ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к биопестицидам, в частности к биоинсектицидам (средствам биологической борьбы) для применения в профессиональной защите растений, садоводстве, лесоводстве и сельском хозяйстве или на приусадебном садово-огородном участке.
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В общем, пестицид представляет собой химическое вещество или биологический агент, который отпугивает, выводит из строя, убивает или иным образом препятствует вредителям. Вредители-мишени могут включать насекомых, патогены растений, сорняки, моллюски, птиц, млекопитающих, рыбу и микробы, которые приносят урон хозяйству, причиняют неудобства или распространяют болезнь, либо являются переносчиками болезней. Хотя у пестицидов есть свои преимущества, многие из них имеют и недостатки, такие как потенциальная токсичность для людей и других видов, а также неблагоприятное воздействие на окружающую среду.
Химические пестициды могут вызывать острые и отдаленные последствия для здоровья людей, подвергшихся их воздействию. Воздействие химических пестицидов может вызвать множество неблагоприятных последствий для здоровья, от простого раздражения кожи и глаз до более серьезных последствий, таких как поражение нервной системы, имитация гормонов, вызывающих репродуктивные проблемы, а также может вызывать рак.
Применение химических пестицидов вызывает ряд экологических проблем. Исследования показывают, что более 98% распыляемых инсектицидов и 95% гербицидов достигают места назначения, отличного от целевых видов, включая нецелевые виды, воздух, воду и почву.
Биопестициды представляют собой естественную альтернативу токсичным химическим пестицидам - растения, бактерии, грибы и минералы для борьбы с насекомыми-вредителями, поражающими пищевые и другие сельскохозяйственные культуры всех видов. Биопестициды сравнительно безопасны и, как правило, нетоксичны для пользователей и потребителей, быстро разлагаются и могут быть нацелены на конкретных вредителей, чтобы не нанести вред полезным насекомым.
Несмотря на исследования в области биопестицидов, еще не существует эффективного многоцелевого решения с широким спектром применений, которое было бы удобным для пользователя и могло быть адаптировано к конкретному применению. В результате потребление биопестицидов относительно низкое по сравнению с химическими пестицидами, несмотря на многие преимущества биопестицидов.
Поэтому желательно предоставить более простую альтернативу химическим пестицидам, которая была бы гибкой для множества применений и удобна для пользователя, чтобы облегчить использование.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В соответствии с первым аспектом настоящего изобретения предложен набор для борьбы с вредителями, где набор для борьбы с вредителями содержит: (а) количество энтомопатогенных нематод; и (b) смачивающую композицию, где смачивающая композиция содержит одно или несколько поверхностно-активных веществ.
Предпочтительно, количество энтомопатогенных нематод определено заранее. Термин «количество» будет пониматься квалифицированным специалистом как означающий «количество организмов». Следует понимать, что набор может включать смесь одного или нескольких штаммов нематод, где каждая смесь содержит соответствующее количество. Количества одного или нескольких штаммов нематод могут быть одинаковыми или разными в зависимости от желаемого применения набора.
Композиция смачивающего агента по настоящему изобретению, предпочтительно, является ключевым элементом при применении изобретения. Ключевые факторы, улучшенные в настоящем смачивающем агенте по сравнению с известными смачивающими агентами, предпочтительно, включают улучшенную совместимость со штаммами энтомопатогенных нематод (включая улучшенную жизнеспособность нематод), улучшенную смачивающую способность и повышенную эффективность штаммов энтомопатогенных нематод.
В частности, при использовании набора для борьбы с вредителями по изобретению обычно по меньшей мере 90% энтомопатогенных нематод выживают в течение по меньшей мере 24 часов после введения набора для борьбы с вредителями; и/или смертность вредителей составляет обычно по меньшей мере 90% в течение по меньшей мере 24 часов, предпочтительно, по меньшей мере 48 часов, даже более предпочтительно, по меньшей мере 72 часов после введения набора для борьбы с вредителями; и/или распространение энтомопатогенных нематод обычно увеличивается по сравнению с контрольными энтомопатогенными нематодами в отсутствие композиции смачивающего агента.
Предпочтительно, композиция смачивающего агента дополнительно содержит растворитель. Предпочтительно, растворитель содержит простой эфир гликоля. Предпочтительно, простой эфир гликоля представляет собой метиловый эфир дипропиленгликоля. Предпочтительно, растворитель представлен в концентрации растворителя, выбранной в диапазоне от 1 до 25% от несмешанной композиции смачивающего агента. Наиболее предпочтительно, растворитель представляет собой метиловый эфир дипропиленгликоля, представленный в растворителе в концентрации от 5% до 10% от несмешанной композиции смачивающего агента. В наиболее предпочтительном варианте осуществления изобретения концентрация метилового эфира дипропиленгликоля составляет в диапазоне от 50 до 100 мл в 1 литре.
Предпочтительно, одно или несколько поверхностно-активных веществ включают поверхностно-активное вещество, выбранное из группы поверхностно-активных полиоксиалкиленгликолей. Пример может включать полиэтиленгликоль. Одно или несколько поверхностно-активных веществ могут содержать неионное поверхностно-активное вещество. Другие варианты осуществления изобретения могут включать одно или несколько поверхностно-активных веществ, выбранных из анионных поверхностно-активных веществ. В вариантах осуществления изобретения одно или несколько поверхностно-активных веществ могут содержать соль фосфатного эфира. Предпочтительно, поверхностно-активное вещество представляет собой калиевую соль фосфатного эфира арилового эфира. Предпочтительно, поверхностно-активное вещество представлено в концентрации поверхностно-активного вещества, выбранной в диапазоне от 0,5% до 10% от несмешанной композиции смачивающего агента. Наиболее предпочтительно, поверхностно-активное вещество представляет собой калиевую соль фосфатного эфира арилового эфира, представленную в концентрации поверхностно-активного вещества, выбранной в диапазоне от 1% до 3% от несмешанной композиции смачивающего агента. В наиболее предпочтительном варианте осуществления изобретения, концентрация калиевой соли фосфатного эфира арилового эфира выбрана в диапазоне от 10 мл и 30 мл на 1 литр. Предпочтительно, композиция смачивающего агента содержит одно или несколько поверхностно-активных веществ на основе обратного блок-сополимера.
Поверхностно-активное вещество по настоящему изобретению в наборе для борьбы с вредителями может быть объединено с растворителем по настоящему изобретению при любой концентрации растворителя и/или поверхностно-активного вещества, как указано выше. Особенно предпочтительной является композиция смачивающего агента, содержащая растворитель на основе простого эфира гликоля (например, метиловый эфир дипропиленгликоля) и поверхностно-активный полиоксиалкиленгликоль (например, полиэтиленгликоль), где поверхностно-активное вещество может присутствовать в виде соли эфира фосфорной кислоты (особенно соли калия, например калиевая соль фосфатного эфира арилового эфира).
Исследования показали, что спиртовые этоксилаты (обычные поверхностно-активные вещества в современных композициях почвенных кондиционеров) обладают осушающим действием, и потенциальная повышенная биодоступность этих химических веществ по сравнению с солями эфира фосфорной кислоты может усилить осушающие свойства, тем самым иммобилизуя нематоды. Например, Steinernema carpocapsae переходят в ангидробиоз при угрозе высыхания. Исследования показали, что такие обычные почвенные кондиционеры могут иметь иммобилизирующий эффект на нематод и даже могут быть нематоцидными. Поэтому важно, чтобы смачивающие агенты и/или почвенные кондиционеры были проверены до того, как они будут объединены с видами нематод, поскольку они могут быть ответственны за уничтожение нематод в течение 3-6 часов, что снижает эффективность указанных нематод.
Многие смачивающие агенты предназначены для разрушения границы раздела воды и масел и позволяют удалить масла. Наименее совместимые смачивающие агенты обычно включают блок-сополимеры, которые обычно растворимы в воде. Представленный смачивающий агент, предпочтительно, содержит обратные блок-сополимеры, растворимые в масле. Предпочтительные смачивающие агенты, содержащие обратные триблок-сополимеры, демонстрируют улучшенную жизнеспособность нематод.
Композиция смачивающего агента, предпочтительно, дополнительно содержит одно или несколько смачивающих соединений. Предпочтительно, одно или несколько смачивающих соединений выбраны из алкиленоксидов. Предпочтительно, одно или несколько смачивающих соединений включают соединение, выбранное из полигидроксиэтилалкаксиалкиленоксидов.
Композиция смачивающего агента, предпочтительно, дополнительно содержит почвенный пенетрант. Один или несколько почвенных пенетрантов, предпочтительно, также помогают в перемещении нематод.
Предпочтительно, композиция смачивающего агента представлена в жидкой или порошкообразной форме. Предпочтительно, порошок является безводным.
Предпочтительно, жидкая или порошкообразная композиция смачивающего агента предназначена для смешивания с водой для получения рабочего смачивающего агента, имеющего концентрацию смеси, выбранную в диапазоне от 2,22% до 2,86% об./об. (рассчитано на основе полевого внесения 20 л композиции смачивающего агента на 700-900 л воды на 1 га). Предпочтительно, рабочий смачивающий агент предназначен для смешивания с водой при соотношении смешивания рабочий смачивающий агент:вода для получения конечной композиции смачивающего агента, где соотношение компонентов смеси выбрано в диапазоне от 1:2,22 до 1:2,86. Наиболее предпочтительно, соотношение компонентов смеси выбрано в диапазоне от 1:35 до 1:90. Наиболее предпочтительно, соотношение компонентов смеси выбрано в диапазоне от 1:70 до 1:90.
Описанная композиция смачивающего агента, предпочтительно, улучшает эффективность содержащего энтомопатогенного штамма нематод. Композиция смачивающего агента также, предпочтительно, снижает водоотталкивающие свойства в почве, в которую ее вносят в виде окончательной композиции смачивающего агента, предпочтительно, обеспечивая достаточное удерживание вблизи корневой зоны растений, сельскохозяйственных культур и других садовых организмов, где нематоды могут обнаруживать цель и выжить дольше, чем те, которые сопровождаются другими известными композициями смачивающих агентов. Это особенно важно, поскольку нематодам для движения обычно требуется пленка из воды/жидкости. Если вода/жидкость недоступны из-за обезвоживающей природы многих других смачивающих агентов, то жизнь нематоды может быть поставлена под угрозу.
Предпочтительно, набор для борьбы с вредителями дополнительно содержит комплект обучающих материалов, где комплект обучающих материалов предназначен для обучения пользователей как использовать (подходящее) количество энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых.
Предпочтительно, количество энтомопатогенных нематод составляет от 0,5 до 5,0 миллиардов инфекционных нематод (обычно инфекционных ювенильных (IJ) нематод). На площади земельного участка количество энтомопатогенных нематод, предпочтительно, составляет от 2,5 до 5,0 миллиардов инфекционных нематод на гектар. Количество инфекционных нематод, предпочтительно, зависит от ситуации с вредителями, их плотности и области внесения.
Предпочтительно, энтомопатогенная нематода выбрана из рода Heterorhabditis и/или рода Steinernema. Предпочтительно, энтомопатогенная нематода выбрана из следующей группы: Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis downesi, Steinernema feltiae, Steinernema carpocapsae и/или Steinernema kraussei.
Предпочтительно, набор для борьбы с вредителями используется для борьбы с популяцией личинок, куколок и/или взрослых насекомых. Более предпочтительно, насекомые выбраны из следующей группы: Tipula spp., Tipula oleracea, Gryllotalpa, Agrotis spp., Otiorhynchus sulcatus, Otiorhynchus spp., Hoplia philanthus, Phyllopertha horticola, Amphimallon solstitialis, Melolontha, Serica brunnea, Cydia pomonella, Cydia molesta, Cydia splendana, Ephydridae, Spodoptera spp., Chrysodeixis chalcites, Mamestra brassicae и Duponchelia fovealis, Hylobius abietis, Frankliniella occidentalis, Chromatomyia syngenesiae, Phytomyza vitalbaek Anoplophora chinensisk Ips typographus, Synanthedon myopaeformis, Opogona sacchari, Diaprepes abbreviates, Grapholita molesta, Grapholita funebrana, Chrysoteuchia topiaria, Rhabdopterus picipes, Capnodis tenebrionis, Curculio nucum, Zeuzera pyrina, Thaumetopoea processionea, Paysandisia archon, Synanthedon exitiosa, Rhynchophorus ferrugineus, Diabrotica virgifera, Bibionidae и/или Porcellio scaber.
Предпочтительно, энтомопатогенные нематоды активны при температурах выше 12°С. Более предпочтительно, энтомопатогенные нематоды активны при температурах выше 10°С. Более предпочтительно, энтомопатогенные нематоды активны при температурах выше 8°С.
Предпочтительно, энтомопатогенная нематода имеет степень уничтожения между 70 и 100%. Более предпочтительно, степень уничтожения составляет между 80 и 100%. Наиболее предпочтительно, степень уничтожения составляет между 90 и 100%.
Предпочтительно, набор для борьбы с вредителями используется для борьбы с популяцией личиночных и/или куколочных насекомых, выбранных из следующей группы: Tipula spp. Tipula oleracea, Gryllotalpa и/или Agrotis spp. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды включают Steinernema carpocapsae и/или Steinernema feltiae. Более предпочтительно, в таких вариантах осуществления количество энтомопатогенных нематод активно выше 8 или 12°С. Наиболее предпочтительно, в таких вариантах осуществления степень уничтожения составляет от 70 до 100%. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления комплект обучающих материалов предназначен для обучения пользователей по применению (соответствующего) количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых на газоне, спортивных и культурно-бытовых площадках. В контексте настоящего изобретения применение на газоне, спортивных и культурно-бытовых площадках относится к применению на лужайках для гольфа, футбольных полях, площадках для регби и на всех спортивных и культурно-бытовых газонах.
Предпочтительно, набор для борьбы с вредителями используется для борьбы с популяцией личиночных и/или куколочных насекомых, выбранных из следующей группы: Hoplia philanthus, Phyllopertha horticola, Amphimallon solstitialis, Melolontha и/или Serica brunnea. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды включают Heterorhabditis bacteriophora или комбинацию Heterorhabditis bacteriophora и Steinernema feltiae. Более предпочтительно, в таких вариантах осуществления количество энтомопатогенных нематод является активным при температуре выше 8 или 12°С. Наиболее предпочтительно, в таких вариантах осуществления степень уничтожения составляет от 80 до 100%. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления комплект обучающих материалов предназначен для обучения пользователей использованию (соответствующего) количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых на газоне, спортивных и культурно-бытовых площадках. В контексте настоящего изобретения применение на газоне, спортивных и культурно-бытовых площадках относится к применению на лужайках для гольфа, футбольных полях, площадках для регби и на всех спортивных и культурно-бытовых газонах.
Предпочтительно, набор для борьбы с вредителями используется для борьбы с популяцией личиночных и/или куколочных насекомых, выбранных из следующей группы: Frankliniella occidentalis, Chromatomyia syngenesiae, Phytomyza vitalbae, Liriomyza spp. Tuta absoluta, Crioceris spp. Synanthedon myopaeformis, Cydia pomonella, Grapholita molesta, Grapholita funebrana, Thaumetopoea processionea, Tipula oleracea и/или Bibionidae. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды включают Steinernema feltiae. Более предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды являются активными при температуре выше 8°С. Наиболее предпочтительно, в таких вариантах осуществления степень уничтожения составляет между 80 и 100%. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления комплект обучающих материалов предназначен для обучения пользователей использованию (соответствующего) количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых в садоводстве. Применение в садоводстве в контексте настоящего изобретения относится к использованию на ягодах, декоративных растениях и цветах.
Предпочтительно, набор для борьбы с вредителями используется для борьбы с популяцией личиночных и/или куколочных насекомых, выбранных из следующей группы: Otiorhynchus sulcatus, Hoplia spp. Phyllopertha horticola, Amphimallon solstitialis и/или Melolontha. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды включают Heterorhabditis bacteriophora и/или Steinernema feltiae. Более предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды являются активными при температуре выше 8°С. Наиболее предпочтительно, в таких вариантах осуществления степень уничтожения составляет между 90% и 100%. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления комплект обучающих материалов предназначен для обучения пользователей использованию (соответствующего) количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых в садоводстве. Применение в садоводстве в контексте настоящего изобретения относится к использованию на ягодах, декоративных растениях и цветах.
Предпочтительно, набор для борьбы с вредителями используется для борьбы с популяцией личиночных и/или куколочных насекомых, выбранных из следующей группы: Otiorhynchus sulcatus, Hylobius abietis, Anoplophora chinensis, Ips typographus, Diaprepes abbreviates, Rhabdopterus picipes, Curculio nucum и/или Diabrotica virgifera. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды включают Heterorhabditis downesi и/или Heterorhabditis bacteriophora. Более предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды являются активными при температуре выше 8 или 12°С. Наиболее предпочтительно, в таких вариантах осуществления степень уничтожения составляет между 90% и 100%. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления комплект обучающих материалов предназначен для обучения пользователей использованию (соответствующего) количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых в садоводстве. Применение в садоводстве в контексте настоящего изобретения относится к использованию на ягодах, декоративных растениях и цветах.
Предпочтительно, набор для борьбы с вредителями используется для борьбы с популяцией личиночных и/или куколочных насекомых, выбранных из следующей группы: Cydia pomonella, Cydia molesta, Cydia splendana, Ephydridae, Spodoptera spp. Chrysodeixis chalcites, Mamestra brassicae, Duponchelia fovealis, Hylobius abietis, Anoplophora chinensis, Ips typographus, Opogona sacchari, Chrysoteuchia topiaria, Capnodis tenebrionis, Zeuzera pyrina, Paysandisia archon, Synanthedon exitiosa, Rhynchophorus ferrugineus, Agrotis spp. и/или Porcellio scaber. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды включают Steinernema carpocapsae. Более предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды являются активными при температуре выше 14°С. Наиболее предпочтительно, в таких вариантах осуществления степень уничтожения составляет между 90% и 100%. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления комплект обучающих материалов предназначен для обучения пользователей использованию (соответствующего) количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых на деревьях и в лесных хозяйствах. Применение на деревьях и в лесах в контексте настоящего изобретения относится к использованию в регионах, где есть деревья и лесное хозяйство.
Предпочтительно, набор для борьбы с вредителями используется для борьбы с популяцией личиночных и/или куколочных насекомых, выбранных из следующей группы: Lycoriella spp. и/или Bradysia spp. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды включают Steinernema feltiae. Более предпочтительно, в таких вариантах осуществления энтомопатогенные нематоды являются активными при температуре выше 8°С. Наиболее предпочтительно, в таких вариантах осуществления степень уничтожения составляет между 90 и 100%. Предпочтительно, в таких вариантах осуществления комплект обучающих материалов предназначен для обучения пользователей использованию (соответствующего) количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых при выращивании грибов. Применение выращивания грибов в контексте настоящего изобретения относится к использованию в регионах, используемых для выращивания грибов.
В соответствии со вторым аспектом настоящего изобретения предложен способ борьбы с популяцией личинок насекомых, включающий следующие стадии:
a) предоставление набора для борьбы с вредителями согласно первому аспекту настоящего изобретения;
b) смешивание количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента с объемом воды для получения объема активированного биопестицида; и
c) нанесение объема активированного биопестицида на участок земли или пораженную листьями часть одного или нескольких растений.
В соответствии с третьим аспектом настоящего изобретения предложен способ борьбы с популяцией личинок насекомых, включающий следующие стадии:
a) предоставление количества энтомопатогенных нематод;
b) предоставление композиции смачивающего агента, содержащей одно или несколько поверхностно-активных веществ; и
c) предоставление комплекта обучающих материалов, где комплект обучающих материалов включает стадии, предназначенные для обучения пользователей использованию количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых.
Предпочтительно, количество энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента является подходящим для набора для борьбы с вредителями согласно первому аспекту настоящего изобретения.
В соответствии с четвертым аспектом настоящего изобретения предложен набор для борьбы с вредителями, где набор для борьбы с вредителями включает:
a) количество энтомопатогенных нематод;
b) композицию смачивающего агента, содержащую одно или несколько поверхностно-активных веществ; и
c) комплект обучающих материалов, включающий обучение способу, где способ включает стадии: применения количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых.
Предпочтительно, количество энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента является подходящим для набора для борьбы с вредителями согласно первому аспекту настоящего изобретения.
Предпочтительно, способ по комплекту обучающих материалов направлен на конкретное применение способа. Более предпочтительно, применение включает одно применение, выбранное из следующей группы: применение на газоне, спортивных и культурно-бытовых площадках; применение в садоводстве; на деревьях и в лесном хозяйстве; применение при выращивании грибов. Применение на газоне, спортивных и культурно-бытовых площадках в контексте настоящего изобретения относится к применению на лужайках для гольфа, футбольных полях, площадках для регби и на всех спортивных и культурно-бытовых газонах. Применение в садоводстве в контексте настоящего изобретения относится к использованию на ягодах, декоративных растениях и цветах Применение на деревьях и в лесах в контексте настоящего изобретения относится к использованию в регионах, где есть деревья и лесное хозяйство. Применение при выращивания грибов в контексте настоящего изобретения относится к использованию в регионах, используемых для выращивания грибов.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
Нематоды, паразитирующие на насекомых, также известные как энтомопатогенные нематоды, представляют собой круглые черви, обитающие в почве, которые были коммерциализированы для борьбы с сельскохозяйственными, садовыми и лесными вредителями или дома и на садовых участках с некоторыми заметными успехами. Однако на способность этих нематод эффективно обнаруживать и уничтожать целевых насекомых-хозяев могут серьезно влиять условия окружающей среды, при этом почва является одним из наиболее важных факторов, влияющих на выживание, устойчивость и инфекционность нематод в полевых условиях. Энтомопатогенные нематоды используют влагу в почве для перемещения и предотвращения их высыхания, но водоотталкивающие свойства или гидрофобность почвы стали проблемой, которая может помешать успешному применению нематод.
Различные коммерческие продукты, такие как поверхностно-активные вещества почвы, почвенные кондиционеры, смачивающие агенты или почвенные пенетранты, были использованы для улучшения эффектов водоотталкивающих свойств почвы, чтобы снизить межфазное натяжение между гидрофильной и несмачиваемой гидрофобной фазами. Эти смачивающие агенты помогают улучшить движение воды по профилю почвы, повысить эффективность использования воды за счет улучшения водоотталкивающих свойств и улучшить равномерное распределение воды.
Таким образом, в настоящем изобретении подробно описан набор для борьбы с вредителями, включающий энтомопатогенные нематоды и композицию смачивающего агента, и, предпочтительно, вместе с обучающим комплектом для обучения пользователей борьбе с популяцией насекомых-вредителей-мишеней, повреждающих интересующую продукцию.
Обычно набор для борьбы с вредителями по изобретению не содержит химический пестицид. Предпочтительно, набор для борьбы с вредителями по изобретению не содержит химический пестицид и не предназначен для использования в комбинации с химическим пестицидом (независимо от того, применяются ли набор для борьбы с вредителями по изобретению и химический пестицид одновременно или последовательно). Как показано в приведенных ниже примерах, авторы настоящего изобретения продемонстрировали, что обычные смачивающие агенты не подходят для использования с энтомопатогенными нематодами. В частности, было показано, что обычные смачивающие агенты снижают выживаемость энтомопатогенных нематод и снижают пестицидную активность энтомопатогенных нематод по сравнению с смачивающими агентами, используемыми в наборах для борьбы с вредителями по изобретению. Таким образом, наборы для борьбы с вредителями по настоящему изобретению обеспечивают удивительные преимущества по сравнению с решениями, известными в данной области.
Выживаемость энтомопатогенных нематод согласно изобретению может быть, по меньшей мере, сопоставима с выживаемостью контрольной популяции тех же энтомопатогенных нематод в отсутствие смачивающего агента по изобретению. Выживаемость одной и той же энтомопатогенной нематоды согласно изобретению обычно улучшается по сравнению с выживаемостью контрольной популяции той же энтомопатогенной нематоды в присутствии обычного смачивающего агента. Обычно, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или более энтомопатогенных нематод, содержащихся в наборе для борьбы с вредителями по настоящему изобретению, выживают в течение по меньшей мере 24 часов, по меньшей мере 48 часов, по меньшей мере 72 часов или более после введения указанного набора для борьбы с вредителями. Выживаемость энтомопатогенных нематод может варьироваться в зависимости от конкретного вида (примерные виды описаны в настоящем изобретении). Однако, предпочтительно, для любой данной энтомопатогенной нематоды, содержащейся в наборе для борьбы с вредителями по настоящему изобретению, по меньшей мере 90% выживают в течение по меньшей мере 24 часов после введения. Выживаемость энтомопатогенных нематод может быть определена с использованием любых подходящих методов, примеры методов являются стандартными в данной области. В качестве неограничивающего примера, выживаемость энтомопатогенных нематод может быть определена с использованием анализа совместимости, такого как стандартный метод, описанный в примере 1 ниже.
Пестицидная активность энтомопатогенных нематод согласно изобретению может быть, по меньшей мере, сопоставима с пестицидной активностью контрольной популяции той же энтомопатогенной нематоды в отсутствие смачивающего агента по изобретению. Пестицидная активность той же энтомопатогенной нематоды в присутствии обычного смачивающего агента обычно повышается. Активность пестицидов можно количественно оценить любым подходящим способом. В качестве неограничивающего примера, пестицидная активность энтомопатогенных нематод может быть определена количественно в виде процента подлежащих обработке вредителей, которые были убиты в/к заданному моменту времени (называемые взаимозаменяемо смертностью вредителей). Обычно, смертность вредителей, подлежащих обработке, составляет по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или более в течение по меньшей мере 24 часов, по меньшей мере 48 часов, по меньшей мере 72 часов или более после введения указанного набора для борьбы с вредителями. Смертность вредителей может варьироваться в зависимости от конкретных видов вредителей и/или конкретных видов энтомопатогенных нематод (примеры видов вредителей и энтомопатогенных нематод описаны в настоящем изобретении). Однако, предпочтительно, для любой данной энтомопатогенной нематоды и вредителя смертность вредителя составляет по меньшей мере 90% в течение по меньшей мере 24 часов после введения, более предпочтительно, в течение по меньшей мере 48 часов после введения, даже более предпочтительно, в течение по меньшей мере 72 часов после введения. Смертность вредителей может быть определена с использованием любых подходящих методов, примеры методов являются стандартными в данной области. В качестве неограничивающего примера, смертность вредителей может быть определена с использованием анализа патогенности, такого как те, которые используются в приведенных ниже примерах.
Распространение энтомопатогенной нематоды согласно изобретению может быть изменено по сравнению с распространением контрольной популяции той же энтомопатогенной нематоды в отсутствие смачивающего агента по изобретению. Распространение может быть вертикальным и/или горизонтальным. Ссылки в данном документе на «распространение» охватывают как горизонтальное, так и вертикальное распространение, если не указано иное.
Обычно вертикальное распространение энтомопатогенных нематод с помощью смачивающих агентов по изобретению по меньшей мере сравнимо с распространением контрольной популяции той же энтомопатогенной нематоды в отсутствие смачивающего агента по изобретению.
Горизонтальное распространение энтомопатогенных нематод с помощью смачивающих агентов по изобретению по меньшей мере сравнимо с распространением эталонной популяции той же энтомопатогенной нематоды в отсутствие смачивающего агента по изобретению и обычно улучшается по сравнению с диспергированием такой контрольной популяции. Горизонтальное распространение энтомопатогенных нематод согласно изобретению может быть увеличено по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 75% или более по сравнению с горизонтальным распространением контрольной популяции тех же энтомопатогенных нематод в отсутствие смачивающего агента по изобретению.
Распространение энтомопатогенных нематод может быть определено с использованием любых подходящих методов, примеры методов являются стандартными в данной области. В качестве неограничивающего примера, вертикальное распространение энтомопатогенных нематод может быть определено с использованием анализа песчаной колонны. В качестве дополнительного неограничивающего примера, горизонтальное распространение энтомопатогенных нематод может быть определено путем количественного определения распространение на чашке с агаром с декстрозой Сабуро (SDA). Опять же, в данной области известны подходящие способы с использованием планшетов SDA.
Распространение энтомопатогенных нематод может варьироваться в зависимости от конкретного вида (в настоящем изобретении описаны типичные виды). Однако, предпочтительно, для любой данной энтомопатогенной нематоды, содержащейся в наборе для борьбы с вредителями по изобретению, горизонтальное распространение увеличено по сравнению с контрольными энтомопатогенными нематодами с отсутствием композиции смачивающего агента, более предпочтительно, горизонтальное распространение увеличивается по меньшей мере на 20% по сравнению с контрольными энтомопатогенными нематодами с отсутствием композиции смачивающего агента.
Предпочтительно, наборы для борьбы с вредителями по настоящему изобретению обеспечивают повышенную выживаемость энтомопатогенных нематод и повышенную смертность вредителей, как описано в настоящем документе. В некоторых особенно предпочтительных вариантах осуществления наборы для борьбы с вредителями по настоящему изобретению обеспечивают повышенную выживаемость энтомопатогенных нематод, повышенную смертность вредителей и повышенное распространение (особенно горизонтальное распространение), как описано в данном документе. Не ограничиваясь теорией, считается, что полезные свойства наборов для борьбы с вредителями по настоящему изобретению обеспечиваются смачивающим агентом по настоящему изобретению, в частности, растворителем и/или поверхностно-активным веществом (или их комбинацией), которые должны быть включены в смачивающий агент.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР
На ФИГ. 1 представлен вид компонентов набора для борьбы с вредителями согласно первому и четвертому аспектам настоящего изобретения.
На ФИГ. 2 показана эффективность (%) Heterorhabditis bacteriophora, применяемого отдельно или с композицией смачивающего агента (в виде набора-С для борьбы с вредителями) для борьбы с личинками валлийского хруща, Hoplia philanthus. Испытания проводились в гольф-клубе Grove, Уотфорд, Лондон, Великобритания, в период с мая 2017 года по октябрь 2018 года. Обработка включала: Heterorhabditis bacteriophora 2,5 миллиарда/га, применяемые отдельно, набор для борьбы с вредителями-С 2,5 миллиарда/га, применяемый с композицией смачивающего агента (10 л/га) и хлорпирифос (Equity) 2 л а.и./га. Все обработки проводились с использованием инжектора для почвы после обычного штангового опрыскивателя. Для оценки популяции личинок образцы почвы были взяты через 2, 4, 6 и 8 недель после внесения.
На ФИГ. 3 показано применение нематод на поле для гольфа для борьбы с личинками комаров долгоножек.
На ФИГ. 4 показано нанесение нематод на поле для гольфа путем пробивания отверстий для борьбы с личинками комаров долгоножек.
На ФИГ. 5 показаны подготовка и процесс, выполняемые до и во время полевых испытаний по примерам 1-6.
На ФИГ. 6 показана эффективность (%) нематод (Steinernema feltiae весной и Steinernema carpocapsae осенью), применяемых отдельно или с композицией смачивающего агента (в виде набора для борьбы с вредителями-L) для борьбы с личинками комаров долгоножек. Испытания проводились в гольф-клубе, Mull of Kintyre, Шотландия, в период с апреля 2018 г. по сентябрь 2018 г. Обработка включала: нематоды (Steinernema feltiae весной и Steinernema carpocapsae осенью) 2,5 миллиарда/га, применяемые отдельно дважды с недельными интервалами, набор для борьбы с вредителями-L 2,5 миллиарда/га, применяемый дважды с недельными интервалами с композицией смачивающего агента (10 л/га) и хлорпирифос (Equity) 2 л а.и./га. Все обработки проводились с использованием обычного штангового опрыскивателя перед аэрацией почвы, включая создание крошечных отверстий диаметром 0,5 см. Для оценки популяции личинок образцы почвы были взяты через 6 недель после обработки.
На ФИГ. 7 показан экспериментальный участок, Кингс Кэпл, Херефордшир, Англия, Великобритания.
На ФИГ. 8 показана эффективность (%) Heterorhabditis bacteriophora отдельно или с композицией смачивающего агента (в виде набора для борьбы с вредителями-Н) для борьбы с черным виноградным долгоносиком (Otiorhynchus sulcatus) на клубнике, выращиваемой в полевых условиях. Обработка включала: Metarhizium anisopliae, применяемые в виде предварительно смешанного раствора, Steinernema kraussei, применяемые с композицией смачивающего агента или без нее, в виде раствора, Heterorhabditis bacteriophora отдельно или с композицией смачивающего агента (в виде набора для борьбы с вредителями-Н) и хлорпирифос (Equity). Испытания проводились на песчаной почве в пленочной теплице в Кингс-Кэпл, Херефордшир, Великобритания, в период с июля по октябрь 2016-17 гг. Каждый куст клубники был инфицирован 30 яйцами черного виноградного долгоносика, и кусты были оценивали на степени уничтожения через 13 недель после инокуляции. Столбцы с одинаковыми буквами существенно не различаются (Р>0,05); тест Тьюки). Каждую обработку повторяли 4 раза с 15 растениями на обработку.
На ФИГ. 9 показаны сравнительные результаты эффективности инсектицида, полезных насекомых и набора для борьбы с вредителями-F (Steinernema feltiae) для борьбы с западным цветочным трипсом (Frankliniella occidentalis) на клубнике, выращиваемой в полевых условиях. Обработка включала: инсектицид (Tracer - торговая марка), полезные хищные клещики, Neoseiulus cucumeris, Steinernema feltiae отдельно или с композицией смачивающего агента (в виде набора для борьбы с вредителями-F). Испытания проводились на песчаной почве в пленочной теплице в Кингс-Кэпл, Херефордшир, Великобритания, в период с июля по октябрь 2015-17 гг. Урожай клубники был заражен западными цветочными трипсами (5-20 взрослых особей/цветок), и количество трипсов на каждом цветке/растении подсчитывали на 28, 29, 30, 31, 32, 33 и 35 неделю после обработки. Каждую обработку повторяли 4 раза с 15 растениями на обработку.
На ФИГ. 10 показаны результаты сравнительной эффективности пестицидов и набор для борьбы с вредителями-S (Steinernema feltiae) для борьбы с личинками сциаридной мухи в тепличных условиях. Обработка включала: карбофуран, тефлубензурон, Steinernema feltiae отдельно или с композицией смачивающего агента (в виде набора для борьбы с вредителями-S). Испытания проводились на ферме по производству грибов в Великобритании в 2016-17 гг. Грибы были естественно инфицированы личинками сциарид, и их количество подсчитывали в 1 и 3 недели после обработки. Каждую обработку повторяли 4 раза с 15 растениями на обработку.
На ФИГ. 11 показана эффективность Heterorhabditis bacteriophora отдельно, Heterorhabditis downesi отдельно и Steinernema carpocapsae отдельно или с композицией смачивающего агента (в виде набора для борьбы с вредителями-Т) для борьбы с личинками соснового долгоносика у ели ситкинской. Обработка включала: Heterorhabditis bacteriophora отдельно,
Heterorhabditis downesi отдельно, Steinernema carpocapsae отдельно и Steinernema carpocapsae + композиция смачивающего агента (в виде набора для борьбы с вредителями-Т). Нематоды применяли из расчета 3,5 миллиона на пень в 500 мл воды в виде полива. Испытания проводились на пнях ели ситкинской в лесу Тайви-Норт, Кередигион, Уэльс, в период с июня по август 2016-17 гг.. Каждый пень подвергался оценке степени уничтожения через 4 недели после обработки. Каждую обработку повторяли 5 раз с 5 пнями на обработку.
На ФИГ. 12 представлена блок-схема, изображающая способ борьбы с популяцией личинок насекомых согласно второму и третьему аспектам настоящего изобретения.
Со ссылкой на ФИГ. 1 представлен вид компонентов набора для борьбы с вредителями 10 согласно первому и четвертому аспектам настоящего изобретения. Набор для борьбы с вредителями 10 содержит количество энтомопатогенных нематод 12, композицию смачивающего агента 14 и комплект обучающих материалов 16. В показанном варианте осуществления количество энтомопатогенных нематод включает Steinernema feltiae в количестве 2,5 миллиарда организмов на гектар обрабатываемой площади. Организмы следует хранить при температуре ниже 8°С, ниже которой Steinernema feltiae остаются в значительной степени лабильными. При температуре выше 8°С Steinernema feltiae становятся активными и заразными. Композиция смачивающего агента 14 включает жидкость, содержащую 10% метилового эфира дипропиленгликоля, 3% поверхностно-активных полиэтиленгликолей и почвенные пенетранты. Комплект обучающих материалов 16 выполнен с возможностью позволить пользователю осуществить способ борьбы с популяцией насекомых согласно второму и третьему аспектам.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Если в настоящем документе не определено иное, научные и технические термины, используемые в описании настоящего изобретения, имеют значения, которые обычно понимаются специалистами в данной области техники. Значение и объем терминов должны быть ясными; однако, в случае какой-либо неясной двусмысленности, определения, приведенные в настоящем документе, имеют приоритет над любым словарным или внешним определением. Следует понимать, что данное изобретение не ограничивается конкретными методами, протоколами, реагентами и т.д., описанными в настоящем документе, и как таковые они могут варьироваться. Используемая в настоящем документе терминология предназначена только для описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения объема настоящего изобретения, которое определяется исключительно формулой изобретения. Кроме того, если из контекста не следует иное, термины в единственном числе должны включать множественное число, а термины во множественном числе должны включать единственное число. В данной заявке использование термина «или» означает «и/или», если не указано иное. Кроме того, использование термина «включающий», а также других форм, таких как «включает» и «включенный», не является ограничивающим.
Описание вариантов осуществления изобретения не предназначено быть исчерпывающим или ограничивать изобретение точной формой. Хотя конкретные варианты осуществления и примеры изобретения описаны в настоящем документе в иллюстративных целях, в пределах объема изобретения возможны различные эквивалентные модификации, что будет понятно специалистам в соответствующей области техники. Например, хотя стадии или функции способа представлены в заданном порядке, альтернативные варианты осуществления могут предполагать функции в другом порядке или функции могут выполняться по существу одновременно. Принципы изобретения, представленные в данном документе, могут быть применены к другим процедурам или способам, если это необходимо. Различные варианты осуществления, описанные в данном документе, могут быть объединены для предоставления дополнительных вариантов осуществления. Аспекты изобретения могут быть изменены, если необходимо, для использования композиций, функций и концепций приведенных выше ссылок и приложения, чтобы предоставить еще дополнительные варианты осуществления изобретения. Более того, из соображений биологической функциональной эквивалентности, некоторые изменения могут быть внесены в структуру белка, не влияя на биологическое или химическое действие по типу или количеству. Эти и другие изменения могут быть внесены в изобретение в свете подробного описания. Предполагается, что все такие модификации включены в объем прилагаемой формулы изобретения.
Обсуждаемые в настоящем документе публикации предназначены исключительно для их раскрытия до даты подачи настоящей заявки. Ничто в данном документе не должно толковаться как признание того, что такие публикации составляют предшествующий уровень техники по отношению к прилагаемой формуле изобретения.
ПРИМЕРЫ
Конкретные варианты осуществления описаны далее только в качестве примера и со ссылкой на чертежи.
Пример 1 - сравнительные исследования NemaSpreader с коммерчески доступными смачивающими веществами
Смачивающие агенты как класс соединений являются коммерчески легко доступными, а некоторые (например, H2Pro) даже рекламируются как подходящие для использования с энтомопатогенными нематодами. Была исследована выживаемость различных видов нематод после воздействия различных смачивающих агентов. Эти смачивающие агенты включают коммерчески доступные смачивающие агенты и смачивающий агент согласно настоящему изобретению (NemaSpreader®).
Конечные концентрации смачивающего агента были эквивалентны тем, которые предписаны в соответствии с рекомендациями производителя для применения в полевых условиях. В колбу для тканевых культур (вместимость 50 мл) добавляли 15 мл раствора нематод вместе с 15 мл каждого смачивающего агента, таким образом, общий полученный объем составлял 30 мл, содержащих приблизительно 93750 IJ (что эквивалентно полевому применению 2,5×109 IJ/га в 800 л воды). Для контроля к раствору нематод добавляли 15 мл дистиллированной воды вместо смачивающего агента. Каждую обработку повторяли трижды. Колбы для тканевых культур хранили при 20±2°С в темноте.
Жизнеспособность нематод оценивали через 3, 6 и 24 часа путем удаления аликвот 3×20 мкл из каждой суспензии, и количество живых нематод подсчитывали с помощью бинокулярного микроскопа (Olympus). Нематоды считались мертвыми, если наблюдались следующие критерии: (i) отсутствие движения, (ii) начальные признаки разложения и/или образование пузырьков внутри нематоды, (iii) отсутствие реакции на физическое раздражение. Весь анализ повторяли дважды.
Как показано в таблице 1 ниже, смачивающий агент NemaSpreader® в соответствии с тем, который требуется для первого аспекта настоящего изобретения, совместим с видами нематод, выбранными из следующей группы: Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis downesi, Steinernema feltiae; Steinernema carpocapsae, Steinernema kraussei. Выживаемость нематод после 24-часового воздействия указанного смачивающего агента не опускалась ниже 90%. Напротив, через 24 часа после воздействия выживаемость исследуемых видов нематод была значительно снижена во всем диапазоне анализируемых обычных смачивающих агентов.
Следовательно, вопреки общепринятым знаниям, выбор смачивающего агента может иметь значительное влияние на выживаемость/жизнеспособность нематод, а выбор конкретного смачивающего агента является ключевым фактором к эффективности продуктов и наборов для борьбы с вредителями, содержащих энтомопатогенные нематоды.
Кроме того, в дальнейших сравнительных исследованиях оценивалась постэкспозиционная патогенность в отношении личинок большой восковой моли, Galleria mellonella, через 24 часа после экспозиции. Нематод, подвергшихся воздействию исследуемых адъювантов из анализов совместимости, промывали три раза для удаления какого-либо остаточного смачивающего агента с тела нематоды. Один миллилитр раствора нематод после каждой обработки помещали в микроцентрифужную пробирку объемом 1,5 мл и вращали при 3000 об/мин в течение 7 мин. Супернатант, содержащий избыток смачивающего агента, отбрасывали, и нематоды ресуспендировали, используя 1 мл дистиллированной воды. Процесс повторяли по 3 раза для каждого вида обработки. Для каждой ресуспензии нематод опять проводили подсчет, чтобы определить имеющуюся концентрацию, и объемы корректировались для получения конц. 500 нематод в 900 мкл воды для каждой обработки.
Пять личинок G. mellonella помещали в чашку Петри диаметром 90 мм, выстланную фильтровальной бумагой Whatman®. Затем по фильтровальной бумаге равномерно распределяли 900 мкл суспензии нематоды и герметизировали крышку с помощью Parafilm™. Были протестированы два контрольных условия; G. mellonella заражали нематодами, не подвергавшимися воздействию какого-либо смачивающего агента, и холостые контроли с использованием личинок G. mellonella подвергали воздействию фильтровальной бумаги, обработанной только дистиллированной водой. Чашки Петри хранили при 25±1°С в темноте. Смертность регистрировали ежедневно до гибели всех насекомых. Всех зараженных нематодами мертвых личинок переносили в чашки Петри, выстланные влажной фильтровальной бумагой, и выдерживали при 25±1°С в течение 3 дней, после чего мертвых личинок препарировали и просматривали под световым микроскопом для проверки наличия нематод. Каждую обработку повторяли 3 раза с 5 личинками на повторение и проводили дважды.
Патогенность указанных нематод после воздействия не опускалась ниже 90% через 72 часа после воздействия смачивающего агента (данные не показаны).
Кроме того, также было протестировано вертикальное распределение указанных нематод через тестовую среду (столбик песка) с использованием смачивающего агента (30 мл смачивающего агента было добавлено к 350 г песка в стеклянном стакане Hi-Ball (Wilkinson, UK), и вертикальное распределение на более 80% глубины стеклянного стакана Hi-Ball было достигнуто с использованием смачивающего агента (данные не показаны). Горизонтальное распределение также оценивалось с использованием чашек с SDA. На чашке Петри диаметром 9 см на чашках с агаром Сабуро с декстрозой (SDA) были нарисованы два концентрических круга на расстоянии 1,0 и 3,5 см от центральной точки чашки. Аликвоты 20 мкл смачивающего нематод агента в тех же концентрациях, что и в анализе совместимости, добавляли в центральную точку чашки. Затем чашки герметизировали с помощью Parafilm и хранили в темноте при 21±2°С в течение 2 часов, после чего нематоды, мигрировавшие в каждую зону ((i) 0-1,0 см от центра чашки Петри; (ii) 1,0-3,5 см и (iii) 3,5-4,5 см), подсчитывались для оценки их перемещения от точки размещения. Наблюдаемое увеличение рассеивания в зону ii наблюдалось для всех видов нематод, испытанных с использованием смачивающего агента согласно настоящему изобретению, по сравнению с холостым контролем.
Таким образом, смачивающий агент по изобретению превосходит альтернативные продукты (включая первый альтернативный продукт, содержащий спирты, С6-12, этоксилированный 5-10%, пропан-1,2-диол, пропоксилированный 1-3%; и второй альтернативный продукт, содержащий этоксилат спирта 19,4% (неионогенное поверхностно-активное вещество); запатентованную смесь + спирт, вторичный С11-15, этоксилированный 15-20% + апельсин, сладкий, доп. проплингликоль 5-10%) в исследованиях совместимости, патогенности после контакта и распространения.
Таким образом, выбор увлажняющего агента важен, поскольку он может повлиять на другие аспекты продукта/набора для борьбы с вредителями (такие как патогенность и распространение нематод) и, следовательно, на эффективность пестицида. В следующих далее примерах описываются полевые исследования настоящего набора для борьбы с вредителями в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения при осуществлении способа в соответствии со вторым аспектом.
Пример 2 - Уничтожение личинок чейфера на поле для гольфа
Полевые испытания были проведены на естественно зараженных тройниках, гринах и фервеях, содержащих смесь валлийского хруща, Hoplia philanthus (90%), хрущика садового, Phyllopertha horticola (3%), июньского хруща, Amphimallon solstitialis (1%), майского хруща, Melolontha (4%) и видов проволочников Agriotes (3%) в гольф-клубе Grove, Уотфорд, гольф-клубе Ashridge, Беркхамстед, Великобритания. Почва состоит из супеси, содержащей 88,0% песка, 5,6% ила, 6,4% глины с 5,8% органического вещества. При прикормке образцов почвы личинками Galleria mellonella естественные нематоды обнаружены не были.
За неделю до обработки определяли плотность личинок перед обработкой тройников, гринов и фервеев (см. ФИГ. 4) путем взятия трех пробок из почвы размером 16×16×10-15 см лопатой или резаком для отверстий для гольфа (диаметр 10 см). Подсчитывали количество живых личинок и регистрировали количество личинок на квадратный метр. Затем личинки помещали обратно в пробку для почвы, которую возвращали на исходное место.
Heterorhabditis bacteriophora (для использования в наборе для борьбы с вредителями-С) с композицией смачивающего агента и без нее в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения (предварительно смешанная жидкая форма: 5-10% метиловый эфир дипропиленгликоля, поверхностно-активные полиоксиалкиленгликоли и почвенные пенетранты) вносили с помощью трактора, установленного на инжектор грунта (см. ФИГ. 3), с последующим штанговым опрыскивателем для обработки 10 га тройников, гринов и фервеев в гольф-клубе Grove весной и осенью 2017-18 (температура почвы на глубине 7 см 14,5-18,0°С; температура воздуха 14-20°С; ясный день).
Обработки включали:
1. Только Heterorhabditis bacteriophora 2,5 миллиарда на гектар, применяли дважды с интервалом в неделю;
2. Набор для борьбы с вредителями согласно первому аспекту настоящего изобретения, содержащий 2,5 миллиарда Heterorhabditis bacteriophora на гектар + 5 литров конечной смешанной композиции смачивающего агента (разведение жидкой формы до 500 литров воды; 1% об./об.) (набор для борьбы с вредителями-С) применяли дважды с интервалом в неделю;
3. Хлорпирифос (2 литра действующего вещества на гектар) применяли только один раз; и
4. Необработанный контроль.
Плотность личинок после обработки определяли через 2, 4, 6 или 8 недель после внесения нематод или хлорпирифоса.
Полученные результаты
В целом комбинированный продукт для борьбы с вредителями согласно первому аспекту (Heterorhabditis bacteriophora с композицией смачивающего агента - набор для борьбы с вредителями-С) обеспечивал лучшее уничтожение через 2, 4, 6 и 8 недель после обработки по сравнению с химическим средством или нематодами, применяемыми отдельно. Комбинированный продукт для борьбы с вредителями обеспечил 97%-ное уничтожение. Только нематоды обеспечивали 70%, а химический препарат 62%. Был замечено прогрессирующее уничтожение личинок в их естественной среде обитания (см. ФИГ. 2).
Пример 3 - Уничтожение личинок комаров долгоножек на поле для гольфа
Личинка комаров долгоножек (Tipula spp.) является личиночной стадией долгоножки и может очень трудным для уничтожения вредителем, обитающим в почве. Личинки питаются корнями различных растений, таких как зерновые культуры и различные виды травы на полях для гольфа, спортивных площадках и лужайках. Взрослые насекомые вылупляются из куколок и выходят на поверхность почвы с середины августа. Самки совокупляются и откладывают яйца чуть ниже влажной поверхности почвы, а через две недели личинки начинают вылупляться. Личинки питаются листвой растений ночью и корнями днем.
Полевые испытания были проведены на естественно зараженных гринах, содержащей личинки видов Tipula (100%), в гольф-клубе Machrihanish, Шотландия, Великобритания. Почва состоит из супеси, содержащей 85% песка, 4,5% ила, 5% глины с 5,5% органического вещества. При прикормке образцов почвы личинками Galleria mellonella естественные нематоды обнаружены не были.
За неделю до обработки в гринах определяли плотность предварительно обработанных личинок Tipula spp., отбирая шесть пробок почвы на грин с помощью резака для лунок для гольфа (диаметром 10 см). Подсчитывали количество живых личинок и выражали количество личинок на квадратный метр. Затем личинок помещали обратно в почвенную пробку, которую возвращали на исходное место.
В соответствии с первым аспектом настоящего изобретения Steinernema feltiae и Steinernema carpocapsae (набор для борьбы с вредителями-L) применяли в равной пропорции со смачивающим агентом и без него (жидкая форма: метиловый эфир дипропиленгликоля 5-10%, полиоксиалкиленгликоль поверхностно-активные вещества и почвенные пенетранты), используя штанговый опрыскиватель, такой же, как описан на ФИГ. 3. Чтобы доставить нематод к цели под поверхностью, за 24 часа в грин с помощью инжектора почвы (ФИГ. 4) пробивали небольшие отверстия (диаметром 0,5-1,0 см и глубиной 5-7 см), чтобы помочь суспензии нематод достичь уровня ниже травы или слоя соломы.
Два гектара гринов были обработаны в апреле 2018 года и в конце сентября 2018 года. Одновременно с помощью штангового опрыскивателя применяли эталонный химический продукт хлорпирифос.
Обработки включали:
1. Steinernema feltiae (весна) или Steinernema carpocapsae (осень) 2,5 миллиарда на гектар (2,5 миллиарда каждого вида) применяли дважды с интервалом в неделю;
2. Набор для борьбы с вредителями (набор для борьбы с вредителями-L) в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения, содержащий Steinernema feltiae или Steinernema carpocapsae 2,5 миллиарда
3. на гектар (2,5 миллиарда каждого вида) + 10 л конечной смешанной композиции смачивающего агента (жидкая форма, разбавленная до 1% об./об.) применяли дважды с интервалом в неделю;
4. Хлорпирифос (2 литра действующего вещества на гектар) применяли только один раз;
5. Необработанный контроль.
Плотность личинок после обработки определяли через 4 или 8 недель после внесения нематод или хлорпирифоса.
Полученные результаты
Эффективность набора для борьбы с вредителями в соответствии с первым аспектом сравнивали с использованием только нематод и только химическим веществом для борьбы с личинками комаров долгоножек в полевых условиях. Осенью эффективность набора для борьбы с вредителями была лучше (85%); однако его эффективность сохранялась (20%) и в течение весеннего сезона. Комбинированное применение Steinernema feltiae и Steinernema carpocapsae было на втором месте по эффективности (75%) по сравнению с другими видами обработки хлорпирифосом, Steinernema feltiae или Steinernema carpocapsae (ФИГ. б).
Пример 4 - Уничтожение виноградного долгоносика на ягодах (земляника, выращенная в поле))
Испытание проводилось в пленочной теплице на коммерческой клубничной ферме в Pennoxstone Court, Kings Caple, Херефорд, Англия, Великобритания, с июля по октябрь 2016 г. (ФИГ. 7). Почва на этом участке была супесчаной. В предыдущем году участок не обрабатывался инсектицидами. Как было определено с использованием «метода наживки Galleria», на испытательных участках не было обнаружено естественных популяций нематод. Этот метод предполагает инкубацию личинок Galleria mellonella в почве, где они легко погибают от нематод, если они присутствуют. Этот метод обеспечивает удобный способ изучения природных и интродуцированных популяций нематод.
Сорт (а) сельскохозяйственных культур:
Клубника Столетие (рассада) и Симфония (открытая корневая система);
Тип почвы: Супесь;
Размер исследуемого: 1,5×0,9 м с 0,3 м буфера между участками;
Повторность: 4×15 растений/обработка.
Участки размером 1,5×0,9 м с буфером 0,3 м были расположены в виде полной рандомизированной блочной конструкции с 4 повторами на обработку (стандарт EPPO РР1/181). Рассаду клубники высаживали 7 июля 2016 года, а яйца виноградного долгоносика 14 июля и 22 августа 2016 года. В день обработки погода была частично пасмурной, температура воздуха и почвы (на глубине 7 см) составляла 25°С и 20°С, соответственно. Каждую обработку повторяли 4 раза с 15 растениями в повторности. Были применены следующие способы обработки:
1. Биоинсектицид Met52® G вносили из расчета 120 кг на гектар перед высадкой;
2. Steinernema kraussei вносили из расчета 30000 на растение;
3. Heterorhabditis bacteriophora вносили из расчета 30000 на растение;
4. Хлорпирифос вносили из расчета 2,0 литра на гектар;
5. Набор для борьбы с вредителями в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения, содержащий Steinernema kraussei вносили с композицией смачивающего агента (жидкая форма: метиловый эфир дипропиленгликоля 5-10%, поверхностно-активные полиоксиалкиленгликоли и почвенные пенетранты - разбавленные до 1% об./об.);
6. Набор для борьбы с вредителями в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения, содержащий Heterorhabditis bacteriophora (набор для борьбы с вредителями-Н), вносили с вышеуказанной композицией смачивающего агента (жидкая форма, разбавленная до 1% об./об.);
7. Необработанный контроль.
Система испытаний
Первую инокуляцию яиц проводили 14 июля 2016 г., по 10 яиц с каждой стороны растения (всего 20 яиц/растение). Вторую инокуляцию яиц проводили 22 августа, по 10 яиц на растение. Это было сделано для того, чтобы почва была влажной во время инокуляции. Поверхностную корку вокруг основания растения разрыхляли, и с каждой стороны растения проделывали два отверстия (глубиной 2-3 см в почве). Сразу после инокуляции лунку неплотно закрывали почвой, и каждое растение получало приблизительно 100 мл поливной воды для защиты яиц от высыхания.
Внесение обработки Met 52G®
Гранулированный продукт Met52® G сначала смешивали с 1,0 литром почвы, затем энергично встряхивали в течение 5 минут, чтобы удалить споры из рисовых гранул. Затем эту смесь распределяли по поверхности почвы и потом смешивали с верхними 5 см почвы. Нормы соответствовали рекомендованной производителем норме для борьбы с виноградным долгоносиком, которая колеблется от 30 до 122 кг/га продукта = от 4,5×1013 до 1,35×1014 КОЕ/га (утвержденная в Великобритании норма составляет до 61 кг/га посевов, без обработки дорожек и необсаженных площадей). После предварительного смешивания клубнику высаживали, и каждое растение орошали по 200 мл.
Внесение продуктов с нематодами
Нематоды вносили с помощью Dosatron®, который обеспечивает постоянное соотношение впрыскивания и равномерное и пропорциональное впрыскивание, добавляя гибкости к простым или автоматизированным системам, так что нематоды могли быть легко внесены рядом с корнями растений.
Оценка степени уничтожения
Растения оценивали на степень уничтожения 12-16 октября 2016 и подсчитали количество живых личинок. Большинство личинок были обнаружены недалеко от корней растений, но также были найдены и подальше от растений в почве. Собранные личинки с обработанных участков затем переносили в лабораторию и помещали на влажную фильтровальную бумагу в чашки Петри (диаметром 9 см) и инкубировали при 25°С (относительная влажность 100% в течение 3-5 дней). Причину гибели подтверждали исследованием грибковой споруляции мертвой личинки или иссечением под микроскопом для подтверждения присутствия нематод.
Факторы окружающей среды
В ходе испытаний все растения регулярно орошались через капиллярные трубки. Растения подвергались воздействию тех же биотических (давление вредителей, болезни растений и т.д.) и абиотических (интенсивность света, температура, доступность воды и т.д.) факторов, что и коммерчески выращиваемые растения в этом месте. Испытание проводилось в период с июня по октябрь 2016 года. Температуру почвы и воздуха регистрировали в течение испытательного периода с помощью регистратора данных Tinytag®.
Полученные результаты
Набор для борьбы с вредителями, содержащий Heterorhabditis bacteriophora, вызывал самую высокую гибель (98%) при внесении с композицией смачивающего агента по сравнению с другими видами обработки (60-82%). Steinernema kraussei также обеспечивает хорошее уничтожение при внесении с композицией смачивающего агента (85,5%). Все другие обработки были аналогичными и обеспечивали уничтожение личинок виноградного долгоносика (см. ФИГ. 8).
Пример 5 - Уничтожение западного цветочного трипса на посевах клубники
Западные цветочные трипсы, Frankliniella occidentalis, являются основным вредителем в мировом масштабе. Они наносят ущерб большому разнообразию экономически важных сельскохозяйственных культур из-за своего пищевого поведения и передачи вредоносных вирусов растений, включая вирус пятнистого увядания на растениях томатов. Личинки и взрослые особи питаются практически любым цветущим растением, включая перец, огурцы, салат, картофель, помидоры, клубнику, некоторые косточковые фрукты и широкий спектр декоративных растений. Это приводит к деформированию плодов, которое часто называют кошачьей мордой, что неприемлемо для потребителя. Этот вредитель приобрел устойчивость ко многим существующим инсектицидам и большинству средств биологической борьбы, нацеленных на стадии подавления листвы. Однако, набор для борьбы с вредителями в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения, содержащий Steinernema feltiae (набор для борьбы с вредителями-F), применяли для нацеливания на стадии обитания насекомых в почве (предкуколка и куколка) и впоследствии предотвращали рост популяции.
Набор для борьбы с вредителями, содержащий Steinernema feltiae, является эффективным против предпукуколек и куколок, но менее эффективен против личинок (L2). Полевые испытания проводили на коммерческой клубничной ферме, Pennoxstone Court, Kings Caple, Херефорд, Англия, Великобритания летом 2015-16 гг. В целях стандартизации различных экспериментов, насколько это было возможно, следовали Руководству ЕРРО по оценке эффективности инсектицидов, РР 1/85(3) «Трипсы на открытом грунте». Наблюдались участки размером не менее 20 квадратных метров с четырьмя повторностями на обработку. Следующие процедуры применялись с использованием капельного орошения с помощью Dosatron®:
1. Необработанный контроль;
2. Известный химический инсектицид: Tracer® 150 мл/га, наносимый на листву;
3. Нанесение на листву полезных хищных клещей и насекомых;
4. Steinernema feltiae применяли отдельно; и
5. Набор для борьбы с вредителями (набор для борьбы с вредителями-F) в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения, содержащий Steinernema feltiae, применяемый в одной четвертой рекомендуемой дозы (0,625 миллиона на га) с композицией смачивающего агента (жидкая предварительно смешанная форма: метиловый эфир дипропиленгликоля 5-10%, полиоксиалкиленгликолевые поверхностно-активные вещества и почвенные пенетранты), разбавленные до 1% об./об. в 1 л/100 л воды.
Для всех обработок применяли 1000 л воды/га. Начиная с начала июня (24 неделя) растения обрабатывали с недельными интервалами до шести раз. За популяцией западных цветочных трипсов следили с помощью желтой липкой ловушки - количество живых взрослых трипсов, прилипших к желтым липким ловушкам, подсчитывали с недельными интервалами с помощью переносной увеличительной линзы.
Полученные результаты
Обработка Steinernema feltiae с композицией смачивающего агента или без нее оставляла популяцию трипсов в количестве менее чем две особи на каждом цветке по сравнению с другими полезными веществами или инсектицидами. Наибольшее количество популяции трипсов было отмечено в контроле, и в течение 28-35 недель наблюдения было обнаружено от 6 до 12 особей на цветок (ФИГ. 9).
Пример 6 - Уничтожение личинок сциаридной мухи на грибах
Грибковые комары, также известные как сциаридные мухи, обитающие на питательных средах и вокруг них, являются основным вредителем декоративных культур в теплицах и пленочных теплицах. Личинки сциарид ответственны за нанесение вреда большому количеству экономически важных горшечных растений, непосредственно питаясь корнями и тканями стеблей сеянцев, черенков и молодых растений. Они также наносят ущерб косвенно, передавая грибковые заболевания через повреждения, нанесенные личинками сциарид. Горшечные растения, которые, как известно, подвержены атаке сциарида, включают пуансеттию, азалию, цикламен, каланхоэ, экзакум, герберы, бегонию и другие. Все виды молодых растений и молодые укорененные черенки (овощи, декоративные и саженцы) очень восприимчивы к личинкам сциарид. Одной из наиболее важных областей применения являются травы в горшках (например, базилик). С ростом использования компоста в горшечной почве, сциариды становятся серьезной проблемой. Были проведены полевые испытания для оценки следующих способов борьбы с личинками сциарид при выращивании грибов:
1. Необработанный контроль;
2. Химический пестицид карбофуран, применяемый в соответствии с рекомендациями по применению;
3. Химический пестицид тефлубензурон, применяемый в соответствии с рекомендациями по применению;
4. Steinernema feltiae, применяемые отдельно;
5. Набор для борьбы с вредителями в соответствии с первым аспектом, содержащий Steinernema feltiae (набор для борьбы с вредителями-F), вносимый из расчета 2,5 миллиарда на гектар + композиция смачивающего агента (жидкая форма: метиловый эфир дипропиленгликоля 5-10%, поверхностно-активные полиоксиалкиленгликоли и почвенные пенетранты), разбавленные до 1% об./об. в 1 л/100 л воды.
Грибы собирали в течение 4 недель и подсчитывали количество мертвых и живых личинок.
Полученные результаты
В целом, все обработки приводили к уничтожению личинок сциаридной мухи на от 52 до 89%. Значительная эффективность была достигнута набором для борьбы с вредителями (89%) через 3 недели после нанесения. Уничтожение личинок на первой неделе применения был самым высоким в случае тефлубензурона (71%), за которым следует набор для борьбы с вредителями (68%) на 3-й неделе (ФИГ. 10).
Пример 7 - Уничтожение соснового долгоносика в лесу
Большой сосновый долгоносик, Hylobius abietis, является одним из наиболее важных вредителей для лесовосстановления в хозяйственных лесах Европы и Великобритании. Стоимость ущерба вызванная Hylobius abietis, оценивается в 150 миллионов евро в ЕС (без использования пестицидов) и в 2,57 миллиона евро в год только в Великобритании.
Полевые испытания для проверки эффективности различных наборов для борьбы с вредителями в соответствии с настоящим изобретением против личинок и куколок соснового долгоносика позднего возраста проводили на ситхинской ели, пнях Picea sitchensis, в Тайви-Норт-Форест, Средний Уэльс, в период с июня по август 2016-17 гг. Объекты состояли из пней и были организованы в виде полностью рандомизированного блочного дизайна, при этом каждый пень был размещен на достаточном расстоянии во избежание перекрестного загрязнения (стандарт ЕРРО РР1/181). Применяли способы обработки, перечисленные ниже. Каждую обработку повторяли 5 раз с 5 пнями в повторности. В дни, когда применялись обработки, погода была частично пасмурной со средней температурой пня 13,0°С и 13,3°С для первой и второй серии обработок, соответственно. Были отобраны пни ситкинской ели, естественно инфицированные личинками крупного соснового долгоносика. 6 апреля 2016 г., перед началом испытаний, два пня с каждого участка оценивали на степень уничтожения для определения естественного заражения сосновым долгоносиком. Было обнаружено около десяти личинок соснового долгоносика на пень, естественного заражения нематодами зарегистрировано не было.
Следующие виды обработки применялись со смачивающим агентом и без него (жидкая форма: метиловый эфир дипропиленгликоля 5-10%, поверхностно-активные полиоксиалкиленгликоли и почвенные пенетранты). Обработка, обеспечиваемая смачивающим агентом, представляла собой наборы для борьбы с вредителями в соответствии с настоящим изобретением. Каждый пень обрабатывали поливом 500 мл воды, содержащей композицию смачивающего агента и 3,5 миллиона нематод.
1. Необработанный контроль;
2. Heterorhabditis bacteriophora смачивали по 3,5 миллиона на пень;
3. Heterorhabditis downesi смачивали по 3,5 миллиона на пень;
4. Steinernema carpocapsae смачивали по 3,5 миллиона на пень;
5. Steinernema carpocapsae смачивали по 3,5 миллиона на пень + композиция смачивающего агента (жидкая форма), разбавленные до 1% об./об. в 1 л/100 л воды (набор для борьбы с вредителями-Т).
Оценка степени уничтожения
Оценку степени уничтожения проводили на обработанных пнях через 4 недели после внесения нематод. Оценку степени уничтожения производили путем тщательного удаления всей коры пня до 30 см вниз. При необходимости это проделывали и под поверхностью почвы. Для каждого пня регистрировали общее количество Hylobius abietis, обнаруженных в коре и на границе раздела кора/древесина. Также регистрировали стадию развития (личинки, куколки или взрослая особь), был ли организм живым или мертвым, причину гибели от нематод или любую другую важную информацию о пне. В процессе оценки у каждого пня также регистрировали диаметр (в диапазоне от 20 до 55 см). Живых личинок, куколок и взрослых особей собирали и помещали в пластиковые ящики с необработанной почвой и доставляли в лабораторию. Эти личинки, куколки и взрослые особи очищали водой и этанолом для удаления любых поверхностных микроорганизмов, которые могли вызвать гибель. Затем личинки помещали на влажную фильтровальную бумагу по пять личинок на чашку и оставляли при комнатной температуре. Гибель регистрировали с 24-часовыми интервалами, а также причину смерти и другую соответствующую информацию. Через неделю мертвых насекомых, не проявлявших типичных симптомов, анализировали под микроскопом, чтобы проверить наличие нематод. По возможности регистрировали другую информацию, такую как количество нематод, если они были живы, содержание липидов и какие-либо сопутствующие инфекции от других нематод.
Испытание проводили в период с июня по август 2016-17 гг. Обработанные пни подвергали воздействию окружающей среды без какого-либо вмешательства. Температуру пня регистрировали в течение испытательного периода с помощью регистратора данных Tinytag®. В течение испытательного периода регистрировали среднесуточные максимальные, минимальные и средние температуры пня.
Полученные результаты
В целом, уничтожение соснового долгоносика значительно отличалось при разных обработках (Р<0,001). Набор для борьбы с вредителями (содержащий Steinernema carpocapsae; гибель 95%) и обработка Heterorhabditis downesi (гибель 96,5%) обеспечили максимальное уничтожение личинок соснового долгоносика через 4 недели после обработки. Обработка Steinernema carpocapsae была немного эффективнее, чем обработка Heterorhabditis bacteriophora (ФИГ. 11).
Все конкретные исследования в отношении личинок хруща, личинок комаров долгоножек, большого соснового долгоносика, черного виноградного долгоносика, западных цветочных трипсов и сциаридной мухи показали, что при применении набора для борьбы с вредителями эффективность на 20-30% выше, чем при альтернативных способах обработки.
Со ссылкой ФИГ. 12, показан способ 20 борьбы с популяцией личиночных или куколочных насекомых в соответствии со вторым и третьим аспектами, где способ включает стадии:
a) предоставление набора для борьбы с вредителями в соответствии с ФИГ. 1 22;
b) смешивание количества энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента с объемом воды для получения объема активированного биопестицида 24;
c) нанесение объема активированного биопестицида на участок земли 26.
Следует принимать во внимание, что описанные выше варианты осуществления приведены только в качестве примера и что в них могут быть внесены различные модификации, не выходящие за пределы объема изобретения, определенного в прилагаемой формуле изобретения.
Изобретение также можно понять со ссылкой на следующее:
Подготовка резервуара для смешивания
Взятие нематод из холодильника при температуре 5-10°С и выдерживание нематод при комнатной температуре в течение 30 минут для акклиматизации.
Смешивание составленной упаковки набора для борьбы с вредителями с 10 л воды в ведре, чтобы получить гомогенную суспензию.
Промывание упаковки, так как нематоды часто цепляются за упаковку. Размешивание основного раствора, пока все комочки не растворятся.
Добавление трех четвертей необходимого количества воды в резервуар вместе с необходимым количеством композиции смачивающего агента из расчета 1 л/100 л воды.
При работающей мешалке добавление через сито необходимого количества набора для борьбы с вредителями.
Добавление оставшейся воды и начало нанесения нематод, поддерживая перемешивание, чтобы избежать оседания нематод, пока не будет нанесена вся смесь.
После нанесения полив 1-2 л воды на квадратный метр, чтобы смыть нематод с травы или почвы.
Использование всего раствора для опрыскивания за один раз после смешивания набора для борьбы с вредителями с водой и составом смачивающего агента. Нельзя хранить в резервуаре более 4 часов.
Меры предосторожности при применении
Не замораживать. Продукт следует хранить при температуре от 5 до 10°С для сохранения максимальной эффективности.
Снять все фильтры с форсунок распылительного оборудования, чтобы избежать засорения.
Использовать сопла диаметром не менее 0,8 мм. Не превышать давление насоса 5 бар.
Наносить рано утром или поздно вечером при слабом освещении. Не применять при ярком солнечном свете, так как нематоды уязвимы для УФ-излучения и высыхания.
Увлажнять поверхность почвы во время нанесения и, если возможно, поливать перед внесением, это будет дополнительным преимуществом.
Применять нематоды в то время, когда температура почвы находится в диапазоне от 8 до 30°С, как минимум 3-6 часов в день в течение как минимум двух недель после нанесения.
Промывать резервуар и оборудование чистой водой перед использованием набора для борьбы с вредителями.
Применение набора наборов для борьбы с вредителями на садовых культурах
Ирригационное оборудование
Использование набора для борьбы с вредителями с помощью микроорошения (индивидуальная трубка для спагетти), капельного орошения или ручного или моторизованного откалиброванного оборудования для орошения.
Орошение перед применением нематод для увлажнения почвы или поверхности питательной среды.
Растворение набора для борьбы с вредителями в воде и добавление его в чистый расходный резервуар.
Непрерывное перемешивание раствора во время нанесения, чтобы предотвратить оседание нематод.
Промывание расходного резервуара чистой водой и введение в систему после нанесения.
Способ окунания растений
Добавление одной упаковки с 500 миллионами инфекционных нематод в 800 литров воды (этого достаточно для обработки примерно 4000 растений с корневыми комочками размером с кулак) и тщательное перемешивание раствора.
Поддержание перемешивания раствора с набором для борьбы с вредителями с подачей сжатого воздуха.
Смачивание контейнеров
Добавление одной упаковки с 500 миллионами инфекционных нематод в 1000 литров воды и равномерное нанесение на поверхность горшечной среды.
Регулирование объема соответственно для меньших или больших горшков, как указано на схеме смачивающего смешивания.
Погружение клубничных кустов
Добавление одной упаковки с 500 миллионами инфекционных нематод в 80 литров воды (этого достаточно для обработки примерно 40000 растений) и тщательное перемешивание раствора.
На один куст клубники требуется примерно 2 мл раствора нематод.
Нанесение смачивания
Заливание 200 мл вокруг основания каждого растения или введение непосредственно в корневую зону.
Одна упаковка из 500 миллионов инфекционных нематод, разведенных в 4000 литров воды, содержащей композицию смачивающего агента, предназначена для обработки 20000 растений.
Статистический анализ
Число выживших личинок преобразовывали в процентную эффективность с использованием приведенного ниже уравнения и анализировали с использованием дисперсионного анализа (ANOVA). Непреобразованные данные были проанализированы, поскольку преобразование арксинус-квадратный корень не улучшило нормальность процентных данных. Различия между видами обработки сравнивали с использованием критерия разделения на среднее значение Тьюки (Р<0,05). Статистический анализ проводили с использованием пакета статистического программного обеспечения (IBM, 2013. IBM SPSS Statistics for Windows, Version 22,0. Armonk, NY: IBM Corp.).
.
Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к средствам защиты растений. Набор для борьбы с вредителями содержит: a) энтомопатогенные нематоды в количестве, составляющем от 0,5 миллиона до 5,0 миллиардов на гектар обрабатываемой площади, причем энтомопатогенная нематода выбрана из следующей группы: Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis downesi, Steinernema feltiae, Steinernema carpocapsae и/или Steinernema kraussei; b) композицию смачивающего агента, содержащую метиловый эфир дипропиленгликоля. Набор дополнительно содержит комплект обучающих материалов, включающий обучение способу применения энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых. Предлагаемый набор для борьбы с вредителями обеспечивает безопасную и устойчивую защиту травяного покрова и растений круглый год. 4 н. и 23 з.п. ф-лы, 12 ил., 3 табл., 7 пр.
1. Набор для борьбы с вредителями, где набор для борьбы с вредителями содержит:
a) энтомопатогенные нематоды в количестве, составляющем от 0,5 миллиона до 5,0 миллиардов на гектар обрабатываемой площади, причем энтомопатогенная нематода выбрана из следующей группы: Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis downesi, Steinernema feltiae, Steinernema carpocapsae и/или Steinernema kraussei;
b) композицию смачивающего агента, содержащую метиловый эфир дипропиленгликоля.
2. Набор для борьбы с вредителями по п. 1, где метиловый эфир дипропиленгликоля представлен в концентрации, выбранной в диапазоне от 1 до 25% от композиции смачивающего агента, предпочтительно от 5 до 10% от композиции смачивающего агента.
3. Набор для борьбы с вредителями по любому из предшествующих пунктов, где композиция смачивающего агента дополнительно содержит поверхностно-активное вещество, содержащее полиоксиалкиленгликоль.
4. Набор для борьбы с вредителями по п. 3, где поверхностно-активное вещество присутствует в концентрации, выбранной в диапазоне от 0,5 до 10% об./об. от композиции смачивающего агента.
5. Набор для борьбы с вредителями по любому из предшествующих пунктов, где композиция смачивающего агента содержит одно или несколько поверхностно-активных веществ на основе обратного блок-сополимера.
6. Набор для борьбы с вредителями по любому из предшествующих пунктов, где композиция смачивающего агента дополнительно содержит один или несколько смачивающих соединений, выбранных из алкиленоксидов.
7. Набор для борьбы с вредителями по любому из предшествующих пунктов, где композиция смачивающего агента содержит одно или несколько смачивающих соединений, выбранных из полигидроксиэтилалкоксиалкиленоксидов.
8. Набор для борьбы с вредителями по любому из предшествующих пунктов, где композиция смачивающего агента дополнительно содержит один или несколько почвенных пенетрантов.
9. Набор для борьбы с вредителями по любому из предшествующих пунктов, где композиция смачивающего агента представлена в жидкой или порошкообразной форме.
10. Набор для борьбы с вредителями по п. 9, где жидкая композиция смачивающего агента предназначена для смешивания с водой для получения рабочего смачивающего агента, имеющего концентрацию смешивания, выбранную в диапазоне от 2,22 до 2,86% об./об.
11. Набор для борьбы с вредителями по п. 10, где рабочий смачивающий агент предназначен для смешивания с водой при соотношении компонентов смеси композиция рабочего смачивающего агента: вода для получения конечной композиции смачивающего агента, где соотношение компонентов смеси выбрано в диапазоне от 1:35 до 1:90.
12. Набор для борьбы с вредителями по любому из предшествующих пунктов, где указанный набор для борьбы с вредителями дополнительно включает комплект обучающих материалов, где комплект обучающих материалов предназначен для обучения пользователей использованию энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых.
13. Набор для борьбы с вредителями по любому из предшествующих пунктов, где количество энтомопатогенных нематод составляет от 2,5 миллиардов до 5,0 миллиардов на гектар обрабатываемой площади.
14. Набор для борьбы с вредителями по любому из предшествующих пунктов, где личинки насекомых выбраны из следующей группы: Tipula spp., Tipula oleracea, Gryllotalpa, Agrotis spp., Otiorhynchus sulcatus, Otiorhynchus spp., Hoplia philanthus, Phyllopertha horticola, Amphimallon solstitialis, Melolontha melolontha, Serica brunnea, Cydia pomonella, Cydia molesta, Cydia splendana, Ephydridae, Spodoptera spp., Chrysodeixis chalcites, Mamestra brassicae, Duponchelia fovealis, Hylobius abietis, Frankliniella occidentalis, Chromatomyia syngenesiae, Phytomyza vitalbae, Anoplophora chinensis, Ips typographus, Synanthedon myopaeformis, Opogona sacchari, Diaprepes abbreviates, Grapholita molesta, Grapholita funebrana, Chrysoteuchia topiaria, Rhabdopterus picipes, Capnodis tenebrionis, Curculio nucum, Zeuzera pyrina, Thaumetopoea processionea, Paysandisia archon, Synanthedon exitiosa, Rhynchophorus ferruginous, Diabrotica virgifera, Bibionidae и/или Porcellio scaber.
15. Способ борьбы с популяцией личиночных или куколочных насекомых, включающий стадии:
a) предоставление набора для борьбы с вредителями по любому из предшествующих пунктов, содержащего энтомопатогенные нематоды в количестве, составляющем от 0,5 миллиона до 5,0 миллиардов на гектар обрабатываемой площади, причем энтомопатогенная нематода выбрана из следующей группы: Неterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis downesi, Steinernema feltiae, Steinernema carpocapsae и/или Steinernema kraussei и композицию смачивающего агента, содержащую метиловый эфир дипропиленгликоля;
b) смешивание энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента с объемом воды для получения объема активированного инсектицида; и
c) нанесение объема активированного инсектицида на участок земли.
16. Способ борьбы с популяцией личиночных или куколочных насекомых, включающий стадии:
а) предоставления энтомопатогенных нематод в количестве, составляющем от 0,5 миллиона до 5,0 миллиардов на гектар обрабатываемой площади, причем энтомопатогенная нематода выбрана из следующей группы: Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis downesi, Steinernema feltiae, Steinernema carpocapsae и/или Steinernema kraussei;
b) предоставление композиции смачивающего агента, содержащей метиловый эфир дипропиленгликоля и одно или несколько поверхностно-активных веществ; и
c) предоставление комплекта обучающих материалов, где комплект обучающих материалов предназначен для обучения пользователей использованию энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых.
17. Набор для борьбы с вредителями, где набор для борьбы с вредителями содержит:
a) энтомопатогенные нематоды в количестве, составляющем от 0,5 миллиона до 5,0 миллиардов на гектар обрабатываемой площади, причем энтомопатогенная нематода выбрана из следующей группы: Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis downesi, Steinernema feltiae, Steinernema carpocapsae и/или Steinernema kraussei;
b) композицию смачивающего агента, содержащую метиловый эфир дипропиленгликоля; и
c) комплект обучающих материалов, включающий обучение способу, где способ включает стадии: применение энтомопатогенных нематод и композиции смачивающего агента для борьбы с популяцией личинок насекомых.
18. Набор для борьбы с вредителями по п. 17, где метиловый эфир дипропиленгликоля представлен в концентрации, выбранной в диапазоне от 1 до 25% от композиции смачивающего агента, предпочтительно от 5 до 10% от композиции смачивающего агента.
19. Набор для борьбы с вредителями по п. 17 или 18, где композиция смачивающего агента дополнительно содержит поверхностно-активное вещество, содержащее полиоксиалкиленгликоль.
20. Набор для борьбы с вредителями по п. 19, где поверхностно-активное вещество присутствует в концентрации, выбранной в диапазоне от 0,5 до 10% об./об. от композиции смачивающего агента.
21. Набор для борьбы с вредителями по любому из пп. 17-20, где композиция смачивающего агента содержит одно или несколько поверхностно-активных веществ на основе обратного блок-сополимера.
22. Набор для борьбы с вредителями по любому из пп. 17-21, где композиция смачивающего агента дополнительно содержит один или несколько смачивающих соединений, выбранных из алкиленоксидов.
23. Набор для борьбы с вредителями по любому из пп. 17-22, где композиция смачивающего агента содержит одно или несколько смачивающих соединений, выбранных из полигидроксиэтилалкоксиалкиленоксидов.
24. Набор для борьбы с вредителями по любому из пп. 17-23, где композиция смачивающего агента дополнительно содержит один или несколько почвенных пенетрантов.
25. Набор для борьбы с вредителями по любому из пп. 17-24, где композиция смачивающего агента представлена в жидкой или порошкообразной форме.
26. Набор для борьбы с вредителями по п. 25, где жидкая композиция смачивающего агента предназначена для смешивания с водой для получения рабочего смачивающего агента, имеющего концентрацию смешивания, выбранную в диапазоне от 2,22 до 2,86% об./об.
27. Набор для борьбы с вредителями по п. 26, где рабочий смачивающий агент предназначен для смешивания с водой при соотношении компонентов смеси композиция рабочего смачивающего агента: вода для получения конечной композиции смачивающего агента, где соотношение компонентов смеси выбрано в диапазоне от 1:35 до 1:90.
| TERRI HOCTOR et al., Survival and Infectivity of the Insect-Parasitic Nematode Heterorhabditis bacteriophora Poinar in Solutions Containing Four Different Turfgrass Soil Surfactants, INSECTS, 20.12.2012, v | |||
| Очаг для массовой варки пищи, выпечки хлеба и кипячения воды | 1921 |
|
SU4A1 |
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| BENJAMIN A | |||
| MCGRAW et al., Fine-scale spatial analysis of soil moisture and | |||
