12 недель. Кроме того, в некоторых вариантах осуществления такое поголовье несушек, или репродуктивное поголовье, можно вакцинировать в возрасте, который соответствует приблизительно первым двум неделям. Такое поголовье несушек, или репродуктивное поголовье, можно вторично вакцинировать в возрасте приблизительно 16, приблизительно 17, приблизительно 18, приблизительно 19 или приблизительно 20 недель. Потомство такого поголовья несушек, или репродуктивного поголовья, может демонстрировать титр антител к описанному в данном документе полипептиду, что может предупредить или смягчить симптомы инфекции, вызываемой реовирусом птиц, у потомства. Вакцинацию in ovo можно проводить, например, в момент времени приблизительно 13 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 15 дней, приблизительно 16 дней, приблизительно 17 дней, приблизительно 18 дней, приблизительно 19 дней, приблизительно 20 дней или в любом диапазоне этих значений.

Кур можно вакцинировать в любом подходящем возрасте, и перед первой вакцинацией они обычно имеют возраст приблизительно от одного до трех дней. Кур можно вакцинировать только один раз. Или же, если используются две дозы вакцины, первую дают, например, когда куры имеют возраст от 3 дней до недели, а последующую спустя дополнительные 1-10 недель.

Несколько доз композиции можно вводить на протяжении всей жизни курицы. Поскольку материнский иммунитет является основным источником обеспечения защиты бройлерного потомства, обычно вакцинируют племенных кур, хотя при желании можно вакцинировать цыплят-бройлеров.

Настоящее изобретение включает способ обеспечения развития иммунного ответа в отношении варианта группы 1 и/или варианта группы 2 реовируса птиц у сельскохозяйственной птицы, при этом способ включает введение выделенного вируса, композиции или вакцины, как описано в данном документе. В некоторых аспектах иммунитет включает гуморальный и/или клеточный иммунитет. В некоторых аспектах иммунитет включает мукозный иммунитет.

Настоящее изобретение включает способ предупреждения инфекции, вызванной реовирусом птиц, у сельскохозяйственной птицы, при этом способ включает введение выделенного вируса, композиции или вакцины, как описано в данном документе.

В некоторых аспектах способов по настоящему изобретению введение включает инъекцию, опрыскивание, пероральное введение или ингаляционное введение. В некоторых аспектах способов по настоящему изобретению введение индуцирует мукозный иммунитет. В некоторых аспектах способов по настоящему изобретению введение предусматривает введение in ovo. В некоторых аспектах введение in ovo включает введение в момент времени приблизительно 13 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 15 дней, приблизительно 16 дней, приблизительно 17 дней, приблизительно 18 дней, приблизительно 19 дней, приблизительно 20 дней или в любом диапазоне этих значений.

Настоящее изобретение включает способ выявления воздействия на птицу варианта группы 1 и/или варианта группы 2 реовируса птиц, при этом способ включает определение того, характеризуется ли специфическим связыванием полученный от птицы образец антисыворотки с вирусом по настоящему изобретению. К примеру, настоящее изобретение включает применение одного или нескольких реовирусов птиц по настоящему изобретению в способах выявления воздействия на птицу реовируса птиц, при этом способ предусматривает определение того, что образец антисыворотки, полученный от птицы, характеризуется специфическим связыванием с реовирусом птиц по настоящему изобретению.

Настоящее изобретение также включает наборы, содержащие один или несколько реовирусов птиц по настоящему изобретению. Набор может включать один или несколько контейнеров, наполненных реовирусом птиц по настоящему изобретению. В некоторых аспектах вирус может являться, например, лиофилизированным, высушенным путем сублимационной сушки, замороженным или составленным в виде шипучей таблетки. Набор может содержать дополнительные отдельные контейнеры с другими штаммами реовирусов птиц или других патогенов сельскохозяйственной птицы. Такой набор может содержать дополнительные компоненты, как например вирус для положительного контроля, вирус для отрицательного контроля, вторичное антитело и/или детектируемый маркер. Кроме того, набор может содержать другие реагенты, как например также содержать буферы и растворы, необходимые для практического осуществления настоящего изобретения. Необязательно к такому(-им) контейнеру(-ам) могут прилагаться уведомление или печатные инструкции. Набор по настоящему изобретению может содержать "упаковочный материал". Используемый в данном документе термин "упаковочный материал" относится к одной или нескольким физическим структурам, применяемым для размещения содержимого набора. Упаковочный материал изготавливают посредством хорошо известных способов, предпочтительно с обеспечением стерильной, не содержащей загрязнений окружающей среды. Упаковочный материал может представлять собой твердую матрицу или такой материал, как стекло, пластик, бумага, фольга и т.п.

В настоящем изобретении представлены способы обнаружения и/или измерения количества реовируса птиц группы 1 или группы 2 в образце, полученном от птицы. Такой способ может включать приведение образца в контакт с антителом, которое селективно связывается с описанным в данном документе реовирусом птиц, как описано в данном документе, и измерение количества антитела, связывающегося с вирусом или белком в образце. Образец может представлять собой любой биологический материал, такой как ткань, кость, кровь, моча или фекалии. Способы данного аспекта настоящего изобретения применимы, например, для определения того, инфицирована ли сельскохозяйственная птица реовирусом птиц по настоящему изобретению. Инфицированных животных, идентифицированных таким образом, затем можно изолировать или умерщвлять с целью предупреждения переноса реовируса к другим животным.

Как используется в данном документе, "выделенный" относится к материалу, удаленному из его первоначальной среды (например, природной среды, если он встречается в природе) и таким образом измененному "рукой человека" относительно его естественного состояния.

Термин "и/или" обозначает один или все из перечисленных элементов или комбинацию любых двух или более из перечисленных элементов.

Слова "предпочтительный" и "предпочтительно" относятся к вариантам осуществления настоящего изобретения, которые могут предоставлять определенные преимущества в определенных обстоятельствах. Однако другие варианты осуществления также могут быть предпочтительными в тех же или других обстоятельствах. Кроме того, перечисление одного или нескольких предпочтительных вариантов осуществления не означает, что другие варианты не являются применимыми, и не предполагает исключения других вариантов осуществления из объема настоящего изобретения.

Термины "включает" и его варианты не имеют ограничивающего значения в случаях, когда эти термины встречаются в описании изобретения и формуле изобретения.

Если не указано иное, формы существительного единственного числа и фраза "по меньшей мере один" используются взаимозаменяемо и означают один или более чем один.

Также в данном документе перечисление числовых диапазонов по конечным точкам включает все числа, которые относятся к этому диапазону (например, от 1 до 5 включает 1, 1,5, 2, 2,75, 3,3,80, 4, 5 и т.д.).

Для любого способа, раскрытого в данном документе, который включает отдельные стадии, эти стадии можно осуществить в любом удобном порядке. И, при необходимости, две или больше стадий в любой комбинации можно осуществить одновременно.

Если не указано иное, все числа, отражающие количества компонентов, молекулярные массы и т.д., которые используются в описании и формуле изобретения, следует понимать во всех случаях как модифицированные термином "приблизительно". Соответственно, если в иных случаях не указано противоположное, числовые параметры, изложенные в описании и формуле изобретения, являются приблизительными значениями, которые могут варьироваться в зависимости от желаемых свойств, к получению которых стремятся в настоящем изобретении. По крайней мере, и не в качестве попытки ограничить основные принципы эквивалентов объемом формулы изобретения, каждый числовой параметр следует интерпретировать по меньшей мере с учетом количества описанных значимых цифр и путем применения стандартных методик округления.

Несмотря на то, что числовые диапазоны и параметры, представляющие широкий объем настоящего изобретения, являются приблизительными значениями, числовые значения, изложенные в конкретных примерах, представлены настолько точно, насколько это возможно. Все числовые значения, тем не менее, по своему существу включают диапазон, неизбежно обусловленный стандартным отклонением, присутствующим в соответствующих им тестовых измерениях.

В нескольких местах в настоящей заявке представлено руководство в виде списка примеров, каковые примеры можно применять в различных комбинациях. В каждом случае изложенный список служит только в качестве типичной группы и не должен толковаться как исключающий список. Следует понимать, что конкретные примеры, материалы, количества и процедуры следует толковать в широком смысле в соответствии с объемом и сущностью настоящего изобретения, изложенными в данном документе.

Все заголовки приведены для удобства читателя и не должны использоваться для ограничения значения текста, который следует после заголовка, если это не указано.

Изобретение определено формулой изобретения. Однако ниже представлен неисчерпывающий список неограничивающих вариантов осуществления. Любые один или несколько признаков этих вариантов осуществления могут быть объединены с любыми одним или несколькими признаками другого примера, варианта осуществления или аспекта, описанных в данном документе.

1. Выделенный реовирус птиц, где выделенный реовирус птиц представляет собой штамм реовируса птиц 94826 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077, или его потомство или производное, при этом его потомство или производное характеризуются по сути такими же биологическими и серологическими характеристиками, что и штамм реовируса птиц 94826 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077.

2. Выделенный реовирус птиц, где выделенный реовирус птиц представляет собой штамм реовируса птиц 96139 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078, или его потомство или производное, при этом его потомство или производное характеризуются по сути такими же биологическими и серологическими характеристиками, что и штамм реовируса птиц 96139 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078.

3. Выделенный реовирус птиц по вариантам осуществления 1 или 2, где выделенный реовирус птиц предусматривает главный вирусный посевной материал.

4. Выделенный реовирус птиц по любому из вариантов осуществления 1-3, где выделенный реовирус птиц является лиофилизированным, высушенным путем сублимационной сушки, замороженным или представлен в виде шипучей таблетки.

5. Композиция, содержащая выделенный реовирус птиц по любому из вариантов осуществления 1-4.

6. Композиция по варианту осуществления 5, содержащая адъювант.

7. Композиция по вариантам осуществления 5 или 6, содержащая фармацевтически приемлемый носитель.

8. Композиция по любому из вариантов осуществления 5-7, где композиция составлена для интраназального, внутриглазного, перорального, чресслизистого, внутримышечного, подкожного введения или введения in ovo.

9. Композиция по любому из вариантов осуществления 5-8, где композиция составлена для опрыскивания или распыления в виде аэрозоля.

10. Вакцина, содержащая выделенный реовирус птиц по любому из вариантов осуществления 1-4 или композицию по любому из вариантов осуществления 5-9.

11. Вакцина по варианту осуществления 10, где вакцина снижает восприимчивость птицы из отряда Galliformes к вирусным артриту/теносиновиту, индуцируемым реовирусами.

12. Вакцина для птиц из отряда Galliformes, содержащая количество штамма реовируса птиц 94826 С140, депонированного в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077, или его потомства или производного, достаточное для защиты птиц от вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами, и фармацевтически приемлемый носитель.

13. Вакцина по вариантам осуществления 11 или 12, где вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 1/генотипа 5.

14. Вакцина для птиц из отряда Galliformes, содержащая количество штамма реовируса птиц, представляющего собой штамм реовируса птиц 96139 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078, или его потомства или производного, достаточное для защиты птиц от вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами, и фармацевтически приемлемый носитель.

15. Вакцина по вариантам осуществления 13 или 14, где вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 2/генотипа 1.

16. Шипучая таблетка, содержащая реовирус птиц, композицию или вакцину по любому из вариантов осуществления 1-15.

17. Способ снижения восприимчивости птицы из отряда Galliformes к вирусным артриту/теносиновиту, индуцируемым реовирусами, при этом способ включает введение птице реовируса птиц, композиции или вакцины по любому из вариантов осуществления 1-16.

18. Способ защиты птицы из отряда Galliformes от вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами, при этом способ включает введение птице реовируса птиц, композиции или вакцины по любому из вариантов осуществления 1-16.

19. Способ по вариантам осуществления 17 или 18, где вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 1/генотипа 5.

20. Способ по вариантам осуществления 17 или 18, где вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 2/генотипа 1.

21. Способ по любому из вариантов осуществления 17-20, где введение является интраназальным, внутриглазным, пероральным, чресслизистым, внутримышечным или подкожным.

22. Способ по любому из вариантов осуществления 17-20, где введение предусматривает введение in ovo.

23. Способ по любому из вариантов осуществления 17-20, где реовирус птиц, композицию или вакцину вводят с помощью аэрозоля.

24. Способ по любому из вариантов осуществления 17-20, где реовирус птиц, композицию или вакцину вводят с помощью питьевой воды.

25. Способ по любому из вариантов осуществления 17-24, где введение предусматривает введение племенной самке птицы или самцу птицы.

26. Способ обеспечения выработки антител к реовирусам у сельскохозяйственной птицы, при этом способ включает введение птице выделенного реовируса птиц, композиции или вакцины по любому из вариантов осуществления 1-16.

27. Способ по любому из вариантов осуществления 17-26, где птица представляет собой курицу или индейку.

28. Диагностический набор, содержащий выделенный реовирус птиц по любому из вариантов осуществления 1-4.

29. Способ выявления воздействия на птицу реовируса птиц, при этом способ включает определение того, что образец антисыворотки, полученный от птицы, характеризуется специфическим связыванием с реовирусом птиц по любому из вариантов осуществления 1-3.

30. Гипериммунная сыворотка к реовирусу птиц по любому из вариантов осуществления 1-3.

31. Антитело, которое связывается с реовирусом птиц по любому из вариантов осуществления 1-3 и не связывается со штаммами реовируса птиц S1133, 1733, 2408 и/или 2177.

32. Антитело по варианту осуществления 31, где антитело представляет собой моноклональное антитело.

Настоящее изобретение проиллюстрировано следующими примерами. Следует понимать, что конкретные примеры, материалы, количества и процедуры следует толковать в широком смысле в соответствии с объемом и сущностью настоящего изобретения, изложенными в данном документе.

ПРИМЕРЫ

Пример 1

94826 С140 - вариант реовируса птиц группы 1/генотипа 5

Аттенуированный реовирус птиц 94826 С140 получали путем 140-кратного пассирования реовируса птиц 94826 на куриных эмбрионах. Аттенуированный реовирус птиц 94826 С140 депонирован в АТСС^® под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077 13 августа 2019 г. Аттенуированный реовирус птиц 94826 С140 также представлен в архиве с рег. № PDRC: 121116 в хранилище вирусов Центра диагностики и исследований в области птицеводства (PDRC) Университета Джорджии, расположенного по адресу 953 Колледж-Стейшн-Роуд, Атенс, Джорджия, 20602. Безопасность и эффективность 94826 С140 в виде живой вакцины на основе аттенуированного реовируса более подробно описаны в примере 3.

Исходный реовирус птиц 94826 представляет собой реовирус птиц группы 1/генотипа 5 и более подробно описан в международной заявке № PCT/US 2015/013449 (WO 2015/116778) и заявке на патент США №15/223623, обе из которых включены в данный документ посредством ссылки.

Пример 2

96139 С140 - вариант реовируса птиц группы 2/генотипа 1

Аттенуированный реовирус птиц 96139 С140 получали путем 140-кратного пассирования реовируса птиц 96139 на куриных эмбрионах. Аттенуированный реовирус птиц 96139 С140 депонирован в АТСС^® под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078 13 августа 2019 г. Аттенуированный реовирус птиц 9619 С140 также представлен в архиве с рег. № PDRC: 119812 в хранилище вирусов Центра диагностики и исследований в области птицеводства (PDRC) Университета Джорджии, расположенного по адресу 953 Колледж-Стейшн-Роуд, Атенс, Джорджия, 20602. Безопасность и эффективность 96139 С140 в виде живой вакцины на основе аттенуированного реовируса более подробно описаны в примере 3.

Исходный реовирус птиц 96139, представляющий собой реовирус птиц группы 2/генотипа 1, более подробно описан в международной заявке № PCT/US 2015/013449 (WO 2015/116778) и заявке на патент США №15/223623, обе из которых включены в данный документ посредством ссылки, и депонирован в АТСС^® под регистрационным номером патентного депонирования РТА-125688 7 марта 2019 г.

Пример 3

Кандидатные штаммы 94826 С140 и 96139 С140 для получения живой вакцины на основе аттенуированного реовируса

Изоляты

Реовирус птиц 94826 С140, вариант реовируса птиц группы 1/генотипа 5, является таким как описано в примере 1.

Реовирус птиц 96139 С140, вариант реовируса птиц группы 2/генотипа 1, является таким как описано в примере 2. 96139 С140

Пассажи на эмбрионах

Оба изолята вируса последовательно пассировали на эмбрионах, свободных от специфических патогенов (SPF), посредством способа инокуляции хориоаллантоисной мембраны (САМ). В частности, САМ из исходного изолята разбавляли 1:100 в стерильной минимальной основной среде (MEM) и 0,1 мл инокулировали в САМ 9-11-дневных SPF-эмбрионов. Через 48 часов после инокуляции эмбрионы выдерживали при пониженной температуре, составляющей 4°С, в течение 4 часов, а САМ из эмбрионов собирали, объединяли, гомогенизировали в транспортной среде для вирусов (VTM) с использованием Bead Ruptor от Omni, очищали при 1500 x g и хранили при -80°С до следующего пассажа на эмбрионах.

Исходные титры С140

Исходные титры как для 94826 С140, так и для 96139 С140 показаны в таблице 1 ниже.

Тестирование на идентичность

Тестирование на идентичность проводили для каждых 10-20 пассажей на эмбрионах. Вкратце, аликвоты САМ-пассажей подвергали RT-PCR в отношении белка сигма-С реовируса, осуществляли секвенирование и нуклеотидные и аминокислотные последовательности сравнивали с исходными и предыдущими пассажами для подтверждения идентичности.

Тестирование на чистоту

Тестирование на чистоту проводили для исходных образцов С140 в соответствии с рекомендациями, изложенными в статье 9 Свода федеральных нормативных актов (9CFR), раздел 113.332 (9 CFR, §113.332), а также посредством способов культивирования и RT-PCR/PCR.

Культура бактерий, грибков и плесени показала, что оба исходных образца 94826 С140 и 96139 С140 являлись отрицательными в отношении бактерий, грибков и плесени при культивировании.

PCR показала, что оба образца 94826 С140 и 96139 С140 являлись отрицательными в отношении Mycoplasma gallisepticum (MG) и Mycoplasma synoviae (MS).

PCR/RT-PCR на наличие посторонних вирусов показала, что оба исходных образца 94826 С140 и 96139 С140 являлись отрицательными в отношении посторонних вирусов птиц.

Результаты тестирования на загрязнение исходных вирусов возбудителем лимфоидного лейкоза, проводимого в соответствии с рекомендациями, изложенными в 9 CFR, §113.332 (b)(2)(3), показаны в таблице 2 ниже и указывают на то, что оба исходных образца 94826 С140 и 96139 С140 не содержали возбудителя лейкоза.

Тестирование в отношении безопасности

140-кратные САМ-пассажи (С140) для обоих изолятов тестировали в отношении безопасности в соответствии с рекомендациями, изложенными в разделе 113.332 статьи 9 Свода федеральных нормативных актов (9CFR).

План эксперимента

• Исходные птицы:

• Родительское поголовье (птицы бройлерного типа) от Aviagen

• Племенное поголовье, вакцинированное коммерческим живым и инактивированным S1133

• Цыплята-бройлеры, отрицательные по антителам к реовирусам 94826 и 96139

• Тест в отношении безопасности в соответствии со статьей 9 CFR

• Параметры для оценки в соответствии со статьей 9 CFR:

• 94826 С140 (VG1/GT5) при 10⁴ EID50/0,2 мл [29 цыплят]

• 94826 С140 (VG1/GT5) при 10⁵ EID50/0,2 мл [30 цыплят]

• 96139 С140 (VG2/GT1) при 10⁴ EID50/0,2 мл [30 цыплят]

• 96139 С140 (VG2/GT1) при 10⁵ EID50/0,2 мл [30 цыплят]

• Ежедневный мониторинг в течение 21 дня

• Оценка хромоты, отека сухожилий/пяток

• Смертность

Результаты 10-кратной оценки 1-дневных коммерческих бройлеров, отрицательных по антителам к 94826 и 96139, показаны в таблице 3 ниже. Результаты показали, что не наблюдалось каких-либо клинических признаков или макроскопических поражений у бройлеров, которым подкожно вводили дозы 10⁴ EID50 или 10⁵ EID50 94826 или 96139 в течение 21-дневного поствакцинального периода оценки. Вакцины считаются безопасными для использования у 1-дневных бройлеров при этих дозах.

Результаты 10-кратной оценки 28-дневных коммерческих бройлеров, отрицательных по антителам к 94826 и 96139, показаны в таблице 4 ниже. Результаты показали, что не наблюдалось каких-либо клинических признаков или макроскопических поражений у бройлеров, которым подкожно вводили дозы 10⁴ EID50 или 10⁵ EID50 94826 или 96139 в течение 21-дневного поствакцинального периода оценки. Вакцины считаются безопасными для использования у 28-дневных бройлеров при этих дозах.

Тестирование эффективности

Эффективность исходных образцов С140 оценивали в соответствии со статьей 9 CFR, 113.332 (4)(с)(1,2,3).

Тестирование эффективности на 1-дневных бройлерах, отрицательных по антителам к реовирусам 94826 и 96139

• Вакцинация/подкожная инъекция

• 94826 С140 (VG1/GT5) при 10^2,5 EID50/0,2 мл [31 цыпленок]

• 94826 С140 (VG1/GT5) при 10³ EID50/0,2 мл [31 цыпленок]

• 96139 С140 (VG2/GT1) при 10^2,5 EID50/0,2 мл [30 цыплят]

• 96139 С140 (VG2/GT1) при 10³ EID50/0,2 мл [30 цыплят]

• Невакцинированные контрольные животные

• 20 1-дневных цыплят, помещенных в изоляционные блоки для невакцинированных/зараженных контрольных животных

• 21-дневные животные (вакцинированные/подкожно и невакцинированные)

• Все группы, зараженные путем инъекции в подушечки стопы с использованием 10⁴ EID50/0,05 мл 94826 Li7 или 96139 Li5 (родительские вирусы)

• Ежедневное наблюдение в течение 14 дней

• Смертность

• Угнетенное состояние

• Хромота/прихрамывание

• Опухшие подушечки стопы и/или сухожилия

Результаты тестирования эффективности на 1-дневных бройлерах представлены в таблице 5 ниже. Результаты показали, что 1-дневные цыплята, вакцинированные с использованием 10^2,5 или 10³ EID50 на дозу, были защищены после заражения гомологичными родительскими вирусами.

Результаты для невакцинированных/зараженных родительским вирусом бройлеров показаны в таблице 6 ниже. Результаты показали, что тест на эффективность являлся состоятельным на основании клинических признаков, наблюдаемых у невакцинированных/зараженных бройлеров.

Результаты обратного титрования исходных образцов С140 для исследования эффективности при 1-дневном возрасте - аликвоты разбавленных исходных образцов С140 (10^2,5 и 10³ EID50/доза) титрованных в эмбрионах (5 повторов), показаны в таблице 7 ниже.

Итоговые результаты испытаний эффективности на 1-дневных бройлерах

Вакцинация при однодневном возрасте вакциной 94826 С140 или 96139 С140 в дозах 10^2,5 и 10³ защищала от появления клинических признаков после заражения родительскими вирусами через подушечки лап.

Невакцинированные/зараженные контроли находились в допустимых пределах, указанных в статье 9 CFR, 113.332 (4)(с)(3), для обоих родительских вирусов.

Тестирование на 1-дневных бройлерах было приемлемым в соответствии с рекомендациями, указанными в статье 9 CFR.

Полное раскрытие всех патентов, заявок на патенты и публикаций, а также материалов, доступных в электронном виде (включающих, например, нуклеотидные последовательности, предоставленные, например, в GenBank и RefSeq, и аминокислотные последовательности, предоставленные, например, в SwissProt, PIR, PRF, PDB, и продукты трансляции аннотированных кодирующих участков в GenBank и RefSeq), цитируемых в данном документе, включено посредством ссылки. В случае, если существует какое-либо несоответствие между раскрытием настоящей заявки и раскрытием(-ями) любого из документов, включенных в данный документ посредством ссылки, раскрытие настоящей заявки имеет преимущественную силу. Вышеизложенные подробное описание и примеры были представлены исключительно для четкости понимания. На основании этого не должны истолковываться никакие излишние ограничения. Настоящее изобретение не ограничивается приведенными и описанными подробными деталями, а что касается вариантов, очевидных для специалиста в данной области, то они будут включены в настоящее изобретение, определенное формулой изобретения.

Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии. Представлен штамм реовируса птиц 94826 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077, и штамм реовируса птиц 96139 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078. Представлены: композиция для получения вакцины для иммунизации против инфекции, вызываемой реовирусом птиц, содержащая выделенный реовирус птиц; вакцина для иммунизации против инфекции, вызываемой реовирусом птиц, содержащая выделенный реовирус птиц; способ снижения восприимчивости птицы из отряда Galliformes к вирусным артриту/теносиновиту, индуцируемым реовирусами; способ защиты птицы из отряда Galliformes от вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами; способ обеспечения выработки антител к реовирусам у сельскохозяйственной птицы; диагностический набор для выявления воздействия на птицу реовируса птиц и способ выявления воздействия на птицу реовируса птиц. Изобретение позволяет получить вакцину для иммунизации против инфекции, вызываемой реовирусом птиц. 12 н. и 10 з.п. ф-лы, 7 табл., 3 пр.

1. Выделенный реовирус птиц для иммунизации против инфекции, вызываемой реовирусом птиц, где выделенный реовирус птиц представляет собой штамм реовируса птиц 94826 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077.

2. Выделенный реовирус птиц для иммунизации против инфекции, вызываемой реовирусом птиц, где выделенный реовирус птиц представляет собой штамм реовируса птиц 96139 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078.

3. Выделенный реовирус птиц по п. 1 или 2, где выделенный реовирус птиц предусматривает главный вирусный посевной материал.

4. Выделенный реовирус птиц по любому из пп. 1-3, где выделенный реовирус птиц является лиофилизированным, высушенным путем сублимационной сушки, замороженным или представлен в виде шипучей таблетки.

5. Композиция для получения вакцины для иммунизации против инфекции, вызываемой реовирусом птиц, содержащая выделенный реовирус птиц по любому из пп. 1-4 и фармацевтически приемлемый носитель.

6. Композиция по п. 5, дополнительно содержащая адъювант.

7. Композиция по п. 5 или 6, где композиция составлена для интраназального, внутриглазного, перорального, чресслизистого, внутримышечного, подкожного введения или введения in ovo или составлена для опрыскивания или распыления в виде аэрозоля.

8. Вакцина для иммунизации против инфекции, вызываемой реовирусом птиц, содержащая выделенный реовирус птиц по любому из пп. 1-4 и фармацевтически приемлемый носитель.

9. Вакцина по п. 8, где вакцина снижает восприимчивость птицы из отряда Galliformes к вирусным артриту/теносиновиту, индуцируемым реовирусами.

10. Вакцина по п. 8, предназначенная для птиц из отряда Galliformes и содержащая количество штамма реовируса птиц 94826 С140, депонированного в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126077, достаточное для защиты птиц от вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами, и фармацевтически приемлемый носитель.

11. Вакцина по п. 8, предназначенная для птиц из отряда Galliformes и содержащая количество штамма реовируса птиц, представляющего собой штамм реовируса птиц 96139 С140, депонированный в АТСС под регистрационным номером патентного депонирования РТА-126078, достаточное для защиты птиц от вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами, и фармацевтически приемлемый носитель.

12. Вакцина по п. 10 или 11, где вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 2/генотипа 1 или вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 1/генотипа 5.

13. Композиция для иммунизации против инфекции, вызываемой реовирусом птиц, содержащая реовирус птиц по любому из пп. 1-4 и шипучую таблетку.

14. Способ снижения восприимчивости птицы из отряда Galliformes к вирусным артриту/теносиновиту, индуцируемым реовирусами, при этом способ включает введение птице реовируса птиц по любому из пп. 1-4, композиции по любому из пп. 5-7 или вакцины по любому из пп. 8-12.

15. Способ защиты птицы из отряда Galliformes от вирусных артрита/теносиновита, индуцируемых реовирусами, при этом способ включает введение птице реовируса птиц по любому из пп. 1-4, композиции по любому из пп. 5-7 или вакцины по любому из пп. 8-12.

16. Способ по п. 14 или 15, где вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые реовирусами, представляют собой вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 1/генотипа 5 или вирусные артрит/теносиновит, индуцируемые вариантом реовируса группы 2/генотипа 1.

17. Способ по любому из пп. 14-16, где введение является интраназальным, внутриглазным, пероральным, чресслизистым, внутримышечным или подкожным, или предусматривает введение in ovo, или где реовирус птиц, композицию или вакцину вводят с помощью аэрозоля, или с помощью питьевой воды.

18. Способ по любому из пп. 14-17, где введение предусматривает введение племенной самке птицы или самцу птицы.

19. Способ обеспечения выработки антител к реовирусам у сельскохозяйственной птицы, при этом способ включает введение птице выделенного реовируса птиц по любому из пп. 1-4, композиции по любому из пп. 5-7 или вакцины по любому из пп. 8-12.

20. Способ по любому из пп. 14-19, где птица представляет собой курицу или индейку.

21. Диагностический набор для выявления воздействия на птицу реовируса птиц, содержащий один или несколько контейнеров, наполненных выделенным реовирусом птиц по любому из пп. 1-4, и инструкции.

22. Способ выявления воздействия на птицу реовируса птиц, при этом способ включает определение того, что образец антисыворотки, полученный от птицы, характеризуется специфическим связыванием с реовирусом птиц по любому из пп. 1-3.