СОЛИ МОНТЕЛУКАСТА И СОДЕРЖАЩИЕ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ Российский патент 2025 года по МПК C07D215/18 A61K31/137 A61K31/167 A61K31/47 A61P11/00 A61P11/06 A61P11/08 

Настоящее изобретение относится к солям монтелукаста с β2 адренергическими агонистами, содержащим их фармацевтическим композициям и их применению для лечения респираторных воспалительных патологий, обструктивных патологий и вызванных аллергеном дисфункций дыхательных путей. Настоящее изобретение также относится к способу получения указанных солей.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Натриевая соль монтелукаста (формула I) является хорошо известным селективным антагонистом CysLT₁. Ее вводят перорально и показано, что она эффективна для лечения астмы или других зависимых от лейкотриенов заболеваний, таких как аллергии и воспаления. Ее продают в виде таблеток, содержащих количество натриевой соли, соответствующее 4, 5 или 10 мг монтелукаста в виде кислоты.

ФОРМУЛА I

Натриевая соль монтелукаста является белым гигроскопичным порошком, растворимым в метаноле, этаноле и воде.

Натриевую соль получают исходя из монтелукаста в форме свободной карбоновой кислоты ((R, E)-2-(1-((1-(3-(2-(7-хлорхинолин-2-ил)винил)фенил)-3-(2-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)пропилтио)-метил)циклопропил)уксусной кислоты, формула II) путем обработки источником ионов натрия.

ФОРМУЛА II

В нескольких патентах описаны методики синтеза или получения монтелукаста в форме свободной кислоты: в частности, в WO2005/074935 описана методика синтеза ключевого карбоксильного промежуточного продукта, а в WO 2004/108679, US 2005/0107612 и US 2005/0234241 описано получение соли с амином (дициклогексиламином или трет-бутиламином) и превращение в натриевую соль монтелукаста или свободную кислоту.

Агонисты β2 (бета-2) адренергического рецептора являются классом лекарственных средств, которые воздействуют на β2 адренергический рецептор. β2 Адренергические агонисты вызывают расширение гладких мышц бронхиальных проходов, расширение сосудов мышц и печени, расслабление мышц матки и высвобождение инсулина. Их в основном используют для лечения астмы и других легочных нарушений, таких как COPD.

Их можно разделить на агонисты β2 адренергического рецептора кратковременного действия, длительного действия и сверхдлительного действия.

Формотерол, (+/-)N-[2-гидрокси-5-[1-гидрокси-2[[2-(п-метоксифенил)-2-пропил]-амино]-этил]-фенил]-формамид (формула III) является агонистом β2 длительного действия (LABA), использующимся в форме фумарата для лечения респираторных воспалительных или обструктивных патологий вследствие его очень активного и длительного бронхорасширяющего эффекта. Он характеризуется двумя хиральными центрами. Его вводят путем ингаляции в виде рацемической смеси.

ФОРМУЛА III

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Если не приведено другое определение, все термины данной области техники, обозначения и другая научная терминология, использующаяся в настоящем изобретении, обладают значениями, обычно известными специалистам в области техники, к которой относится настоящее изобретение. В некоторых случаях обладающие общеизвестными значениями термины определены в настоящем изобретении для ясности и/или удобства ссылки; таким образом, включение таких определений в настоящее изобретение не следует понимать, как указывающее на существенные отличия от обычно понимаемых в данной области техники.

Термин "физиологически приемлемый инертный наполнитель" в настоящем изобретении означает вещество, само не оказывающее какое-либо фармакологическое воздействие и не приводящее к побочным реакциям при введении млекопитающему, предпочтительно человеку. Физиологически приемлемые инертные наполнители хорошо известны в данной области техники и раскрыты, например в публикации Handbook of Pharmaceutical Excipients, sixth edition 2009, которая включена в настоящее изобретение в качестве ссылки.

Термин "монтелукаст" в настоящем изобретении означает монтелукаст в форме свободной карбоновой кислоты.

Термины "агонисты кратковременного действия адренергического рецептора β2" или "β2 агонисты кратковременного действия" или "SABAs" в настоящем изобретении означают агонисты адренергического рецептора β2, обладающие длительностью воздействия, составляющей примерно от 4 до 6 ч. Предпочтительными примерами SABAs, которые можно использовать в настоящем изобретении, являются фенотерол, орципреналин, сальбутамол и тербуталин.

Термины "агонисты длительного действия адренергического рецептора β2" или "β2 агонисты длительного действия" или "LABAs" в настоящем изобретении означают агонисты адренергического рецептора β2, обладающие длительностью воздействия, составляющей до 12 ч. Предпочтительными примерами LABAs, которые можно использовать в настоящем изобретении, являются бамбутерол, кленбутерол, формотерол и салметерол.

Термины "агонисты сверхдлительного действия адренергического рецептора β2" или "β2 агонисты сверхдлительного действия" или "Ultra-LABAs" в настоящем изобретении означают агонисты адренергического рецептора β2, обладающие длительностью воздействия, составляющей 24 ч, позволяющие проводить введение один раз в сутки. Предпочтительными примерами Ultra-LABAs, которые можно использовать в настоящем изобретении, являются вилантерол, индакатерол и олодатерол.

Термины "формотерол", "фенотерол", "салметерол" и "вилантерол" в настоящем изобретении означают свободные основания формотерола, фенотерола, салметерола и вилантерола.

Термины "приблизительно" и "примерно" в настоящем изобретении означают диапазон экспериментальной погрешности, которая может наблюдаться при измерении.

Термины "содержащий", "имеющий", "включающий" следует считать открытыми терминами (т. е. означающими "включая, но не ограничиваясь только ими") и их следует считать поддерживающими такие термины, как "состоит в основном из", "состоящий в основном из", "состоит из" или "состоящий из".

Термины "состоит в основном из", "состоящий в основном из" следует считать полузакрытыми терминами, означающими, что не включены другие ингредиенты, которые существенно влияют на основные и новые характеристики настоящего изобретения (таким образом, могут включаться необязательные инертные наполнители).

Термины "состоит из", "состоящий из" следует считать закрытыми терминами.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Большое количество лекарственных средств, утвержденных для лечения воспалительных заболеваний дыхательных путей, характеризуется комбинацией молекул, например, беклометазон/формотерол, флутиказон фуроат/вилантерол, будесонид/формотерол, индакатерол/гликопирроний с разными механизмами воздействия, предназначенные для оказания синергетического терапевтического эффекта.

Задачей настоящего изобретения является получение новых солей монтелукаста, оказывающих синергический терапевтический эффект. Первым объектом настоящего изобретения являются соли монтелукаста с β2 адренергическими агонистами.

Авторы настоящего изобретения неожиданно установили, что соли, предлагаемые в настоящем изобретении, обладают синергетическим эффектом при лечении вызванных аллергеном дисфункций дыхательных путей.

Вторым объектом настоящего изобретения является способ получение солей монтелукаста.

Третьим объектом настоящего изобретения являются фармацевтические композиции, содержащие соли монтелукаста в комбинации по меньшей мере с одним физиологически приемлемым инертным наполнителем.

Четвертым объектом настоящего изобретения являются указанные выше соли монтелукаста и фармацевтические композиции для применения в качестве лекарственных средств.

Пятым объектом настоящего изобретения являются указанные выше соли монтелукаста и фармацевтические композиции для применения для лечения респираторных воспалительных патологий, обструктивных патологий, вызванных аллергеном дисфункций дыхательных путей.

ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фиг. 1 приведена порошковая рентгенограмма соли монтелукаста с формотеролом, полученной из этилацетата.

На фиг. 2 приведены порошковые рентгенограммы исходных лекарственных средств: A) формотерол; B) монтелукаст.

На фиг. 3 приведена порошковая рентгенограмма соли монтелукаста с формотеролом, полученной из этилацетата, и относительные положения пиков (2-тета) и межплоскостные расстояния (ангстремы).

На фиг. 4 приведен спектр ¹H-NMR (700 MHz; DMSO-d₆) соли монтелукаста с формотеролом, полученной из этилацетата.

На фиг. 5 сопоставлены спектры ¹H-NMR (700 MHz; DMSO-d6) соли монтелукаста с формотеролом (подчеркнутые значения), монтелукастом и формотеролом (неподчеркнутые значения).

На фиг. 6 приведен спектр ¹³C-NMR HMBC (175 MHz; DMSO-d₆) соли монтелукаста с формотеролом.

На фиг. 7 приведен спектр ¹³C-NMR (175 MHz; DMSO-d₆) соли монтелукаста с формотеролом.

На фиг. 8 сопоставлены спектры ¹³C-NMR (175 MHz; DMSO-d₆) соли монтелукаста с формотеролом (подчеркнутые значения), монтелукастом и формотеролом (неподчеркнутые значения).

На фиг. 9 приведен спектр FT-IR соли монтелукаста с формотеролом.

На фиг. 10 приведен спектр FT-IR монтелукаста.

На фиг. 11 приведен спектр FT-IR формотерола.

На фиг. 12 представлен эффект формотерола 2 по сравнению с формотеролом 1 p<0,001.

На фиг. 13 представлен противовоспалительный эффект соли монтелукаста с формотеролом по сравнению с разбавителем (***p< 0,001).

На фиг. 14 представлена терпевтическая эффективность по предупреждению бронхиальной гиперреактивности соли монтелукаста с формотеролом (0,3, 0,75 и 1,5 мг/кг) по сравнению с OVA p<0,001; соли монтелукаста с формотеролом 0,75 мг/кг по сравнению с 0,3 мг/кг p <0,001; соли монтелукаста с формотеролом 0,75 мг/кг по сравнению с 1,5 мг/кг p <0,05.

На фиг. 15 представлена терпевтическая эффективность по предупреждению вызванной сальбутамолом бронхиальной релаксации соли монтелукаста с формотеролом 0,75 мг/кг по сравнению с OVA p<0,001.

На фиг. 16 представлена терапевтическая эффективность по предупреждению бронхиальной гиперреактивности соли монтелукаста с формотеролом. Формотерола, монтелукаста и соли монтелукаста с формотеролом по сравнению с OVA p<0,001; соли монтелукаста с формотеролом по сравнению с формотеролом p<0,05.

На фиг. 17 представлена терапевтическая эффективность по предупреждению вызванной сальбутамолом бронхиальной релаксации соли монтелукаста с формотеролом. Соли монтелукаста с формотеролом по сравнению с OVA p<0,001; соли монтелукаста с формотеролом по сравнению с формотеролом p<0,001; соли монтелукаста с формотеролом по сравнению с монтелукастом p<0,001.

На фиг. 18 представлены (A) содержание IgE в плазме: разбавитель по сравнению с OVA p<0,01; (B) содержание IL-4 в легких: разбавитель по сравнению с OVA p<0,01, формотерола (0,3 мг/кг), монтелукаста (0,3 мг/кг) и соли монтелукаста с формотеролом (0,75 мг/кг) по сравнению с OVA p<0,05; (C) содержание IL-13 в легких: разбавитель по сравнению с OVA p<0,01, формотерола (0,3 мг/кг), монтелукаста (0,3 мг/кг) и соли монтелукаста с формотеролом (0,75 мг/кг) по сравнению с OVA p<0,05.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к соли монтелукаста с β2 адренергическим агонистом.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения β2 адренергический агонист выбран из группы, включающей β2 агонисты кратковременного действия, β2 агонисты длительного действия или β2 агонисты сверхдлительного действия.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения β2 адренергический агонист выбран из группы, включающей фенотерол, орципреналин, сальбутамол, тербуталин, бамбутерол, кленбутерол, формотерол, салметерол, вилантерол, индакатерол и олодатерол.

Более предпочтительно, β2 адренергическими агонистами являются формотерол, фенотерол, салметерол и вилантерол.

В частности, соль монтелукаста с формотеролом формулы IV представляет собой фармацевтически приемлемую соль, которая может усиливать терапевтический потенциал.

ФОРМУЛА IV

Она обеспечивает быстрое начало и длительное действие формотерола при уменьшении количества введений с помощью эффективного ингалятора с монтелукастом. Ее можно вводить путем ингаляции и это является другим отличием от натриевой соли монтелукаста: соль монтелукаста с формотеролом менее гидрофильна, чем натриевая соль монтелукаста и поэтому может легко проходить через мембраны клеток при введении путем ингаляции вследствие липофильного характера этих двух компонентов.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения соль монтелукаста с формотеролом в кристаллической форме I отличается порошковой рентгенограммой, которая получена с использованием излучения CuKα и характеризуется углами 2θ, на которой имеются характеристические пики примерно при 6,39, 9,97, 13,05, 13,77, 15,42, 16,87, 17,87, 18,25, 20,37, 20,77, 23,14, 24,57, 26,23, 28,01, 28,96, 32,09, 33,81 и 38,57.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения соль монтелукаста в кристаллической форме I отличается порошковой рентгенограммой, приведенной на фиг. 1.

Другие фармацевтически приемлемые производные представляют собой соли монтелукаста с фенотеролом (формула V), салметеролом (формула VI) и вилантеролом (формула VII).

ФОРМУЛА V

ФОРМУЛА VI

ФОРМУЛА VII

Как показано в экспериментальном разделе, путем проведения доклинических исследований изучены соли монтелукаста с формотеролом, фенотеролом, салметеролом и вилантеролом.

Проведенные in vitro и in vivo (отек лап мышей и модель астмы на мышах) эксперименты подтвердили терапевтические преимущества этих объединений.

В частности, показано, что терапевтическая эффективность соли монтелукаста с формотеролом значительно выше, чем у формотерола и монтелукаста при введении в двойной молярной дозе.

Полученные данные демонстрируют синергетический эффект комбинации формотерола и монтелукаста, в частности, при регулировании бронхиального тонуса и модулировании воспалительного ответа.

Полученные данные указывают на заметное уменьшение явления десенсибилизации рецептора β₂, определяющее увеличенную эффективность при борьбе с вызванной аллергеном дисфункцией дыхательных путей и увеличенную противовоспалительную активность.

Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента соль монтелукаста с β2 адренергическим агонистом в комбинации по меньшей мере с одним физиологически приемлемым инертным наполнителем.

Предпочтительно, если указанные композиции находятся в форме порошка, суспензии или раствора, более предпочтительно, если указанные композиции вводят путем ингаляции или пероральным путем.

Композиции можно использовать для ингаляции через слизистую оболочку или включать в раствор для лечения аэрозолем. Для введения путем ингаляции соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, можно доставлять в форме спрея аэрозоля в упаковках, находящихся под давлением, или путем использования распылителей. Кроме того, препарат также можно доставлять в виде порошкообразного вещества, вдыхаемого путем вдувания через устройства для ингаляции. Предпочтительной системой доставки для ингаляции является аэрозоль с дозированием для ингаляции, приготовленный в виде суспензии или раствора ингредиентов в пропеллентах, подходящих для фармацевтических препаратов для ингаляции.

Фармацевтические композиции, пригодные для перорального применение, можно вводить в виде таблеток, капсул или сиропов.

Другим объектом настоящего изобретения являются соли монтелукаста или содержащие их фармацевтические композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, для применения в качестве лекарственного средства.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, соли монтелукаста или содержащие их фармацевтические композиции применимы для лечения респираторных воспалительных патологий, обструктивных патологий, вызванных аллергеном дисфункций дыхательных путей, таких как астма, COPD и фиброз легких.

Благоприятно, что соли монтелукаста, предлагаемые в настоящем изобретении, значительно уменьшают вызванную аллергеном дисфункцию дыхательных путей даже при введении в половинной дозе по сравнению с отдельными лекарственными средствами.

В частности, фармацевтическая композиция, содержащая соль монтелукаста с формотеролом, предлагаемую в настоящем изобретении, увеличивает противовоспалительную активность по сравнению с монтелукастом и формотеролом, вводимыми в двойной дозе, и снижает десенсибилизацию рецептора β₂.

Другим объектом настоящего изобретения является способ получения солей монтелукаста, предлагаемых в настоящем изобретении, включающий следующие стадии:

i) растворение или суспендирование монтелукаста в органическом растворителе;

ii) добавление при перемешивании β2 адренергического агониста, предпочтительно формотерола, фенотерола, салметерола или вилантерола;

iii) выделение соли монтелукаста с β2 адренергическим агонистом, предпочтительно соли монтелукаста с формотеролом, фенотеролом, салметеролом или вилантеролом.

Растворители, применимые для образования соли, включают C₁-C₄ алифатические спирты (метанол, этанол, изопропанол), C₂-C₆ алифатические кетоны (ацетон, метилэтилкетон, метилизопропилкетон, диэтилкетон), C₄-C₈ алифатические простые эфиры (диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, ди-трет-бутиловый эфир), C₄-C₆ циклические простые эфиры (тетрагидрофуран, диоксан), C₃-C₈ алифатические сложные эфиры (этилацетат), C₅-C₈ углеводороды (толуол, ксилол, пентан, гексан, гептан), C₁-C₄ хлорированные углеводороды (дихлорметан, хлороформ, дихлорэтан), алифатические C₂-C₄ нитрилы (ацетонитрил) или их смеси.

Предпочтительным растворителем для образования соли является этилацетат.

Предпочтительно, если в способе, предлагаемом в настоящем изобретении, отношение выраженных в ммоль/мл содержаний монтелукаста и органического растворителя составляет от 1:1 до 1:5.

Предпочтительно, если в способе, предлагаемом в настоящем изобретении, отношение количества молей монтелукаста к количеству молей β2 адренергического агониста, предпочтительно формотерола, фенотерола, салметерола или вилантерола, составляет от 1:1 до 1:1,5.

В предпочтительном варианте осуществления способа, предлагаемого в настоящем изобретении, стадию выделения iii) проводят путем добавления антирастворителя, выбранного из группы, включающей C₅-C₈ алифатические углеводороды с линейной цепью, предпочтительно пентан, гексан, гептан или их смесь.

Предпочтительно, если отношение объема органического растворителя к объему антирастворителя составляет от 2:1 до 1:2, предпочтительно 1:1.

В качестве альтернативы, стадию выделения iii) проводят путем кристаллизации.

Растворителями, применимыми для кристаллизации, являются те же, которые указаны выше для образования соли, предпочтительно диэтиловый эфир.

Предпочтительно, если кристаллизацию проводят путем внесения затравки.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения способ дополнительно включает стадию сушки при температуре в диапазоне от 30 до 80°C, предпочтительно 40-50°C. Предпочтительно, если стадию сушки проводят в сушильном шкафу.

Материалы и методики

a) Химические исследования

Монтелукаст, формотерол, фенотерол и салметерол приобретали у фирмы Carbosynth Ltd (Compton Berkshire, UK). Вилантерол приобретали у фирмы Accel Pharmtech (East Brunswick, US). Все остальные имеющиеся в продаже продукты приобретали у фирмы Merck-Sigma Aldrich. Спектры ¹H (700 MHz) и ¹³C (175 MHz) NMR снимали на спектрометре Agilent INOVA; химическим сдвиги определяли относительно сигнала остаточного растворителя (DMSO-d6: δ_H=2,49, δ_C=39,0); и ¹H-¹³C для двух и трех связей определяли с помощью градиентных 2D HMBC экспериментов, оптимизированных для ^2,3J 8 Hz. Порошковую рентгенографию (XRPD) проводили с помощью дифрактометра Panalytical X’pert PRO. Профили интенсивностей накапливали в диапазоне 2θ, составляющем 4-40° с использованием излучения CuKα с Ni фильтром (λ=1,5406 Å) при 40 кВ и 30 мА с шагом 0,02° при времени сканирования 120 с/шаг. Рентгенограммы обрабатывали с помощью программного обеспечения Highscore Plus.

b) Доклинические фармакологические анализы

ИССЛЕДОВАНИЕ IN VITRO

Самок мышей BALB/c (8 недель; Charles River) умерщвляли, быстро иссекали бронхиальные ткани и их очищали от жира и соединительной ткани. Вырезали кольца длиной 1-2 мм и их помещали в ванны для органов, смонтированные на изометрических динамометрических датчиках (типа 7006, Ugo Basile, Comerio, Italy) и соединяли с Powerlab 800 (AD Instruments). Кольца сначала растягивали до остаточного натяжения в 0,5g и им давали приходить в равновесие в течение не менее 30 мин. В каждом эксперименте бронхиальные кольца обрабатывали карбахолом (10-6 моль/л) до получения воспроизводимого ответа. После установления воспроизводимого ответа реактивность бронхов оценивали с помощью кумулятивной зависимости концентрация - ответ на формотерол в присутствии или при отсутствии монтелукаста (1 мкМ).

ИССЛЕДОВАНИЕ IN VIVO

Отек лап мышей. Самцов мышей CD1 (Charles River; масса 25-30 г) разделяли на группы (n=7) и немного анестезировали энфлураном. Животным каждой группы под подошву вводили 50 мкл физиологического раствора, содержащего каррагенин (1%). Объем лап измеряли гидроплетизмографом, модифицированным для измерения небольших объемов (Ugo Basile Milan Italy), сразу после инъекции и затем через 0,5, 1, 2, 3, 4 и 24, 48 и 72 ч. Животным контрольной группы под подошву вводили разбавитель. Увеличение объема рассчитывали, как разность исходного объема лапы и объема лапы в каждый момент времени.

Для оценки in vivo синергетического эффекта соли монтелукаста с формотеролом за 30 мин до инъекции каррагенина под подошву мышам внутрибрюшинно вводили разбавитель, формотерол (0,3 мг/кг), монтелукаст (0,3 мг/кг) или соль монтелукаста с формотеролом (0,3 мг/кг).

Модель астмы на мышах. Самок мышей BALB/c (8 недель; Charles River) сенсибилизировали путем подкожного введения овальбумина (100 мкг, растворенного в 400 мкл AlOH₃ 13,5 мг/мл) в дни 0 и 8, в двадцать первый день мышей стимулировали путем аэрозольного введения овальбумина (3% в течение 20 мин). Мышей умерщвляли через 48 ч и бронхи использовали для оценки реактивности бронхов по отношению к карбахолу и сальбутамолу. Лекарственные средства вводили внутрибрюшинно до каждого воздействия аллергена. Монтелукаст и формотерол вводили в дозе 0,3 мг/кг, а для соли монтелукаста с формотеролом использовали дозы 0,3, 0,75 и 1,5 мг/кг. Дозы выбирали для обеспечения эквимолярного сопоставления терапевтической эффективности лекарственных средств. Ткани легких отбирали и использовали для определения содержания цитокинов, таких как IL-4 и IL-13. Кроме того, определяли содержания IgE в плазме.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ РАЗДЕЛ

Пример 1

Синтез соли монтелукаста с формотеролом (IV)

N-(2-(3-Формамидо-4-гидроксифенил)-2-гидроксиэтил)-1-(4-метоксифенил)пропан-2-аминий-2-(1-(((1-(3-(2-(7-хлорхинолин-2-ил)винил)-фенил)-3-(2-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)пропил)тио-)метил)циклопропил)ацетат

Монтелукаст (360 мг, 0,58 ммоля) растворяли в 19 мл этилацетата. К раствору при интенсивном перемешивании одной порцией добавляли формотерол (200 мг, 0,58). Перемешивание продолжали в течение 1 ч и затем при непрерывном перемешивании медленно добавляли н-гексан (19 мл). Реакционную смесь дополнительно перемешивали в течение 15 ч. Полученное таким образом твердое вещество отфильтровывали, промывали н-гексаном (2×10 мл) и сушили в сушильном шкафу (50°C, 12 ч). Выход 80%. Температура плавления 129,4±2,1 ¹H NMR (700 MHz, DMSO-d₆, J в Hz) формотерол: δ 0,96 (d, 6,2, 3H), 2,44 (с перекрыванием, 1H), 2,77 (с перекрыванием, 1H), 2,82 (с перекрыванием, 1H), 3,03 (с перекрыванием, 1H), 3,69 (s, 1H), 4,58 (m, 1H), 6,77 (с перекрыванием, 2H), 6,83 (с перекрыванием, 2H), 6,85 (с перекрыванием, 2H), 7,06 (d, 8,5, 2H), 8,03 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 9,56 (bs, NH).

Монтелукаст: δ 0,35-0,43 (m, 4H), 1,39 (s, 6H), 2,11 (с перекрыванием, 1H), 2,18 (с перекрыванием, 1H), 2,30 (s, 2H), 2,49 (с перекрыванием, 2H), 2,73 (с перекрыванием, 1H), 3,03 (с перекрыванием, 1H), 3,98 (t, 7,5, 1H), 6,90 (с перекрыванием, 1H),7,03 (с перекрыванием, 1H), 7,11 (с перекрыванием, 1H), 7,35 (с перекрыванием, 1H), 7,36 (с перекрыванием, 1H), 7,38 (с перекрыванием, 1H), 7,40 (с перекрыванием, 1H), 7,49 (d, 16,3, 1H), 7,59 (dd, 2,0, 10,7, 1H), 7,62 (d, 7,5, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,88 (d, 16,3, 1H), 7,93 (d, 8,7, 1H), 8,00 (d, 8,7, 1H), 8,40 (d, 8,7, 1H)

¹³C-NMR соли монтелукаста с формотеролом (175 MHz, DMSO-d₆): δ 172,7, 159,8, 157,6, 156,8, 148,0, 146,7, 145,8, 143,6, 139,6, 136,6, 136,1, 135,0, 134,2, 131,0, 129,8, 128,9, 128,3, 127,2, 126,8, 126,7, 126,4, 125,9, 125,7, 125,6, 125,3, 125,2, 121,6, 120,3, 118,5, 114,6, 113,6, 69,9, 54,9, 54,1, 53,0, 49,4, 42,6, 39,9, 38,9, 31,9, 31,6, 17,3, 12,1, 11,9.

Пример 2

Монтелукаст (720 мг) и формотерол (400 мг) помещали в круглодонную колбу и добавляли ацетонитрил (30 мл) и изопропанол (12 мл). Раствор перемешивали в течение 10 мин и затем нагревали при 80°C в течение 1 ч. После охлаждения твердое вещество получали фильтрованием. Порошок промывали ацетонитрилом. Перекристаллизация из диэтилового эфира давала искомое соединение. Выход 62%.

Пример 3

Монтелукаст (360 мг, 0,58 ммоля) растворяли в 19 мл ацетона. К раствору при интенсивном перемешивании одной порцией добавляли формотерол (200 мг, 0,58). Через 10 мин образовывался осадок. Перемешивание продолжали в течение 4 ч и затем твердое вещество отфильтровывали. Полученное твердое вещество промывали н-гексаном (2×10 мл) и сушили в сушильном шкафу (50°C, 12 ч). Выход 66%.

Пример 4

Синтез соли монтелукаста с фенотеролом (V)

N-(2-(3,5-Дигидроксифенил)-2-гидроксиэтил)-1-(4-гидроксифенил)пропан-2-аминий-2-(1-(((1-(3-(2-(7-хлорхинолин-2-ил)винил)фенил)-3-(2-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)пропил)тио)метил)циклопропил)ацетат

Монтелукаст (300 мг, 0,51 ммоля) растворяли в 15 мл этилацетата. К раствору при интенсивном перемешивании одной порцией добавляли фенотерол (155 мг, 0,51 ммоля). Перемешивание продолжали в течение 1 ч и затем при непрерывном перемешивании медленно добавляли н-гексан (15 мл). Реакционную смесь дополнительно перемешивали в течение 15 ч. Полученное таким образом твердое вещество отфильтровывали, промывали н-гексаном (2×10 мл) и сушили в сушильном шкафу (50°C, 12 ч).

Пример 5

Синтез соли монтелукаста с салметеролом (VI)

N-(2-Гидрокси-2-(4-гидрокси-3-(гидроксиметил)фенил)этил)-6-(4-фенилбутокси)гексан-1-аминий-2-(1-(((1-(3-(2-(7-хлорхинолин-2-ил)винил)фенил)-3-(2-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)пропил)тио)метил)циклопропил)ацетат

Монтелукаст (300 мг, 0,51 ммоля) растворяли в 15 мл этилацетата. К раствору при интенсивном перемешивании одной порцией добавляли салметерол (212 мг, 0,51 ммоля). Перемешивание продолжали в течение 1 ч и затем при непрерывном перемешивании медленно добавляли н-гексан (15 мл). Реакционную смесь дополнительно перемешивали в течение 15 ч. Полученное таким образом твердое вещество отфильтровывали, промывали н-гексаном (2×10 мл) и сушили в сушильном шкафу (50°C, 12 ч).

Пример 6

Синтез соли монтелукаста с вилантеролом (VII)

6-(2-((2,6-Дихлорбензил)окси)этокси)-N-(2-гидрокси-2-(4-гидрокси-3-(гидроксиметил)-фенил)этил)гексан-1-аминий-2-(1-(((1-(3-(2-(7-хлорхинолин-2-ил)винил)фенил)-3-(2-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)пропил)тио)метил)циклопропил)ацетат

Монтелукаст (300 мг, 0,51 ммоля) растворяли в 15 мл этилацетата. К раствору при интенсивном перемешивании одной порцией добавляли вилантерол (248 мг, 0,51 ммоля). Перемешивание продолжали в течение 1 ч и затем при непрерывном перемешивании медленно добавляли н-гексан (15 мл). Реакционную смесь дополнительно перемешивали в течение 15 ч. Полученное таким образом твердое вещество отфильтровывали, промывали н-гексаном (2×10 мл) и сушили в сушильном шкафу (50°C, 12 ч).

Результаты

Соли, полученные по методике, описанной в примере 1, выбирали для специфического химического исследования. Соль монтелукаста с формотеролом получали в виде бледно-коричневого порошка и рентгенограмма XRPD, приведенная на фиг. 1, представляла собой рентгенограмму кристалла, отличающуюся от имеющихся для исходных лекарственных средств (фиг. 2, A и B). На фиг. 3 приведены положения [2-тета] (медь (Cu)) основных пиков кристаллической формы.

Для оценки взаимодействия двух компонентов, представляющих собой органическую кислоту и основание соответственно, проводили анализ с помощью одно- и двумерного NMR. В частности, проводили предварительный подробный спектроскопический анализ недиссоциированных форм этих двух компонентов. Затем проводили спектроскопический анализ соли.

В спектре ¹H NMR соли монтелукаста с формотеролом (фиг. 4) обнаружены отличия химических сдвигов от данных для исследованных ранее монтелукаста и формотерола.

В частности, как показано на фиг. 5, обнаружено суммарное изменение химических сдвигов протонов, связанных с атомами углерода в области вблизи от вторичной аминогруппы формотерола.

Анализ с помощью¹³C NMR, проведенный с помощью одно- и двумерных экспериментов (фиг. 6 и 7 соответственно), обнаружил различия химических сдвигов недиссоциированных форм и соли (фиг. 8).

Измерения в NMR показали, что карбоксигрупа участвует во взаимодействии с аминогруппой формотерола. Кроме того, путем сопоставления сигналов спектров ¹H NMR этих двух компонентов соли определена стехиометрия (1:1) полученной соли

Анализ инфракрасного спектра соли монтелукаста с формотеролом (фиг. 9) обнаружил некоторые отличия от поглощений в IR спектрах монтелукаста (фиг. 10) и формотерола (фиг. 11). В частности, в IR спектре соли (фиг. 9) отсутствует полоса валентного колебания C=O карбоксигруппы, содержащаяся на фиг. 10 (1712 см^-1), тогда как имеется полоса асимметрического валентного колебания при 1608 см^-1, приписываемая карбоксилатному иону. Кроме того, содержится полоса средней интенсивности при 2335 см^-1, приписываемая соли вторичного амина (фиг. 9).

Синергетический терапевтический эффект соли монтелукаста с формотеролом по сравнению с отдельными лекарственными средствами

Полученные результаты подчеркивают терапевтические преимущества этой ассоциации, которая, с одной стороны, оптимизирует бронхиальный релаксирующий эффект формотерола и, с другой стороны, усиливает противовоспалительный эффект монтелукаста.

Воздействие на бронхи, предварительно сокращенные мускариновым агонистом (карбахол), вызывает значительное сокращение, которое эффективно обращается при введении формотерола. В действительности, введение формотерола стимулирует значительную бронхиальную релаксацию зависимым от концентрации образом (формотерол 1). Однако этот эффект значительно ослабляется при последующем воздействии бронхиального препарата на адренергический агонист (формотерол 2), что очевидно обусловлено десенсибилизацией рецептора. Напротив, предварительная инкубация с монтелукастом in vitro, хотя и не меняет бронхорасширяющий ответ на формотерол, сохраняет его эффективность (фиг. 12). Аналогичные благоприятные синергетические эффекты наблюдались in vivo.

Кроме того, фармакологическое лечение мышей монтелукастом (0,3 мг/кг) и формотеролом (0,3 мг/кг) приводит к противовоспалительному эффекту, которые значительно усиливается при введении соли монтелукаста с формотеролом (0,3 мг/кг) (фиг. 13). Следует подчеркнуть, что равная 0,3 мг/кг доза соли соответствует в пять раз меньшей дозе, что для этих двух отдельных лекарственных средств.

На основании этих данных в модели астмы на мышах оценена терапевтическая эффективность соли монтелукаста с формотеролом по сравнению с отдельными лекарственными средствами.

Сенсибилизация посредством OVA на бронхиальном уровне вызывает усиление ответа на карбахол и уменьшенный ответ на сальбутамол (фиг. 14 и 15). Фармакологическое лечение солью монтелукаста с формотеролом приводит к эффективному регулированию бронхиальной гиперреактивности, что является связанным с дозой эффектом (фиг. 14). Наилучшая доза соли равнялась 0,75 мг/кг, которая свидетельствует о возвращении реактивности бронхов к исходным значениям, что демонстрирует соответствующую эффективность предупреждения развития гиперреактивности. Эта доза также является наиболее эффективной для регулирования ответа на сальбутамол (фиг. 15). Кроме того, сенсибилизация определяет воспалительное состояние, которое вызывает значительное уменьшение ответа на бета-адренергические агонисты, которые в настоящее время являются самыми эффективными лекарственными средствами для борьбы с гиперреактивностью. Равная 0,75 мг/кг доза не только устраняет ослабленный ответ на карбахол, но и сохраняет отсутствие эффективности сальбутамола для индуцирования бронхиальной релаксации.

В другой серии экспериментов сопоставлена терапевтическая эффективность монтелукаста с формотеролом в дозе 0,75 мг/кг с эффективностью введения отдельных лекарственных средств формотерола (0,3 мг/кг) и монтелукаста (0,3 мг/кг).

Полученные результаты подтверждают превосходство соли монтелукаста с формотеролом для сохранения функции бронхов. Соль монтелукаста с формотеролом вводили в половинной концентрации по сравнению с отдельными лекарственными средствами (фиг. 16 и 17). Полученные результаты свидетельствуют о терапевтической эффективности соли монтелукаста с формотеролом, значительно более высокой, чем для исходных лекарственных средств формотерола и монтелукаста (вводимых в почти вдвое большей дозе), для борьбы с развитием гиперреактивности к карбахолу, индуцированной сенсибилизацией (фиг. 16). Кроме того, соль монтелукаста с формотеролом демонстрировала значительно более высокую эффективность для сохранения эффективности сальбутамола для модуляции бронхиальной релаксации. В действительности, как видно из чертежа (фиг. 17), введение овальбумина приводит к значительному снижению вызванной сальбутамолом релаксации. Этот эффект эффективно обращается только при лечении солью монтелукаста с формотеролом.

Проводили биохимические исследования плазмы и ткани легких, взятых у мышей, которых сенсибилизировали и лечили солью монтелукаста с формотеролом (0,75/мг/кг), формотеролом (0,3 мг/кг) и монтелукастом (0,3 мг/кг) (фиг. 18). Содержания IgE в плазме (фиг. 18-A), как и ожидалось, показали, что ни одно из исследованных лекарственных средств, не меняло эффективность сенсибилизации, поскольку все случаи лечения не влияли на содержание IgE. С другой стороны соль монтелукаста с формотеролом, хотя и введенная в половинной дозе по сравнению с отдельными лекарственными средствами, приводила к сходной эффективности ингибирования и IL-4 (фиг. 18-B), и IL-13 (фиг. 18-C) цитокинов, которые играют ключевую роль в клеточным механизмах, лежащих в основе нарушений типа астмы, таких как гиперреактивность и воспаление дыхательных путей.

Эксперименты, проведенные in vivo с использованием модели астмы на мышах, в еще большей степени свидетельствуют в пользу нашей гипотезы. Полученные результаты подтверждают значительно более высокую терапевтическую эффективность соли монтелукаста с формотеролом по сравнению с формотеролом и монтелукастом (вводимыми в двойной дозе) для устранения дисфункции дыхательных путей, вызванной сенсибилизацией.

Соль монтелукаста с формотеролом демонстрировала значительную эффективности и при борьбе с бронхиальной гиперреактивностью и при сохранении эффективности сальбутамола при модулировании бронхиальной релаксации. В действительности, введение овальбумина приводило и к возникновению гиперреактивности дыхательных путей, и к значительному уменьшению вызванной сальбутамолом релаксации. Лечение солью монтелукаста с формотеролом (при половинной дозе по сравнению с отдельными лекарственными средствами) более эффективно обращало оба воздействия на дыхательные пути, чем отдельные лекарственные средства.

В заключение следует отметить, что полученные выше данные свидетельствуют о дополнительных трех полезных характеристиках соли монтелукаста с формотеролом: 1) заметное уменьшение является десенсибилизации рецептора β₂; 2) увеличенная эффективность при борьбе с вызванной аллергеном дисфункцией дыхательных путей; 3) увеличенная противовоспалительная активность.

Изобретение относится к соли монтелукаста с β2 адренергическим агонистом, где β2 адренергический агонист выбран из формотерола и сальбутамола. Также предложены способ получения указанной соли монтелукаста, фармацевтическая композиция, содержащая указанную соль монтелукаста и применение указанной соли монтелукаста в качестве лекарственного средства. Техническим результатом предложенного изобретения является получение новых солей монтелукаста, оказывающих синергический терапевтический эффект при лечении вызванных аллергеном дисфункций дыхательных путей. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 18 ил., 6 пр.

1. Соль монтелукаста с β2 адренергическим агонистом, где β2 адренергический агонист выбран из группы, включающей формотерол и сальбутамол.

2. Соль монтелукаста с формотеролом по п. 1 в кристаллической форме I, отличающаяся порошковой рентгенограммой, которая получена с использованием излучения CuKα и характеризуется углами 2θ, на которой имеются характеристические пики при 6,39, 9,97, 13,05, 13,77, 15,42, 16,87, 17,87, 18,25, 20,37, 20,77, 23,14, 24,57, 26,23, 28,01, 28,96, 32,09, 33,81 и 38,57.

3. Способ получения соли по п. 1 или 2, включающий следующие стадии:

i) растворение или суспендирование монтелукаста в органическом растворителе, выбранном из группы, состоящей из C₁-C₄ алифатических спиртов, C₂-C₆ алифатических кетонов, C₄-C₈ алифатических простых эфиров, C₄-C₆ циклических простых эфиров, C₃-C₈ алифатических сложных эфиров, C₅-C₈ углеводородов, C₁-C₄ хлорированных углеводородов, алифатических C₂-C₄ нитрилов и их смесей;

ii) добавление при перемешивании β2 адренергического агониста;

iii) выделение соли монтелукаста с β2 адренергическим агонистом;

где β2 адренергический агонист выбран из группы, включающей формотерол и сальбутамол.

4. Способ по п. 3, где указанный органический растворитель выбран из группы, состоящей из следующих: метанола, этанола, изопропанола, ацетона, метилэтилкетона, метилизопропилкетона, диэтилкетона, диэтилового эфира, диизопропилового эфира, ди-трет-бутилового эфира, тетрагидрофурана, диоксана, этилацетата, толуола, ксилола, пентана, гексана, гептана, дихлорметана, хлороформа, дихлорэтана, ацетонитрила и их смесей, предпочтительно этилацетата.

5. Способ по п. 3 или 4, где отношение выраженных в ммоль/мл содержаний монтелукаста и органического растворителя составляет от 1:1 до 1:5.

6. Способ по любому из пп. 3-5, где отношение количества молей монтелукаста к количеству молей β2 адренергического агониста составляет от 1:1 до 1:1,5.

7. Способ по п. 3, где стадию выделения iii) проводят путем добавления антирастворителя, выбранного из группы, включающей C₅-C₈ алифатические углеводороды с линейной цепью_, предпочтительно пентан, гексан, гептан или их смесь.

8. Способ по п. 7, где отношение объема органического растворителя к объему антирастворителя составляет от 2:1 до 1:2, предпочтительно 1:1.

9. Способ по п. 3, где стадию выделения iii) проводят путем кристаллизации, предпочтительно из диэтилового эфира.

10. Способ по любому из пп. 3-9, дополнительно включающий стадию сушки при температуре в диапазоне от 30 до 80°C, предпочтительно 40-50°C.

11. Фармацевтическая композиция для лечения респираторных воспалительных патологий, обструктивных патологий, вызванных аллергеном дисфункций дыхательных путей, таких как астма, COPD и фиброз легких, содержащая соль монтелукаста с β2 адренергическим агонистом по п. 1 или 2 в комбинации по меньшей мере с одним физиологически приемлемым инертным наполнителем.

12. Фармацевтическая композиция по п. 11, где указанная композиция находится в форме порошка, суспензии или раствора, предпочтительно, если указанную композицию вводят путем ингаляции или пероральным путем.

13.Фармацевтическая композиция по п. 11 или 12, предназначенная для применения в качестве лекарственного средства, для лечения респираторных воспалительных патологий, обструктивных патологий, вызванных аллергеном дисфункций дыхательных путей, таких как астма, COPD и фиброз легких.

14. Применение соли по п. 1 или 2 в качестве лекарственного средства, для лечения респираторных воспалительных патологий, обструктивных патологий, вызванных аллергеном дисфункций дыхательных путей, таких как астма, COPD и фиброз легких.